喉痛灵颗粒HPLC特征图谱及多指标成分含量测定研究

目的:建立喉痛灵颗粒HPLC特征图谱并测定尿苷、鸟苷(R,S)-告依春、腺苷四个指标性成分的含量,为喉痛灵颗粒的质量控制提供参考。方法:采用Shim-pack VP-ODS(4.6 mm×250 mm, 5μm)色谱柱,以甲醇-水为流动相进行梯度洗脱,柱温：30℃;流速：0.9 mL·min^-1;检测波长：254 nm;进样量10μL;通过相似度评价结合聚类分析对10批喉痛灵颗粒特征图谱进行分析评价,并对其中的4个指标成分进行含量测定研究。结果:建立了喉痛灵颗粒的特征图谱,共标定了10个共有峰,10批样品的指纹图谱相似度在0.810～0.943;尿苷、鸟苷、(R,S)-告依春、腺苷分别在2.78～27.15μg·mL^-1、2.25～19.07μg·mL^-1、2.93～30.42μg·mL^-1、2.02～20.97μg·mL^-1内线性关系良好(r≥0.999 8),平均加样回收率为95.26%～103.79%,RSD为0.90%～1.72%。通过聚类分析,10批样品聚成二类。结论...     

炒椿皮配方颗粒HPLC特征图谱及含量测定方法的建立

目的：建立炒椿皮配方颗粒高效液相色谱法(HPLC)特征图谱及含量测定方法。方法：采用HPLC,色谱柱为资生堂MGⅡC18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,柱温为30℃,检测波长为254 nm,进样量为10μL,以铁屎米酮为参照,建立炒椿皮配方颗粒的特征图谱,利用对照品对其共有峰进行指认,并对炒椿皮饮片、标准汤剂和配方颗粒的相关性进行评价。同时以铁屎米酮为对照品,以乙腈-0.1%磷酸水溶液(29∶71)为流动相,检测波长为360 nm,进样量为20μL,建立其含量测定方法。结果：所建立的炒椿皮配方颗粒HPLC特征图谱共确定了9个特征峰,指认了其中3个,各样品特征图谱与对照图谱相似度为0.984～1.000。含量测定结果表明,铁屎米酮质量浓度为1.018～12.216μg·mL^-1时与峰面积呈良好线性关系;铁屎米酮平均加样回收率为99.22%,RSD<2%;10批炒椿皮配方颗粒中铁屎米酮质量分数为0.209 7～0.215 9 mg·g^-1     

宣肺止嗽合剂中4种生物碱的含量测定方法研究

目的:建立同时测定宣肺止嗽合剂中4种生物碱含量的高效液相色谱分析方法。方法:色谱柱为安捷伦SB-C₁₈(250 mm×4.6 mm, 5μm);流动相：乙睛-0.1%磷酸溶液(3∶97);检测波长：210 nm;流速：1.0 mL·min^-1;柱温：30℃;进样量：10μL。结果:吗啡、磷酸可待因、蒂巴因、盐酸罂粟碱4种生物碱成分在各自的质量浓度范围内线性关系良好,相关系数r²≥0.9960,平均回收率分别为97.8%、96.9%、97.4%、97.5%,对应的RSD分别为1.2%、1.2%、1.6%、1.4%(n=9)。10批宣肺止嗽合剂样品中吗啡的含量为0.078～0.160 mg·mL^-1、磷酸可待因的含量为0.008～0.025 mg·mL^-1、蒂巴因的含量为0.0002～0.0013 mg·mL^-1、盐酸罂粟碱的含量为0.010～0.025 mg·mL^-1。结论:该方法操作简便,结果准确,可用于宣肺止嗽合剂的质量控制,为其质...     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定强力枇杷露中5种罂粟壳生物碱含量

目的建立强力枇杷露中罂粟碱、那可丁、蒂巴因、吗啡和可待因5种罂粟壳生物碱的多指标成分含量测定方法,为提高其质量标准提供参考。方法采用超高效液相色谱-串联质谱法。色谱条件:色谱柱为Acquity UPLC BEH HILIC(1.7μm,2.1 mm×100 mm),柱温40℃,流速0.3 mL/min,进样量1.0μL,流动相为含0.1%甲酸的乙腈溶液-含0.1%甲酸的10mmol/L甲酸铵水溶液,梯度洗脱;质谱条件:电喷雾离子源(ESI~+),多反应离子监测(MRM)。结果罂粟碱、那可丁、蒂巴因、吗啡和可待因分别在18.59～185.9 ng/mL(r=0.999 2)、23.26～232.6 ng/mL(r=0.999 1)、11.63～116.3 ng/mL(r=0.999 5)、802.26～8023 ng/mL(r=0.999 5)、149.8～1498 ng/mL(r=0.999 3)范围内线性关系良好,平均回收率分别为103.5%、101.4%、99.6%、98.9%、101.3%,RSD分别为1.9%、2.2%、1.6%、3.4%、1.8%。结论本研究建立的方法操作简便、结果准确、重复性好,可为强力枇杷露质量标准的提升提供参考依据。     

不同产地白术饮片HPLC指纹图谱研究

目的:通过对不同产地白术饮片研究，建立白术饮片高效液相指纹图谱。方法:采用HPLC法。色谱柱：Agilent C₁₈(5μm, 250 mm×4.6 mm);流动相：乙腈-水，梯度洗脱(0～10 min, 50%～70%A;10～20 min, 70%～80%A,20～30 min; 80%～92%A,30～38 min, 92%～100%A),流速为1.0mL·min^-1,柱温为25℃,白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ检测波长为220 nm,白术内酯Ⅱ检测波长为276 nm,进样量20μL。以2号峰白术内酯Ⅲ为参照，记录12批次白术饮片的HPLC图谱，然后将其导入《中药色谱指纹图谱相似度评价软件系统2012版》(国家药典委员会),采用指纹图软件确定共有峰。结果:建立12批白术饮片的HPLC指纹图谱，标定12个共有峰，相似度均大于0.90。经验证，与对照指纹图谱具有较好的一致性。结论:研究建立HPLC指纹图谱可用于白术饮片质量控制方法，同时也为白术饮片质量评价提供科学依据。     

洛阳正骨传统方药活血灵汤的HPLC指纹图谱研究

目的：建立活血灵汤的HPLC指纹图谱评价体系,为活血灵汤的质量控制提供科学、合理的方法。方法：采用高效液相色谱法,以AgilentC18柱（4.6 mm×250 mm, 5μm）为色谱柱;以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱;流速1.0 mL·min^-1;检测波长255 nm;柱温30℃;进样量20μL。对10批活血灵汤样品进行测定,以中药色谱指纹图谱相似度评价软件建立了活血灵汤的标准指纹谱,并进行相似度评价、对共有峰进行归属及确认。结果：10批活血灵汤HPLC指纹图谱相似度不低于0.98,共标定了20个共有峰,6个峰得到化学确认。结论：建立的HPLC指纹图谱方法稳定易行,重复性好,反映了活血灵汤中的成分,可作为活血灵汤的质量控制方法。     

洛阳正骨传统方药活血灵汤的HPLC指纹图谱研究

目的：建立活血灵汤的HPLC指纹图谱评价体系,为活血灵汤的质量控制提供科学、合理的方法。方法：采用高效液相色谱法,以AgilentC18柱（4.6 mm×250 mm, 5μm）为色谱柱;以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱;流速1.0 mL·min^-1;检测波长255 nm;柱温30℃;进样量20μL。对10批活血灵汤样品进行测定,以中药色谱指纹图谱相似度评价软件建立了活血灵汤的标准指纹谱,并进行相似度评价、对共有峰进行归属及确认。结果：10批活血灵汤HPLC指纹图谱相似度不低于0.98,共标定了20个共有峰,6个峰得到化学确认。结论：建立的HPLC指纹图谱方法稳定易行,重复性好,反映了活血灵汤中的成分,可作为活血灵汤的质量控制方法。     

复方罗汉果清肺糖浆HPLC特征图谱及主要成分含量测定

目的建立复方罗汉果清肺糖浆的特征图谱,并测定其中主要成分木犀草苷、罗汉果皂苷Ⅴ的含量。方法采用Waters Sunfire C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL/min,检测波长210 nm,柱温25℃,进样量10μL。结果 15批复方罗汉果清肺糖浆HPLC特征图谱确立了10个共有峰,且相对保留时间的RSD均小于2.0%。木犀草苷、罗汉果皂苷Ⅴ分别在0.163 2～0.816 0μg、0.730 8～3.654 0μg范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为96.30%、95.11%,RSD分别为2.28%、2.87%。结论 HPLC特征图谱结合主要成分含量测定能更全面反映制剂内在质量,可用于复方罗汉果清肺糖浆综合质量评价。     

复方板蓝根颗粒HPLC指纹图谱研究

目的：建立复方板蓝根颗粒的HPLC指纹图谱的分析方法,用于复方板蓝根颗粒的质量控制。方法：采用Kromasil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),以甲醇-水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.8 mL·min^-1,检测波长254 nm,柱温为25℃,对指纹图谱进行共有峰标定,以R, S-告依春为参照峰计算各共有峰的相对保留时间和峰面积比值,采用2012年版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》软件对10批复方板蓝根颗粒进行相似度评价。结果：复方板蓝根颗粒HPLC指纹图谱分析方法的专属性、精密度、重现性和稳定性均良好;10批复方板蓝根颗粒指纹图谱与对照指纹图谱的相似度值均> 0.90,相似度良好。结论：所建立的HPLC指纹图谱能够表达复方板蓝根颗粒中多组分的整体特征,为复方板蓝根颗粒的质量控制提供了方法依据。     

五味消毒饮口服液HPLC指纹图谱的建立及6种指标性成分定量测定

目的建立五味消毒饮口服液(WXOL)的HPLC法特征指纹图谱,并同时测定绿原酸、木犀草苷、木犀草素、蒙花苷、咖啡酸、秦皮乙素6种主要指标成分的量。方法采用Agilent 1260高效液相色谱仪进行色谱分析,色谱柱为Agilent TC-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.5%醋酸水溶液-甲醇,梯度洗脱:0~10 min,10%~32%甲醇;10~20 min,32%甲醇;20~25 min,32%~46%甲醇;25~31 min,46%~48%甲醇;31~41 min,48%~80%甲醇;体积流量为1 m L/min;检测波长为320 nm;柱温为30℃;采用国家药典委员会出版的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012年版)对10批WXOL化学成分指纹图谱进行相似度评价,并采用多成分同时测定法对6种指标性成分进行定量测定。结果 10批WXOL HPLC特征指纹图谱相似度均大于0.98,共17个共有峰,各峰分离度较好。通过对照品比对确定了其中绿原酸(5号峰)、秦皮乙素(7号峰)、咖啡酸(8号峰)、木犀草苷(12号峰)、蒙花苷(16号峰)、木犀草素(17号峰)6个成分,10批WXOL中绿原酸量为54.038 3~105.551 1μg/m L,秦皮乙素量为4.122 1~31.359 9μg/m L,咖啡酸量为2.413 0~4.420 7μg/m L,木犀草苷量为4.042 8~11.312 8μg/m L,蒙花苷量为3.866 3~46.271 9μg/m L,木犀草素量为0.990 8~2.126 8μg/m L。不同批次间各指标性成分量变化较小,样品质量较稳定。结论所建立的HPLC特征指纹图谱结合多指标成分定量测定的方法,稳定性、重复性较好,有利于保证WXOL质量均一,对其质量控制具有参考价值。     

银翘柴桂汤HPLC指纹图谱研究

目的:建立银翘柴桂汤HPLC指纹图谱分析方法,拟定其指纹特征图谱指标成分群。方法:采用HPLC测定,依利特ODS柱(4.6 mm×50 mm,5μm),流动相甲醇-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),检测波长230 nm,流速1 mL·min-1,柱温35℃。结果:10批银翘柴桂汤中共标示出17个共有峰,全方汤剂的特征峰基本为各味药特征峰的加和;利用指纹图谱相似度评价系统软件,测得10批汤剂指纹图谱相似度在0.910～0.986。结论:方法准确可靠,重复性好,可为银翘柴桂颗粒剂的开发研究提供质量评价依据,并为其物质基础研究提供了一定参考。     

补肾健骨胶囊高效液相色谱指纹图谱及主成分分析

目的：建立补肾健骨胶囊的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱,并进行主成分分析。方法：采用HPLC,色谱柱为Thermo-Hypersil GOLD^TM-C18(250 mm×4.6 mm×5μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为235 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。根据15批样品的HPLC检测图谱,采用国家药典委员会《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012年版)进行相似度评价和共有峰的确定,并采用Minitab17.0软件进行主成分分析。结果：补肾健骨胶囊指纹图谱共标出13个共有峰,并指认了其中3个共有峰,分别为莫诺苷、马钱苷、淫羊藿苷;15批样品的相似度均大于0.9,各批次样品之间有良好的相似性。经主成分分析,共提取出2个主成分,方差累计贡献率为92.3%,样品中1、2、4、6、8、13号共有峰(特别是13号共有峰)对应成分的含量变化是导致样品质量差异的重要原因。结论：所建HPLC指纹图谱及主成分分析结果可为补肾健骨胶囊的质量评价提供参考。     

基于标准汤剂的秦皮（白蜡树）配方颗粒质量标准分析

目的：建立基于标准汤剂的秦皮(白蜡树)配方颗粒质量标准,为该配方颗粒的质量控制提供依据。方法：利用15批秦皮(白蜡树)标准汤剂和3批秦皮(白蜡树)配方颗粒建立了高效液相色谱法(HPLC)特征图谱,流动相0.1%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0～10 min,12%～15%B;10～30 min,15%～32%B),检测波长220 nm,并进行相似度评价、聚类分析及主成分分析(PCA)。针对特征图谱中的共有峰建立HPLC一测多评法(QAMS),测定秦皮(白蜡树)标准汤剂与配方颗粒中主要成分的含量。测定秦皮(白蜡树)饮片中相应成分的含量,计算从饮片到标准汤剂及配方颗粒的转移率。结果：3批秦皮(白蜡树)配方颗粒特征图谱与标准汤剂对照特征图谱的相似度均>0.9,共确定了7个共有峰。聚类分析及PCA结果表明,不同批次标准汤剂成分存在一定差异性,未表现出产地聚集性。15批秦皮(白蜡树)标准汤剂出膏率6.18%～11.62%,秦皮甲素、紫丁香苷、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素、木通苯乙醇苷B质量分数分别为44.92～103.51、1.36～11.87、33.26～90.73、4.63～29....     

柴胡口服液HPLC指纹图谱及柴胡皂苷b2的含量测定

目的:建立柴胡口服液HPLC指纹图谱,并测定柴胡皂苷b2的含量,为科学评价和有效控制其质量提供可靠的方法.方法:用HPLC方法测定了10批柴胡口服液,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统,建立柴胡口服液的标准指纹图谱,并计算了每批制剂的相似度及柴胡皂苷b2的含量.结果:10批柴胡口服液的HPLC指纹图谱主要有11个共有峰,其中1个共有峰得到确认,相似度均＞0.985.柴胡皂苷b2在0.0397～0.793 3μg呈良好的线性关系(r=0.999 1),平均加样回收率98.27％,RSD 1.79％.结论:柴胡口服液制剂可通过与标准指纹图谱比较评价质量,方法稳定易行、重复性好,可用于柴胡口服液的质量评价.     

银桑菊固体饮料的HPLC指纹图谱

目的:银桑菊固体饮料的质量标准,建立其HPLC指纹图谱。方法:采用HPLC法对10批银桑菊固体饮料样品进行分析,以Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-0.4%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长268 nm,流速1.0 m L·min-1,柱温35℃,进样量10μL;利用国家药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2.0版)标定共有峰和相似度评价。结果:建立了银桑菊固体饮料的HPLC指纹图谱,标定了20个共有峰,10批样品的相似度均0.9,并指认了3个峰分别为绿原酸、甘草苷、木犀草苷。结论:该法操作简便可靠,所建立的HPLC指纹图谱重复性良好,可用于银桑菊固体饮料的质量评价。     

西黄丸HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的建立西黄丸的HPLC-ELSD指纹图谱的质量评价方法。方法采用Waters C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.5%醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,柱温30℃。蒸发光散射检测器的条件为漂移管温度45℃,载气体积流量1.5 L/min。结果建立了西黄丸HPLC指纹图谱共有模式,标定出25个共有峰,有24个共有峰来自乳香,1个共有峰(2号峰)来自体外培育牛黄,西黄丸不同批次之间相似度均大于0.9,采用聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和特征图谱相似度分析对10批西黄丸HPLC特征图谱进行评价,找出相对差异较大的样品以及对于西黄丸质量影响较大的成分。结论该HPLC指纹图谱结合模式识别可以较好地反映西黄丸的内在质量,为西黄丸的进一步研究提供科学依据。     

经典名方阳和汤基准样品的HPLC指纹图谱分析

目的：建立经典名方阳和汤基准样品的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱,结合化学计量学方法对其质量进行评价,为阳和汤基准样品的质量控制提供参考。方法：采用HPLC建立阳和汤基准样品指纹图谱,使用ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相选择乙腈(A)-0.05%磷酸水溶液(含0.05%三乙胺溶液)(B)梯度洗脱(0～5 min,2%～3%A;5～15 min,3%～5%A;15～65 min,5%～30%A;65～90 min,30%～70%A),流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长210、260 nm。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)并结合聚类分析、主成分分析与偏最小二乘法-判别分析对指纹图谱结果进行分析,评价不同批次阳和汤基准样品的质量差异,并寻找造成质量差异的主要化学成分。结果：建立了阳和汤基准样品的HPLC指纹图谱,确定了13个共有峰,并对各共有峰进行归属,其中2、8号峰来自熟地黄,10、11号峰来自肉桂,1、3～6号峰来自炒白芥子,13号峰来自麻黄,7、9、12号峰来自甘草。通过对照品指...     

柴芩清肝汤高效液相色谱指纹图谱研究

目的 对柴芩清肝汤的HPLC指纹图谱进行研究,建立其质量评价体系.方法 采用HPLC梯度洗脱技术进行分离.色谱柱为Diamonsil C18(5 μm,250 mm×4.6 mm),保护柱为Diamonsil C18,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长230 nm,柱温25℃.结果 确定了19个共有峰,并对各共有峰进行了初步归属.10批样品指纹图谱的相似度均在0.90以上.结论 该方法准确可控,可用于柴芩清肝汤的质量控制.     

葛根总黄酮HPLC特征图谱研究

目的：建立葛根总黄酮特征图谱的质量评价方法。方法：采用HPLC法测定,使用Agilent Eclipse XDBC₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),以甲醇-0.05%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1;检测波长为250 nm,柱温为25℃。采用主成分相对保留时间比较分析法和国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版),对10批不同批次葛根总黄酮HPLC特征图谱进行评价。结果：建立了葛根总黄酮的HPLC特征图谱,共标定了5个共有峰,分别为3′-羟基葛根素、葛根素、 3′-甲氧基葛根素、葛根素芹菜糖苷和大豆苷。结论：该研究建立的葛根总黄酮特征图谱特征性和专属性强,且方法快速、简便、可靠,可用于控制葛根总黄酮的质量。     

HPLC-DAD-QTOF-MS联用技术研究大株红景天胶囊指纹图谱

建立了大株红景天胶囊HPLC-DAD指纹图谱分析方法,色谱柱为Agilent Eclipse Plus-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm),以流动相甲醇-0.1%甲酸水溶液进行梯度洗脱,柱温35℃,流速1.0 m L·min~(-1),检测波长276 nm,采用该方法测定市售10批大株红景天胶囊,并用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A)软件进行指纹图谱分析,确定了21个色谱峰作为指纹图谱共有峰,同时对扣除峰面积超过总峰面积50%的单个共有峰前后10批样品的相似度结果进行分析比较,发现10批样品的相似度均大于0.940。采用HPLC/Q-TOF-MS对指纹图谱中的共有峰进行指认,确定了21个共有峰的分子式,结合对照品及质谱信息对其中11个指纹峰进行结构推断。该研究首次采用HPLC建立大株红景天胶囊的指纹图谱并结合HPLC/Q-TOFMS对指纹峰进行指认,该方法具有良好的精密度、稳定性和重复性,为大株红景天胶囊的质量评价提供依据。