阜阳市手足口病病例巢式RT—PCR诊断与结果分析

目的明确阜阳市手足151病暴发的病原体,并对RT,PCR结果进行分析。方法利用巢式RT—PCR方法,分别采用肠道通用引物、EV71特异引物和CoxA16特异引物对这起暴发中156例病人的176份病例标本进行检测。结果156例病例的176份标本中,肠道通用引物、EV71特异引物和CoxA16特异引物检测阳性率分别为73．30％、63．07％、0％。咽拭子、气管吸痰液、肛拭子肠道通用引物检测阳性率分别为75．71％、54．54％、78．57％,χ^2=4．57,P〉0．05;EV71特异引物检测阳性率分别为65．00％、45．45％、71．43％,χ^2=3．57,P〉0．05,两种引物检测的三类标本阳性率比较均无统计学意义。156例病例中,有22人采集了双份或多份标本共计50份,其中标本阳性率和病例阳性率比较,肠道通用引物检测分别为56．00％、81．82％,χ^2=4．41,P〈0．05;EV71特异引物检测分别为54．00％、81．82％,χ^2=5．04,P〈0．05,两种引物检测结果均有统计学意义。结论巢式RT—PCR技术是肠道病毒快速诊断的重要手段,阜阳市手足口病暴发的病原体为肠道病毒EV71型。多次多样本采样能够提高病例阳性诊断率。     

应用通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应检测肠道病毒

目的设计通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应(RT-n-PCR),以求敏感、特异及快速诊断肠道病毒(EV)感染。方法在EV基因组5'端非编码区(5'-UTR)设计2对通用引物,建立RT-n-PCR检测方法。结果共有104份临床标本检测到相应大小扩增条带,阳性率31.8%(104/327);在147例病例中粪便和咽拭子EV阳性比较差异无统计学意义(P>0.05)。病例总阳性数64例,阳性率38.8%(64/165)。正常儿童与可疑EV感染病人EV阳性率比较差异有统计学意义(u=3.38,P<0.01)。结论RT-n-PCR可以准确快速地检测出肠道病毒,同时检测多份标本可以提高EV阳性率。     

郴州市2009年46例临床诊断为手足口病的病原学分析

[目的]了解2009年郴州市手足口病的病原体类型及分布特征。[方法]采集46例临床诊断为手足口病病例的粪便样本,采用RT-PCR及Real-Time PCR法检测样本中的肠道病毒通用型(EV)、肠道病毒71型(EV71)、肠道病毒科萨奇A16型(CoxA16)3种核酸。[结果]46例临床诊断手足口病样本,其中EV71型22例、通用型11例、CoxA16型4例,总阳性率为80.43%。[结论]2009年引起郴州市重症手足口病的病原体主要为EV71型。     

厦门市2011—2014年手足口病病原监测分析

目的了解厦门市手足口病病原特征。方法采用实时RT-PCR对手足口病标本进行总肠道病毒通用核酸及EV71、Cox A16特异性核酸检测。结果共报告手足口病12 010例,总阳性率为58.5%,其中EV71占38.1%,CoxA16占20.9%,EV71和CoxA16同时阳性0.1%,其他肠道病毒占41.0%,优势病原呈动态变化。2岁儿童阳性率最高(63.2%)。EV71重症病例发生率最高,死亡5例均为EV71阳性;重症病例92.0%为5岁以下儿童。发病高峰为5~6月。结论厦门市手足口病主要由EV71引起,其他肠道病毒的作用越来越重要,5岁以下儿童仍是重症病例的主要人群。建议继续加强手足口病病原监测,并对其他肠道病毒鉴定型别。     

70例手足口病病原检测和临床分析

目的 分析研究70例手足口病患者的临床一般情况及其致病原.方法 采集70例手足口病患者(其中5岁以下儿童患者60例)的咽拭子标本,提取病毒RNA.用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)一步法检测肠道病毒(EV)的5'-UTR区基因、肠道病毒71型(EV71)的Vp3～Vp1区基因、柯萨奇病毒A16(Cox-A16)的Vp3～Vp1区基因.结果 在70例手足口病患者中,咽拭子标本肠道病毒核酸阳性率为42.8%(30/70).在30例肠道病毒核酸阳性病原中,EV71占66.7%(20/30).5岁以下儿童有EV71肠道病毒、或Cox-A16病毒、或非EV71及非Cox-A16的其他肠道病毒感染病例.而5岁以上的儿童和成人患者则只有EV71肠道病毒感染病例.39例4 d内采集的咽拭子标本病原核酸阳性检测率平均为66.7%(26/39),31例5 d以后采集的标本病原核酸阳性检测率是12.9%(4/31),差异有统计学意义(x~2=20.4,P<0.01).结论 手足口病以0～5岁婴幼儿患病为主,但成人也可发病.用RT-PCR检测病原核酸阳性的手足口病患者以EV71为主,且以发病后4 d内阳性检测率高.     

郴州市2008年17例临床诊断手足病病例病原学分析

[目的]了解2008年郴州市手足口病的病原体类型及分布特征。[方法]采集17例临床诊断手足口病病例的咽拭子、疱疹液等样本,采用RT-PCR及Real-Time法检测样本中的肠道病毒通用型(EV)、肠道病毒71型(EV71)、肠道病毒科萨奇A16型(CoxA16)这3种核酸。[结果]共检测17例临床诊断手足口病样本,其中通用型3例、CoxA16型3例、EV71型2例,总阳性率为47.00%。[结论]引起郴州市手足口病的病原体主要为CoxA16型及其他肠道病毒。     

2008年龙岩市手足口病实验室检测结果分析

目的了解龙岩市2008年手足口病病原特点。方法用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及组织细胞分离法,对614例手足口病患者的咽拭样本454份、粪便样本377份、疱疹液样本62份共893份进行CA16和EV71的检测。结果 614例中158例检出CA16或EV71,其中CA16 37例、EV71 121例,4例检出其他肠道病毒。病原监测发现2008年4月以前流行的是CA16,5月份CA16和EV71同时存在,6月份以后7个县(市、区)监测的病例均为EV71,全市7个县(市、区)均监测到EV71。结论本检测表明RT-PCR用于手足口病CA16和EV71的检测,可以快速、准确地扩增咽拭、粪便、疱疹液及病毒培养物中的病毒,鉴定病毒亚型,结果可靠,是一种快速、敏感、特异的检测方法。2008年引起龙岩市幼儿手足口病的病原,5月份以前流行病原为CA16,5月份后为EV71。     

70例手足口病病原检测和临床分析

Objective To analyze the etiology and clinical manifestations of 70 patients with hand-foot-mouth disease (HFMD). Methods The viral RNA from the pharynx swab samples were extracted and collected from 70 HFMD patients (of which,60 cases were under 5 years old) to detect the 5'-UTR gene of EV,the Vp3-Vp1 genes of EV71 and Cox-A16 by utilizing the technique of RT-PCR. Results Of 70 HFMD patients,30 cases (42.8%, 30/70) were positive in enterovirus nucleic acid, including EV71 and Cox-A16,pharynx swab sample testing. While, of the enteroviral pathogen RNA-positive 30 cases, EV71 accounted for 66. 7% (20/30). The proportion of etiological positive of 39 samples collected within 4 days after onset was 66.7% (26/39), but the probability of 31 samples collected after more than 5 days after onset was 12.9%(4/31),the difference was significantly(χ2=20.4,P<0. 01). Conclusion HFMD patients were mainly infants and young children between 0-5 years old, but adults could also be attacked. The enterovirus detected was mainly EV71,and the pharynx swab samples should be collected within 4 days after onset to increase the related viral nucleic acid positive detection probability.     

5676例手足口病病例分析

目的了解手足口病的临床和流行病学规律，探索恰当、正确的应对措施，有效、经济地开展预防控制工作。方法对5676例手足口病病例进行临床分类、流行病学分析、肠道病毒71（EV71）和柯萨奇A16（CAV16）病毒核酸检测。结果手足口病发病以幼儿为主，尤其是散居儿童。病例报告存在“周末低谷”和“周一跳跃”现象。轻型病例中病毒核酸检出率高达85．42％，重症病例中病毒核酸检出率仅28．57％，重症病例中有明显挂靠手足口病现象。咽拭子中病毒核酸检出率最高，为71．43％，肛拭子和粪便检出率66．67％，疱疹液检出率最低，为26．67％。结论手足口病是小儿常见传染病，绝大多数为轻型病例，预防的重点是高发期健康教育。     

2010年乌鲁木齐市手足口病监测结果

目的开展手足口病病原学检测,了解乌鲁本齐市2010年手足口病病原特点。方法用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,对208例手足口病患者的咽拭样本105份、粪便样本104份、肛拭样本27份共236份进行肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组(CA16)的检测。结果实验室检测的208例样本中,EV71检出104例,CA16检出66例,其他肠道病毒检出14例。病原监测发现2010年以EV71和CA16病原流行为主,各月监测的病例均以EV71型较多,各区县均监测到EV71病原。结论 RT-PCE方法用于手足口病EV71和CA16病原的检测,可以快速、准确地扩增咽拭、粪便及肛拭中的病毒,是一种快速、特异的检测方法。2010年乌鲁木齐市手足口病疫情自5月以来有明显增高趋势,呈现散发为主、局部聚集性发病的特点,病原主要是EV71和CA16型病毒。     

2011年平顶山市手足口病实验室检测结果分析

目的：对平顶山市2011年手足口病实验室检查结果进行分析,了解2011年平顶山市手足口病病原学特征,为实验室诊断手足口病提供参考。方法采集2011年平顶山市各地送检的499例手足口病患者的粪便、肛拭子、咽拭子、疱疹液和脑脊液等标本507份,应用RT-PCR技术检测样本中的肠道病毒、肠道病毒71型（ EV71）、柯萨奇病毒A组16型（ CA16）。结果499例手足口病患者的507份各类样本中,检测到肠道病毒（PE）阳性84份,EV71病毒特异性基因片段阳性167份, CA16特异性基因片段阳性125份。499例手足口病病例中,阳性376例,阳性率75.35%;其中EV71阳性167例,占阳性人数44.41%,CA16阳性共125例,占阳性人数33.24%, EV71的检出率较CA16高。已检验499例中,重症患者133例,阳性109例,阳性率81.95%;其中EV71共91例,占阳性人数83.49%,CA16共9例,占阳性人数8.26%。结论 EV71是2011年平顶山市手足口病的优势病原体;同时EV71是引起手足口病重症病例的主要毒株类型。     

2009年山东省手足口病病例的病原学检测分析

目的了解2009年引起山东省手足口病（HFMD）的病原体型别及分布特征。方法采集HFMD临床诊断病例的粪便、咽拭子、疱疹液等标本,应用肠道通用引物和EV71、CoxA16特异性引物对其进行RT-PCR鉴定;使用RD、Hep-2细胞对部分肠道通用引物阳性的粪便标本进行病毒分离。结果共收集1604份HFMD临床诊断病例标本,实验室检测阳性标本990份,其中EV71阳性标本589份,CoxA16阳性标本29份,EV71和CoxA16同为阳性标本2份,EV71和CoxA16的检出率分别为36.72%和1.81%。从80份肠道通用引物阳性的粪便标本中分离出肠道病毒32株,其中EV71型病毒23株,CoxA16型病毒4株。结论引起山东省HFMD的病原体主要为EV71型肠道病毒,EV71感染占EV阳性标本数的59.50%。全省17个地市均有EV71感染的HFMD病例检出。     

2008年广东省手足口病实验室检测结果分析

目的对广东省2008年手足口病实验室检查结果进行分析,了解2008年广东省手足口病病原学特征,为实验室诊断手足口病提供参考。方法采集2008年4—12月广东省各地送检的292例手足口病患者的粪便、肛拭子、咽拭子、疱疹液和脑脊液等标本426份和98名手足口病病例接触者的粪便、肛拭子和咽拭子等标本98份,应用RT-PCR技术检测样本中的肠道病毒、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CVA16)。结果292例手足口病患者的426份各类样本中,检测到肠道病毒阳性267份,EV71病毒特异性基因片段阳性169份,CVA16特异性基因片段阳性36份,EV71和CVA16病毒核酸同时阳性3份。292例手足口病病例中,EV71的检出率较CVA16高,分别为50.68%(148/292)和11.99%(35/292),20例手足口病死亡病例均为EV71感染病例。手足口病病例粪便样本的肠道病毒、EV71和CVA16的检测阳性率最高,分别为76.72%(178/232)、45.26%(105/232)和14.66%(34/232),且在发病9 d后仍能检测到EV71病毒。98名手足口病病例接触者的各类样本中,分别检测...     

手足口病患儿EV71的检测与其临床分析

目的了解仙居县2008年6月-2009年6月儿童手足口病病例不同标本中肠道病毒EV71和CoxA16的感染情况,为手足口病的治疗和预防控制提供依据。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及实时荧光RT-PCR方法,对145例疑似手足口病的咽拭子、疱疹液及脑脊液标本进行手足口致病病毒进行检测,全部取咽拭子145份,49份同时取疱疹液,47份同时取脑脊液,进行EV、EV7I和CoxA16的检测,最后对重症病例的病毒核酸测序,并进行基因分型。结果 145份疑似样品中,39份为肠道通用病毒阳性,其中21份样品EV71阳性,6份样品CoxA16阳性;咽拭子、疱疹液、脑脊液的检出率分别为28.6%、28.6%、12.8%;3例重症病例均只检出肠道病毒EV71,阳性率为100.0%。结论采用咽拭子及其疱疹液标本检出率比较,差异无统计学意义,且阳性检出率高于脑脊液标本,仙居县肠道病毒夏季高发,感染以EV71和CoxA16为主,手足口病重症感染病毒为EV71的C4亚型。     

病毒性脑炎病例中肠道病毒的分析

[目的]了解病毒性脑炎病例中肠道病毒感染的比例及流行型别分布,积累病原学诊断经验。[方法]采集2004至2007年监测病例脑脊液标本,细胞培养分离肠道病毒,RT-PCR诊断,组合血清中和试验与EVVP1基因序列分析进行血清型别鉴定。[结果]246例标本肠道病毒分离阳性率19.5%,病毒分离与RT-PCR检测总阳性率34.5%;流行/暴发病例分离阳性率（41.2%）高于一般住院病例（13.8%）;阳性率呈逐年下降趋势（44.7%～2.5%）。分离到的均为埃坷病毒（echovirus,ECV）,其中ECV30型占43.8%。RT-PCR诊断阳性率（49.0%）显著高于病毒分离率（28.9%）。[结论]病毒性脑炎中肠道病毒占比例高,ECV30为常见血清型;RT-PCR诊断敏感、快速,有实际应用价值。     

2010-2013年湖南省手足口病病原学监测结果分析

摘要:目的　分析2010-2013年湖南省手足口病（HFMD）病原学监测结果,为HFMD防控提供科学依据。方法　在湖南省所有县（市、区）连续收集手足口病病例的咽拭子、粪便等标本,应用RT-PCR技术检测肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）、非EV71和CoxA16的其他肠道病毒（EV）。结果　2010-2013年共收集HFMD标本31 341份,检出阳性19 423份,阳性率为62.0%,EV71、CoxA16、其他EV和混合感染所占比例依次为40.7%、18.8%、39.4%和1.1%。湖南省HFMD病原谱的构成2010年和2012年以EV71为主（52.4%和55.9%）,2011年EV71、CoxA16和其他EV所占比例相当,分别占34.3%、34.2%和31.4%,2013年以其他EV为主（67.3%）。多部位采样的阳性率最高（83.8%）,单一部位采样的阳性率从大到小依次为粪便（78.3%）、疱疹液（70.8%）、肛拭子（67.6%）和（鼻）咽拭子（55.0%）。轻症、重症和死亡病例的标本阳性率依次为59.8%、73.4%和91.2%,其中EV71的构成比依次为34.8%、66.2%和89.1%。不同性别病例的病原谱构成差异无统计学意义。结论　湖南省手足口病的主要病原体在2010-2013年间发生了改变,EV71是引起手足口病重症和死亡病例的主要毒株类型。为提高手足口病实验室诊断率,提倡对病例多部位联合采样。     

阜阳市2011～2012年手足口病病原学监测结果分析

手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)是由多种肠道病毒引起的一种儿童常见传染病,主要病原是肠道病毒71型(human enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A16型(coxsackievirus A16,CoxA16),均属于小RNA病毒科肠道病毒[1]。隐性