小白菊内酯对人肝癌BEL-7402细胞p53蛋白和增殖细胞核抗原表达的影响

小白菊内酯(parthenolide)为一种西方传统药物,是从艾叶菊属的短舌匹菊(小白菊)PyrethrumParthenium(L.)Smith中提取的化学成分(C15H20O3),主要用于治疗皮肤感染、风湿病和偏头痛[1]。小白菊内酯以时间依赖关系抑制c-fos和c-myc蛋白表达,但不影响p15、p16、p18、p19蛋白表达,以剂量依赖关系使血管平滑肌细胞(VSMC)周期中的G0/G1期细胞比例明显增多,S期细胞比例显著减少,同时抑制VSMC的[3H]TdR掺入[2];前期研究表明小白菊内酯抑制人肝癌细胞BEL-7402细胞增殖,并诱导其凋亡[3]。本研究以BEL-7402细胞为靶细胞,研究小白菊内酯对其p5…     

岩大戟内酯B对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响

目的:探讨岩大戟内酯B(jolkinolide B,JB)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及生长周期的影响。方法:取对数生长期的MDA-MB-231细胞,加入JB,使终质量浓度分别为0,2.5,5,10,20,40,80 mg·L^-1,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测岩大戟内酯B对MDA-MB-231细胞的生长抑制率。另设10,20,40,80 mg·L^-1组的JB,采用流式检测技术分析岩大戟内酯B对MDA-MB-231细胞的细胞周期,RT-PCR及Western blot检测真核细胞翻译起始因子(eIF4E),细胞周期蛋白D₁(CyclinD₁)基因mRNA表达及蛋白水平。结果:随着岩大戟内酯B浓度增加可显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖,G₁期细胞阻滞。与空白组比较,20,40 μmol·L^-1的岩大戟内酯B可抑制CyclinD₁和eIF4E的mRNA表达,转染eIF4E-siRNA组CyclinD₁的mRNA表达及蛋白水平也被抑制,同时细胞周期阻滞在G₁期(P<0.05,P<0.01)。结论:岩大戟内酯B可通过下调eIF4E及CyclinD₁的表达而阻滞细胞周期于G₁期。     

丹参酮ⅡA抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖及其机制研究

目的：观察丹参酮Ⅱ_A(tanshinone Ⅱ_A，TA)对10％胎牛血清诱导的大鼠血管平滑肌细胞(RVSMC)增殖的抑制作用，并探讨其可能的作用机制。方法：体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞A7r5细胞株，以终浓度为10％的胎牛血清(FBS)作为刺激因素，用细胞计数法、噻唑蓝(MTT)比色法和5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)掺入法测定TA对细胞增殖的影响，用流式细胞术(FCM)分析细胞周期分布特征，用Western blot实验测定细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)磷酸化活性，用RT-PCR测定c-fos的表达水平。结果：细胞计数、MTT比色法和BrdU掺入实验表明丹参酮Ⅱ_A能抑制10％FBS所诱导的VSMC增殖，作用强度呈剂量依赖性；细胞周期分析显示，TA处理组G₀/G₁期细胞百分比高于10％FBS组，而S期比例低于10％FBS组，表明TA可阻止10％FBS所诱导的细胞周期由G₀/G₁期向S期推进；Western blot结果显示与10％FBS组相比，TA处理组ERK1/2磷酸化活性降低；RT-PCR结果显示TA处理组c-fos表达水平降低。结论：丹参酮可抑制10％FBS诱导的体外培养大鼠动脉平滑肌细胞增殖，此作用可能与其阻止细胞周期由G₀/G₁期向S期推进，抑制MAPK信号转导通路激活，进而下调c-fos表达有关。     

桔梗皂苷D抑制人结肠癌SW620细胞增殖及其机制的研究

 目的 研究桔梗皂苷D对人结肠癌SW620细胞增殖的影响及作用机制。方法 采用人结肠癌细胞株SW620细胞,分别以四甲基偶氮唑蓝法观察桔梗皂苷D对细胞增殖的抑制作用,以流式细胞术检测桔梗皂苷D对细胞周期分布和凋亡的影响, 蛋白质免疫印迹法检测桔梗皂苷D对细胞周期蛋白和凋亡蛋白表达的影响。结果 与空白对照组比较,桔梗皂苷D呈剂量依赖地抑制人结肠癌SW620细胞的生长;15、20 μmol·L^-1桔梗皂苷D作用细胞24 h后,显著增加G₀/G₁期细胞比例,分别为(72.83±5.26)%和(76.82±5.83)%(P<0.05,空白对照组(56.78±4.92)%,周期蛋白cyclinD1、c-myc、CDK6表达明显下调;10、15、20 μmol·L^-1桔梗皂苷D作用细胞48 h后,明显增加细胞凋亡率,分别为（19.5±5.1）%、（35.8±5.3）%和（43.8±4.0）%(P<0.05,空白对照组（8.93±5.72）%,相关蛋白pro-caspase3、PARP表达下降。结论 桔梗皂苷D通过调控周期蛋白cyclinD1、c-myc、CDK6的表达,将细胞阻滞于G₁期,进而诱导细胞凋亡,抑制人结肠癌细胞SW620的增殖。     

葛根素抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖及c-fos和bcl-2蛋白表达

目的：观察葛根素对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响及对c-fos和bcl-2蛋白的表达作用,旨在认识葛根素作用的分子机制。方法： 建立凝血酶（T）诱导VSMC增殖的模型,以细胞计数和流式细胞仪DNA含量测定、细胞周期分析法观察T及葛根素对VSMC增殖和DNA合成的影响。T及葛根素等各处理因素作用24 h后,用免疫印迹法（Western blot）检测c-fos蛋白和bcl-2蛋白表达。结果：T对VSMC有明显促增殖作用,促增殖效应在24 h 末达峰,且T在0.1～1.0 U·L^-1有剂量依赖关系；葛根素呈剂量依赖性地抑制T诱导的细胞增殖、DNA合成以及 VSMC c-fos和bcl-2蛋白的表达。结论： 葛根素能抑制T诱导的VSMC增殖,这可能与其抑制c-fos和bcl-2蛋白表达有关。     

白术精油含药血清对人肺癌A549细胞株的抑瘤作用及机制研究

目的: 探讨白术精油对人肺癌A549细胞的抑瘤作用及作用机制。 方法: 白术精油乳剂灌胃SD大鼠,10日后采集含药血清体外培养A549细胞,噻唑蓝法(MTT)测其细胞生长抑制率,流式细胞术(FCM)检测白术精油含药血清对A549细胞细胞周期的影响,酶联免疫法(ELISA)检测白术精油含药血清对A549细胞半胱天冬蛋白酶3(caspase-3)蛋白表达的影响。 结果: 白术精油中剂量组(150 μL·kg^-1)15%含药血清、高剂量组(300 μL·kg^-1)15%含药血清能够显著抑制A549细胞增殖,使A549细胞周期停滞在G₀/G₁期,并能显著增加A549细胞caspase-3的蛋白含量。 结论: 白术精油具有抑制A549细胞增殖的作用,其抑瘤机制可能是控制A549细胞周期停滞在G₀/G₁期、促进细胞内caspase-3的蛋白表达促进细胞凋亡,从而抑制A549细胞增殖。     

斑蝥酸钠维生素B6诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及周期阻滞

目的: 研究斑蝥酸钠维生素B6（艾易舒）注射液对人肝癌HepG2细胞增殖、细胞周期与凋亡的影响,探讨其分子机制。 方法: 将不同浓度的斑蝥酸钠维生素B6注射液（0,1,5,10 mg·L^-1）作用于人肝癌HepG2细胞12,24,48 h,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞学技术检测细胞凋亡率及细胞周期的变化,Western blot检测蛋白激酶B（Akt）,磷酸化蛋白激酶B（pAkt）,B细胞淋巴瘤-2基因相关X蛋白（Bax）,B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）及细胞周期依赖性激酶抑制因子p21蛋白表达变化,RT-PCR检测Bax,Bcl-2及p21 mRNA表达变化。 结果: 斑蝥酸钠维生素B6可显著抑制HepG2细胞的增殖,诱导细胞凋亡,具有显著的时间和浓度效应（P<0.05）;同时G₀/G₁期细胞比例显著升高,S期细胞比例显著降低（P<0.05）。Western blot结果显示斑蝥酸钠维生素B6可下调HepG2细胞中pAkt和Bcl-2蛋白的表达,上调Bax和p21蛋白的表达（P<0.05）。RT-PCR结果显示Bax,p21 mRNA的表达水平明显升高,而Bcl-2 mRNA的表达水平下降（P<0.05）。 结论: 斑蝥酸钠维生素B6可抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,诱导其凋亡并引发G₀/G₁期阻滞,其机制可能与斑蝥酸钠维生素B6参与调控磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）通路有关。     

参白解毒方抑制HCT116细胞增殖的药效及机制

目的 探讨参白解毒方（SBJDF）抑制结直肠癌（CRC）细胞HCT116增殖的药效及机制。方法 利用参白解毒方（0、0.25、0.5、1、2、4 g·L^-1）处理HCT116细胞48 h，噻唑蓝（MTT）比色法检测参白解毒方对HCT116细胞活力的影响，分别设置空白组、参白解毒方（1、2、4 g·L^-1）组，倒置显微镜观察参白解毒方对HCT116细胞形态的影响，克隆形成实验观察参白解毒方对HCT116细胞增殖能力的影响，JC-1探针检测参白解毒方对HCT116细胞线粒体膜电位（Δψm）的影响，流式细胞仪检测HCT116细胞周期分布和细胞凋亡率，蛋白免疫印迹法（Western blot）分析参白解毒方对细胞周期，抗凋亡以及核转录因子-κB（NF-κB）信号通路相关蛋白的影响。结果 参白解毒方有效抑制HCT116细胞活力，引起细胞形态改变，呈浓度依赖性；与空白组比较，参白解毒方（1、2、4 g·L^-1）组克隆形成率均明显下降（P<0.05，P<0.01），参白解毒方（2、4 g·L^-1）组诱导HCT116细胞发生G₀/G₁期阻滞（P<0.05，P<0.01）。与空白组比较，参白解毒方（1、2、4 g·L^-1）组周期蛋白D₁（CyclinD₁）表达明显下降（P<0.05，P<0.01），参白解毒方（2、4 g·L^-1）组细胞周期蛋白A₂（CyclinA₂），周期蛋白依赖性激酶4（CDK4）蛋白表达明显下降（P<0.05，P<0.01），参白解毒方（4 g·L^-1）组周期蛋白依赖性激酶1（CDK1）表达显著下降（P<0.01）。与空白组比较，参白解毒方（2、4 g·L^-1）组课诱导HCT116细胞凋亡，并下调抗凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关xl蛋白（Bcl-xl）表达（P<0.05，P<0.01），降低HCT116细胞线粒体膜电位；与空白组比较，参白解毒方（2、4 g·L^-1）组可下调NF-κB信号通路相关蛋白IκB激酶α（IKKα）、NF-κB抑制蛋白α（IκBα）、磷酸化p65蛋白（p-p65）的表达（P<0.05，P<0.01）。结论 参白解毒方有效抑制HCT116细胞增殖，其机制可能通过抑制HCT116细胞NF-κB信号通路的激活，引起细胞周期阻滞，诱导细胞凋亡。     

桂枝茯苓胶囊及其成分组合物抗子宫收缩作用及其机制

目的：研究桂枝茯苓胶囊及成分组合物（14个成分）对子宫平滑肌收缩抑制作用及其机制。方法：采用前列腺素F_2α（Prostaglandin,PGF_2α）诱导的子宫平滑肌收缩模型,检测PGF_2α诱导后的子宫组织p42/44丝裂原激活蛋白激酶（p42/44 MAPK）磷酸化及间隙连接蛋白43（Cx43）的表达水平,考察其抑制离体子宫平滑肌收缩可能的作用机制。结果：桂枝茯苓胶囊及成分组合物抑制子宫幅值50%浓度（IC₅₀）分别为130.40、46.67μg?mL^-1;桂枝茯苓胶囊及其组合物能抑制PGF_2α诱导的子宫组织p42/44MAPK 磷酸化和Cx43水平升高。结论：桂枝茯苓胶囊及成分组合物抑制PGF_2α诱导的子宫平滑肌收缩作用,其机制可能与降低子宫组织p42/44MAPK磷酸化水平、抑制Cx43蛋白表达增高有关。     

辣椒碱通过TRPV1诱导结肠癌SW480细胞凋亡

目的 探讨辣椒碱通过瞬时受体电位香草酸亚型1（TRPV1）对人结肠癌SW480细胞的影响及可能的分子机制。方法 设立辣椒碱组及空白组,通过细胞增殖与活性检测-8（CCK-8）法检测辣椒碱（50,100,200,300,400,500,600,800,1 000 μmol·L^-1）处理SW480细胞12,24,48 h后的细胞活性,选取有效抑制增殖的辣椒碱浓度;采用流式细胞术检测辣椒碱干预（200,400,800 μmol·L^-1）后细胞凋亡及细胞周期的变化;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测辣椒碱（200,400 μmol·L^-1）干预后TRPV1,肿瘤抑制蛋白p53,磷酸化p53（p-p53）,抑癌基因［B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）］,活化的天冬氨酸蛋白水解酶-3（cleaved Caspase-3）,cleaved Caspase-8,活化的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（cleaved PARP）的蛋白表达的影响;此外,利用微小RNA（mRNA）沉默技术作用TRPV1,观察200 μmol·L^-1辣椒碱处理沉默TRPV1的SW480细胞凋亡率的变化,以及上述蛋白表达的影响。结果 与空白组比较,辣椒碱50,100 μmol·L^-1作用对细胞活性未出现显著影响,浓度在200 μmol·L^-1以上时,随浓度增加细胞活性逐渐降低（P<0.01）,呈剂量依赖效应;与空白组比较,辣椒碱200,400,800 μmol·L^-1处理可明显诱导细胞凋亡（P<0.05,P<0.01）;200,400 μmol·L^-1 辣椒碱干预下,细胞生长表现为G₂/M期阻滞,800 μmol·L^-1表现为G₀/G₁期阻滞（P<0.05）;与空白组比较,辣椒碱200,400 μmol·L^-1处理细胞能够明显上调上述凋亡途径中相关蛋白（p53,p-p53,Bax,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-8,cleaved PARP）的表达（P<0.05,P<0.01）,Bcl-2蛋白表达显著下调（P<0.01）;沉默TRPV1能明显抑制辣椒碱诱导的细胞凋亡及凋亡通路蛋白表达（P<0.05,P<0.01）。结论 辣椒碱可能通过TRPV1受体抑制SW480细胞增殖,阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡。     

川芎嗪诱导HL-60细胞株分化与分子机制的研究

目的:研究川芎嗪(TMP)诱导HL-60细胞分化并初步探讨其机制.方法:MTT实验测定细胞增殖变化;硝基四氮唑蓝(N BT)还原实验、瑞氏染色细胞形态学观察和流式细胞仪检测细胞表面CDllb,CD14表达率测定细胞分化状态;流式细胞仪检测细胞周期;RT-PCR,Western blot检测c-myc,p27,CDK2和cyclinEl mRNA和蛋白表达.结果:TMP能明显抑制HL-60细胞增殖,呈剂量和时间依赖性.TMP低质量浓度(200～ 300 mg·L-1)促进HL-60细胞分化;300 mg·L-1 TMP处理HL-60细胞后,细胞被阻滞于G0/G1期,c-myc mRNA和蛋白表达水平逐渐减弱;p27 mRNA和蛋白表达水平显著上升;CDK2,cyclinE1 mRNA水平变化并不显著,但其蛋白表达水平则显著下降,呈时间依赖性.结论:小剂量TMP能诱导HL-60细胞的分化,其机制可能是c-myc表达的下调,p27表达的增加,在蛋白水平抑制与cyclinE-CDK2复合物的结合,使细胞周期停滞于G0/G1期.     

隐丹参酮对宫颈癌Hela细胞增殖及细胞凋亡的影响

目的:研究隐丹参酮对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用及对细胞周期和凋亡的影响。方法:MTT法检测不同浓度隐丹参酮分别在24,48,72 h对Hela细胞的抑制作用;流式细胞仪(FCM)检测隐丹参酮对Hela细胞周期和凋亡的影响;Western blot法检测E6,p53,p21蛋白的表达。结果:不同质量浓度(0.5~16 mg.L-1)隐丹参酮对Hela细胞的毒性均有明显剂量和时间依赖性,其24,48,72 h的IC50值分别为17.8,8.17,6.55 mg.L-1;隐丹参酮可使Hela细胞细胞周期的构成发生明显的变化并诱导细胞凋亡。Western blot表明,隐丹参酮作用Hela细胞后HPV E6的蛋白水平表达逐渐降低,p53和p21的蛋白水平表达逐渐升高。结论:隐丹参酮对宫颈癌Hela细胞有较强的细胞毒性,其作用机制可能是使Hela细胞生长停滞在G0/G1期并诱导细胞凋亡,使S期细胞比例降低;抑制HPV E6的蛋白的表达,使p53功能恢复,启动凋亡,从而起到杀伤肿瘤的作用。     

华蟾素注射液联合放疗对食管癌细胞增殖与周期的影响

目的:观察华蟾素注射液对食管癌细胞ECA109增殖的抑制作用,分析华蟾素联合X射线照射对细胞周期的影响,探讨华蟾素注射液与放疗联合效应的机制。方法:实验分空白组、华蟾素组、放疗组、华蟾素+放疗组,作用食管癌ECA109细胞48 h后,应用噻唑蓝(MTT)比色法检测华蟾素注射液对ECA109细胞增殖的影响;流式细胞术(FCM)检测细胞周期的变化,反转录-PCR(RT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)检测各组泛素连接酶(RNF2),p16和周期蛋白依赖性激酶(CDK4)mRNA和蛋白表达。结果:华蟾素可显著抑制食管癌ECA109细胞的增殖,且呈浓度和时间依赖性。与空白组比较,各药物组中DNA合成前期(G0/G1期)细胞比例明显升高(P0.05),S期细胞比例明显下降(P0.05)。与空白组比较,华蟾素+放疗组中RNF2 mRNA和蛋白明显降低(P0.05),且各药物组均能促进p16 mRNA和蛋白表达(P0.05),抑制CDK4 mRNA和蛋白水平(P0.05)。结论:华蟾素注射液能有效抑制人食管癌ECA109细胞增殖,并将细胞阻滞于G0/G1期,机制可能与降低RNF2,CDK4水平,上调p16基因水平相关。     

The effects of BuYang HuanWu Decoction and its effective components on proliferation-related factors and ERK1/2 signal transduction pathway in cultured vascular smooth muscle cells

Buyang Huanwu Decoction (BYHWD) was a commonly used traditional Chinese medicine for the treatment and prevention of ischemic cardiovascular and cerebral disease. Previous studies had shown that BYHWD alkaloids and glycosides could inhibit intimal hyperplasia and vascular smooth muscle cell (VSMC) proliferation after injury caused by balloon catheter. The present study aims to explore the mechanisms by which cell cycle was affected by BYHWD and its components. Primary rat VSMC was treated with platelet-derived growth factor (PDGF) and cell cycle phase and extracellular-signal regulated protein kinase (ERK) transduction pathway factors were measured. PDGF-treated cells were associated with a significant increase in the number of cells in the G₂/M phase and S phase, and in the expression of P-ERK1/2, proliferating cell nuclear antigen (PCNA), c-fos, cyclinD₁ and cyclin-dependent kinase-4, as well as a decrease in the number of cells in the G₀/G₁ phase, and in the expression of cyclin-dependent kinase inhibitor P21 protein and mitogen-activated protein kinase phosphatase-1 (MKP-1). Treatment with plasma of rats fed seven doses of BYHWD crude extract (22.2 g/kg), BYHWD alkaloids (1.66 g/kg), BYHWD glycosides (14.2 g/kg) or the negative control atorvastatin (20 mg/kg) inhibited these changes. All drug-containing plasma had similar activity to the mitogen activated protein kinase (MAPK)/ERK antagonist PD098059 which inhibited PDGF-induced expression of P-ERK1/2 and enhanced MKP-1. These suggest that BYHWD and its components may prevent VSMC proliferation by interfering with the ERK transduction pathway.     

DDPH对实验性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及对PDGF-B,bFGF,c-sis,c-myc的影响

 目的：观察1-（2，6-二甲基苯氧基）-2-（3，4-二甲氧基苯乙胺基）丙烷盐酸盐（DDPH）对实验性高血压大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的作用及对生长因子PDGF-B，bFGF及其相关癌基因c-sis，c-myc表达的影响。方法：采用氚-胸腺嘧啶核苷（³H-TdR）掺入法，电镜，免疫组化，原位杂交法进行实验观察。结果：DDPH在降低血压同时，能减少VSMC的线粒体，粗面内质网和3H-TdR掺入量，并能逆转VSMC增殖时PDGF-B，bFGF抗原及c-sis，c-mycmRNA的表达增强。结论：DDPH能抑制实验性高血压大鼠的VSMC增殖，与生长因子及癌基因调控的分子生物学机制有关。     

(2S)-naringenin from Typha angustata inhibits vascular smooth muscle cell proliferation via a G0/G1 arrest

Ethnopharmacological relevance

Typha angustata is used in traditional Chinese medicine for a variety of clinical disorders. Its pharmacological actions include beneficial effects on hyperlipidemia and myocardial infarction, as well as labor-inducing and antibacterial effects.

Aim of the study

We investigated the mechanism underlying the ability of (2S)-naringenin, an active compound from Typha angustata, to inhibit the proliferation of vascular smooth muscle cells (VSMCs).

Materials and methods

After measuring the antiproliferative effect of (2S)-naringenin on VSMC proliferation using cell proliferation and viability assays, the possible involvement of a signaling pathway associated with platelet-derived growth factor receptor β (PDGF-Rβ), extracellular signal regulated kinase 1/2 (ERK1/2), phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)-linked protein kinase B (Akt/PKB), or phospholipase C-γ1 (PLCγ1) was investigated by immunoblotting. Moreover, the effect of (2S)-naringenin on DNA synthesis and the cell cycle was examined using a [³H]-thymidine incorporation assay and flow cytometry.

Results

(2S)-Naringenin significantly inhibited PDGF-BB-induced VSMC proliferation in a concentration-dependent manner, but did not affect signaling pathways associated with PDGF-Rβ, Akt/PKB, ERK1/2, or PLCγ1. However, (2S)-naringenin suppressed DNA synthesis via a G₀/G₁ cell cycle arrest. Accordingly, the expression of cyclins D1 and E and cyclin-dependent kinases 2 and 4 was inhibited in a concentration-dependent manner; moreover, the phosphorylation of retinoblastoma protein was suppressed.

Conclusions

Our results show that (2S)-naringenin inhibited the PDGF-BB-induced proliferation of VSMCs via a G₀/G₁ arrest; thus, (2S)-naringenin may be valuable as a therapeutic agent for managing atherosclerosis and/or vascular restenosis.     

莪术醇抑制人肝癌细胞HepG2增殖的机制

目的:探讨莪术醇在体外对人肝癌HepG2细胞的增殖和细胞周期的影响及其分子机制.方法:体外培养HepG2细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察莪术醇对HepG2细胞增殖的抑制作用,流式细胞术分析莪术醇处理后HepG2细胞的周期分布,TaqMan探针实时荧光定量PCR法及Western印迹检测细胞周期调控相关基因的表达水平.结果:莪术醇对HepG2细胞的增殖具有明显抑制作用,且在一定范围内(2.5～10mg·L-1)呈浓度和时间依赖性;莪术醇诱导HepG2细胞发生G1期阻滞,伴随cyclin D1,CDK2,CDK8,pRB1,p27KIPl mRNA表达水平增高,而cyclin A1的水平则下调,cyclin E1和CDK4的表达不受影响,p53及其下游调控蛋白p21WAF1和Wip1表达水平增高.结论:莪术醇诱导人肝癌HepG2细胞G1期阻滞、抑制细胞增殖,其作用可能通过激活p53与pRB通路,抑制cyclin A1基因的表达和上调p21 WAF1,p27KIP1以及CDK8基因的表达而实现的.     

齐墩果酸诱导人肝癌Bel-7402细胞G2/M期阻滞及凋亡的机制研究

该研究旨在探讨齐墩果酸在诱导Bel-7402肿瘤细胞凋亡过程中,细胞周期分布的变化及其相关的分子机制。采用MTT法、台盼蓝拒染试验检测齐墩果酸对肝癌细胞增殖的抑制作用;PI单染检测细胞周期;Annexin V-FITC双染法观察细胞凋亡;Western blot法检测周期调控蛋白以及凋亡相关蛋白表达的变化。结果显示齐墩果酸能显著抑制Bel-7402肝癌细胞株增殖,G₂/M期的细胞比例显著升高,而G₁期细胞明显减少,明显增加细胞凋亡率;同时下调细胞周期蛋白cyclin B1,使蛋白磷酸酶Cdc25C(Ser216)磷酸化而失去活性、引起Cdk1(Tyr15)以及蛋白激酶Chk1的磷酸化水平升高。OA也可上调p21水平导致细胞周期阻滞在G₂/M期;此外Bcl-2表达减少,Bax,Cyt c表达增加,cleaved-caspase-9和cleaved-caspase-3蛋白表达增加。以上结果提示齐墩果酸能明显抑制肝癌细胞的生长,诱导细胞凋亡,可能是通过激活凋亡线粒体信号通路而实现的。     

雷公藤红素对大鼠血管平滑肌细胞c-myc和血小板源性生长因子的mRNA的影响

目的：观察雷公藤红素对大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）中原癌基因（ｃ－ｍｙｃ）和血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）的ｍＲＮＡ表达水平的影响。方法：分别将所培养的第５￣１０代ＶＳＭＣ同步化培养２４ｈ后，加入２０％胎牛血清（ＦＣＳ）和不同剂量的雷公藤红素（０．１、０．２和０．３ｍｇ／Ｌ），共同孵育６ｈ和１２ｈ后，分别提取ＶＳＭＣ胞浆总ＲＮＡ，通过地高辛标记探针，采用斑点杂交方法检测ｃ－ｍｙｃ和ＰＤＧＦ的ｍＲ