37例性病门诊患者泌尿生殖道沙眼衣原体基因分型研究

目的:了解性病门诊高危人群中沙眼衣原体分型特征.方法:采用巢式PCR扩增omp 1基因的VS1-VS2序列,自动测序仪测序,对沙眼衣原体临床菌株分型.结果:以12株标准株omp 1基因VS1-VS2序列为标准,37例沙眼衣原体感染样本基因分型共检出9个血清型,B型1株(2.7%)、D型5株(13.5%)、E型11株(29.7%)、F型5株(13.5%)、G型1株(2.7%)、H型3株(8.1%)、J型9株(24.3%)、K型1株(2.7%)、混合感染型1例(2.7%).结论:本组泌尿生殖道沙眼衣原体感染的基因型以E型、J型、F型、D型为主,分型对于监测特定型别的流行动态有重要意义.     

汕头性病门诊患者泌尿生殖道沙眼衣原体检测

目的：了解2011-2017年本院11584例性病门诊患者泌尿生殖道沙眼衣原体感染特征。方法：对就诊患者的临床资料进行回顾性分析。结果：（1）11584例患者中沙眼衣原体阳性1480例,阳性率12.78%。6886例男性患者中泌尿生殖道沙眼衣原体感染1023例,阳性率14.86%,4698例女性患者中沙眼衣原体阳性457例,阳性率9.73%,男女患者阳性率比较有显著统计学差异;（2）感染率最高和最低的年龄段为≤19岁和≥60岁的患者,感染率分别为 28.29%（71/251）和9.16%（34/371）;（3）1480例泌尿生殖道沙眼衣原体阳性患者中有991例无症状的体检者（66.96 %）。结论：2011-2017年本院性病门诊患者泌尿生殖道沙眼衣原体感染率较高,泌尿生殖道沙眼衣原体阳性感染者中无症状感染者占比较高。     

沙眼衣原体的基因分型及其临床意义

目的　探讨对沙眼衣原体更为简便的分型方法及基因分型的临床意义。方法　利用聚合酶链反应 (PCR)扩增沙眼衣原体外膜蛋白基因 (omp1 )片段 ,以核酸内切酶作酶切 ,1 0 %聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,银染色后观察带型分布。结果　扩增 1 5种血清型omp1基因 ,产物为 871bp的DNA片段。用AluⅠ酶切此片段 ,观察到 1 5种血清型呈现具有特征性的带型分布 ,但C组带型较难区别。再用HpaⅡ、HinfⅠ及EcoRⅠ三重酶切 ,则可将C组各型完全区分开来。对 74株沙眼衣原体临床株进行分型 ,发现E ,F ,G ,D在本观察人群中占优势 ,偶尔 ,也见到B ,H ,J等型别。还观察到 1例F/D混合型。沙眼衣原体的型别与临床表现之间未见有明显的关联 ,但发现D型感染者常为抗沙眼衣原体抗体高滴度者。结论　omp1基因分型技术可以作为流行病学调查中的有用的研究工具     

中国南方部分城市泌尿生殖道沙眼衣原体基因分型研究

目的 了解中国南方4个城市性病高危人群中沙眼衣原体(Ct)基因型的分布特征。方法 从衡阳、上海、广州、江门四个城市的性病门诊收集1180份泌尿生殖道标本,经质粒PCR筛选后,阳性者用巢式PCR扩增Ctomp1基因片段,酶切omp1扩增产物,分析Ct各临床株omp1基因的限制性片段长度多态性(RFLP),将临床株分型。结果 Ct质粒PCR阳性者301份,用于分型者286份。通过RFLP分型,共检出10个基因型,其中常见的是E(30.8%)、J(23.8%)、D(17.5%)、F(10.5%)、G(6.2%)型,并且不同城市间基因型的分布差异无统计学意义(χ²=0.981,P>0.05)。结论 4个城市存在Ct多种基因型,并且基因型的分布大致相同。     

泌尿生殖道沙眼衣原体MLVA-ompA分型方法的建立及初步应用

目的:探讨泌尿生殖道沙眼衣原体(Ct)多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)-omp A分型方法的建立及初步应用。方法:共对5株Ct参考株和31株性病门诊男性Ct阳性株进行MLVAomp A分型。合成针对串联重复次数差异性显著的3个可变数目串联重复序列(VNTR)(CT 1291,CT1299,CT 1335)的引物,优化PCR反应条件,进行PCR扩增,与参考序列比对进行MLVA分型。Omp A分型采用本实验室已建立的巢式PCR方法,扩增omp A基因,通过测序后进行Blast比对判断型别。结果:omp A和MLVA分型方法的分辨率分别为0.83和0.86,MLVA-omp A分型分辨率可达0.96。31株临床Ct株中,29例(93.5%)omp A分型成功,共被分为8个基因型B(0.7%)、D(37.9%)、E(0.7%)、F(10.3%)、G(0.7%)、H(0.7%)、J(20.7%)、K(3.4%)。31株临床Ct株MLVA分型全部成功(100%),共检出10个MLVA亚型和18个MLVA-omp A亚型。结论:成功建立了Ct的MLVA-omp A分型方法,该方法可对临床Ct阳性株进行分型分析,与omp A分型方法相比,具有更高分辨率,可作为Ct传统分型方法的补充。     

广东省梅州地区142例泌尿生殖道沙眼衣原体的基因分型及药敏分析

目的:检测本地区泌尿生殖道沙眼衣原体(Ct)临床分离株阿奇霉素、克拉霉素、多西环素、左氧氟沙星4种常用抗生素体外药物敏感性,并对Ct基因分型进行初步研究。方法:将采集到符合要求的临床标本142例,采用McCoy细胞培养法进行培养,传代至感染率达到90%以上,收集标本采用微量稀释法测定4种常用抗生素的药物敏感性。对Ct临床株omp1基因片段应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法进行基因分型。结果:共培养出Ct阳性株82株,其中McCoy细胞感染率达到90%以上的菌株48株,阳性率为33.80%;共检出4个基因型,E型16株(33.33%),J型12株(25.00%),F型10株(20.83%),D型10株(20.83%)。药敏结果显示,最低抑菌浓度(MIC)分别是:阿奇霉素0.063~1.000 mg/L,克拉霉素0.008~0.032 mg/L,多西环素0.016~0.125 mg/L,左氧氟沙星0.250~2.000 mg/L。结论:142例标本中Ct感染以E型为主要基因型,实验中未发现对这4种抗菌药产生耐药的菌株,克拉霉素、多西环素抗衣原体活性相对较强,阿奇霉素、左氧氟沙星的抑菌浓度在较高的水平。     

三种方法检测泌尿生殖道沙眼衣原体的比较

目的用三种方法检测泌尿生殖道沙眼衣原体,评价其方法的敏感性和特异性.方法采用C-C快速法、PCR和VIDAS CHL三种方法检测150例尿道或宫颈分泌物标本.结果在150例患者中,阳性患者43例,阳性率为28.67％,C-C快速法检测的敏感性与特异性为97.67％和100％,PCR检测的敏感性和特异性为100％和98.13％,VIDAS CHL检测的敏感性和特异性为97.67％和97.20％.结论三种方法检测泌尿生殖道沙眼衣原体的敏感性和特异性无显著性差异(P＞0.05).     

北京地区育龄妇女泌尿生殖道沙眼衣原体感染状况及基因分 …

目的 对北京地区育龄妇女沙眼衣原体的感染状况及春基因分型进行初步研究。方法 利用胶体金免疫法对１７７例计划生育门诊及妇科体检的育龄妇女进行筛查,对９例沙眼衣原体感染阳性者的拭子标本直接进行套式ＰＣＲ扩增主要外膜蛋白（ＭＯＭＰ）基因。将扩增的ＤＮＡ进行限制性内切酶长度多态性分析,并对ＭＯＭＰ基因易变区ＶＳ１、ＶＳ２、ＶＳ３、ＶＳ４进行基因序列分析。结果 １７７名育龄妇女有９例沙眼衣原体感染阳性,９份     

泌尿生殖道沙眼衣原体分离培养方法探讨

泌尿生殖道沙眼衣原体分离培养方法探讨王启操张国威何云志王志安沙眼衣原体（ＣＴ）是一组特殊的革兰阴性菌，专性细胞内寄生。用细胞培养法分离ＣＴ具有较好的敏感性和特异性，是诊断ＣＴ感染最可靠的方法，也是验证其它检测方法的金标准。我们采用放线菌酮处理的ＭｃＣ...     

多重聚合酶链反应用于D－K型沙眼衣原体基因分型的研究

目的摸索一套泌尿生殖道沙眼衣原体基因分型的多重聚合酶链反应法。方法选择某一型与其它各型均不同的可变区部位作为下游引物,以恒定区 1区的高度保守区作为各型的公用上游引物,优化反应条件,进行标准株和临床野生株的多重聚合酶链反应扩增,并与聚合酶链反应－限制性内切酶片段多态性方法比较。结果用摸索出的反应系统和条件,对 8个标准株进行扩增,扩增出与理论值一致的片段,并可直接在普通水平琼脂糖凝胶进行电泳。特异性检测证明：①衣原体各型之间没有非特异性交叉扩增,②对泌尿生殖道病原和寄生微生物进行扩增,未扩出任何 DNA带。对临床野生株分型结果证明：复合聚合酶链反应阳性率为 100％,而聚合酶链反应－限制性内切酶片段多态性为 94.44％。结论本套衣原体基因分型的多重聚合酶链反应法特异、敏感、快速、实用,最终能用于临床分型。     

沙眼衣原体临床分离株的抗菌药物敏感性及基因分型研究

目的 探讨广州地区沙眼衣原体临床株对6种抗菌药物的敏感性和基因型分布,以及两者之间的关系。 方法 细胞培养法分离衣原体临床株,测定6种抗菌药物对沙眼衣原体的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。巢式PCR扩增沙眼衣原体主要外膜蛋白基因（omp1）的VS1-2片段,核酸测序分型。结果 346例患者的泌尿生殖道标本接种后,获得76株沙眼衣原体临床分离株,其中40株传代后达到药敏试验所需菌量。药敏试验结果显示克拉霉素、阿奇霉素、罗红霉素、多西环素、四环素和氧氟沙星的MIC50/MIC90（μg/ml）分别为0.008/0.032、0.08/0.16、0.125/0.5、0.032/0.064、0.25/0.5、0.5/1.0。40株共检出7种基因型,其中E型有14株（35％）,其次为J型10株（25％）和F型6株（15％）。7种基因型衣原体菌株对阿奇霉素的MIC50完全相同,而罗红霉素、克拉霉素和氧氟沙星的MIC50在不同型别菌株间有1 ~ 4倍的差异。结论 克拉霉素、多西环素和阿奇霉素显示较强的抗衣原体活性,7种基因型衣原体对阿奇霉素显示一致的敏感性。     

广州地区沙眼衣原体omp1基因分型及突变研究

目的 探讨不同omp1基因型沙眼衣原体（Ct）在广州地区非淋菌性尿道（宫颈）炎患者中的分布情况。方法 从性病和妇科门诊及外展现场采集男性尿道和女性宫颈拭子,提取Ct基因组DNA为模板,巢式PCR扩增Ct omp1基因VD1 ~ VD3并测序分型,分析Ct型别决定簇VD1 ~ VD2区域的氨基酸突变情况。结果 共检测1208份拭子,检出Ct 132株,对其中130株进行测序分型,共发现10个omp1基因型,分别为E型38株（29.23%）、D型25株（19.23%）、J型24株（18.46%）、F型21株（16.15%）、G型7株（5.38%）、H型5株（3.85%）、K型5株（3.85%）、B型、Ja型各2株（各1.54%）、I型1株（0.77%）;可见E、D、J、F 4个型别为主要感染型别,共占83%。序列分析发现,D、B、K 3个型别在VD1 ~ VD2区域的氨基酸存在突变。另有2例为混合感染未能确定型别。结论 广州地区Ct omp1基因型别感染以E、D、J、 F 4种型别为主,共占83%,Ct B型也发现于男性尿道和女性宫颈。     

性病门诊泌尿生殖道沙眼衣原体的分子流行病学研究

目的 了解广西性病门诊泌尿生殖道沙眼衣原体感染率和基因分型状况及相关因素。方法 对598例性病门诊患者的泌尿生殖道标本经质粒PCR筛选后，阳性者用巢式PCR扩增沙眼衣原体ompl基因片段，酶切ompl扩增产物，对沙眼衣原体各临床株ompl基因进行限制性片段长度多态性（RFLP）分析，将临床株进行基因分型。结果 在598例性病门诊患者中，经PCR检测，83例沙眼衣原体阳性，感染率为13.9%，感染率在性别之间差异无统计学意义。阳性者的DNA进行RFLP分析，基因分型发现，E型占27.7%，F型占20.5%，D型占13.2%和G型占12.0%。基因型在不同性别、年龄和婚姻组之间的分布差异无统计学意义。E型和F型比其他型别更不易出现临床症状，而G型80%的病例出现下腹痛的表现。结论 广西性病门诊患者中存在一定比例的沙眼衣原体感染和多种基因型分布，omp1基因的多态性分析可以作为沙眼衣原体分子流行病学研究的工具，同时应加强对泌尿生殖道沙眼衣原体感染的筛查、控制及感染者的随访。     

微量细胞培养法检测疑似非淋菌性尿道炎患者的沙眼衣原体

采用微量细胞培养法分离１０７例疑似非淋菌性尿道炎或宫颈炎患者泌尿生殖道标本中的沙眼衣原体。总衣原体感染率为２４．３％，男、女衣原体感染率分别为２５．７％和２１．２％。对衣原体培养阳性的患者做了临床分析。并对向量细胞培养与传统的玻璃瓶增减法进行了比较。结果表明：在本组人群中沙眼衣原体感染有较高的流行率。     

南京地区性病患者沙眼衣原体感染的基因分型

目的了解南京地区性病患者泌尿生殖道沙眼衣原体感染分离株的基因型（血清型）分布情况。方法应用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性分析,对来自南京地区性病门诊病人和性乱妇女的９４份沙眼衣原体阳性标本进行了基因分型研究。结果Ｅ型为南京地区性病高危人群最流行的沙眼衣原体基因型,占３６．２％,其次为Ｆ、Ｇ和Ｄ型,分别占１９．２％、１７．０％和１２．８％,而Ｋ、Ｊ、Ｉ、Ｈ型比较少见。发现了一个Ｂ基因型,一个Ｆ／Ｇ混合型和４个非典型基因型。结论我国南京泌尿生殖道沙眼衣原体感染流行株的基因型分布情况与国外基本相同,且存在某些基因型的变异。     

质粒缺口-连接酶链反应-酶联免疫吸附法检测沙眼衣原体

目的：建立高度灵敏特异的质粒缺口-连接酶链反应-酶联免疫吸附法(Gap—LCR—ELISA)检测沙眼衣原体(Chlamydia trac dtrachomatis，CT)。方法：根据CT共有隐蔽性质粒设计并标记4条寡核苷酸探针，对6型CT标准株和鹦鹉热衣原体及其他常见泌尿生殖道病原菌行Gap-LCR-ELISA。结果：质粒Gap-LCR-ELISA可枪测出6型CT，并与其他病原体无交叉反应，其最低检测限为2．5个原体(elementary bodies，EB)，比PCR敏感10倍。结论：质粒Gap-LCR-ELISA对检测CT感染具有极高的灵敏度和特异度，适宜于我国进行大规模CT流行病学调查。     

连接酶链反应检测性病患者沙眼衣原体感染

目的 评价连接酶链反应(LCR)诊断性病患者尿道/宫颈中沙眼衣原体(Ct)的意义。方法 STD门诊尿道(宫颈)炎患者276例,取尿道/宫颈拭子,以LCR分析法检测Ct。采用每4份标本相混合的方法分别以LCR分析法检测尿道/宫颈拭子标本中的Ct,其中56例患者同时进行尿道/宫颈拭子Ct细胞培养。差异性结果由PCR法扩增Ct的主要外膜蛋白基因来进行确认,确定LCR分析法检测Ct的敏感性、特异性。结果 LCR分析法检测尿道/宫颈拭子Ct的敏感性、特异性分别为96.7%和100%。采用每4份标本相混合的方法分别以LCR分析法检测尿道/宫颈拭子标本中的Ct,与单独用每份标本逐一进行LCR检测比较,结果完全一致,符合率为100%。结论 以尿道/宫颈拭子为标本,LCR分析法检测Ct的敏感性、特异性高。适用于诊断泌尿生殖道Ct感染。用标本相混合的方法LCR分析检测尿道/宫颈拭子标本中的Ct,适用于Ct感染的普查。     

临床标本中沙眼衣原体噬菌体Vp1基因及血清Vp1抗体的检测

目的 检测临床标本中沙眼衣原体噬菌体Vp1基因及血清Vp1抗体.方法 收集天津性传播疾病研究所就诊患者的分泌物拭子和血清;用PCR法筛查分泌物标本中的Vp1基因;以Vp1蛋白作为抗原通过ELISA法及Western印迹法检测血清中针对Vp1抗体的存在;对PCR法结果阳性的分泌物进行细胞培养,然后免疫荧光法进行检测Vp1.结果 共筛查出36例拭子的PCR扩增产物在目的片段位置出现明显条带,及23例Vp1抗体阳性的血清.通过细胞培养及免疫荧光法,利用制备的单抗检测沙眼衣原体临床标本,尚未发现阳性标本.结论 从临床拭子及血清中成功筛查出沙眼衣原体噬菌体Vp1基因和Vp1抗体.     

阿奇霉素和强力霉素治疗泌尿生殖道沙眼衣原体感染的回顾性研究

目的:评价阿奇霉素1g疗法和强力霉素7d疗法在临床治疗泌尿生殖道沙眼衣原体感染的疗效.方法:对2017年5月至2019年5月门诊所有衣原体检测阳性的患者病例进行回顾性研究,剔除未按标准剂量及疗程、未接受判愈试验、接受其他可能影响疗效药物治疗患者资料.结果:68例初始接受单剂量阿奇霉素1 g治疗的患者,微生物治愈率为79...