测定七叶灵水解的快速试验

某些细菌具有水解七叶灵为七叶亭的能力。利用这一特性,可对某些链球菌、肠杆菌、李斯特氏菌及厌氧菌作出鉴定。此试验的测定方法有多种,本文介绍一种快速法,其原理和观察结果的方式与常法相同,但30分钟内即可得出鉴定结果。试验在七叶灵缓冲液中进行。该缓冲液的组成是,七叶灵5.0克、枸椽酸铁铵0.5克,氯化钠8.0克、磷酸氢二钾0.4克、磷酸二氢钾0.1克及蒸馏水1000 ml。校正pH至5.6±2,分装备用。试验时,取4～6个菌落接种在0.5ml七叶灵缓冲液中,使其浊度与Mc-Farland第三管相近,放37℃水浴。每隔30分钟、60分钟和2小时观察结果。溶液变黑为阳性反应。用该法测定各种细菌水解七叶灵反应的结果是:59%     

用快速发酵试验测定娇嫩细菌的碳水化合物反应

用肉汤法测定娇嫩细菌分解碳水化合物产酸的能力,一般需要较长的时间.某些细菌的生长须要在培养基中添加血清或其它营养成份.用快速发酵试验(Rapid Fermentation test RFT)鉴定淋病双球菌可以得到可靠的结果.作者将Brown氏法进行改良以适于鉴定其它娇嫩细菌.试验所用试剂有:①20%碳水化合物肉汤溶液:碳水化合物20.0克,蛋白胨10.0克,肉膏3.0克,氯化钠5.0克,蒸溜水1000毫升,校正pH7.0,过滤除菌.②缓冲盐     

氯化钠-七叶苷水解试验快速鉴定肠球菌

水解七叶苷和在高盐浓度下生长是肠球菌的两个重要特性.目前常用的肠球菌鉴定方法往往需要12～24h。我们推荐一种联合的氯化钠-七叶苷水解试验,可以在1～2h 内报告阳性结果.一、材料与方法1.菌株:102株链球菌均自住院患者分离.2.试剂:七叶苷2.0g,枸橼酸铁铵0.5g,氯化钠50.0g,磷酸氢二钾0.4g,磷酸二氢钾0.1g,加蒸     

纸片法快速细菌七叶灵水解试验在细菌鉴定中的应用

七叶灵水解试验在细菌分类鉴定工作中经常使用，借以观察细菌是否具有水解七叶灵生成七叶素和葡萄糖的能力。常规的七叶灵水解试验是将培养的细菌接种于七叶灵水解试验培养基中，37℃培养3—4d才能观察结果，并且培养基成分中的胆汁会抑制某些细菌的生长，影响结果的判定。     

克雷伯氏菌的快速鉴定

作者根据在缺乏电解质的胱氨酸乳糖琼脂CL-ED(Oxiod CM 301)上的菌落特征、直接抗生素敏感试验及七叶苷快速水解试验,快速鉴定从尿道分离的克雷伯氏菌。只对氨苄青霉素耐药并在2小时内水解七叶苷、发酵乳糖的粘液状大菌落报告为克雷伯氏菌。常规的七叶苷水解试验用琼脂基础培养基.含     

嗜常温气单胞菌中的自杀现象为基础的种属鉴定

嗜常温气单胞菌(亲水气单胞菌、寡源气单胞菌和豚鼠气单胞菌)的种属鉴定,常需大量生化试验确定。曾有不少研究者鉴定特定的种的标志。因此,有人提出用先锋酶素Ⅰ敏感性作为寡源气单胞菌的表现型标志:以CAMP 反应确定需氧和厌氧来区别三个嗜常温的气单胞菌.对于使用种-特异生物学现象来快速鉴定嗜常温气单胞菌,作者提出用自杀现象与产气性和七叶苷水解联合的方法。当气单胞菌在含有0.5%葡萄糖的肉汤培养基生长时,由于供给的葡萄糖抑制三羧酸循环,结果乙酸盐积累而导致细菌细胞死亡呈     

肠道条件致病菌的快速鉴定试验

作者介绍一种半固体培养基,能及时和正确地鉴别肠道条件致病菌。培养基的制备方法:氯化钠4克,磷酸钠0.5克、硫酸铵1克、硫酸钾2克、硫酸镁0.5克、碳酸钠0.2克、乳糖20克、甘露醇 1克、蛋白胨20克、中性红0.04克、溴麝香草酚兰0.02克,琼脂3克、蒸馏水1000毫升。琼脂先于少量水中、用玻棒研磨,静置1-2小时。中性红放试管内,加水3毫升,煮沸溶解,滇麝香草酚兰溶于0.5毫升酒精中。其它成份均先用少量水溶解,(蛋白胨可用玻棒研磨),余下的蒸馏水用0.1N NaOH校正至pH 7.0-7.2。上述成份混合后,煮沸5-7分钟,琼脂全部溶解后,用棉花纱布过滤,待冷至30-40℃时再校正pH 7.0-7.2,分装试管,每管     

下呼吸道分泌物中糠秕马拉色菌的分离与鉴定

目的 对痰涂片镜检可疑为马拉色菌的标本进行马拉色菌的分离培养,并对分离菌株进行系统鉴定.方法 收集2010年3月至201 1年9月卫生部北京医院经派克墨水染色镜检可疑为马拉色菌的下呼吸道分泌物标本133份,接种于含1％吐温60的科玛嘉琼脂培养基(即改良念珠菌显色培养基),于35℃大气环境中培养.挑取疑似菌落在含0.5％吐温40和0.5％吐温60的沙保弱平板上进行纯培养.采用传统的表型鉴定方法对分离菌株进行鉴定,包括染色镜检观察菌体形态及染色性、沙保弱培养基生长试验、吐温试验、七叶苷分解试验、过氧化氢试验、吐温沉淀试验和蓖麻油试验,可疑菌株采用18s rRNA基因序列分析方法对分离菌株进行菌种鉴定.结果 镜检可疑的下呼吸道分泌物中马拉色菌分离率为47.4％ (63/133),63株分离菌经传统的表型鉴定方法结合l8srRNA基因序列分析方法均鉴定为糠秕马拉色菌.标本直接涂片,用派克墨水染色镜下可明显区分马拉色菌和念珠菌.结论 糠秕马拉色菌在改良念珠菌显色培养基上的菌落呈粉红色,可明显区别于其他念珠菌菌落,用改良念珠菌显色培养基可提高下呼吸道分泌物中糠秕马拉色菌的分离率.传统的表型鉴定结合基因序列分析可提高马拉色菌鉴定的准确性.     

七叶洋地黄双苷滴眼液对翼状胬肉成纤维细胞生长分化的影响

背景:已有研究证实七叶洋地黄双苷滴眼液滴眼液能够促进组织的血供,但在治疗黄斑变性的同时是否加速翼状胬肉的生长却不清楚.目的:观察七叶洋地黄双苷滴眼液对翼状胬肉成纤维细胞生长分化的影响.方法:纳入同时有黄斑变性和翼状胬肉的患者26例,一眼给予七叶洋地黄双苷滴眼液点眼,随访时间为3,6,12,18和24个月,每次皆收集翼状胬肉图像并观察其翼状胬肉侵蚀角膜面积变化.最后8例行翼状胬肉手术治疗,切除的组织行成纤维细胞体外培养,ELISA法检测成纤维细胞基质金属蛋白酶1,3,9的表达,荧光定量PCR法检测成纤维细胞基质金属蛋白酶3 mRNA的表达.同时找年龄匹配的未用药的8例初发翼状胬肉组织作对照,并与年龄匹配的正常结膜组织对比.结果与结论:患者用七叶洋地黄双苷滴眼液治疗后翼状胬肉侵蚀角膜的面积生长速度明显加快(P < 0.01),而且其翼状胬肉成纤维细胞中基质金属蛋白酶1,3水平较对照组和正常结膜组织均增加(P < 0.01),基质金属蛋白酶3 mRNA的表达比对照组高了52.7% (P < 0.01).结果提示,七叶洋地黄双苷能促进翼状胬肉的增长,其机制可能与其促进翼状胬肉组织中成纤维细胞基质金属蛋白酶1,3的分泌,促进基质金属蛋白酶3 mRNA的表达有关.     

苍术糖浆治疗小儿佝偻病

药物: 一、配方:苍术500克、鸡蛋皮粉56克,制成苍术糖浆560毫升。每10毫升含苍术9克、鸡蛋皮粉1克。二、制法:取鸡蛋皮洗净晒干,焙黄研成细粉,过120目筛。选市售苍术500克,加水浸过药面约3厘米,煎煮2次,第1次煮沸1小时,第2次煮沸半小时,两次煎液合併,用纱布过滤,浓缩至560毫升。再按配方加入鸡蛋皮粉拌匀。每100毫升加食盐0.5克(去苦味)、适量白糖及尼泊金(防腐剂)0.05克,即     

原核基因工程制备新型重组α-半乳糖苷酶应用于人B→O血型改造的研究

本研究利用基因工程方法制备脆弱类杆菌来源的新型α-半乳糖苷酶并将其应用于人B→O血型改造.在获得了能够表达细菌α-半乳糖苷酶工程菌株的基础上,从诱导时间、诱导剂浓度两个方面对工程菌株的诱导条件进行优化,获得细菌α-半乳糖苷酶的最佳可溶性表达条件;超声上清经过阳离子交换层析和阴离子交换层析等方法进行纯化.利用纯化后的α-半乳糖苷酶在磷酸盐缓冲液(pH 6.8)中处理B型红细胞2小时,制备O型红细胞.结果表明细菌α-半乳糖苷酶最佳诱导表达条件为:37℃、起始D(600)为0.8,IPTG浓度为0.1 mmol/L,诱导时间为2小时.纯化后α-丰乳糖苷酶的纯度为电泳纯,比活由纯化前的0.42 U/mg提高到了2.1 U/mg.该酶在26℃、接近中性的pH条件(6.8)下经2小时可将B型红细胞改造成O型红细胞,需要的酶量为225μg/ml红细胞.结论:建立了重组细菌α-半乳糖苷酶的表达纯化工艺,制备的重组α-半乳糖苷酶可有效地将B型红细胞改造成O型红细胞,为B→O血型改造提供了更有效的工具酶.     

用于人牙周细菌药敏试验的琼脂培养基

牙周病是具有不同临床表现及不同微生物所致的炎症。牙周囊中隐藏着100-150种细菌,占优势的有5-10种。主要是厌氧菌、兼性厌氧菌和嗜碳酸菌。单纯使用抗菌素,或者与手术清创术联合治疗牙周病都是有效的。药敏试验有助于合理选用抗菌药物,为此提出了一种适用于多数牙周菌株体外药敏试验的培养基,称V培养基。该培养基的优点是:(1)牙周菌生长良好;(2)成分容易配制;(3)药物最小抑菌浓度(MIC)同其他培养基得到的一致;(4)不需添加血液。 V培养基的成分如下:每升含胰蛋白胨15克,酵母浸膏5克,氯化钠5克,葡萄糖2克,丙酮酸钠2克,甲酸钠1克,延胡索酸钠1.5克,琥珀酸钠0.1克,吐温-800.25毫升,琼脂15克,氯血红素5毫克,维生素K_30.5毫克。作者比较了50株牙周菌在V培养基和6种其他培养基(Wilkins-Chalgren琼脂WCA、Schaedler琼脂、Brucella琼脂、胰蛋白酶黄豆血平板TSA、以及加血液的Schaedler和Brucella琼脂)上的生长情况。 V培养基同TSA在牙周细菌生长的能力和数量上相似;同WCA相比,试验的24种细菌中有17种结果相似,有6种细菌在V培养基上生长优于WCA;V培养基明显优于Schaedler和Brucella琼脂,牙周细菌在这些琼脂上生长不良。加血液能增加Brucella琼脂上细菌的生长,但对Schaedler琼脂无明显促进作用。用同样的上述牙周菌株在V培养基及常用于临床厌氧菌敏感试验的培养基WCA上进行青霉素、四环素、氯霉素、克林达霉素和红霉素等5种抗菌素的药敏试验比较,测得的MIC基本相同。只有腐蚀类杆菌(“Corroding”Bacteroides)在V培养基上的MIC高于WCA,可能是因细菌在V培养基上生长较好,以致抑菌需要的抗菌素浓度增高。总之,V培养基用于培养牙周病分离的细菌可与血琼脂培养基媲美,甚至更佳。在药敏试验上,其价值同WCA类似。因此,V培养基不失为进行人牙周菌药敏试验的合适培养基。     

便于运输的保存百日咳杆菌生物学特性的方法

作者提出了一种长期保存百日咳杆菌而不改变其生物学特性的方法.将新近分离的百日咳杆菌或副百日咳杆菌在马铃薯甘油培养基或含20～25%人或动物血液的牛奶琼脂上孵育48小时后,用无菌的0.85%氯化钠溶液从培养基表面洗下培养物,使悬液浓度达1500万～3000万个细菌/毫升.取无菌吸管将细菌悬液分装于1毫升安瓿,每安瓿0.3～0.5毫升.安瓿熔封后保存于4℃冰箱,亦可在室温保存不长的时间(故适宜于运输).     

21株绿色气球菌的生物学特性研究

本文报告了从临床标本中分离的21株绿色气球菌的生理及生化特性.本菌的革兰氏阳性、四联状排列、在血琼脂平板上呈α-溶血、能耐受60℃30min、能在65g/L Nacl 肉汤中生长、能在胆汁七叶苷培养基中生长并变黑及发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖等特性比较恒定,大部分菌株触酶阴性或弱阳性.但有些试验结果不规律.此菌对大多数抗生素耐药.     

血小板许汝和氏稀释液的一点改进

许汝氏血小板稀释液中加入美兰0.012克,使血小板在普遍显微镜下轮廓清晰,易于观察。试剂:尿素10克,柠檬酸钠0.5克,甲醛0.1毫升,美兰0.012克,加水至1000毫升。结果观察:经沉淀后的血小板在显微镜下,背景呈兰色,血     

尿液中检出绿色气球菌一例

绿色气球菌多在败(菌)血症患者的血液中检出,我们从一例泌尿系感染患者的尿中分离出一株绿色气球菌,现报告如下。细菌鉴定留取中段尿,用接种环沾取离心沉淀物接种血琼脂和麦康凯琼脂平板,35℃24h 培养后,血平板上长出α-溶血,圆形光滑,灰白色小菌落,麦康凯琼脂平板上未生长。涂片染色为G 阳性球菌,四联状排列。触酶,氧化酶试验均阴性,OF 葡萄糖为发酵型。接种胆汁七叶苷培养基,35℃24h 后,培     

374株来自血液中菌株的分析

从1982～1986年,本室从各科送检的住院病人血液标本中,分离出各类细菌374株,并对部份菌株作了药物敏感试验,现将结果报告如下: 一、材料与方法1.细菌培养:所有病人均按常规静脉采血3毫升,立即接种于30～40毫升葡萄糖肉汤培养基内,即送实验室置37℃温箱孵育增菌。分离、鉴定方法均按上海科学技术出版社出版的《临床医学检验》进行。     

石蒜碱增高小鼠血红蛋白作用初报摘要

本实验证明当单次腹腔注射盐酸石蒜碱3毫克/公斤于小白鼠,待过2小时,断头处死,用Sahli法测定其血红蛋白含量,可由对照组的均值±标准差12.2±0.8克/100毫升,升高至用药组的13.2±0.5克/100毫升,P<0.01,如改为注药4次(间隔为3小时),末次注药后待过2小时,同法测定之,血红蛋白量可升高至15.2±1.1克/100毫升,P<0.01,当改为注药2次,待过15小时,同法测定该批小鼠的血红蛋白量时,也呈现相似的增高情况。     

静脉输入硫酸镁对妊娠严重高血压的心血管影响

对5名妊娠引起严重高血压患者进行研究,血压(?)160/110。12小时前未用任何降压药。先以5％葡萄糖100毫升加4克硫酸镁静滴,15分钟后再以每小时1.5克速度维持。然后测量患者体循环和肺动脉压、心率、心排血量,测定血气、pH值、氧饱合血红蛋白和总血红蛋白,治疗前和输入4克硫酸镁后,立即测定血液动力学变化。结果在输硫     

临床分离革兰氏阴性厌氧杆菌的快速法

现已公认,类杆菌-梭形杆菌群的革兰氏阴性无芽胞厌氧杆菌是一群重要的病原菌,同时也是胃肠道下段、口腔和阴道正常菌丛的主要组分。但这些细菌的分类不清,在常规检验中很少加以确切鉴定。明确鉴定这类菌株将有助于评价检验结果,确定传染源,选定治疗方案和判定预后。该类细菌原有的几种常规试验需48小时才能完成。而本研究的目的在于设计一组简单而快速的试验方法,能在24小时内鉴定临床标本中分离的革兰