基于AMPK-FoxO3a自噬轴探讨葛根芩连汤改善2型糖尿病db/db小鼠肝脏脂质异位蓄积的机制

目的 探讨葛根芩连汤调控腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）-叉头框蛋白O3a（FoxO3a）自噬轴改善2型糖尿病db/db小鼠肝脏脂质异位蓄积的机制研究，为阐明葛根芩连汤的降糖机制及推广应用提供科学依据。方法 选取SPF级自发性2型糖尿病动物模型db/db小鼠75只及正常db/m小鼠15只予维持饲料喂养1周后检测血糖，随机分为6组，每组15只。正常组（生理盐水0.2 g·kg^-1）、二甲双胍组（0.2 g·kg^-1）、葛根芩连汤高、中、低剂量组（31.9、19.1、6.9 g·kg^-1）及模型组（生理盐水0.2 g·kg^-1），连续灌胃给药12周，1次/d，检测各组小鼠空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbA1c），酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清空腹胰岛素（FINS）、游离脂肪酸（FFA）水平，苏木素-伊红（HE）染色观察肝组织病理改变，使用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝脏组织中磷酸化（p）-AMPK、p-FoxO3a及自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）、p62蛋白的表达；免疫荧光检测肝脏组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肝组织AMPK、FoxO3a、LC3 mRNA表达。结果 与正常组比较，模型组小鼠肝脏组织有病理学改变；模型组小鼠FBG、HbA1c、FINS和FFA水平显著升高（P<0.01）；肝脏组织中p-AMPK、p62、HIF-1α蛋白表达水平显著升高，p-FoxO3a、LC3Ⅱ的蛋白表达显著降低（P<0.01）；模型组小鼠肝脏组织AMPK mRNA表达显著降低，FoxO3a表达显著升高（P<0.01）。与模型组比较，各给药组肝脏组织病变程度减轻；各给药组FBG、HbA1c、FINS和FFA水平有所降低（P<0.01）；葛根芩连汤中、高剂量组p-AMPK、p62、HIF-1α蛋白表达有所增加，p-FoxO3a的表达呈剂量依赖性降低，二甲双胍组、葛根芩连汤高剂量组LC3Ⅱ的表达有所升高（P<0.01）；给药组AMPK mRNA的表达呈剂量依赖性增加，FoxO3a的表达呈剂量依赖性降低（P<0.01）。结论 葛根芩连汤可改善2型糖尿病db/db小鼠肝脏脂质异位蓄积，可能与调控AMPK-FoxO3a自噬轴相关。     

抑制AMPK观察清燥救肺汤对肺癌细胞自噬启动相关蛋白表达的影响

目的 观察应用腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）抑制剂（compound C）后，清燥救肺汤对肺癌细胞自噬启动相关蛋白AMPK，哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR），UNC-51样激酶1（ULK1）表达的影响。方法 雄性C57BL/6J小鼠随机分为模型组，环磷酰胺（CTX）组（50 mg·kg^-1），清燥救肺汤组（11 g·kg^-1），AMPK抑制剂组（10 mg·kg^-1），清燥救肺汤加AMPK抑制剂组（清燥加抑制剂组）（11 g·kg^-1+10 mg·kg^-1）。小鼠右腋皮下注射Lewis肺癌细胞构建肺癌荷瘤模型。造模24 h后，CTX组腹腔注射给药，隔日1次，共7次，AMPK抑制剂组与清燥加抑制剂组腹腔注射compound C，每日1次，共14 d。清燥救肺汤组和清燥加抑制剂组，造模前后14 d均以中药设定剂量灌胃给药。实验结束后处死各组小鼠并取荷瘤组织，统计各组瘤质量；透射电镜（TEM）观察各组肺癌组织自噬溶酶体的生成情况；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测AMPK，磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK），mTOR，磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR），ULK1，磷酸化UNC-51样激酶1（p-ULK1），微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）和p62蛋白的表达；苏木素-伊红（HE）染色观察各组肺癌组织病理学变化。结果 与模型组比较，清燥救肺汤组瘤质量降低（P<0.01），电镜下发现自噬溶酶体生成，p-AMPK，p-ULK1，LC3B，LC3B-Ⅱ蛋白表达和p-AMPK/AMPK，p-ULK1/ULK1，LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均升高（P<0.05，P<0.01），p-mTOR，p62蛋白表达和p-mTOR/mTOR均降低（P<0.05）。与清燥救肺汤组比较，清燥加抑制剂组电镜下未见自噬溶酶体生成，p-AMPK，p-ULK1，LC3B，LC3B-Ⅱ蛋白表达和p-AMPK/AMPK，p-ULK1/ULK1，LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均明显降低（P<0.05，P<0.01），p62蛋白表达升高（P<0.05）。HE染色结果显示，各给药组肺癌组织与模型组比较，病理有明显改善。结论 清燥救肺汤能促进自噬发生标志蛋白LC3B-Ⅱ升高及p62蛋白表达降低从而诱导自噬发生，其自噬启动机制可能不是调控AMPK/mTOR/ULK1通路介导，而是通过AMPK/ULK1通路实现的。     

基于AMPK/mTOR自噬通路探讨芍药苷保护溃疡性结肠炎小鼠的作用机制

目的 探讨芍药苷通过腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）自噬通路对溃疡性结肠炎（UC）小鼠的保护作用机制研究。方法 自由饮用4%葡聚糖硫酸钠（DSS）建立UC小鼠模型，56只BALB/c雄性小鼠，随机分为模型组、AMPK抑制剂组（20 mg·kg^-1）、芍药苷（50 mg·kg^-1）+抑制剂（20 mg·kg^-1）组、芍药苷高剂量组（50 mg·kg^-1）、中剂量组（25 mg·kg^-1）、低剂量组（12.5 mg·kg^-1）药物干预7 d后，通过比较小鼠体质量、疾病活动指数（DAI）变化和苏木素-伊红（HE）染色结果判断芍药苷对UC的保护作用。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组小鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）的水平，免疫荧光检测结肠中微管相关蛋白1轻链3（LC3）的含量，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测结肠组织中AMPK、mTOR蛋白及其磷酸化蛋白p-AMPK、p-mTOR，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测AMPK、mTOR、Beclin1、LC3和p62的mRNA表达水平。结果 与空白组比较，模型组小鼠体质量下降、DAI评分升高、结肠出现严重的病理学损伤，炎症因子TNF-α、IL-6在血清中含量上升（P<0.01），LC3和p-AMPK/AMPK在结肠组织中蛋白水平下调，p-mTOR/mTOR蛋白水平上调（P<0.01）；AMPK、LC3的mRNA表达水平下调，mTOR、p62的mRNA表达上调（P<0.01）。与模型组和芍药苷+抑制剂组比较，经芍药苷治疗后小鼠体质量上升、DAI评分降低、结肠组织病理损伤减轻，炎症因子TNF-α、IL-6在血清中含量下降（P<0.05），LC3和p-AMPK/AMPK在结肠组织中蛋白水平上调，p-mTOR/mTOR蛋白水平下调（P<0.01），AMPK、Beclin1、LC3的mRNA表达水平上调，mTOR、p62的mRNA表达下调（P<0.01），抑制剂组小鼠结肠组织病理损伤严重，各项指标趋势与芍药苷高剂量组完全相反。结论 芍药苷可通过激活AMPK/mTOR信号通路，增强自噬，减轻UC小鼠的炎症损伤，从而起到保护作用。     

翻白草总黄酮对2型糖尿病db/db小鼠降血糖的作用机制

目的 探讨翻白草总黄酮对2型糖尿病db/db小鼠的血糖、血脂、氧化应激、组织病理及肝脏磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路的影响。方法 24只db/db小鼠随机分为模型组、盐酸二甲双胍组（0.2 g·kg^-1）,翻白草总黄酮低、高剂量组（0.1,0.4 g·kg^-1）,另取6只db/m小鼠作为正常组。药物干预4周后,检测血清中空腹血糖（FBG）,糖化血清蛋白（GSP）,总胆固醇（TC）,甘油三酯（TG）,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）,低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）,空腹血胰岛素（FINS）,丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平,计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）,检测肝糖原含量;苏木素-伊红（HE）染色观察肝脏、胰腺组织病理学变化;采用蛋白免疫印迹法（Western bolt）分别检测肝脏组织中胰岛素受体β（IRβ）,胰岛素受体底物-1（IRS-1）,PI3K,磷酸化PI3K（p-PI3K）,Akt,p-Akt,葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）蛋白的表达。结果 与正常组比较,模型组肝细胞排列紊乱,胞浆内可见大量脂肪空泡、脂滴,伴有部分细胞坏死。胰腺胰岛体积减小,胰岛组织和腺泡细胞界限不明显,细胞排列紊乱,部分细胞空泡化;血清FBG,GSP,TC,TG,LDL-C,FINS,MDA水平显著升高（P<0.01）,血清HDL-C,SOD水平明显降低（P<0.05）,肝糖原含量显著降低（P<0.01）,肝脏组织IRβ,IRS-1,p-PI3K/PI3K,p-Akt/Akt和GLUT4蛋白表达显著降低（P<0.01）。与模型组比较,翻白草总黄酮低、高剂量组肝细胞形态结构较完整,空泡样变、水肿坏死显著减少。胰腺结构清晰,被膜结构完整,胰岛分布正常,结构完整。血清FBG,GSP,TC,TG,FINS,MDA水平明显降低（P<0.05）,血清HDL-C,SOD水平明显升高（P<0.05）,肝糖原含量显著升高（P<0.01）,肝脏组织IRS-1,p-PI3K/PI3K,p-Akt/Akt和GLUT4蛋白表达明显升高（P<0.05）。结论 翻白草总黄酮可显著改善糖脂代谢紊乱及胰岛素抵抗,抗氧化应激,减轻肝脏、胰腺的病理损伤,提高肝脏组织PI3K/Akt信号通路中的相关蛋白表达,从而防治2型糖尿病。     

基于16S rRNA技术研究蒌连丸对2型糖尿病db/db小鼠肠道菌群的影响

目的 研究蒌连丸对2型糖尿病db/db小鼠肠道菌群的影响。方法 取4~5周龄雄性db/m+小鼠为正常组,将同周龄成模雄性db/db小鼠根据血糖、体质量随机分为模型组、二甲双胍组（0.25 g·kg^-1·d^-1）及蒌连丸组（13 g·kg^-1·d^-1）,每组6只药物干预5周,每周记录小鼠体质量、进食水量及空腹血糖（FBG）,5周后检测空腹血糖、肝脏甘油三酯（TG）、肝脏总胆固醇（TC）、糖化血清蛋白（GSP）、空腹血清胰岛素（FINS）,同时计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）;收集小鼠肠道内粪便,应用16S rRNA技术检测各组小鼠粪便肠道菌群结构变化。结果 与正常组比较,模型组体质量、进食水量、FBG、肝脏TG、肝脏TC、GSP、FINS及HOMA-IR显著升高（P<0.01）;与模型组比较,蒌连丸组可显著降低db/db小鼠饮水量、FBG、肝脏TG、肝脏TC、GSP、FINS及HOMA-IR（P<0.01）;蒌连丸组肠道菌群从门到属水平均发生了变化,有益菌相对丰度增加,有害菌相对丰度减少。其中,嗜黏蛋白阿克曼菌、布劳特氏菌、瘤胃球菌、副拟杆菌丰度显著增加（P<0.01）。结论 蒌连丸可以显著改善2型糖尿db/db小鼠糖脂代谢,其机制可能与增加肠道中嗜黏蛋白阿克曼菌、布劳特氏菌、瘤胃球菌、副拟杆菌丰度有关。     

加味葛根芩连汤对2型糖尿病db/db小鼠胰腺组织TGR5/cAMP/GLP-1信号通路的影响

目的 探讨加味葛根芩连汤对肥胖型2型糖尿病（T2DM）模型小鼠血糖血脂及胰腺组织中G蛋白偶联胆汁酸受体5（TGR5）相关途径的影响。方法 将10只7周龄无特定病原体（SPF）级雄性m/m小鼠及50只7周龄SPF级雄性db/db小鼠在SPF级实验室适应性喂养1周。m/m小鼠作为空白组。成模后随机分为5组,每组10只,分别作为模型组、二甲双胍组（0.2 g·kg^-1）、加味葛根芩连汤高、中、低剂量组（31.9、19.1、6.4 g·kg^-1）,灌胃体积均为10 mL·kg^-1,模型组和空白组灌服等体积蒸馏水,1次/d,连续12周。定期检测小鼠空腹血糖（FBG）。药物干预12周后,检测血清中糖化血清蛋白（GSP）、血清葡萄糖（GLU）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平;采用苏木素-伊红（HE）染色观察各组小鼠胰腺组织病理改变,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胰腺组织TGR5、蛋白激酶A（PKA）、磷酸化（p）-PKA、环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）、p-CREB、前蛋白转化酶1/3（PC1/3）、胰高糖素样肽-1（GLP-1）蛋白的表达水平,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测胰腺组织环磷腺苷（cAMP）的含量。结果 与空白组比较,模型组小鼠胰腺组织出现病理学改变;小鼠FBG、GSP、GLU、TC、TG、LDL-C水平显著增高（P<0.01）,HDL-C水平明显降低（P<0.05）;胰腺组织中TGR5、p-PKA（Thr197）/PKA、p-CREB（Ser133）/CREB、PC1/3、GLP-1蛋白表达水平显著降低（P<0.01）;胰腺组织中cAMP的含量显著降低（P<0.01）。与模型组比较,治疗组胰腺组织病变程度减轻;加味葛根芩连汤高剂量组及二甲双胍组均能够明显降低db/db小鼠FBG、GSP、GLU、TC、TG、LDL-C水平（P<0.05,P<0.01）,显著增高db/db小鼠HDL-C水平（P<0.01）;除加味葛根芩连汤中剂量组GLP-1蛋白外,加味葛根芩连汤高、中剂量组及二甲双胍组TGR5、p-PKA（Thr197）/PKA、p-CREB（Ser133）/CREB、PC1/3、GLP-1蛋白表达水平均有不同程度的增加（P<0.05,P<0.01）;加味葛根芩连汤高、中剂量组及二甲双胍组胰腺组织中cAMP的含量明显增高（P<0.05,P<0.01）。结论 加味葛根芩连汤能够改善T2DM模型db/db小鼠的葡萄糖稳态,其机制可能与调控TGR5/cAMP/GLP-1信号通路相关蛋白表达有关。     

从氧化应激角度探讨补阳还五汤对糖尿病周围神经病变大鼠的治疗作用

目的 基于氧化应激探讨补阳还五汤对糖尿病周围神经病变（DPN）大鼠的神经保护作用机制和方中黄芪用量。方法 90只SD大鼠随机分为正常组、模型组、α-硫辛酸干预组、补阳还五汤高黄芪剂量组（中药高剂量组）、补阳还五汤中黄芪剂量组（中药中剂量组）、补阳还五汤低黄芪剂量组（中药低剂量组）。除正常组外，其余各组大鼠均用高糖高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病。各药物干预组分别持续给药12周。含量依次为α-硫辛酸60 mg·kg^-1·d^-1、中药高剂量组15 g·kg^-1·d^-1、中药中剂量组8.75 g·kg^-1·d^-1、中药低剂量组5.625 g·kg^-1·d^-1。给药结束后检测机械性痛阈（PWT）和神经传导速度（SNCV）；检测谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）。取L4-5背根神经节（DRG），电镜观察各组神经元线粒体形态结构；检测呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性，和线粒体膜电位，免疫组化和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/核因子E₂相关因子2（Nrf2）通路中主要蛋白：磷酸化单磷酸腺苷活化蛋白激酶（p-AMPK）、磷酸化核因子E₂相关因子2（p-Nrf2）、血红素氧合酶-1（HO-1）、醌NADH脱氢酶1（NQO1）的表达。结果 与正常组比较，模型组空腹血糖升高（P<0.01），SNCV、PWT、GSH含量均降低（P<0.01），MDA含量升高（P<0.01）；线粒体损伤明显，多数呈空泡样改变；呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性和线粒体膜电位均显著降低（P<0.01）；p-AMPK、p-Nrf2、HO-1、NQO1降低（P<0.01）。与模型组比较，α-硫辛酸组及中药高剂量组SNCV、PWT、GSH上升，MDA降低（P<0.05，P<0.01），线粒体结构损伤减轻；呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性和线粒体膜电位均显著升高（P<0.01），p-AMPK、p-Nrf2、HO-1、NQO1明显升高（P<0.05，P<0.01）。结论 补阳还五汤通过AMPK/Nrf2通路调节氧化应激，治疗DPN。其治疗作用与黄芪的用量有一定联系，其中补阳还五汤高黄芪剂量组抑制氧化应激的作用较补阳还五汤中黄芪剂量组和补阳还五汤低黄芪剂量组更明显。     

基于“以方测证”理论从AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF通路探讨雷公藤多苷诱导卵泡发育不良大鼠模型的中医证候属性

目的 采用雷公藤多苷诱导卵泡发育不良大鼠模型,基于“以方测证”理论从腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/缺氧诱导因子-1/血管内皮生长因子（AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF）信号通路探索该模型的证候属性。方法 将48只具有规律动情周期大鼠随机分为正常组（n=8）和造模组（n=40）,造模组大鼠连续灌胃雷公藤多苷混悬液（75 mL·kg^-1）30 d,造模后将其分为模型组、四物汤组（3.69 g·kg^-1）、右归饮组（3.11 g·kg^-1）、左归饮组（7.29 g·kg^-1）和归肾丸组（10.35 g·kg^-1）,每组8只。相应药物干预14 d。巴氏染色检测各组大鼠动情周期变化;体视镜观察卵巢组织形态;苏木素-伊红（HE）染色观察卵巢组织病理学及卵泡计数;酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定血清促卵泡激素（FSH）、黄体生成素（LH）及雌二醇（E₂）含量;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测卵巢组织AMPK、mTOR、HIF-1、VEGF mRNA及蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠动情周期紊乱,次级、成熟卵泡减少,闭锁卵泡增多,FSH、LH、AMPK mRNA及蛋白表达显著升高（P<0.01）,E₂含量,mTOR、HIF-1、VEGF mRNA及蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,归肾丸组次级、成熟卵泡增多,闭锁卵泡减少,FSH、LH含量、AMPK mRNA表达及蛋白表达显著降低（P<0.01）,E₂含量、mTOR、HIF-1、VEGF mRNA表达及蛋白表达显著升高（P<0.01）。与归肾丸组比较,四物汤组、右归饮组、左归饮组成熟卵泡数量显著减少,闭锁卵泡数量显著增多（P<0.01）;四物汤组、右归饮组、左归饮组LH显著升高（P<0.01）,FSH明显升高（P<0.05）,E₂明显降低（P<0.05）;右归饮组AMPK蛋白表达明显升高（P<0.05）,mTOR和HIF-1 mRNA表达显著降低（P<0.01）,VEGF蛋白及mRNA表达显著降低（P<0.01）;四物汤组mTOR和HIF-1 mRNA,VEGF蛋白及mRNA表达明显降低（P<0.05）;左归饮组mTOR mRNA和VEGF蛋白及mRNA表达明显降低（P<0.05）。结论 归肾丸可以抑制AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF通路来改善卵泡发育不良大鼠模型的卵巢功能、促进卵泡成熟,且总体疗效优于左归饮、右归饮和四物汤,表明该模型的证候更符合肾精亏虚证。     

柴胡加龙骨牡蛎汤对帕金森病伴发抑郁模型大鼠的神经保护作用及对AMPK/mTOR信号通路的影响

目的 观察柴胡加龙骨牡蛎汤（CLMT）对帕金森病伴发抑郁（PDD）模型大鼠多巴胺能神经元的保护作用，并基于腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（AMPK/mTOR）信号通路探讨其作用机制。方法 80只雄性SD大鼠，随机选取10只作为正常组，其余采用长期低剂量颈背部皮下注射鱼藤酮联合慢性不可预见性温和应激（CUM）建立PDD大鼠模型，将造模成功的PDD大鼠随机分为模型组、西药组（多巴丝肼0.032 g·kg^-1+盐酸氟西汀0.002 g·kg^-1）、CLMT低、中、高剂量组（5、10、20 g·kg^-1），每组10只，正常组和模型组予以等体积生理盐水灌胃，连续4周。旷场实验、爬杆实验评估各组大鼠行为学变化；高效液相色谱法（HPCL）测定脑脊液中多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）含量；苏木素-伊红（HE）染色法观察各组大鼠黑质DA能神经元病理改变；免疫组化法（IHC）检测黑质酪氨酸羟化酶（TH）阳性表达；免疫荧光法（IF）检测黑质α-突触核蛋白（α-synuclein）表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测纹状体微管相关蛋白1轻链3（LC3）、AMPK、磷酸化AMPK（p-AMPK）、mTOR、磷酸化mTOR（p-mTOR）蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组大鼠旷场实验水平运动总距离及中央区域活动时间均明显减少（P<0.05，P<0.01），爬杆时间明显缩短（P<0.01），评分升高（P<0.01），脑脊液中DA、5-HT含量减少（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，CLMT高剂量组和西药组水平运动总距离明显增加及中央区域活动时间均增加（P<0.05，P<0.01），爬杆时间延长（P<0.05），评分下降（P<0.05，P<0.01），DA及5-HT含量增加（P<0.05，P<0.01）。与正常组比较，模型组大鼠黑质DA能神经元数量明显减少，胞体缩小且排列疏松，α-synuclein荧光表达显著增强（P<0.01），TH阳性表达显著降低（P<0.01）；与模型组比较，CLMT高剂量组和西药组黑质DA能神经元数量增加，胞体增大，α-synuclein荧光表达明显减弱（P<0.05，P<0.01），TH表达显著增加（P<0.01）。与正常组比较，模型组纹状体LC3Ⅱ/Ⅰ、p-AMPK/AMPK表达明显降低（P<0.05，P<0.01）、p-mTOR/mTOR表达显著增加（P<0.01）；与模型组比较，CLMT高剂量组和西药组LC3Ⅱ/Ⅰ、p-AMPK/AMPK表达均明显增加（P<0.05，P<0.01）、p-mTOR/mTOR表达显著降低（P<0.01）。结论 CLMT可抑制鱼藤酮神经毒性，发挥神经保护作用，提高DA水平，从而改善帕金森病大鼠抑郁状态，其机制可能与调控AMPK/mTOR信号通路，激活自噬，促进异常聚集的α-synuclein降解有关。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨红芪多糖对糖尿病肾病db/db小鼠作用机制

目的 观察红芪多糖（HPS）对糖尿病肾病db/db小鼠Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的影响。方法 将50只db/db小鼠按体质量随机分为模型组、厄贝沙坦组、HPS高、中、低剂量组,每组10只;另取10只C57BL/6小鼠作为正常组。正常组和模型组给予5 mL·kg^-1·d^-1蒸馏水,厄贝沙坦组给予22.75 mg·kg^-1·d^-1厄贝沙坦溶液,HPS高、中、低剂量组分别给予200、100、50 mg·kg^-1·d^-1 HPS溶液。6组小鼠每日灌胃1次,连续给药12周。检测各组小鼠一般状态、血糖（GLU）、24 h尿蛋白（UTP）、血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）,苏木素-伊红（HE）染色观察肾脏组织病理变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）、实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肾脏中Wnt1、β-catenin、糖原合成激酶-3β（GSK-3β）及磷酸化糖原合成激酶-3β（p-GSK-3β）的蛋白及mRNA的表达水平。结果 治疗12周后,与正常组比较,模型组小鼠一般状态较差且肾脏组织病理超微结构病变显著,其GLU、24 h UTP、SCr、BUN水平均升高（P<0.01）;与模型组比较,HPS高、中剂量组小鼠一般状态及肾脏组织病理超微结构均得到一定程度改善,其GLU、24 h UTP、SCr、BUN水平均降低（P<0.05,P<0.01）;与正常组比较,模型组Wnt1、β-catenin、GSK-3β及p-GSK-3β mRNA及蛋白表达水平均升高（P<0.01）;与模型组比较,HPS高、中剂量组Wnt1、β-catenin、GSK-3β及p-GSK-3β mRNA及蛋白表达水平均明显降低（P<0.05,P<0.01）。结论 HPS可在一定程度上减轻糖尿病肾病的肾损伤,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路激活有关。     

黄芪囊泡样纳米颗粒通过调节肠道菌群降低db/db糖尿病小鼠血糖的作用机制分析

目的 研究黄芪水煎液中囊泡样纳米颗粒（VLNs）的提取方法及特性,探讨黄芪VLNs通过调节db/db小鼠肠道菌群来降低血糖的作用机制。方法 采用超速离心法和尺寸排阻色谱法分别富集黄芪水煎液中的VLNs,通过透射电子显微镜、纳米颗粒跟踪分析仪分析黄芪水煎液中VLNs的形态、粒径、浓度。选用db/db糖尿病小鼠,按血糖值随机分为模型组,黄芪VLNs高、中、低剂量（21.1,10.6,5.3 g·kg^-1）组和二甲双胍组（0.25 g·kg^-1）,每组7只,另设7只C57BL/6小鼠作为正常组,灌胃给药3周（每日1次）,每周观察小鼠空腹血糖变化;苏木素-伊红（HE）染色观察糖尿病小鼠肝脏和胰腺病理形态情况;采集小鼠粪便进行肠道微生物16S rRNA多样性检测。结果 2种方法所得纳米颗粒粒径均在200 nm左右,超速离心法提取的黄芪VLNs具有典型的茶托状,其浓度为3.0×10¹¹个/mL;尺寸排阻色谱法所得黄芪VLNs形态相对较差,其浓度为2.2×10¹¹个/mL。给药3周后,与模型组比较,黄芪VLNs高、中、低剂量组均能显著降低糖尿病小鼠的空腹血糖（P<0.05,P<0.01）;可改善肠道菌群失调,显著降低厚壁菌门/拟杆菌门比例,提高有益菌相对丰度,降低有害菌相对丰度。结论 黄芪VLNs可能通过调节肠道菌群中厚壁菌门/拟杆菌门的比例来降低db/db糖尿病小鼠的血糖。     

补中益气汤通过Adipor1/AMPK/PGC-1α调节脂代谢治疗运动性疲劳

目的 探讨补中益气汤通过脂联素受体1（Adipor1）/磷酸腺苷活化蛋白激酶（AMPK）/过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子-1α（PGC-1α）对运动性疲劳（EIF）小鼠骨骼肌中脂代谢的影响。方法 将C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、补中益气汤低、中、高剂量组、维生素C组。空白组不施加任何干预,其余组通过力竭游泳建立EIF模型。力竭游泳前1 h,空白组、模型组灌服0.2 mL蒸馏水,补中益气汤低、中、高剂量组分别灌胃4.1、8.2、16.4 g·kg^-1的补中益气汤,维生素C组灌胃0.04 g·kg^-1剂量维生素C,持续6周。实验6周后,计算小鼠体质量增长率、脏器指数、力竭游泳时间;酶比色法检测小鼠血清中尿素氮（BUN）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、乳酸（LD）的水平;苏木素-伊红（HE）染色观察骨骼肌组织病理变化;透射电镜（TEM）观察骨骼肌组织超微结构;微板法检测血清中游离脂肪酸（NEFA）、甘油三酯（TG）的含量;蛋白免疫印迹法（Western blot）测定骨骼肌中Adipor1、磷酸化（p）-AMPK/AMPK、PGC-1α和己糖激酶2（HK2）蛋白的表达。结果 与空白组比较,模型组小鼠的体质量增长率、胸腺指数降低,血清中BUN、CK、LD、LDH水平升高（P<0.01）,NEFA、TG含量下降（P<0.01）,骨骼肌组织Adipor1、p-AMPK/AMPK、PGC-1α、HK2蛋白表达下降（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,补中益气汤高剂量组体质量增长率、胸腺指数、力竭游泳时间显著升高（P<0.01）,BUN、CK、LD、LDH显著下降（P<0.01）,NEFA、TG显著升高（P<0.01）,骨骼肌组织Adipor1、p-AMPK/AMPK、PGC-1α、HK2蛋白表达明显升高（P<0.05,P<0.01）;维生素C组胸腺指数、力竭游泳时间明显提高,BUN、CK、LD明显下降（P<0.05,P<0.01）,NEFA、TG显著升高（P<0.01）,骨骼肌组织Adipor1蛋白表达显著升高（P<0.01）。结论 补中益气汤能够延缓EIF的发生,其机制可能与调节Adipor1/AMPK/PGC-1α信号通路,提高骨骼肌对脂肪的利用率有关。     

基于AMPK/ULK1自噬通路探讨人参败毒散对溃疡性结肠炎黏膜屏障的干预机制

目的 研究人参败毒散调控腺苷酸活化蛋白激酶/Unc-51样激酶1（AMPK/ULK1）自噬通路抑制溃疡性结肠炎小鼠黏膜屏障损伤的作用机制。方法 将60只SD大鼠随机分为6组,分为正常组,模型组,柳氮磺胺吡啶肠溶片组（西药组）,人参败毒散高、中、低剂量组。通过2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）/50%乙醇诱导UC模型,西药组（0.3125 g·kg^-1）、人参败毒散高、中、低剂量组（31.2、15.6、7.8 g·kg^-1）灌胃2周后,检测结肠组织病理学改变;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测腺苷酸活化蛋白（AMPKα）mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测紧密连接蛋白中闭合蛋白（Occludin）、紧密连接蛋白蛋白-2（Claudin-2）、自噬标志蛋白p62、微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）及AMPK/ULK1通路磷酸化蛋白p-AMPK、p-ULK1的表达水平。结果 与正常组比较,模型组结肠损伤评分明显上调（P<0.05）,AMPKα mRNA表达明显下调（P<0.05）,p-AMPK、p-ULK1、Occludin蛋白水平及LC3Ⅱ/Ⅰ明显下调（P<0.05）,而p62、Claudin-2蛋白水平明显上调（P<0.05）;与模型组比较,人参败毒散高、中、低剂量组的结肠损伤评分下降,AMPKα mRNA明显上调,p-AMPK、p-ULK1、Occludin蛋白水平及LC3Ⅱ/Ⅰ上升,而p62、Claudin-2蛋白表达下降,以人参败毒散中剂量组干预效应最明显（P<0.05）。结论 人参败毒散可抗肠道黏膜屏障损伤,以人参败毒散中剂量组疗效最佳,其机制可能与激活AMPK/ULK1自噬通路有关,通过加速LC3Ⅰ向LC3Ⅱ转化,促进p62降解,从而改善紧密连接蛋白Occludin、Claudin-2功能,修复肠道机械屏障损伤。     

水蛭、三七及其配伍对慢性肾衰竭大鼠肾纤维化作用机制比较

目的 观察水蛭-三七单味药与药对改善慢性肾衰竭（CRF）大鼠肾脏病理形态及对蛋白磷酸酶2A（PP2A）/腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路的影响。方法 将55只雄性SD大鼠随机分为正常组11只、造模组44只。正常组常规饲养，造模组进行0.25 g·kg^-1·d^-1腺嘌呤连续灌胃28 d复制CRF模型。将造模成功后的大鼠随机分为模型组、水蛭组（3 g·kg^-1·d^-1）、三七组（3 g·kg^-1·d^-1）与水蛭-三七组（3 g·kg^-1·d^-1），每组9只，正常组和模型组以等体积生理盐水灌胃，连续30 d。实验结束后，测定各组大鼠血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）含量；苏木素-伊红（HE）染色、马松（Masson）染色和电镜观察肾脏病理形态学改变；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肾组织PP2A、AMPK、mTOR mRNA的表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肾组织PP2A、AMPK、磷酸化（p）-AMPK、mTOR、p-mTOR蛋白的表达。结果 与正常组比较，模型组大鼠肾脏病理结构变化明显，血清SCr、BUN含量明显升高，肾组织PP2A mRNA表达增加，PP2A蛋白表达和p-mTOR/mTOR均明显升高，p-AMPK/AMPK明显降低（P<0.05）；与模型组比较，药物干预治疗后各组大鼠肾脏病理形态学明显改善，血清中SCr、BUN含量均明显降低，肾组织PP2A mRNA表达下降，PP2A蛋白表达和p-mTOR/mTOR均明显降低，p-AMPK/AMPK明显升高（P<0.05），水蛭-三七组效果更为明显。正常组、模型组及治疗各组肾组织AMPK、mTOR mRNA表达差异未见统计学意义。结论 水蛭-三七对改善CRF大鼠肾纤维化的疗效明显优于单味药，其对CRF大鼠肾纤维化的改善可能与调节PP2A/AMPK/mTOR信号通路有关。     

基于TRPV1对动脉血管平滑肌的自噬作用探讨人参汤治疗AS的作用机制

目的 基于香草酸受体亚型1（TRPV1）对动脉血管平滑肌的自噬作用探讨《金匮要略》人参汤治疗动脉粥样硬化（AS）的作用机制。方法 SPF级8周龄雄性C57BL/6J小鼠14只作为正常组,8周龄载脂蛋白E基因敲除（ApoE^-/-）小鼠70只作为模型组。模型组采用高脂饲料喂食8周制备AS小鼠模型,随后随机分为模型组、人参汤低、中、高剂量（2.715、5.43、10.68 g·kg^-1·d^-1）组和辛伐他汀（0.02 g·kg^-1·d^-1）组,连续给药8周。8周后,取血清,采用检测试剂盒测定血清总胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平,观察小鼠血脂水平的变化;取主动脉,采用苏木素-伊红（HE）染色观察主动脉根部整体的病理情况,采用油红O染色检测主动脉斑块内脂质沉积情况,并计算主动脉根部面积占管腔面积百分比;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠主动脉组织中TRPV1、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）及自噬效应蛋白-1（Beclin-1）、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）、微管相关蛋白1轻链Ⅰ（LC3Ⅰ）的表达情况。结果 与正常组比较,模型组小鼠血清中CHO、TG、LDL-C水平显著升高,HDL-C水平显著降低,主动脉根部斑块面积显著增多（P<0.01）;与模型组比较,人参汤各剂量组可明显降低AS模型小鼠血清中CHO、TG、LDL-C水平（P<0.05,P<0.01）,人参汤低、中剂量组最为显著（P<0.01）。与正常组比较,辛伐他汀组、人参汤低、中、高剂量组均能明显减少主动脉根部斑块面积（P<0.05,P<0.01）,其中人参汤高剂量组效果减轻斑块效果最为显著（P<0.01）。与正常组比较,模型组小鼠的TRPV1、p-AMPK/AMPK、Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的相对表达量明显降低（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,人参汤中、高剂量组TRPV1、p-AMPK/AMPK、Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的相对表达量均明显升高（P<0.05,P<0.01）。结论 《金匮要略》人参汤具有抗AS作用,其作用机制可能是通过调节TRPV1的表达上升,进而恢复了由AMPK介导的自噬水平实现的。     

青钱柳对糖尿病小鼠肝脏糖脂代谢影响及机制研究＊

目的 观察青钱柳水提物（Cyclocarya paliurus aqueous extract， CPAE）对自发性2型糖尿病小鼠（db/db小鼠）肝脏糖脂代谢影响，并探讨其作用机制。方法 取4周龄雄性C57BL/6J小鼠为正常对照组，将同周龄成模雄性db/db小鼠根据血糖、体质量随机分为模型组、盐酸二甲双胍组（0.13 g·kg^-1·d^-1）及青钱柳水提物组（2 g·kg^-1·d^-1），每组10只。干预6周，每2周检测小鼠体质量、空腹血糖（FBG），6周后检测空腹血糖（Fasting blood glucose， FBG）、甘油三脂（Triglyceride， TG）、总胆固醇（Total cholesterol， TC）、游离脂肪酸（Free fatty acid， FFA）、空腹血清胰岛素（Fasting serum insulin， FINS），同时计算胰岛素抵抗指数（Homeostasis model assessment insulin resistance， HOMA-IR）；苏木精-伊红染色（Hematoxylin-eosin stain， HE stain）观察肝脏脂质蓄积情况；过碘酸-Schiff染色法（Periodic Acid-Schiff stain， PAS stain）观察肝组织肝糖原含量；采用Western Blot法检测肝脏P-AMPK、PGC-1α蛋白表达水平。结果 与模型组相比，CPAE可降低db/db小鼠FBG、TC、FFA、FINS及胰岛素抵抗指数（P < 0.01），抑制脂质在肝脏沉积，增加肝糖原含量（P < 0.05），提高肝脏P-AMPK蛋白表达水平（P < 0.01），抑制PGC-1α蛋白表达水平（P < 0.01）。结论 CPAE可降低db/db小鼠FBG、TC、FFA、FINS及胰岛素抵抗指数，改善胰岛素抵抗，增加肝糖原含量，抑制糖异生，其作用机制可能与调节肝脏AMPK/PGC-1α信号通路相关。     

益肾通络方对膜性肾病大鼠的肾保护作用及对AMPK/mTOR/ULK1信号通路的影响

目的 通过观察益肾通络方对膜性肾病大鼠自噬相关蛋白的影响,探讨其对膜性肾病大鼠肾脏保护作用的可能分子机制。方法 80只SD大鼠随机抽取20只设为正常组,其余大鼠均采用预免疫和尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA）的方法制作膜性肾病大鼠模型。将模型复制成功的SD大鼠随机分为模型组,盐酸贝那普利组（10 mg·kg^-1）及益肾通络方低、中、高剂量组（6.61,13.22,26.44 g·kg^-1）,给予相应剂量的药物灌胃,每天1次,连续灌胃4周。灌胃结束后,检测大鼠血浆白蛋白（ALB）,甘油三酯（TG）,胆固醇（TC）,血肌酐（SCr）,尿素氮（BUN）,24 h尿蛋白（UTP）定量指标的变化;苏木素-伊红（HE）染色、马松（Masson）染色、碘酸六胺银（PASM）染色及透射电镜下观测肾脏病理形态改变;免疫荧光法检测肾小球中免疫球蛋白（Ig）G和补体C3的沉积;免疫组化（IHC）法观察自噬标志蛋白Beclin-1,微管相关蛋白轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）,p62蛋白的表达情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测腺苷酸活化蛋白激酶/雷帕霉素靶蛋白/Unc-51样激酶1（AMPK/mTOR/ULK1）信号通路相关蛋白的表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠UTP水平显著升高（P<0.01）,血清中TG,TC水平显著升高（P<0.01）,ALB水平显著下降（P<0.01）;肾小球结构紊乱,体积增大,基底膜可见不同程度增厚和部分肾小管空泡样变性,大量胶原纤维和嗜复红蛋白沉积,足细胞足突广泛融合,肾小球毛细血管襻IgG和补体C3弥漫性沉积;自噬标志蛋白Beclin-1,LC3Ⅱ表达显著降低（P<0.01）,p62蛋白表达显著升高（P<0.01）;磷酸化-腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）蛋白表达显著降低（P<0.01）,磷酸化-雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）,磷酸化-Unc-51样激酶1（p-ULK1）蛋白表达显著升高（P<0.01）;与模型组比较,益肾通络方各剂量组、盐酸贝那普利组大鼠TG,TC,UTP水平均有不同程度降低（P<0.05,P<0.01）,ALB水平显著升高（P<0.01）,血清SCr,BUN水平均差异无统计学意义;肾脏病理损害不同程度减轻;自噬标志蛋白Beclin-1,LC3Ⅱ表达水平不同程度升高（P<0.05,P<0.01）,p62蛋白表达不同程度降低（P<0.05,P<0.01）;p-AMPK蛋白表达水平不同程度升高（P<0.05,P<0.01）,p-mTOR,p-ULK1蛋白表达水平不同程度降低（P<0.05,P<0.01）。结论 益肾通络方对膜性肾病大鼠具有肾脏保护作用,其机制可能与调控AMPK/mTOR/ULK1信号通路相关蛋白的表达,激活自噬有关。     

基于AMPK/Sirt1信号通路探讨身痛逐瘀汤含药血清对膝骨性关节炎大鼠软骨细胞的保护作用

目的 研究身痛逐瘀汤含药血清对膝骨关节炎（KOA）大鼠软骨细胞氧化应激及凋亡的保护作用。方法 50只雄性大鼠分别灌胃给予生理盐水、身痛逐瘀汤低、中、高剂量（1.73、3.46、6.92 g·kg^-1）和硫酸氨基葡萄糖（0.3 g·kg^-1）,连续给药2周后收集血清。构建KOA模型,分离软骨细胞,随机分为正常组、模型组、身痛逐瘀汤含药血清低、中、高剂量组及硫酸氨基葡萄糖组。软骨细胞培养过程中添加磷酸腺苷（AMP）依赖的蛋白激酶（AMPK）抑制剂Compound C（10 μmol·L^-1）,分为正常组、模型组、身痛逐瘀汤含药血清组、Compound C+身痛逐瘀汤含药血清组。5-乙炔基-2''-脱氧尿苷（EdU）染色检测细胞增殖;原位末端标记法（TUNEL）测定凋亡;DCFH-DA探针检测活性氧（ROS）水平;比色法测定谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）含量;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测基质金属蛋白酶-3（MMP-3）、MMP-13、胶原酶Ⅱ型（Col Ⅱ）和聚集蛋白聚糖（Aggrecan）mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法（Weatern blot）检测磷酸化（p）-AMPK及沉默信息调节因子1（Sirt1）蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组软骨细胞增殖率、GSH活性、Col Ⅱ与Aggrecan mRNA表达、p-AMPK和Sirt1蛋白水平显著降低（P<0.01）,而ROS水平、MDA含量、TUNEL阳性细胞率、MMP-3与MMP-13 mRNA表达显著升高（P<0.01）。与模型组比较,身痛逐瘀汤含药血清能提高KOA大鼠软骨细胞中EdU阳性细胞数、GSH活性、Col Ⅱ和Aggrecan mRNA表达水平、p-AMPK和Sirt1蛋白水平（P<0.05,P<0.01）,而TUNEL阳性细胞率、ROS水平、MDA含量、MMP-3和MMP-13 mRNA表达水平则明显降低（P<0.05,P<0.01）。与身痛逐瘀汤含药血清组比较,Compound C+身痛逐瘀汤含药血清组细胞p-AMPK和Sirt1蛋白表达、GSH活性、Col Ⅱ和Aggrecan mRNA水平明显降低（P<0.01）,TUNEL阳性细胞率、ROS水平、MDA含量、MMP-3和MMP-13 mRNA水平显著升高（P<0.01）。结论 身痛逐瘀汤含药血清能减弱KOA大鼠软骨细胞氧化损伤,降低细胞凋亡,其保护作用可能与激活AMPK/Sirt1信号通路有关。     

糖痹康颗粒调控AMPK/NF-κB通路改善糖尿病大鼠坐骨神经炎症反应

目的 探讨糖痹康颗粒通过调控腺苷活化蛋白激酶/核转录因子-κB（AMPK/NF-κB）通路对糖尿病大鼠坐骨神经炎症的影响。方法 SD大鼠高脂高糖饲料诱导连续8周后按单次35 mg·kg^-1链脲佐菌素（STZ）腹腔注射造模。成模后按体质量、血糖随机将大鼠分为模型组和各给药组、糖痹康颗粒低、中、高剂量组（0.625、1.25、2.5 g·kg^-1）及硫辛酸组（0.026 8 g·kg^-1）,并设正常组。成模后持续给药干预12周。期间分别检测治疗前及治疗第4、8、12周大鼠的体质量、血糖水平及热痛阈;于给药第12周时取材坐骨神经进行苏木素-伊红（HE）、劳克坚牢蓝（LFB）染色,扫描电镜观察坐骨神经超微结构变化;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测坐骨神经中白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠坐骨神经组织中AMPK、磷酸化（p）-AMPK、NF-κB的蛋白表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠造模后各时间点血糖浓度、热痛阈均显著升高（P<0.01）;坐骨神经IL-1β、TNF-α水平及NF-κB蛋白表达显著升高（P<0.01）,p-AMPK/AMPK蛋白表达显著降低（P<0.01）。经糖痹康颗粒治疗后,与模型组比较,糖痹康颗粒各组热痛阈明显降低（P<0.05,P<0.01）,坐骨神经IL-1β、TNF-α水平及NF-κB蛋白表达明显降低（P<0.05,P<0.01）;糖痹康颗粒高、中剂量组p-AMPK/AMPK蛋白表达明显升高（P<0.05,P<0.01）。坐骨神经形态学观察显示,糖痹康颗粒治疗后大鼠坐骨神经排列整齐度、致密程度、脱髓鞘变化均优于模型组。结论 糖痹康颗粒可以改善糖尿病大鼠坐骨神经功能、减轻神经炎症损伤,其作用机制可能与上调AMPK/NF-κB通路中AMPK的表达,抑制下游NF-κB表达,从而减轻因NF-κB激活引起IL-1β、TNF-α等炎症因子升高造成的神经炎症反应相关。     

连翘酯苷A对化疗模型小鼠胃肠动力障碍的改善作用

目的 观察连翘酯苷A对化疗小鼠胃肠动力障碍的影响，并探讨其调节胃肠动力的作用机制。方法 将60只KM小鼠随机分为正常组、模型组、甲氧氯普胺组（5 mg·kg^-1）及连翘酯苷A低、中、高剂量组（30，60，120 mg·kg^-1），每组10只，雌雄各半。各组分别灌胃给药，灌胃容积均为10 mL·kg^-1，每日1次，连续4 d。灌胃第1天1 h后，除正常组腹腔注射等量生理盐水外，其余各组均腹腔注射顺铂2 mg·kg^-1，连续4 d。观察连翘酯苷A对模型小鼠胃排空和小肠推进的影响；采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测血清中胃泌素（GAS），生长抑素（SS），胃动素（MTL），血管活性肠肽（VIP）水平，检测胃窦和回肠组织中乙酰胆碱酯酶（AChE）和总一氧化氮合酶（tNOS）的活性；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胃窦和回肠组织AChE和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的蛋白表达水平。结果 与正常组比较，模型组小鼠胃残留率和小肠推进率均显著升高（P<0.01），血清MTL，GAS，SS，VIP含量均明显降低（P<0.05，P<0.01），回肠组织匀浆中AChE活性显著降低（P<0.01），胃窦和回肠组织中tNOS活性均明显升高（P<0.05，P<0.01），胃窦和回肠组织中AChE蛋白表达水平均明显降低（P<0.05），iNOS蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）；与模型组比较，不同剂量连翘酯苷A可以不同程度地降低小鼠胃残留率和小肠推进率，升高血清MTL，GAS，SS，VIP含量，升高胃窦和回肠组织中AChE活性及蛋白表达水平，降低胃窦和回肠组织中tNOS活性和iNOS蛋白表达水平（P<0.05，P<0.01）。结论 连翘酯苷A对顺铂所致的小鼠胃排空延缓和小肠推进亢进具有显著改善作用，其改善化疗所致胃肠功能障碍的机制与调节胃肠道AChE与NOS活性以及调节胃肠激素水平有关。