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1.
《中华中医药学刊》2019,(1)
目的:基于microRNA-155(miR-155)调控Th17细胞探讨补中益气汤改善自身免疫甲状腺炎(AIT)小鼠免疫失常机制。方法:将雌性8周龄NOD.H-2~(h4)小鼠90只,随机分为正常组(NG)、模型组(MG)、西药组(硒酵母片,SeG)、补中益气汤高剂量组(BG-1,19.00 g·kg~(-1)·d~(-1))、补中益气汤中剂量组(BG-2,9.56 g·kg~(-1)·d~(-1))、补中益气汤低剂量组(BG-3,4.78 g·kg~(-1)·d~(-1))共6组。正常组饲以蒸馏水,其余各组饲以含0.05%碘化钠水,8周后自发形成AIT动物模型,再给实验药物8周后麻醉处死小鼠。光镜下观察甲状腺细胞形态; RT-PCR法检测小鼠甲状腺miR-155、白细胞介素-17(IL-17)mRNA表达; Western Blot法测定小鼠甲状腺细胞因子信号抑制因子(SOCS1)、p-JAK2及p-STAT3蛋白表达;流式细胞仪分析小鼠甲状腺Th17细胞比例。结果:与NG组比较,MG组甲状腺淋巴细胞浸润明显,Th17细胞比例升高(P0.01),甲状腺miR-155、IL-17mRNA表达显著上调(P0.01),甲状腺p-STAT3、p-JAK蛋白升高(P0.01), SOCS1蛋白下降(P0.01);与MG组比较,各给药组甲状腺炎均有不同程度改善;同时Th17细胞比例下降(P0.01)、miR-155及IL-17mRNA表达均显著下调(P0.01)、p-STAT3及p-JAK2蛋白水平降低(P0.01)、SOCS1蛋白水平升高(P0.01),其中SeG组与BG-2组无统计学差异。结论:补中益气汤有效改善AIT免疫失常状态,其机制之一可能与抑制miR-155/SOCS1/STAT3信号通路减少炎症因子释放有关。 相似文献
2.
目的:探讨抗纤益心方干预自身免疫损伤小鼠免疫调节的作用机制,及其与辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞平衡的关系。方法:将60只SPF级BALB/c健康8周龄雄性小鼠按1∶5的比例随机分为正常组和造模组,在第0,7,28天于造模组小鼠腹股沟、腋下、背部多处皮下注射猪心肌肌球蛋白乳化液0.2 m L(含猪心肌肌球蛋白0.1 mg)以制备心肌免疫损伤小鼠模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组,抗纤益心方组(KYP),缬沙坦组(Valsartan),抗纤益心方组给予抗纤益心方20.4 g·kg-1·d-1灌胃,缬沙坦组给予缬沙坦12 mg·kg-1·d-1灌胃,正常组和模型组给予同计算量的生理盐水灌胃,连续灌胃4周后取材,苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色检测心肌组织中病理损伤情况,酶联免疫吸附法检测小鼠血清中B型钠尿肽(BNP),抗心肌抗体,白细胞介素-17(IL-17)和白细胞介素-10(IL-10)的表达,流式细胞术检测脾脏Th17,Treg细胞的表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠心肌组织B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠脾脏转录因子维A酸相关孤独受体γt(RORγt),叉头框蛋白P3(Fox P3)m RNA表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠心肌病理损伤增加,血清BNP,抗心肌抗体,IL-17升高,IL-10降低(P<0.05),脾脏Th17细胞表达水平升高,Treg细胞的表达水平降低(P<0.05),心肌组织Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),Bax/Bcl-2值升高,脾脏RORγt m RNA表达升高,Fox P3 m RNA表达降低,RORγt/Fox P3升高(P<0.05);与模型组比较,抗纤益心方组及缬沙坦组心肌病理损伤减轻,血清BNP,抗心肌抗体,IL-17降低,IL-10升高(P<0.05),脾脏Th17细胞表达水平降低,Treg细胞的表达水平升高(P<0.05),心肌组织Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),Bax/Bcl-2降低,脾脏RORγt m RNA表达降低,Fox P3 m RNA表达升高,RORγt/Fox P3值降低(P<0.05)。结论:抗纤益心方可能通过调节Th17/Treg细胞平衡改善心肌免疫损伤。 相似文献
3.
目的 研究补中益气汤(Buzhong Yiqi Decoction, BZYQD)对实验性自身免疫性甲状腺炎(Experimental autoimmune thyroiditis, EAT)模型小鼠海马微血管超微结构及Th17/Treg轴相关细胞因子水平的影响,探讨其改善自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis, AIT)相关轻度认知损伤的机制。方法 50只雌性NOD.H-2h4小鼠随机分为对照组、模型组、补中益气汤低、中、高剂量组(2.73,8.19,24.57 g·kg-1)。除对照组外,其余小鼠采用弗氏佐剂混合免疫注射法建立EAT小鼠模型。造模成功后,中药各剂量组分别按体质量灌服相应药物,对照组及模型组每日灌服与中药等体积双蒸水,每日灌服1次,每灌胃6d,休息1d,连续8周。通过Mirros水迷宫实验评价小鼠空间学习记忆能力。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清TgAb水平。苏木素-伊红(HE)染色法观察甲状腺病理变化。透射电镜观察小鼠海马微血管超微结构变化。免疫荧光染色检测海马组织IgG免疫复合物沉积... 相似文献
4.
目的:研究黄芩汤对溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠道辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)、Th1/Th2细胞平衡的影响。方法:60只雄性C57BL/6J小鼠,按体质量随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(0.2 g·kg-1),黄芩汤低、中、高剂量组(4.55、9.1、18.2 g·kg-1),除正常组外均予以2.5%右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)自由饮水5 d诱导UC,连续灌胃给药7 d后处死小鼠,取肠系膜淋巴结(MLNs)和结肠组织,流式细胞术检测小鼠肠系膜淋巴结Th17/Treg、Th1/Th2,流式细胞微球芯片捕获技术检测结肠组织白细胞介素(IL)-2、IL-17A、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-10等细胞因子含量,对结肠组织样本进行病理切片观察,并采用免疫组化法检测结肠组织中T细胞表达的T-box(T-bet)、GATA结合蛋白-3(GATA-3)、IL-17A、叉头蛋白P3(FoxP3)的表达水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠结肠组织中转化生长因子-β(TGF-... 相似文献
5.
6.
目的:研究益气化痰活血方对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠甲状腺Ets-1、IL-17基因表达的影响,从分子水平说明其影响AIT的部分机制。方法:60只8周龄NOD.H-2h4小鼠,随机分为正常组(NG),模型组(MG),西药组(SeG),益气化痰活血方高、中、低剂量组(YG-1、YG-2、YG-3),每组10只,正常组饲以蒸馏水,其余各组饲以含高碘化钠水(浓度0.05%)。8周后分别以蒸馏水,阳性对照药硒酵母混悬液,益气化痰活血方高、中、低剂量的水煎液给各组小鼠灌胃。8周后取小鼠甲状腺,RT-PCR法检测E26transformation-specific-1(Ets-1)、白细胞介素-17(IL-17) mRNA表达。结果:①与模型组比较,益气化痰活血方组均能使Ets-1 mRNA的表达水平上调(P<0.01);②与模型组比较,益气化痰活血方组均能使IL-17 mRNA的表达水平下调(P<0.01)。结论:益气化痰活血方能上调Ets-1基因表达水平,进而使IL-17炎症水平下降,这可能是其改善AIT小鼠免疫失常的机制之一。 相似文献
7.
目的:观察槐杞黄颗粒对免疫球蛋白(Ig)A血管炎肾炎(IgAVN)小鼠的干预作用并探讨该方药的疗效机制。方法:SPF级昆明种雄性小鼠50只,随机分为正常组、IgAVN模型组、地塞米松组(2.5 mg·kg-1·d-1)、槐杞黄低、高剂量组(4、8 g·kg-1·d-1)。采用口服麦胶蛋白结合尾静脉注射印度墨水法建立小鼠模型。判断造模成功后依据分组灌胃给药4周麻醉处死小鼠。检测各组小鼠24 h尿蛋白定量、尿β2-微球蛋白、血清总蛋白、白蛋白、IgA等;流式测定脾脏单细胞悬液辅助性T细胞17(Th17)比例;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Th17细胞腺苷酸激活蛋白激酶α(AMPKα)、磷酸化腺苷酸激活蛋白激酶α(p-AMPKα)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶1(p-ACC1)蛋白表达;观察脾脏与肾脏病理变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠24 h尿蛋白定量、尿β2-微球蛋白、总胆固醇(P<0.05)、血清白细胞介... 相似文献
8.
目的:探讨活血消瘿方(HXXYF)调控Notch/调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)通路对桥本甲状腺炎(HT)大鼠甲状腺功能和病理形态的影响。方法:将84只大鼠随机分为对照组(NC组)、模型组(Model组)、低剂量HXXYF组(HXXYF-L组,0.5 g/kg)、高剂量HXXYF组(HXXYF-H组,2 g/kg)、左旋甲状腺素钠组(LTSD组,0.1 mg/kg)、Jagged1(Notch激活剂)组(0.67 mg/kg Jagged1)、HXXYF-H+Jagged1组(2 g/kg+0.67 mg/kg),每组12只。除NC组外,其他组大鼠均构建HT模型。全部造模成功后,进行给药处理,1次/d,持续4周。ELISA法检测大鼠血清中游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、白细胞介素(IL)-17、IL-10水平;流式细胞术检测大鼠外周血中Treg、Th17比例;HE染色检测大鼠甲状腺组织病理变化;Western blotting检测甲状腺组织中叉头框蛋... 相似文献
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目的 探讨白头翁汤(Baitouweng Decoction)通过调节T淋巴细胞平衡治疗溃疡性结肠炎(UC)小鼠的机制。方法 将60只C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉秦组(500 mg·kg-1)及白头翁汤低、中、高剂量组(5、10、15 g·kg-1),每组10只。除正常组外,其他各组小鼠均采用自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液,连续7 d,诱导建立UC小鼠模型;给药组小鼠造模同时按上述剂量灌胃给药(20 mL·kg-1),正常组和模型组给予等体积蒸馏水,每日1次,连续给药10 d。实验期间记录小鼠体质量变化,观察粪便性状,检测并记录小鼠便血情况,进行疾病活动指数(DAI)评分;测量结肠长度及脾脏、胸腺湿质量,计算脾脏及胸腺指数;采用HE染色法观察结肠组织病理变化,并进行病理学评分;采用阿尔新蓝染色法观察杯状细胞黏蛋白的表达;采用流式细胞术检测小鼠肠系膜淋巴结及脾脏中辅助性T细胞1(Th1)、辅助性T细胞17(Th17)及调节性T细胞(Treg)细胞的比例;采用ELISA法检测小鼠结肠组织中炎性... 相似文献
10.
目的 探讨甘草附子汤(Gancaofuzi decoction, GCFZ)对胶原诱导型关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)小鼠辅助性T细胞17(T helper cell 17, Th17)和调节性T细胞(Regulatory T cell, Treg)失衡的调节作用。方法 该研究包括4组小鼠:正常对照组(Control组),模型对照组(CIA组),GCFZ 2.4 g·kg-1组和GCFZ 4.8 g·kg-1组。检测各组小鼠足肿胀度、关节炎指数;苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining, HE)观察小鼠踝关节组织病理学变化;流式细胞仪检测脾脏Th17和Treg细胞比例;酶联免疫吸附试验检测血清白介素17(interleukin-17,IL-17)、白介素6(interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha, TNF-α)和白介素10(interleukin-10, IL-10)水平。结果 与正常组比较,CI... 相似文献