Wnt信号通路在胶质瘤中的研究进展

Wnt信号通路是胚胎及器官发育的重要信号通路之一,在机体内参与调控多种细胞的增殖、分化、极化、迁移及凋亡等基因表达;Wnt信号通路的失调与肿瘤的发生发展密切相关。近年来的研究发现,胶质瘤的发病机理及耐药性等多涉及Wnt信号通路的异常激活。本文主要探讨Wnt信号通路在胶质瘤领域的最新研究进展,旨在进一步探索该通路治疗胶质瘤的可能。     

基于Wnt/β-catenin通路及相关蛋白表达对脊髓损伤及其治疗的机制探讨

脊髓损伤（SCI）是人类极具破坏性的创伤性疾病之一,是全球性的治疗难题。神经元损伤后难以再生,导致该疾病高致残率、高死亡率,为家庭和社会带来巨大的经济负担。经典Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路是SCI过程中至关重要的信号转导系统,当前研究证实,多种外源性刺激如沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)、层粘连蛋白样蛋白(Netrin)、微小RNA(miRNA)、热休克蛋白（HSP）等可激活该通路并调节下游靶基因的表达,从而减少SCI后脊髓神经元的自噬和凋亡,抑制炎症,促进神经细胞增殖以及轴突再生,减少瘢痕形成等,最终促进SCI修复。该文总结近3年来基于Wnt/β-catenin信号通路参与SCI保护的相关分子机制,以期为发现SCI新的治疗靶点提供思路。 [国际神经病学神经外科学杂志, 2022, 49(5): 82-86]     

白藜芦醇阻断TGF-β1/Smad信号通路抑制脑胶质瘤细胞迁移侵袭及上皮间质转化

目的 探究白藜芦醇对人脑胶质瘤细胞黏附、迁移、侵袭、上皮间质转化(EMT)及转化生长因子-β 1(TGF-β 1)/Smads信号通路的调控作用。方法 体外培养人脑胶质瘤T98G细胞,分为对照组(不做干预)、实验组(12.5μmol·L^-1白藜芦醇组、25μmol·L^-1白藜芦醇组、50μmol·L^-1白藜芦醇组)、5-氟尿嘧啶组(50 mg·L^-1的5-氟尿嘧啶)、抑制剂组(50μmol·L^-1白藜芦醇+10μmol·L^-1 TGF-β 1/Smad通路抑制剂LY2109761)和激活剂组(50μmol·L^-1白藜芦醇+10μmol·L^-1TGF-β 1/Smad通路激活剂SRI-011381),干预24 h。用细胞计数试剂盒比色(CCK-8)、倒置显微镜、黏附实验、划痕实验、Transwell小室及蛋白印迹(Wb)法对细胞活力、形态、黏附、迁移、侵袭能力及EMT和TGF-β 1/Smad信号通路相关蛋白表达水...     

α-突触核蛋白通过抑制Wnt/β-catenin信号通路参与帕金森病发病机制

目的探讨帕金森病动物模型和细胞模型中α-突触核蛋白与Wnt/β-catenin信号通路的相关关系及其导致神经元损伤的可能机制。方法在动物水平和细胞水平上应用western blotting方法、流式细胞术、免疫荧光法等方法研究α-synuclein与Wnt/β-catenin信号通路关键信号分子GSK-3β的表达关系及其对细胞活性的影响。结果α-syn转基因小鼠脑组织中α-synuclein、p-GSK-3β蛋白表达量均明显增加,与对照组和MPTP组相比具有统计学差异(P 0. 05);α-syn过表达组SH-SY5Y细胞中α-synuclein、p-GSK-3β表达量较对照组及MPP+损伤组明显升高,结果具有统计学差异(P 0. 05);阿立哌唑预处理组α-synuclein较对照组及MPP+组明显增加,p-GSK-3β与对照组及MPP+组差异不具有统计学差异;阿立哌唑预处理组细胞活性明显高于α-syn过表达组,细胞凋亡率较α-syn过表达组明显下降,差异具有统计学意义(P 0. 05);免疫荧光法示α-synuclein与p-GSK-3β存在共定位关系。结论α-synuclein可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路导致神经元损伤,从而参与帕金森病的发病机制。     

FOXC2过表达通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进胶质瘤U87细胞增殖、迁移

目的 探讨FOXC2过表达对胶质瘤U87细胞增殖、侵袭、迁移的影响及其机制.方法 体外培养人脑胶质瘤U87细胞和人脑胶质细胞HEB.U87细胞随机分为空白组(未转染任何质粒)、空载体组(转染pcDNA3.1空载体质粒)、FOXC2过表达组(转染pcDNA3.1-FOXC2过表达质粒)、FOXC2+抑制剂组[转染pcDN...     

大黄素通过调控Wnt/β-catenin信号通路减轻缺血性脑卒中大鼠BCFB

目的 本研究旨在探讨大黄素对缺血性脑卒中(CAT)后血-脑脊液屏障(BCFB)的影响及其潜在机制。方法 SD大鼠随机分为:假手术组、模型组、大黄素低剂量组(20 mg·kg^-1)、大黄素高剂量组(40 mg·kg^-1)以及阳性对照组(尼莫地平12 mg·kg^-1)。构建大鼠大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)模型,通过腹腔注射不同药物进行治疗。对各组大鼠进行神经功能缺损评分;TCC染色检测脑梗死体积;测定脑组织含水量;伊文思蓝(EB)染色检测BCFB通透性;明胶酶谱法评估MMP-9的活性;Western blotting检测基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)、闭合蛋白-5 (Claudin-5)和咬合蛋白(Occludin)和磷酸化糖原合成酶激酶(p-GSK-3 β)、β-连环素(β-catenin)蛋白的表达。结果 与假手术组相比,模型组大鼠神经功能缺损评分明显增加,脑梗死体积和脑组织含水量均明显增加,脑组织EB含量明显增加,脑组织中Claudin-5、Occludin、p-GSK-3 β、β-catenin蛋白表达...     

上皮间质转化与胶质瘤侵袭迁移的研究进展

胶质瘤是一种恶性程度高、浸润性生长的颅内原发性肿瘤。肿瘤的侵袭和转移是导致患者预后差的主要原因。上皮细胞-间质细胞转换(EMT)是胶质瘤细胞获得高度迁移和侵入表型特征的关键过程。EMT是一个进化上保守的细胞发育程序,和致癌效应密切相关。该文就EMT与胶质瘤侵袭迁移相关作用机制和靶向治疗进行综述,为胶质瘤的诊疗研究提供理论依据。     

槐定碱通过Wnt/β-catenin信号通路抑制人胶质瘤U87细胞迁移、侵袭

目的 探讨槐定碱对人胶质瘤U87细胞迁移、侵袭能力的影响及其作用机制。方法 体外培养人胶质瘤U87细胞,加入槐定碱[0 mg/ml（对照组）,1.0 mg/ml,2.0 mg/ml,3.0 mg/ml]共培养24 h,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,免疫印迹法检测细胞β-catenin、E-cadherin、Vimentin和MMP-9蛋白表达,RT-PCR检测细胞Vimentin、MMP-9 mRNA表达。结果 槐定碱明显抑制U87细胞迁移、侵袭能力（P<0.001）,而且随浓度增加抑制作用明显增强（P<0.001）。槐定碱明显抑制U87细胞β-catenin蛋白、Vimentin和MMP-9 mRNA和蛋白表达（P<0.01）,明显增强E-cadherin蛋白表达（P<0.01）,而且随浓度增加抑制作用明显增强（P<0.01）。结论 槐定碱能抑制人胶质瘤U87细胞的迁移和侵袭,机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的活性,阻断细胞上皮间质转化过程。     

TGF-β信号通路在胶质瘤中的作用及分子机制

正胶质瘤是源自神经胶质细胞或其前体的异质性肿瘤,是严重威胁人类健康的常见肿瘤之一,发病率在(0.59～3.69)/10万人,男性多于女性~([1])。其主要发生在大脑,也可能发生在脊髓。根据恶性程度,胶质瘤可分为Ⅰ～Ⅳ级:Ⅰ、Ⅱ级通常分化良好并且预后较好,Ⅲ、Ⅳ级是未分化的或间变性的且预后较差。近30年来,胶质瘤的整体治疗效果未有明显改善,5年生存率很差~([2])。因此,胶质瘤的发病机制、生物学特征和新病因治疗是神经外科领域的热门话题和最     

Meth对大鼠SCI后神经细胞凋亡及wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 探讨甲基强的松龙(methylprednisolone,Meth)对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)后神经细胞凋亡及wnt/β-catenin 信号通路的影响。方法 将60只SD成年大鼠随机分为3组,即假手术(Sham)组、甲基强的松龙(Meth)组和生理盐水(Saline)组,每组各20只; 假手术组仅需切开椎板不损伤脊髓,甲基强的松龙组和生理盐水组采用改良Allens法制作大鼠脊髓损伤模型后立即从尾静脉注射大剂量MP治疗,并在术后第1、2 d相同的时间点分别注射1次; 采用尼氏染色(Nissl)观察组织形态变化; 采用免疫荧光观察蛋白caspase-3表达水平; 采用Western Blot检测各组wnt/β-catenin信号通路蛋白GSK-3β和β-catenin的表达水平。结果 甲强的松龙组(Meth)第7 d SCI较生理盐水组明显减轻(P<0.01); Meth组抑制凋亡蛋白caspase-3表达水平明显下调(P<0.01); 大鼠急性脊髓损伤(SCI)后第3、7 d,甲基强的松龙组呈现抑制蛋白GSK-3β表达(P<0.05),而蛋白β-catenin表达则明显上调(P<0.05)。结论 大鼠急性脊髓损伤后MP可能通过激活wnt/β-catenin信号通路来促进大鼠运动功能恢复以及抑制急性脊髓损伤神经细胞的凋亡。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨白芍总苷对多发性硬化模型大鼠神经系统的保护作用

目的 基于Wnt/β-catenin信号通路探讨白芍总苷(TGP)对多发性硬化(MS)模型大鼠神经系统的保护作用。方法 将60只SD雌性大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量组、高剂量组,每组各15只,足跖皮下注射抗原乳剂(豚鼠脊髓匀浆抗原与福氏佐剂)构建MS大鼠模型,对照组给予等体积的生理盐水灌胃; 低剂量组和高剂量组则在抗原乳剂注射后分别灌胃给予25、50 mg/kg的TGP,连续给药14 d,对照组和模型组给予等量生理盐水; 观察大鼠临床发病、体重变化与神经功能评分情况,HE染色观察大鼠脊髓组织病理变化,TUNEL法观察神经细胞凋亡,Western blot检测Wnt3α,GSK-3β,β-catenin,Bax和Bcl-2蛋白的表达水平。结果 模型组和低、高剂量组大鼠体重明显低于对照组; 模型组第8 d开始体重明显低于其它3组(P<0.05); 低剂量组第12 d开始体重明显低于高剂量组(P<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠神经功能评分、细胞凋亡指数(Apoptosis index,AI)、Wnt3α,β-catenin水平明显升高,Bcl-2/Bax,GSK-3β水平明显降低(P均<0.05); 与模型组比较,低、高剂量组神经功能评分、AI数值、Wnt3α,β-catenin水平明显降低,Bcl-2/Bax,GSK-3β水平明显升高(P均<0.05),且高剂量组较低剂量组变化更明显(P<0.05)。结论 TGP可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活来发挥对MS模型大鼠神经系统的保护作用。     

β-catenin/Tcf-4转录调控AKT2基因表达促进人脑胶质瘤细胞恶性转化的研究

目的 探究胶质瘤中β- catenin/Tcf -4转录调控AKT2基因以促进其恶性表型转化的机制.方法 CHIP - PCR及荧光素酶实验确立AKT2启动子区的Tcf -4结合位点及活性.阿司匹林( ASA)阻断β- catenin/Tcf -4转录复合物活性及恢复AKT2基因的表达后,流式细胞术检测细胞周期,Annexin V检测凋亡及Transwell实验检测侵袭能力.结果 CHIP - PCR表明,AKT2基因启动子区存在两个Tcf -4结合位点- 349/- 343 bp(位点1)和- 3491/- 3497 bp(位点2).荧光素酶实验结果显示位点2的活性比位点1的强.抑制β - catenin/Tcf -4转录活性后,细胞周期阻滞于G0/G1期,侵袭能力下降;恢复AKT2的表达后,细胞S期比例增加,侵袭能力增强.结论 β- catenin/Tcf -4可以直接转录调控AKT2来促进胶质瘤细胞的增殖和侵袭.     

神经胶质瘤Wnt信号通路抑制基因高甲基化改变及其意义

目的研究表明神经胶质瘤中存在Wnt信号通路的异常活化。本研究探讨神经胶质瘤中Wnt信号通路抑制基因启动子区甲基化的改变以及去甲基化药物对其影响。方法对53例恶性胶质瘤组织样本和人胶质瘤细胞系U251、A172检测5个Wnt通路胞外抑制基因:SFRP1、SFRP2、SRFP5、DKK1和WIF1启动子区甲基化状况。去甲基化药物处理胶质瘤细胞后,检测上述5个基因表达水平;采用MTT法和软琼脂细胞集落实验检测胶质瘤细胞生长行为。结果神经胶质瘤组织和细胞系中上述五个基因启动子区存在明显高甲基化修饰。去甲基化药物处理胶质瘤细胞后,RT-PCR分析显示SFRP1、SFRP2、SFRP5和WIF1的表达明显增加,DKK1表达无明显变化;Wnt/β-catenin靶基因CCND1表达明显降低(P0.05);靶基因LRP6表达显著增加(P0.01)。MTT实验和软琼脂细胞集落实验显示去甲基化药物可明显抑制胶质瘤细胞增殖。结论在胶质瘤中Wnt信号通路胞外抑制基因的表达受甲基化调控,去甲基化药物可通过逆转基因的甲基化抑制神经胶质瘤细胞增殖,这为将来去甲基化药物用于恶性胶质瘤治疗提供研究依据。     

脑胶质瘤干细胞Hedgehog信号通路研究进展

脑胶质瘤是中枢神经系统发病率和复发率最高的恶性肿瘤,因其呈浸润性生长,手术、放疗及化疗等治疗手段均难以根治。随着对神经干细胞入了解和肿瘤干细胞概念的提出,有学者成功分离出脑胶质瘤干细胞（glima stem cells,GSCs）,这为有效的治疗脑胶质瘤的研究提供了锲机,也成为神经外科领域的研究热点。Hedgehog信号通路广泛参与胚胎的发育以及多种病理生理过程。     

Wnt信号传导通路在阿尔茨海默病中的研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种中枢神经系统的退行性变性疾病,主要表现为进行性的认知功能障碍和精神神经异常.AD的病因与发病机制至今尚未阐明.由于在神经系统的发育过程中,Wnt信号传导通路在细胞间黏附及细胞分化上起着重要作用,所以它越来越受到人们的关注.近来有研究表明Wnt信号传导通路中多个信号分子的改变均与AD的发生、发展密切相关.     

胶质瘤相关Hedgehog信号通路的研究进展

胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤,传统治疗主要包括肿瘤切除、放疗及化疗,但肿瘤侵袭性强,术后复发率高.Hedgehog这一高度保守的细胞信号传导通路,广泛参与胚胎的发育和多种病理生理过程,且许多研究已证实该通路在较高比例的胶质瘤中异常活化,在肿瘤发生、发展中的作用也逐渐揭示.这为研究胶质瘤的发病机制及诊断治疗提供新的思路.本文就Hedgehog通路在胶质瘤中的研究进展进行综述.     

N-cadherin、E-cadherin及β-catenin在胶质瘤中的表达及意义

目的 探讨神经-钙粘素(N-cadherin),上皮-钙粘素(E-cadherin)及β-catenin在人脑胶质瘤中的表达及意义.方法 采用S-P免疫组化方法检测N-cadherin、E-cadherin、β-catenin在42例不同级别胶质瘤及8例正常脑组织中的表达.结果 N-cadherin,E-cadherin及13-catenin的表达在正常脑组织与胶质瘤之间以及胶质瘤的高低级别组间存在显著差异(P＜0.05),并且在生存时间＞2年组与生存时间≤2年组间差别显著(P＜0.05);N-cadherin与β-catenin的表达随着肿瘤级别的升高而增高.且二者在胶质瘤中的表达呈正相关(P＜0.05,r=0.778).E-cadherin的表达随着肿瘤级别的升高而下降,E-cadherin与N-cadherin、β-catenin的表达呈负相关(P＜0.05,r1=-0.747,r2=-0.783);结论 提示N-cadherin与β-catenin的过度表达和E-cadherin的表达下调在胶质瘤的侵袭及恶性进展中起着重要作用.N-cadherin与β-catenin的表达可能与胶质瘤患者的预后密切相关,提示可作为反映胶质瘤恶性程度与预后的指标.     

β-catenin蛋白在成人脑干和幕上胶质瘤中的表达及其意义

目的 通过检测β-eatenin蛋白在正常脑组织、脑干和幕上胶质瘤中的表达,探讨Wnt/β-catenin信号转导途径在脑干和幕上胶质瘤发生中的作用.方法 采用免疫组织化学和Western blot方法检测β-catenin在6例正常脑组织、10例Ⅱ级脑干胶质瘤和10例Ⅱ级幕上胶质瘤中的表达.结果 β-catenin在正常脑组织中为胞膜表达,在脑干和幕上胶质瘤中为胞质表达.半定量分析β-catenin电泳条带表明其在三组中的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Wnt/β-catenin信号转导途径虽然参与了脑干和幕上胶质瘤的发生,但尚不能认为其是导致脑干胶质瘤患者较幕上胶质瘤患者预后差的决定性因素.     

灯盏花素通过Wnt/β-catenin通路对阿尔茨海默病大鼠模型Aβ跨血脑屏障的转运清除机制研究

目的 探讨灯盏花素（Breviscapine,BRE）对阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）大鼠模型淀粉样蛋白β（Amyloid β,Aβ）跨血脑屏障（blood brain barrier,BBB）的转运清除的影响及其可能作用机制。 方法 随机选择15只Wistar大鼠作为空白组,剩余大鼠于侧脑室内注射淀粉样蛋白β25-35（Aβ25-35）以诱导AD大鼠模型;后随机分为模型组、BRE低（50 mg·kg-1·d-1）、高（100 mg·kg-1·d-1）剂量组及多奈哌齐组（1 mg·kg-1·d-1）,每组各15只,连续灌服给药21 d;Morris水迷宫行为测试检测大鼠空间学习记忆能力;海马组织行尼氏、刚果红染色;酶联免疫吸附试验（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）法检测海马组织中Aβ42、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素1β（Interleukin 1β,IL-1β）、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）水平;Western blot法检测海马Wnt3a/β-连环蛋白（β-catenin）通路因子及Aβ相关转运体蛋白表达水平。 结果 与空白组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长,穿台次数减少,海马CA3区存活神经元数减少,Aβ斑块状严重沉积,Aβ42,TNF-α,IL-1β,MDA水平升高,SOD水平、Wnt3a,β-catenin、低密度脂蛋白受体相关蛋白1（Low density lipoprotein receptor-associated protein 1,LRP-1）及P糖蛋白（P glycoprotein,P-gp）相对表达水平降低,磷酸化糖原合酶激酶3β（Phosphorylated GSK3 β,p-GSK3β）、轴抑制蛋白2（Axis inhibition protein 2,Axin2）相对表达水平升高（P<0.05）;与模型组比较,BRE低、高剂量组及多奈哌齐组大鼠逃避潜伏期缩短,穿台次数增加,海马CA3区存活神经元数增加,Aβ斑块状沉积减轻,Aβ42,TNF-α,IL-1β,MDA水平降低,SOD水平、Wnt3a,β-catenin,LRP-1及P-gp相对表达水平升高,p-GSK3β,Axin2相对表达水平降低（P<0.05）;低、高剂量BRE及多奈哌齐作用效果逐渐增强（P<0.05）。 结论 BRE可促进AD大鼠模型Aβ跨BBB转运清除,其作用机制可能与激活Wnt/β-catenin通路有关。     

Wnt信号通路在阿尔茨海默病中的研究进展

Wnt信号通路参与调控了神经系统的发育和功能,近来研究发现wnt信号通路尤其是Wnt／Bcatenin信号通路的异常与阿尔茨海默病的发病密切相关,现对wnt信号通路结构特点、功能及与阿尔茨海默病关系等的研究进展作一综述。