β-榄香烯诱导结肠癌Lovo细胞凋亡的作用

目的　研究 β 榄香烯诱导结肠癌细胞的凋亡作用 ,探讨其治疗结肠癌的作用机制。 方法　选择 β 榄香烯诱导结肠癌细胞凋亡 ,采用光镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡及细胞周期。Fura 2荧光复合技术测结肠癌细胞内 [Ca2 +]i浓度。结果　β 榄香烯对结肠癌细胞增殖具有很强的抑制作用。β 榄香烯能够诱导结肠癌凋亡。在结肠癌细胞凋亡过程中 ,胞内 [Ca2 +]i明显升高 ,以凋亡早期更为明显。 1h时为 ( 2 5 6.18± 8.85 )nmol/L ,明显高于对照组 ( 12 7.81± 5 .18)nmol/L(P <0 .0 1)。结论　β 榄香烯对结肠癌细胞生长具有很强的抑制作用 ,与诱导凋亡有关。Ca2 +在 β 榄香烯诱导结肠癌细胞凋亡过程中有一定的作用     

β-榄香烯诱导小鼠黑色素瘤B16细胞凋亡的研究

引言β－榄香烯（β－Ｅｌｅｍｅｎｅ,β－Ｅ）是从中药温莪术中提取的一种有效抗癌成分,是我国自行研制的国家二类抗癌新药。既往的研究资料表明,该药对多种动物及人类肿瘤具有明显的抑制作用［１,２］。为进一步探讨β－Ｅ的作用机制,本研究采用透射电镜和ＴｄＴ介...     

反相高效液相色谱法测定小鼠血浆中β-榄香烯含量

目的:建立小鼠血浆中β-榄香烯的反相高效液相色谱法含量分析方法.方法:小鼠血浆中加入2倍体积的乙腈提取出β-榄香烯用于测定.色谱柱为Hypersil BDS C18(4.6 mm×200 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(体积比90∶10),检测波长为205 nm,流速为1 mL/min.结果:血浆中其他组分不影响β-榄香烯的检测,在0.4～24.0mg/L浓度范围内,线性关系良好(Y=160.73 X-24.12,r=0.999 6),相对回收率＞(95.70±3.07)%.结论:本方法具有简单、快速、准确等特点,适用于测定血浆中β-榄香烯的浓度.     

β-榄香烯联合DC/DRibble疫苗促进脾细胞增殖及活化研究

目的:通过观察β-榄香烯联合DC/DRibble疫苗对小鼠脾细胞增殖和IFN-γ分泌水平的影响,探讨β-榄香烯抗肿瘤的免疫机制。方法:制备Balb/c小鼠脾脏来源的树突状细胞(dentritic cell,DC)并鉴定其表型,以Balb/c小鼠来源的肝癌细胞株BNL1MEA.7R.1(BNL)为靶细胞,募集富含肿瘤"信息"的抗原载体—自噬小体(Drips in blebs,DRibble),制备DC/DRibble疫苗。用CCK-8法检测β-榄香烯联合DC/DRibble疫苗对脾细胞的增殖作用,用ELISA法检测培养上清液中IFN-γ的水平。结果:β-榄香烯在合适浓度下联合DC/DRibble疫苗能促进脾细胞增殖并刺激效应性淋巴细胞产生高水平的IFN-γ。结论:β-榄香烯可能通过增强DC抗原递呈功能以发挥抗肿瘤作用。     

β-榄香烯对非小细胞肺癌作用机制的研究进展

β-榄香烯是从天然药用植物温莪术中提取的萜烯类有效活性成分,具有分子质量小、抗肿瘤强、毒性低等特点,临床上用于非小细胞肺癌(on-small-cell lung cancer, NSCLC)常规治疗的辅助用药。β-榄香烯能通过抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤血管形成,阻滞细胞周期,逆转耐药,以及调节免疫能力等发挥抗肿瘤作用。基于榄香烯已有研究基础,对其抑制NSCLC作用机制的研究进展进行综述,以期为临床上更好地将榄香烯用于NSCLC辅助支持治疗提供理论依据和思路。     

β-榄香烯对人膀胱癌BIU-87细胞磷脂膜功能及Bcl-2表达的影响

目的探讨β-榄香烯对人膀胱癌BIU-87细胞磷脂膜功能及Bcl-2表达的影响。方法[32P]Pi同位素参入,提取细胞磷脂进行HPTLC分析细胞磷脂(PC及PE)代谢,考马斯亮蓝法测定细胞膜蛋白水平,分析细胞脂膜流动性及流式细胞仪测定Bcl-2表达的变化。结果随着β-榄香烯浓度的增加,[32P]Pi参入细胞PC、PE量明显降低,膜蛋白水平及Bcl-2表达明显降低,其最大抑制率分别为:41.1%、43.3%、43%、50%,呈明显的量效关系(P<0.05);β-榄香烯明显降低BIU-87细胞膜脂流动性。结论β-榄香烯可以明显抑制BIU-87细胞磷脂代谢、Bcl-2表达及脂膜流动性,提示磷脂(PC及PE)及Bcl-2与膀胱癌BIU-87细胞凋亡有密切关系。     

β-榄香烯对HepG2和HT-29细胞体外抗癌作用的实验研究

目的探讨β-榄香烯对肝癌和结肠癌的作用,为临床上利用β-榄香烯治疗肿瘤提供理论依据。方法体外培养HepG2肝癌细胞和HT-29结肠癌细胞,用生长曲线和MTT法观察β-榄香烯对两种细胞生长的影响。结果β-榄香烯组在培养的第6d、第7d、第8d能显著抑削HT-29细胞增殖;β-榄香烯在培养的第6d能显著抑制HepO2细胞增殖;在第2d、在第3d、在第4d,与对照组相比,β-榄香烯对HT-29和HepG2细胞增殖的抑制作用显著（P〈0．05）。结论β-榄香烯能明显抑制体外培养的HT-29和HepG2细胞生长。     

β-榄香烯对HepG2和HT-29细胞体外抗癌作用的实验研究

目的 探讨β-榄香烯对肝癌和结肠癌的作用,为临床上利用β-榄香烯治疗肿瘤提供理论依据.方法 体外培养HepG2肝癌细胞和HT-29结肠癌细胞,用生长曲线和MTT法观察β-榄香烯对两种细胞生长的影响.结果 β-榄香烯组在培养的第6d,第7d、第8d能显著抑制HT-29细胞增殖;β-榄香烯在培养的第6d能显著抑制Hep02细胞增殖;在第2d,在第3d、在第4d,与对照组相比,β-榄香烯对HT-29和HepG2细胞增殖的抑制作用显著(P<0.05).结论 β-榄香烯能明显抑制体外培养的HT-29和HepG2细胞生长.     

β-榄香烯对肿瘤细胞内钙离子的影响

目的　通过观察 β-榄香烯对小鼠肝癌HcaF细胞内游离Ca2 水平的影响 ,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法　Fluo - 3/AM负载HcaF细胞后 ,通过激光共聚焦扫描显微镜实时观察 β -榄香烯对HcaF细胞内游离Ca2 水平的影响。结果　β -榄香烯可使HcaF细胞内游离Ca2 水平先升后降。结论　β -榄香烯诱导的肿瘤细胞凋亡可能是钙依赖性的。     

β-榄香烯对人膀胱癌BIU-87细胞磷脂代谢转换率及细胞脂膜流动性的影响

磷脂是细胞膜的重要组分,肌醇磷脂在细胞的功能调控中发挥重要的作用,并与细胞增殖及肿瘤形成关系密切。β-榄香烯是中药温莪术的有效抗癌成分,临床应用对许多恶性肿瘤的疗效确切,我们已经证明其可诱导人膀胱癌BIU-87细胞凋亡;本研究旨在进一步研究其对BIU-87细胞肌醇磷脂代谢转换及脂膜流动性的影响,探索凋亡的分子机制,结果报道如下。     

β-榄香烯诱导人脑胶质瘤U251细胞凋亡的机制研究

[目的]探讨β-榄香烯（β-elemene,β-ELE）对人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的诱导作用及对c-myc、hTERT、microRNA分子表达的影响。[方法]用β-榄香烯处理U251细胞株24小时,流式细胞术检测细胞凋亡;RT-PCR法检测c-myc、hTERT基因的表达;Western-blot检测cmyc、hTERT蛋白的表达;基因芯片检测β-榄香烯处理对细胞表达microRNA的影响,并以Real time-PCR法验证其中miR-654-3p、miR-431、miR-150和miR-1976的表达水平。[结果]β-榄香烯明显诱导U251细胞的凋亡,与对照组（0μg·ml-1β-ELE）相比,实验组（100,200,300μg·ml-1β-ELE）的细胞凋亡有所增加,凋亡程度随着β-ELE的浓度增大而增加,具有统计学差异;β-榄香烯抑制了c-myc、hTERT基因mRNA和蛋白的表达,与对照组（0μg·ml-1β-ELE）相比,实验组（50,100,150μg·ml-1β-ELE）的c-myc、hTERT基因mRNA和蛋白的表达水平都有所下降,下降程度随着β-ELE的浓度增大而增加,具有统计学差异;基因芯片和Real time-PCR[结果]显示,与对照组（0μg·ml-1β-ELE）相比,实验组（150μg·ml-1β-ELE）miR-654-3p、miR-431、miR-150和miR-1976的表达有所上调,具有统计学差异。[结论]β-榄香烯诱导了U251细胞凋亡抑制了c-myc、hTERT基因mRNA与蛋白的表达,显著上调了miR-654-3p、miR-431、miR-150和miR-1976的表达水平。因此,β-榄香烯诱导U251细胞凋亡的作用可能是通过其抑制c-myc、hTERT基因mRNA和蛋白的表达及上调microRNA来实现的。此机制为抗肿瘤药物的发展提供了一定的理论基础,值得进一步深入探讨。     

落新妇苷对小鼠骨髓来源树突状细胞成熟及免疫功能的抑制作用

目的：探讨落新妇苷对小鼠骨髓来源树突状细胞（dendritic cell, DC）成熟和免疫功能的影响。 方法：采用体外条件培养法得到小鼠骨髓来源未成熟树突状细胞,加入脂多糖刺激细胞成熟。落新妇苷（低浓度25 μg/mL、中浓度50 μg/mL、高浓度100 μg/mL）处理细胞后,流式细胞仪分析各组细胞凋亡,细胞表面主要组织相容性抗原复合物分子Ⅰa和共刺激分子CD40、CD80和CD86表达;异硫氰酸荧光素标记葡聚糖内吞实验分析各组DC抗原吞噬功能;酶联免疫吸附测定法检测各组DC培养液上清白细胞介素12亚单位p40（p40 subunit of interleukin-12,IL-12p40）水平;氚-胸腺嘧啶核苷掺入法检测体外混合淋巴细胞反应（mixed lymphocyte reaction, MLR）中各组DC刺激同种反应性T细胞的增殖能力,酶联免疫吸附测定法检测MLR上清IL-2、IL-4、IL-10、γ干扰素水平。 结果：各组DC凋亡率差异无统计学意义（P＞0.05）。与脂多糖组相比,高、中、低浓度落新妇苷组细胞表面主要组织相容性抗原复合物分子Ⅰa和共刺激分子表达明显降低,抗原吞噬能力明显升高,分泌IL-12p40明显减少,刺激同种反应性T细胞增殖的能力显著下降（P〈0.05）。与脂多糖组相比,高、中、低浓度落新妇苷组MLR上清中IL-2和γ干扰素水平明显降低（P〈0.05）,而IL-4、IL-10水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论：落新妇苷（25、50、100 μg/mL）能够剂量依赖性地抑制体外培养小鼠骨髓来源DC的成熟,并对其免疫功能具有一定的负性调节作用。     

β-榄香烯对肝星状细胞增殖和细胞周期的影响

目的 观察β-榄香烯对大鼠肝星状细胞(HSCs)增殖及细胞周期的影响.方法 用不同浓度的β-榄香烯对HSCs进行处理,以四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,Annexin-Ⅴ-碘化丙锭染色检测细胞凋亡,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测HSCs细胞周期蛋白D1(Cyclin D1) mRNA、半胱天冬酶2(Caspase 2) mRNA的表达.结果 2.5、5.0、10.0 μmol/L的β-榄香烯均能显著且剂量依赖性的下调Cyclin D1 mRNA的表达、上调Caspase 2 mRNA的表达、抑制HSCs的增殖、诱导HSCs凋亡,并可阻滞细胞周期进程,各组G0/G1期细胞百分比随药物浓度逐渐升高.结论 β-榄香烯对大鼠HSCs增殖及细胞周期具有调控作用,其机制可能与影响Cyclin D1 mRNA和Caspase 2 mRNA的表达有关.     

β-榄香烯抑制人骨髓瘤细胞RPMI-8226增殖的实验研究

目的 研究β-榄香烯对人骨髓瘤RPMI-8226细胞增殖、周期和凋亡的影响.方法 用噻唑蓝(MTT)法检测β-榄香烯对骨髓瘤RPMI-8226细胞增殖的影响;Annexin V/ PI双标流式术检测β-榄香烯对骨髓瘤RPMI-8226细胞周期、细胞凋亡的影响;Hoechst33342/PI 双染荧光显微镜观察β-榄香烯处理后骨髓瘤RPMI-8226细胞形态学变化.结果 β-榄香烯对RPMI-8226骨髓瘤细胞生长具有显著抑制作用,呈浓度和时间依赖性.β-榄香烯处理后,与对照组相比G0/G1细胞比例显著升高,而S、 G2/M细胞比例降低.β-榄香烯作用48 h可诱导骨髓瘤细胞凋亡,凋亡率随药物浓度而递增.结论 β-榄香烯可有效抑制人骨髓瘤细胞增殖;其抑制作用与细胞周期阻滞和细胞凋亡激活有关.     

β-榄香烯抗肿瘤作用机制研究概况

β-榄香烯（Elemene）是从姜科植物莪术中提取的萜烯类化合物,近30年来对莪术抗肿瘤的作用机制进行了广泛的研究,基础及临床实验等研究结果表明,β-榄香烯是莪术抗肿瘤作用的主要物质基础,具有抗瘤谱广、疗效确切、毒副作用小等特点。诱导凋亡是β-榄香烯抗肿瘤作用的主要机制,同时β-榄香烯还具有抑制转移、抗多药耐药、抗肿瘤免疫、化疗增效、放疗增敏等作用,现就β-榄香烯抗肿瘤作用机制进行综述。     

β-榄香烯诱导肿瘤细胞凋亡作用机制研究的探讨

β-榄香烯是近年来我国首先从活血化瘀中药莪术挥发油中筛选出的一种抗癌有效成分。因其具有抗瘤谱广、毒副作用小的特点而有着广阔的临床应用前景。大量药理实验表明β-榄香烯的抗瘤作用机理涉及多个方面，主要包括：(1)抑制肿瘤细胞DNA和RNA的合成；(2)诱导细胞调亡与分化；(3)抗瘤免疫保护作用；(4)消除自由基；(5)逆转肿瘤多药耐药作用等。     

β-榄香烯与核酸的结合作用

本文中用DNA热变性实验及荧光分析法研究了β-榄香烯与小牛胸腺DNA的结合作用．热变性实验表明β-榄香烯可使小牛胸腺DNA的热变性温度Tm值下降2℃，小牛胸腺DNA(30μg／ml)与β-榄香烯(20μg／ml)温育后．激发波长为3．4nm,发射波长为358nm,其荧光强度为0．315，此时小牛胸腺DNA(30μg／ml)的荧光强度仅为0．020,用酵母的t-RNA与-β-榄香烯实验也取得类似的结果。对β-榄香烯的抑癌机理用量子化学CNDO／2方法计算的结果进行了探讨。β-榄香烯的前沿轨道能级ELUMO=0．0168 au EHOMO=03239au鸟嘌呤的ELUMO=0．1629au其EHOMO=-0．25960au胸腺嘧啶的ELUMO=0．1324au．其EHUMO=0.3550au脲嘧啶的ELUMO-=0．0888au其EHOMO=-03940au。上述计算结果提示β-榄香烯与核酸碱基的前沿轨道之间的相互作用；因β-榄香烯上的一个甲基带有较正的静电荷，该甲基可能与核酸碱基上的氮原子存在分子间选择性疏水作用。     

β-榄香烯脂质体在大鼠体内的组织分布

目的 考察β-榄香烯脂质体在大鼠体内的组织分布.方法 建立了大鼠体内β-榄香烯测定的HPLC.色谱条件为:Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm&#215;250 mm,5μm);流动相为甲醇-乙腈-水(40:57:3);检测波长:210 nm;柱温:30℃.并测定大鼠尾静脉注射β-榄香烯脂质体和榄香烯注射液后血浆及组织中的药物浓度.结果 此色谱条件下血浆与组织的标准曲线、精密度等实验结果表明,该方法适于分析生物样品中β-榄香烯含量.与榄香烯注射液相比,β-榄香烯脂质体在大鼠体内的分布特性有不同程度的改变,其中β-榄香烯脂质体在肝、脾、肾组织中分布相对较多.结论 β-榄香烯脂质体及榄香烯注射液在大鼠的心、脾、肾组织中分布具有显著性差异.     

β-榄香烯干预人肝细胞癌HepG2细胞蛋白质组学研究

【目的】通过观察不同浓度β-榄香烯作用于体外培养人肝细胞癌Hep G2细胞的产生的差异性蛋白质表达,筛选β-榄香烯防治肝癌的作用靶点。【方法】于体外常规条件下,以0、10、30μg/m Lβ-榄香烯培养基孵育人肝细胞癌Hep G2 24 h,提取蛋白质后采用十二烷基硫酰钠—聚丙烯酸胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)分离蛋白,选取表达量升高或降低3倍以上的蛋白质点进行质谱鉴定,随后运用Protein Chip PBS1j-C型蛋白质芯片阅读仪将其检测绘制成蛋白质质谱。使用GPS Explore V 3.6软件对所有蛋白质质谱进行分析,并通过MASCOT V 2.1搜库软件进行检索,以鉴定蛋白质质点。【结果】通过对β-榄香烯处理前后肝癌Hep G2细胞蛋白双向凝胶电泳图谱分析,共得到91个差异蛋白质点。选择表达量差异明显的53个蛋白质点进行质谱分析,得到具有统计学意义的差异蛋白质点9个,其中表达上调3个,分别是UBE2V1、SF1、Annexin V;表达下调6个,分别是β-Actin、S100A6、HSP70、Keratin4、FUBP1、Keratin18。【结论】β-榄香烯可影响人肝细胞癌Hep G2细胞的蛋白质表达,这些蛋白质可能是β-榄香烯防治肝癌的作用靶点。