慢性丙型肝炎患者外周血滤泡辅助性T淋巴细胞表面PD-1受体表达及意义研究*

目的 探讨不同血清病毒载量的慢性丙型肝炎（CHC）患者外周血滤泡辅助性T淋巴细胞（Tfh）表面程序性死亡受体-1（PD-1）表达情况。方法 根据血清HCV RNA水平不同,将180例CHC患者分为低病毒载量组76例,3 lg copies/ml≤血清HCV RNA<6 lg copies/ml和高病毒载量组104例,血清HCV RNA≥6 lg copies/ml。比较两组外周血Tfh细胞百分比、Tfh细胞表面PD-1阳性率、外周血T、B淋巴细胞亚群、外周血CD4⁺T淋巴细胞和CD8⁺T淋巴细胞表面PD-1表达和血清白细胞介素21（IL-21）水平的差异。结果 低病毒载量组和高病毒载量组血清HCV RNA水平分别为（4.5±1.2）lg copies/ml和（6.4±0.7）lg copies/ml,Tfh细胞表面PD-1阳性百分比分别为（26.2±2.2）%和（37.2±1.1）%,Tfh细胞百分比分别为（7.9±0.7）%和（5.1±0.4）%,血清IL-21水平分别为（46.8±1.3） ng/L和（21.7±1.1） ng/L,差异均有统计学意义（P<0.01）;低病毒载量组和高病毒载量组外周血CD4⁺T细胞百分比分别为（51.1±4.6）%和（37.6±4.4）%,CD8⁺T细胞百分比分别为（24.0±3.1）%和（31.7±3.9）%, CD4⁺T/CD8⁺T细胞比值分别为（3.3±0.2）和（2.3±0.1）,CD19⁺B细胞百分比分别为（16.7±3.9）%和（11.8±3.2）%,差异具有统计学意义（P<0.01）;低病毒载量组和高病毒载量组外周血CD4⁺T细胞表面PD-1阳性率分别为（10.1±2.3）%和（2.4±0.6）%],CD8⁺T细胞表面PD-1阳性率分别为（6.3±2.2）%和（1.0±0.3）%,差异也具有统计学意义（P<0.01）。结论 不同血清病毒载量的CHC患者外周血Tfh和T淋巴细胞亚群以及血清白细胞介素21水平存在显著差异,进一步探讨它们对病情、抗病毒治疗应答和预后的关系,将具有十分重要的临床意义。     

慢性乙型肝炎患者外周血中滤泡辅助性T淋巴细胞的表达特征

目的研究滤泡辅助性T淋巴细胞(Tfh)在慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血中的表达特征。方法选取2016年3月-2017年3月新疆医科大学附属中医医院肝病科收治的CHB患者53例,采集患者清晨空腹静脉血,采用流式细胞术检测患者外周血Tfh及其亚群。另纳入同期48例健康人群作为对照。正态分布的计量资料2组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。非正态分布的计量资料2组间比较采用Mann-Whitney U检验;多组间比较采用Kruskal-Wallis H检验,进一步两两比较采用Mann-Whitney U检验。计数资料组间比较采用χ~2检验或Fisher精确概率法。相关性分析采用Pearson相关分析法。结果 CHB患者CD4~+ICOS~+、CD4~+CXCR5~+及CD4~+ICOS~+CXCR5~+比例均显著高于对照组(Z=-4.319,P0.001;t=3.742,P0.001;t=15.948,P0.001)。CD4~+ICOS~+、CD4~+CXCR5~+及CD4~+ICOS~+CXCR5~+比例在CHB患者不同免疫分期,即低水平复制期、免疫耐受期及免疫清除期不同阶段的差异均无统计学意义(P值均0.05)。HBs Ag定量、HBV DNA与CD4~+ICOS~+CXCR5~+均无相关性(P值均0.05)。结论 Tfh参与了HBV所介导的免疫反应,通过调节体液免疫应答来实现抗HBV作用。     

慢性丙型肝炎肝硬化患者外周血辅助性T淋巴细胞17/调节性T淋巴细胞及相关因子检测的临床意义

目的探讨丙型肝炎肝硬化(CHC-LC)患者外周血Th17/Treg失衡及其相关细胞因子变化的临床意义。方法收集2014年5月-2016年5月于天门市第一人民医院就诊的CHC患者96例,其中CHC患者54例(CHC组)、CHC-LC患者42例(LC组)、健康体检者40例(HC组)。采用流式细胞术检测3组的外周血Th17/Treg细胞表达情况,采用ELISA法检测血清IL-6、IL-10、IL-17及TGFβ,同时检测HCV RNA、AST、ALT、TBil。多组比较采用方差分析,进一步两组间比较采用SNK-q检验;计数资料组间比较采用χ2检验;相关性分析采用Pearson相关性分析法。结果 LC组的外周血Th17细胞比率[(5.97±0.84)%]、Treg细胞比率[(3.14±0.72)%]、Th17/Treg(1.90±0.52)均显著高于HC组[(2.39±0.46)%、(1.72±0.53)%、(1.39±0.12)]和CHC组[(4.75±0.67)%、(2.81±0.87)%、(1.69±0.45)],差异均有统计学意义(F值分别为312.95、47.21、17.34,P值均0.001)。LC组的各细胞因子IL-6、IL-17、IL-10及TGFβ均显著高于HC组和CHC组,差异均有统计学意义(F值分别为160.38、574.11、23.90、36.97,P值均0.001)。Th17细胞比率、Treg细胞比率、Th17/Treg及各细胞因子(IL-17、IL-6、IL-10、TGFβ)与ALT、AST呈显著正相关性(ALT:r值分别为0.633、0.525、0.631、0.931、0.841、0.372、0.343,P值均0.05;AST:r值分别为0.597、0.502、0.564、0.873、0.813、0.365、0.337,P值均0.05),Th17细胞比率、Treg细胞比率、IL-6、IL-17、TGFβ与TBil均呈显著正相关性(r值分别为0.344、0.231、0.401、0.339、0.307,P值均0.05)。结论 Th17/Treg细胞及相关因子可能与CHC及LC的发生发展密切相关,Th17/Treg及其相关细胞因子检测可能对CHC-LC的防治具有重要意义。     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血淋巴细胞维生素D3受体表达改变及意义

近来研究表明，维生素D3对免疫系统的影响是通过其生物活性形式——1，25-二羟维生素D3[1，25-（OH）2I）3]与T淋巴细胞上维生素D3受体（VDR）结合而发挥作用。原发性胆汁性肝硬化（PBC）是一种有遗传易感性、由免疫介导的、以线粒体抗体阳性、IgM升高和小叶间胆管、分隔胆管的炎症性损伤为特征的慢性胆汁淤积性疾病。本文旨在观察PBC患者外周血1，25-（OH）。D3水平与淋巴细胞VDR表达的变化，探讨1，25-（OH）2D3及VDR改变在PBC防治中的价值。     

自身免疫性肝炎患者外周血CD8~+T淋巴细胞PD-1表达及意义

目的研究自身免疫性肝炎患者外周血CD8+T淋巴细胞程序性死亡受体1(PD-1)表达的变化。方法选择自身免疫性肝炎患者22例和健康人20例,使用流式细胞仪检测所有被研究者外周血CD8+T淋巴细胞PD-1分子的表达状况,比较不同分期和不同性别疾病患者PD-1表达水平。结果自身免疫性肝炎患者外周血CD8+T淋巴细胞PD-1分子阳性百分比为2.5±0.5%,显著高于健康对照组(0.5±0.1%,P<0.001);自身免疫性肝炎发病期患者CD8+T淋巴细胞表达PD-1百分比为2.6±0.7%,与缓解期比无统计学差异(3.4±0.8%);16例女性AIH患者外周血CD8+T淋巴细胞PD-1阳性百分比为3.5±0.7%,亦略高于6例男性患者的1.3±0.3%,但无显著统计学差异(P=0.1021),可能与例数较少有关。结论自身免疫性肝炎患者CD8+T淋巴细胞PD-1表达率增加,PD-1可能在自身免疫性肝炎的发病中起了重要作用。     

HBV携带者外周血中辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2相关细胞因子的研究

目的：研究慢性HBV携带者外周血中辅助性T淋巴细胞1（Th1）/辅助性T淋巴细胞2（Th2）相关细胞因子白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素4（IL-4）及γ干扰素（γ-IFN）随患者体内病毒含量变化时的变化及其意义。方法：通过荧光定量方法检测86名慢性HBV携带者体内的病毒载量,而后根据病毒载量值将患者分为HBV DNA阴性组、HBV DNA低载量组、HBV DNA高载量组;通过ELISA方法检测86名慢性HBV携带者及39名正常人血清中IL-2、IL-4及γ-IFN的含量。结果：各患者组外周血清中IL-2的含量比正常组增高,且HBV DNA低载量组、HBV DNA高载量组与正常组比较,差异有统计学意义（F=3.055,P=0.031）;各患者组外周血清中IL-4的含量比正常组增高,HBV DNA高载量组与正常组比较,差异有统计学意义（F=2.486,P=0.064）;各患者组外周血清中γ-IFN的含量与正常组相比,差异无统计学意义（F=0.063,P=0.976）。结论：慢性HBV携带者体内存在Th1/Th2平衡紊乱,且可能Th1存在免疫功能障碍是形成的机制之一。     

慢性丙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚型和NK活性的研究

本研究为上海市科委发展基金资助项目（ＮＯ．９６Ｂ２２）ＨＣＶ感染引起的肝细胞损害多被认为与ＨＣＶ直接损害和人体免疫应答及免疫调节功能紊乱有关、本研究主要观察慢性丙型肝炎患者外周Ｔ淋巴细胞亚型及ＮＫ活性的改变，探讨患者细胞免疫功能在其发病机制中的作用。我院门诊慢性丙型肝炎患者共３２例，其中男性１８例，女性１４例，年龄２２～６７岁，平均年龄３９．４岁。选择标准：①血清ＨＣＶＲＮＡ（ＲＴ－ＰＣＲ法）和（或）抗－ＨＣＶ阳性；②伴有肝功能异常：血清胆红素、ＡＬＴ、γ－ＧＴ、白蛋白、透明质酸及血浆凝血酶原时…     

不稳定型心绞痛患者外周血辅助性T淋巴细胞功能失衡的意义

目的:探讨不稳定型心绞痛患者(UAP)外周血辅助性T淋巴(Th)细胞亚群功能失衡及意义。方法:采用流式细胞分析法,对22例UA患者、20例稳定型心绞痛患者(SAP)和21例胸痛综合征(CPS)患者外周血CD4+细胞内细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)进行动态监测。结果:UAP患者发病24 h内Th1型细胞因子IFN-γ的表达增高(20.6%),明显高于SAP组(11.3%)和CPS组(10.7%),而SAP组和CPS组间差异无统计学意义;各组间Th2型细胞因子IL-4水平差异无统计学意义。UAP患者IFN-γ高表达持续时间较短,发病1周后恢复(11.7%)。结论:UAP患者存在T细胞亚群功能失衡,主要表现为Th1细胞功能亢进,可能是其发病机制之一。     

乙型肝炎病毒基因型与滤泡辅助性T淋巴细胞的关系及其意义

我国的HBV基因型以B基因型和C基因型为主.C基因型感染者血清HBV DNA水平较高,肝组织学活动度较高,ALT反复或持续波动,其机制目前还不十分清楚.本研究通过比较慢性乙型肝炎(CHB)患者HBV B和C基因型感染者之间滤泡辅助性T淋巴细胞(Tfh)、IL-21、HBV特异性CTL、非特异性CTL、HBV DNA和ALT水平,探讨不同基因型对血清HBV DNA和ALT水平影响的差异的可能机制.     

外周血T细胞表面PD-1在慢性乙型肝炎患者干扰素治疗期间的表达

目的:观察慢性HBV感染(CHB)免疫清除期PD-1的表达状态以及干扰素抗病毒治疗期间T细胞PD-1的表达,明确免疫清除期CHB患者PD-1表达的临床意义.方法:伴有长期ALT反复升高的CHB患者20例被纳入本研究,所有病例均接受为期6 mo的Peg干扰素(1.5μg/kg)抗病毒治疗,每周1次.应用流式细胞术对所有患者抗病毒治疗不同时间点(0、12、24 wk)的外周血总CD8+T细胞和CD4+T细胞PD-1表达百分比和表达强度进行检测.结果:免疫清除期CHB患者外周血总CD8+T细胞和CD4+T细胞PD-1阳性率和PD-1表达荧光强度均明显高于健康对照组(P<0.05);PEG干扰素治疗早期CD8+T细胞PD-1阳性率呈现明显下降,且CD8+T细胞PD-1表达阳性率同ALT水平和病毒水平均呈现明显正相关(R2=0.22,0.357,P=0.001,0.002).结论:CHB患者外周血T细胞PD-1呈高表达:干扰素治疗诱导的病毒水平下降可导致CD8+T细胞PD-1表达明显下降.     

慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞凋亡变化及其意义

研究证实．乙肝病毒（HBV）感染可诱发人体免疫反应（尤其是细胞免疫反应）。外周血淋巴细胞的功能状态与病情转归密切相关。近年发现,T淋巴细胞的凋亡与乙型肝炎（乙肝）慢性化有密切关系,对细胞凋亡基因的研究成为热点。     

甲型肝炎患者外周血T淋巴细胞表面白细胞介素2受体测定

甲型肝炎患者外周血Ｔ淋巴细胞表面白细胞介素２受体测定张海，李国栋，张文玉本文作者运用红细胞花环法检测了８４例甲型肝炎（甲肝）患者外周血Ｔ淋巴细胞表面白细胞介素２受体（ｍＩＬ－２Ｒ）水平，并探讨了ｍＩＬ－２Ｒ在甲肝发病机制中的作用，现将观察结果报告如下...     

慢性乙型肝炎患者外周血中调节性T淋巴细胞、Ⅰ型调节性T淋巴细胞和辅助性T淋巴细胞17的表达特点及临床意义

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+(Treg)、CD4+CD25+IL-10+(Tr1)和CD4+IL-17+(Th17)的表达特点及其与CHB病情的关系。方法选取2013年1月至2014年6月解放军第一八○医院收治的轻中度CHB患者和重度CHB患者各40例,另选取同期无肝病诊断史的健康人40例为对照。分别抽取CHB患者及对照者的外周血,以流式细胞术检测外周血中Treg、Tr1和Th17表达水平,real time-PCR检测血清中Foxp3、RORγt mRNA水平,ELISA检测患者血清中TGFβ1、IL-10、IL-17表达水平。计量资料组间比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果轻中度和重度CHB患者与对照组相比,Treg、Tr1和Th17的百分率,转录因子Foxp3、RORγt表达水平,细胞因子TGFβ1、IL-10、IL-17水平均明显高于健康对照组(P值均0.05);而Treg/Th17和Foxp3/RORγt值显著低于对照组(P值均0.05)。与轻中度CHB患者相比,重度CHB患者Treg、Tr1和Th17的百分率,Foxp3、RORγt表达水平,TGFβ1、IL-10、IL-17水平均显著升高(P值均0.05);Treg/Th17和Foxp3/RORγt值显著降低(P值均0.05)。结论 CHB患者中Treg(特别是Tr1)和Th17的表达失衡程度与CHB病情进展呈正相关,因此,对于CHB患者,纠正Treg(特别是Tr1)和Th17表达失衡可能是很重要的治疗措施,同时监测Treg(特别是Tr1)和Th17的表达比例改变,对于估计CHB患者病情预后、指导临床治疗有积极作用。     

乙型肝炎肝硬化患者外周血T细胞PD-1和PD-L1表达水平及意义

目的探讨乙型肝炎肝硬化患者外周血T淋巴细胞程序性死亡分子-1(PD-1)及其主要配体PD-L1的表达情况。方法在50例乙型肝炎肝硬化患者和25例健康体检者,使用流式细胞仪检测外周血T细胞PD-1和PD-L1表达;采用荧光定量核酸扩增及测序法检测血清HBV DNA载量。结果对照组和肝硬化组外周血T细胞PD-1阳性表达率分别为11.93±1.23%和33.13±3.38%(P<0.05),PD-L1阳性表达率分别为10.59±1.88%和32.47±2.18%(P<0.05);Child-Pugh A级(30.58±2.99%和32.19±1.44%)、B级(34.61±1.43%和33.46±2.58%)和C级(34.2±2.31%和31.76±2.33%)患者外周血T细胞PD-1和PD-L1表达率无显著性相差(P>0.05);在肝硬化患者,T细胞表面PD-l和PD-Ll表达水平与血清HBV DNA载量呈明显正相关(r2=0.8326和:r2=0.643,P<0.05)。结论肝硬化患者外周血T细胞PD-1和PD-L1表达水平明显上调,且与血清HBV DNA载量呈明显正相关,提示T细胞高表达的PD-1可能通过与其配体PD-L1作用而抑制T细胞免疫应答,并导致病毒感染持续。     

PD-1分子对慢性丙型肝炎患者T细胞免疫功能的影响

目的 探讨慢性丙型肝炎患者外周血T细胞表面程序性死亡因子-1（PD-1）分子在T细胞免疫应答中的作用。方法受试对象包括40例慢性丙型肝炎患者,10例非病毒性肝炎的肝病患者,以及20名健康对照。取外周血,采用流式细胞术检测CD4^＋及CD8^＋T细胞上PD-1的表达水平;ELIsA法测定混合淋巴细胞培养上清中IFN—γ及IL-2的浓度。结果慢性丙型肝炎患者外周血CD4^＋及CD8^＋T细胞上PD-1阳性表达率[（38．61±4．35）％、（48．17±5．16）％]明显高于其他肝病患者及健康对照（P〈0．01）。慢性丙型肝炎患者产生Ⅰ型细胞因子的能力明显降低,阻断PD-1共刺激信号途径能够增强患者T细胞分泌I型细胞因子的能力。结论慢性丙型肝炎患者外周血T细胞上PD-1表达水平的升高,可能是导致T淋巴细胞应答能力下降的重要原因。     

慢性丙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群的特征及临床意义

目的 探讨外周血淋巴细胞亚群在慢性丙型肝炎患者中变化的特征及其临床意义。方法 选取2018年1月至2022年7月入院诊治慢性丙型肝炎患者138例,同期健康体检者72例。根据临床表现将患者分为单纯慢性丙型肝炎组58例,丙型肝炎肝硬化失代偿组31例和丙型肝炎早期肝硬化组49例,比较患者和健康对照组临床特征、淋巴细胞计数以及多种亚群所占的百分比。结果 慢性丙型肝炎组ALT、AST和总胆红素水平分别29.6(18.2,47.8)U/L、33.6(24.4,50.1)U/L和25.5(18.5,63.6)μmol/L,显著高于对照组的21.5(16.8,26.5)U/L、23.5(15.7,30.2)U/L和16.6(13.6,26.1)μmol/L,而Hb水平为78.2(64.2,105.3)g/L,显著低于对照组的97.3(78.1,118.9)g/L,(均P<0.05)。单纯慢性丙型肝炎组CD45⁺CD3⁺CD4⁺细胞的绝对值、CD45⁺CD3⁺CD8⁺...     

外周血T淋巴细胞亚群和慢性丙型肝炎患者HCV复制程度关系的研究

目的分析外周血T淋巴细胞亚群和慢性丙型病毒性肝炎(chronic hepatitis C,CHC)患者的丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)复制程度的关系。方法选取上海市第七人民医院收治的CHC患者65例和健康体检者20名,流式细胞仪检测外周血中的T细胞亚群,荧光定量PCR法检测患者血清HCV RNA复制程度。结果 CD3+T细胞亚群在两组人群中分布相比,差异无统计学意义(P0.05);CD4+T细胞亚群在CHC患者中分布明显低于健康体检者(P0.05),而CD8+T细胞亚群在CHC患者中分布明显高于健康体检者(P0.05)。CD3+T细胞亚群百分率与HCV复制程度无明显相关性(P0.05);CD4+T细胞亚群、CD8+T细胞亚群百分率和CD4+/CD8+比值与HCV复制程度有明显相关性(P0.05)。结论 CHC患者外周血T淋巴细胞亚群比例改变与导致HCV感染慢性化密切相关。HCV RNA复制程度增加进一步导致T细胞亚群紊乱,CD4+/CD8+比值的动态变化可提示HCV感染者细胞免疫功能的变化。     

慢性丙型肝炎外周血T淋巴细胞亚群变化及干扰素对其影响

本文应用CD_3、CD_4、CD_8单克隆抗体酶标试剂检测44例慢性丙型病毒性肝炎(慢丙肝)患者外周血T淋巴细胞亚群,其结果与20例正常人比较,显示CD_3、CD_4、CD_4/CD_8比值明显降低,CD_8则明显升高;其中34例慢丙肝接受了国产基因工程干扰素α_1治疗,治疗前后CD_3、CD_4、CD_8、CD_4/CD_8比值与10例对照组比较均无明显差异。研究结果表明,慢丙肝体内存在T淋巴细胞比例失衡;国产基因工程干扰素α_1对调节细胞免疫功能不理想。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD8+T淋巴细胞表面程序性死亡受体-1表达上调的意义

程序性死亡受体-1(PD-1)主要表达于活化的淋巴细胞和单核细胞,尤其是体内活化的T淋巴细胞表面[1],负性调节其活化、增殖和细胞因子的产生[2-3],使人类免疫缺陷病毒(HIV)[4]、HCC[5]、HBV[6-7]等慢性感染过程中患者的病毒特异性CD8+细胞毒性T淋巴细胞(CTL)功能受到抑制,从而造成持续性感染状态.