动脉灌注化疗栓塞联合放射粒子植入治疗原发性肝癌患者疗效及其对肝组织TRF1和TRF2表达的影响*

目的 探讨动脉灌注化疗栓塞术（TACE）联合放射粒子植入治疗原发性肝癌（PLC）患者疗效及其对肝组织端粒重复序列结合因子（TRF）1和TRF2表达的影响。方法 2012年12月~2015年12月我院诊治的108例PLC患者,采用抛硬币法随机分为观察组54例和对照组54例。对照组接受单纯TACE治疗,观察组在TACE治疗的基础上接受¹²⁵I放射粒子植入治疗。肝穿取得肝组织,采用SP法检测肝组织TRF1和TRF2表达情况。结果 在治疗3 m末,观察组客观缓解率为79.6%,显著高于对照组的61.1%（x²=4.441,P<0.05）;观察组血清CEA和AFP水平分别为（273.7±38.1） ng/ml和（820.4±130.3） μg/L,显著低于对照组的【（312.5±33.9） ng/ml和（1080.1±121.3） μg/L,P<0.01】;观察组癌旁肝组织TRF1表达量为（9.7±2.3）,显著高于癌组织的【（4.2±1.8）,P<0.01】,而观察组癌组织TRF2表达量为（9.2±2.2）,显著高于癌旁肝组织的【（3.8±2.6）,P<0.01】;观察组1 a生存率显著高于对照组[96.3%（52/54）对85.2%（46/54）,x²=3.967,P=0.046]。结论 采用TACE联合放射粒子植入术治疗PLC患者安全有效,能够有效降低外周血肿瘤标志物水平,调节肝癌组织TRF1和TRF2表达,抑制肿瘤组织的生长,阻止病情进展,有利于患者康复。     

125I放射粒子植入联合肝动脉栓塞术对原发性肝癌的疗效及对肝脏TRF1和TRF2表达影响

目的研究125I放射粒子植入联合肝动脉栓塞术对原发性肝癌的疗效及对肝脏端粒重复序列结合因子(TRF)1和TRF2表达影响。方法研究对象选取我院2016年12月到2017年12月间收治的原发性肝癌患者96例,采用随机数字法将其分为TACE组和联合组,每组各58例。TACE组患者予以动脉灌注化疗栓塞术(TACE)治疗,联合组患者予以125I放射粒子植入联合TACE治疗。比较两组患者近期疗效,比较两组患者血清癌胚抗原(CEA)和甲胎蛋白(AFP)水平,比较联合组患者治疗后肝脏的TRF1和TRF2表达水平。结果治疗3个月后,TACE组患者客观缓解率为60.34%(35/58),联合组患者客观缓解率为77.58%(45/58),TACE组患者客观缓解率显著低于联合组患者客观缓解率,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,TACE组患者血清CEA、血清AFP水平均显著高于联合组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗1个月后,联合组患者肝脏TRF1表达水平显著高于治疗前,肝脏TRF2表达水平显著低于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访1年,TACE组患者1年生存率为79.31%(46/58),联合组患者1年生存率为94.83%(55/58),TACE组患者1年生存率显著低于联合组患者1年生存率,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论125I放射粒子植入联合TACE治疗原发性肝癌的近期疗效更加显著,能够有效缩小肿瘤组织体积,降低患者血清肿瘤标志物水平,提高机体对化疗药物的敏感性,调节肝脏癌变病灶处TRF1和TRF2水平表达,从而抑制肝癌组织生长,延缓肝癌发展,值得在临床推广。     

胆管细胞癌细胞CD147表达及其临床意义

目的探讨CD147在肝胆管结石并发胆管细胞癌(ICC)组织的表达及其临床意义。方法收集肝胆管结石并发ICC标本30例、对应的癌旁肝组织标本30例和正常肝标本10例。采用q RT-PCR法检测组织CD147m RNA水平,采用免疫组化法检测CD147蛋白的表达;采用Western-Blotting法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和9(MMP-9)蛋白的表达;采用肯德尔(Kendall)等级相关分析CD147 m RNA、CD147、MMP-2和MMP-9表达的相关性。结果经q RT-PCR检测显示,肝胆管结石并发ICC组织CD147m RNA水平为(3.67±1.88),显著高于癌旁组织【(1.52±0.57),P0.01】和正常肝组织【(1.05±0.32),P0.01】,癌旁组织高于正常肝组织(P0.01);5 cm ICC组织CD147 m RNA相对水平(2.73±0.97)显著高于5 cm肿瘤组织【(1.03±0.32),P0.01】,有淋巴转移(2.68±0.74)组织显著高于无转移组织【(1.07±0.44),P0.01】,肿瘤分化程度低组织(2.71±0.86)显著高于中高分化组织【(1.06±0.42),P0.01】;不同年龄和性别患者ICC组织CD147 m RNA水平无显著性差异(P0.05);经免疫组化检测显示,肝胆管结石并发ICC组织CD147蛋白表达相对水平为(27.95±4.90),显著高于癌旁组织【(13.34±9.59),P0.01】和正常肝组织【(2.18±0.66),P0.01】,而癌旁组织高于正常肝组织(P0.01);ICC组织MMP2表达量为(1.06±0.13),显著高于癌旁组织【(0.20±0.03),P0.01】和正常肝组织【(0.15±0.02),P0.01】,而癌旁组织MMP2表达量显著高于正常肝组织(P0.01);肝胆管结石并发ICC组织MMP9表达量为(0.93±0.12),显著高于癌旁组织【(0.17±0.03),P0.01】和正常肝组织【(0.15±0.03),P0.01】,而癌旁组织MMP9表达量显著高于正常肝组织(P0.01);在ICC组织中,CD147m RNA水平与MMP2蛋白表达呈正相关(r=0.457,P0.05);CD147m RNA水平与MMP9蛋白表达也呈正相关(r=0.428,P0.05);CD147蛋白与MMP2蛋白表达呈正相关(r=0.543,P0.05),CD147蛋白与MMP9蛋白表达也呈正相关(r=0.517,P=0.05)。结论 CD147 m RNA、CD147、MMP2、MMP9均在肝胆管结石并发ICC组织中表达增强,CD147的表达可能促进了MMP2和MMP9的表达上调,它们可能共同参与了胆管癌的发生和发展过程。     

射波刀联合经肝动脉化疗栓塞治疗原发性肝癌患者疗效研究*

目的 观察采用射波刀联合经肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗原发性肝癌(PLC)患者的疗效。方法 2016年1月～2019年5月在我院肝病科和上海长海医院诊治的PLC患者58例,被随机分为TACE治疗组29例和TACE联合射波刀立体定向放射治疗29例。结果 术后随访,联合组总有效率为82.8%,显著高于TACE组的58.6%(P<0.05);治疗后,联合组血清血管内皮生长因子(VEGF)水平为(200.4±20.6)pg/ml,显著低于TACE组【(326.5±31.5)pg/ml,P<0.05】,基质金属蛋白酶(MMP)水平为(30.16±28.9)ng/L,显著低于TACE组【(74.2±7.5)ng/L,P<0.05】,甲胎蛋白(AFP)水平为(632.5±60.3)μg/L,显著低于TACE组【794.6±71.8)μg/L,P<0.05】;治疗后,联合组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平为(48.4±2.7)U/L,显著高于TACE组【(35.4±4.0)U/L,P<0.05】;联合组不良反应发生率为44.8%,与TACE组的48.3%比,无显著性差异(P>0.05)。结论 采用TACE联合射波刀立体定向放射治疗PLC患者具有较好的临床疗效,其远期效果还有待于进一步观察。     

单次大剂量肝区放射照射治疗原发性肝癌肝区疼痛患者效果研究

目的 探讨单次大剂量肝区放射照射治疗原发性肝癌(PLC)出现肝区疼痛患者对生存质量的影响。方法 2018年6月～2021年6月我院收治的PLC出现肝区疼痛患者76例,采用随机数字表法将其分为观察组38例和对照组38例,给予两组患者支持治疗,观察组在此治疗的基础上行单次大剂量肝区放射照射治疗。随访60 d。应用疼痛简明量表(BPI)评估疼痛,应用欧洲组织癌症研究和治疗量表(EORTCQLQ-C30)评估生存质量。结果 在治疗后1 m,观察组BPI评分为(1.7±0.8)分,显著低于对照组【(3.4±1.3)分,P<0.05】; EORTCQLQ-C30的功能领域和总体健康状况/生命质量领域评分分别为(47.2±7.0)分和(12.7±1.2)分,显著高于对照组【分别为(35.6±6.0)分和(8.6±0.8)分,P<0.05】,而症状和单项测量评分分别为(10.2±2.2)分和(15.4±3.1)分,显著低于对照组【分别为(18.1±5.0)分和(19.6±4.2)分,P<0.05】;在放疗期间,未发生放疗死亡事件,出现恶心呕吐、乏力和纳差等症状24例(63.2%),发...     

原发性肝癌患者癌组织NLRP3炎性小体表达状况研究

目的 研究原发性肝癌患者癌组织核苷酸结合寡聚化结构域富含脓素亮氨酸重复序列结构域3(NLRP3)炎性小体表达情况。方法 2017年1月～2018年1月我院诊治的原发性肝癌(PLC)患者34例和同期因肝胆管结石切除的肝组织标本30份,采用免疫组织化学法检测肝组织NLRP3炎性小体表达,采用RT-PCR法检测肝组织NLRP3 mRNA 水平,采用ELISA法检测血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平,采用蛋白印记法检测肝组织NLRP3炎性小体、细胞钙依粘连蛋白、波形蛋白和半胱氨酸蛋白酶-1表达。结果 肝癌组织细胞NLRP3炎性小体阳性率为76.5%,显著高于正常对照组的23.3%(P<0.05);肝癌组织NLRP3 mRNA水平为(-2.58±0.35),显著高于正常肝组织【(0.00±0.24),P<0.05】;PLC患者血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平分别为(17.25±3.36) pg/ml、(60.32±8.14) pg/ml 和(24.68±3.58) pg/ml,显著高于对照组【(10.35±1.25) pg/ml、(33.21±4.20) pg/ml和(10.36±2.54) pg/ml, P<0.05】;正常对照组肝组织钙依粘连蛋白水平为(1.2±0.15),显著高于肝癌组【(0.41±0.04), P<0.05】,而半胱氨酸蛋白酶-1和波形蛋白水平为(0.21±0.03)和(0.42±0.06),显著低于肝癌组【(1.49±0.12)和(1.51±0.14), P<0.05】。结论 原发性肝癌患者癌组织NLRP3炎性小体呈现高表达,可能会导致炎症反应并促进肝癌细胞的迁移。     

经ERCP置入胆道金属支架与PTCD治疗老年肝外胆道恶性梗阻患者临床疗效比较

目的观察比较经内镜逆行胰胆管造影(ERCP)放置胆道金属支架与经皮肝穿刺胆管引流术(PTCD治疗老年肝外胆道恶性梗阻患者的临床效果。方法 2014年10月～2017年10月我院收治的60例老年肝外胆道恶性梗阻患者,30接受PTCD治疗(对照组),另30例接受经ERCP胆道金属支架置入治疗(观察组)。随访1年。结果术后,观察组支架通畅时间为(225.4±52.6) d,显著长于对照组【(156.7±44.2) d,P0.05】,住院时间为(12.3±2.4)d,显著短于对照组【(19.9±4.1) d,P0.05】;观察组血清总胆红素为(110.2±60.1)μmol/L,显著低于对照组【(149.8±64.5)μmol/L,P0.05】,碱性磷酸酶为(216.8±127.6)IU/L,显著低于对照组【(312.9±149.5) I-U/L,P0.05】,谷氨酰转肽酶为(196.5±100.5) IU/L,显著低于对照组【(269.8±121.3) IU/L,P0.05】;观察组并发症发生率为10.0%,显著低于对照组的33.3%(P0.05);1 a生存率为30.0%,显著高于对照组的10.0%(x~2=3.922,P=0.045)。结论老年肝外胆道恶性梗阻患者接受经ERCP胆道金属支架置入治疗能短期降低黄疸,改善患者的肝功能指标,延长生存期。     

TACE联合射频消融治疗原发性肝癌患者疗效研究

目的 观察采用肝动脉化疗栓塞(TACE)联合射频消融(RFA)治疗原发性肝癌(PLC)患者的疗效。方法 2016年3月～2018年3月我院收治的PLC患者108例,采用随机数字表法将患者分为联合组和TACE组,每组54例。两组患者均接受TACE治疗,其中54例在TACE治疗的基础上联合RFA治疗。随访观察临床疗效和生存率。结果 联合组有效率为77.8%,疾病控制率为87.0%,显著高于TACE组的50.0%和70.4%(P＜0.05);治疗后,联合组血清总胆红素和甲胎蛋白水平分别为(24.0±6.7)μmol/L和(135.7±15.6)μg/L,显著低于TACE治疗组【分别为(28.3±8.2)μmol/L和(226.5±18.2)μg/L,P＜0.05);在治疗期间,联合组不良反应发生率为48.2%,与TACE组的51.9%比,差异无统计学意义(P＞0.05);联合组1 a生存率为75.0%(39/52),显著高于TACE组的47.2%(25/53),差异有统计学意义(x²=8.542,P=0.003)。结论 采用TACE联合RFA治疗PLC患者安全有效,可提高近期生存率,值得进一步研究。     

非酒精性脂肪性肝病大鼠内生性乙醇和肝组织乙醇代谢相关酶的变化

目的观察高脂饮食和高果糖饮食对大鼠肝脏病理、内生性乙醇、乙醇代谢酶的影响。方法将SD大鼠18只随机分为正常组(n=6),予以普通饲料喂养,高果糖组(n=6)接受普通饲料和含20%果糖水喂养,高脂组(n=6)接受高脂饲料喂养。造模16 w后,取肝组织进行非酒精性脂肪性肝病活动性评分(NAS);采用Biovison试剂盒检测门静脉血乙醇水平;采用实时荧光定量PCR法检测大鼠肝组织乙醇脱氢酶(ADH1)和乙醛脱氢酶(ALDH2)m RNA水平;采用Western blot法测定肝组织ADH1和ALDH2蛋白表达水平;使用乙醇脱氢酶活性试剂盒测定肝组织匀浆乙醇脱氢酶活性。结果在16 w末,高果糖组大鼠肝组织表现为脂肪变性,高脂组大鼠肝组织主要表现为NASH;高脂组大鼠NAS评分为5.40±0.32,显著高于对照组【(1.10±0.25),P0.05】和高果糖组【(2.94±0.40),P0.05】;高脂组大鼠血清内生性乙醇水平【(1.30±0.15)nmol/μL】显著高于正常组【(1.00±0.10)nmol/μL,P0.05)】和高果糖组【(1.04±0.23)nmol/μL,P0.05)】;高脂组大鼠ADH1 m RNA水平显著高于正常组((1.30倍,P0.05)和高果糖组(1.36倍,P0.05);高脂组大鼠ALDH2m RNA水平显著高于正常组(1.55倍,P0.05)和高果糖组(1.44倍,P0.05);高脂组大鼠ADH1蛋白表达显著高于正常组(2.56倍,P0.05)和高果糖组(2.52倍,P0.05);高脂组大鼠ALDH2蛋白表达显著高于正常组(1.41倍,P0.05)和高果糖组(1.57倍,P0.05);高脂组大鼠肝脏乙醇脱氢酶活性为(175±28)μ/L,显著高于正常组【(72±13)μ/L,P0.05)】和高果糖组【(78±9)μ/L,P0.05)】。结论高脂饮食造模大鼠内生性乙醇浓度显著升高,乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶蛋白水平升高,乙醇脱氢酶活性显著升高。     

甘草酸二铵脂质配位体对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织AMPK信号通路的影响

目的研究甘草酸二铵脂质配位体(DGLL)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠的治疗作用,并探讨其可能的作用机制。方法以高脂饲料喂养建立NAFLD大鼠模型,在造模成功后分别给予DGLL或多烯磷脂酰胆碱(PPC)灌胃16周。采用免疫组化法检测肝组织磷酸化的磷酸腺苷激活蛋白激酶α(P-AMPKα)蛋白表达,采用Real-time PCR法检测肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1(CPT-1)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)、酰基辅酶A氧化酶(ACO)、肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)m RNA。结果 DGLL组血清瘦素为(3.87±0.38)ng/ml,显著低于模型组【(4.68±0.39)ng/ml,P0.01】或PPC组【(4.55±0.24)ng/ml,P0.01】;DGLL组脂联素为(12.27±0.64)μg/ml,显著高于模型组【(10.46±0.28)μg/ml,P0.01】,但与PPC组【(12.13±0.56)μg/ml,P0.05】比,无统计学差异;DGLL组大鼠肝组织P-AMPKα蛋白阳性表达面积为(8.38±3.27)%,显著高于模型组【(1.81±0.90)%,P0.01】或PPC组【(5.50±0.73)%,P0.05】;DGLL组肝组织PPAR-γ、CPT-1、GLUT-4 m RNA水平分别为(1.07±0.14、0.91±0.05、1.61±0.54),显著高于模型组【分别为(0.26±0.12、0.14±0.01、0.10±0.03,P0.05】,但ACO m RNA水平(0.23±0.09)与模型组比,无统计学差异【(0.24±0.02),P0.05】;PPC组PPAR-γ和CPT-1 m RNA水平分别为(0.65±0.16)和(0.22±0.05),显著低于DGLL组(P0.05),而GLUT-4和ACO m RNA水平(1.32±0.12和0.14±0.05)与DGLL组比,无统计学差异(P0.05);DGLL组肝组织ACC m RNA水平为(1.67±0.23),显著低于模型组【(3.31±0.02),P0.05】或PPC组【(2.69±0.14),P0.05】;DGLL组L-FABP m RNA水平为(1.06±0.04),显著低于模型组【(1.26±0.02),P0.05】,而与PPC组【(1.06±0.09),P0.05】比,无统计学差异。结论 DGLL能降低NAFLD大鼠血脂、血糖、胰岛素、HOMA-IR、瘦素水平,升高脂联素,并增加肝组织P-AMPKα蛋白表达,上调PPAR-γ、CPT-1、GLUT-4 m RNA水平、下调L-FABP和ACC m RNA水平,这些作用可能与其激活AMPK通路和改善NAFLD糖脂代谢紊乱有关。     

TRF1、TRF2及POT1 mRNA在前列腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨端粒重复序列结合蛋白质(TRF)1、TRF2和端粒保护蛋白1(POT1)mRNA在前列腺癌(PCa)组织中的表达及临床意义。方法选择行尿道前列腺电切术切除的PCa患者中心组织标本55例作为实验组;同期选择55例前列腺增生(BPH)患者病理组织标本作为对照组。通过免疫组化法测定PCa患者肿瘤组织中TRF1、TRF2和POT1 mRNA的表达情况。结果实验组TRF1 mRNA明显高于对照组(P0.05),两组TRF2 mRNA差异无统计学意义(P0.05),实验组POT1 mRNA明显高于对照组(P0.05)。结论 PCa患者组织中TRF1和POT1 mRNA表达上升,说明它们的高表达可能与PCa发生发展密切相关;而PCa患者组织中TRF2的mRNA表达并没有发生明显变化,其作用机制还有待进一步研究。     

蓝莓花青素干预肝硬化大鼠肝组织凋亡蛋白表达的变化*

目的 研究蓝莓花青素干预肝硬化大鼠肝组织凋亡蛋白表达的变化。方法 随机将30只大鼠分为对照组、模型组和实验组。采用二乙基亚硝胺腹腔注射法制备肝硬化模型,在其中一组给予蓝莓花青素灌胃干预,在实验第8周末,取血和肝组织。采用Western blot法检测肝组织c-caspase-3、Bax和Bcl2蛋白表达,取肝组织匀浆检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果 组织病理学检查提示,肝硬化模型制备成功;模型组动物血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β(TGF-β)水平分别为(579.87±20.37)U/L、(428.58±18.25)U/L、(2.56±0.18)ng/L和(2.12±0.15)ng/L,显著高于对照组 [分别为(102.47±3.25)U/L、(104.45±3.87)U/L、(0.81±0.05)ng/L和(0.92±0.07)ng/L,P<0.05],而经过蓝莓花青素处理后,动物血清上述指标显著降低【分别为(371.89±14.72)U/L、(148.71±6.34)U/L、(1.73±0.11)ng/L和(1.45±0.12)ng/L,P<0.05],模型动物血清白蛋白水平为(30.69±2.58)g/L,显著低于对照组【(37.68±3.08)g/L,P<0.05】, 蓝莓花青素处理组升高至【(34.71±3.34)g/L,P<0.05];模型组肝组织匀浆MDA水平为(0.49±0.11)μmol/L,显著高于对照组【(0.06±0.01)μmol/L,P<0.05】,SOD水平为(0.34±0.09)U/mg,显著低于对照组【(0.98±0.21)U/mg,P<0.05】,而蓝莓花青素处理组肝组织匀浆MDA水平显著降低至【(0.17±0.03)μmol/L,P<0.05】,SOD水平显著升高至【(0.71±0.19)U/mg,P<0.05】;模型动物肝组织Bcl-2表达量为(0.48±0.03),而Bad和c-caspase-3表达量分别为(1.50±0.18)和(1.41±0.17),分别较对照组显著降低或升高【分别为(1.76±0.18)、(0.41±0.02)和(0.28±0.01),P<0.05】,而经过蓝莓花青素处理动物肝组织Bcl-2表达显著增强,Bad和c-caspase-3表达显著减弱【分别为1.47±0.14)、(0.64±0.05)和(0.50±0.05),P<0.05]。结论 蓝莓花青素能够降低二乙基亚硝胺诱导的肝硬化大鼠肝组织氧化应激损伤,调节凋亡蛋白表达,抑制肝细胞凋亡,达到保护肝功能的作用。     

不同入肝血流阻断技术下腹腔镜肝切除术治疗原发性肝癌患者近期效果研究

目的 探讨不同入肝血流阻断技术腹腔镜肝切除术(LH)治疗原发性肝癌(PLC)患者的效果。方法 2021年2月～2022年11月我院收治的PLC患者132例,均行LH术治疗。术中,69例观察组采用区域性入肝血流阻断,对照组63例采用间歇性全入肝血流阻断。常规测量心率(HR)和平均动脉压(MAP),使用超声检测门静脉血流速度(PVV)。结果 观察组手术输血率、手术时间和住院日分别为15.9%、(240.3±42.9)min和(14.7±2.3)d,与对照组【分别为19.1%、(231.7±39.5)min和(15.0±2.9)d】比,无统计学差异(P>0.05),而观察组肝血流阻断时间为(0.0±0.0)min,显著短于对照组【(26.8±7.1)min,P<0.05】,术中出血量为(301.2±52.5)mL,显著少于对照组【(369.8±59.4)mL,P<0.05】;在术后7 d,观察组HR、MAP和PVV分别为(79.1±7.2)次/min、(80.7±3.6)mmHg和(21.3±2.0)cm/s,与对照组【分别为(78.9±6.8)次/min、(81.9±4....     

肝脏前体细胞移植对CCl4诱导的肝纤维化自发逆转大鼠肝组织学的影响

目的研究肝脏前体细胞(HPCs)移植对纤维化自发逆转大鼠肝脏组织学的影响。方法采用四氯化碳(CCl_4)腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型,取14只模型大鼠,随机分为自发逆转组7只和HPCs移植组7只,后者采用经脾内注射HPCs。取肝组织行苏木精-伊红和天狼猩红染色,观察组织病理学变化;采用免疫组织化学法检测肝组织OV6和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;采用Western blot法测定α-SMA、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1蛋白表达;采用ELISA法测定血清I型胶原和白蛋白水平。结果在CCl_4腹腔注射8 w后动物肝组织OV6阳性细胞数量达到高峰,12 w时开始下降;与自发逆转组比,HPCs移植组肝组织纤维化和炎症程度减轻,胶原面积显著降低【(3.14±0.99)对(5.05±0.89),P0.05】;自发逆转组肝组织α-SMA和TIMP-1蛋白相对表达量分别为(1.22±0.10)和(0.43±0.09),均显著高于HPCs移植组的【(0.31±0.08)和(0.25±0.032),P0.05】;自发逆转组血清I型胶原水平为(41.33±8.08)ng/ml,显著高于HPCs移植组的【(31.12±10.08)ng/ml,P0.05】,自发逆转组白蛋白为(33.18±4.69)g/L,显著低于HPCs移植组的【(48.30±2.15)g/L,P0.05】。结论肝脏前体细胞移植能加速肝纤维化的逆转,改善肝功能。     

非诺贝特联合双环醇治疗非酒精性脂肪性肝病患者肝组织PPARγ2 mRNA水平变化

目的 探讨应用非诺贝特联合双环醇治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者的疗效及肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ₂(PPARγ₂)水平变化。方法 2018年2月～2019年12月我院收治的NAFLD患者66例,采用随机数字表法分为对照组33例和观察组33例,分别给予双环醇片口服或在此基础上给予非诺贝特片口服治疗,两组均治疗3个月。肝穿刺获得肝组织,采用PCR法检测肝组织PPARγ₂ mRNA水平,采用化学发光免疫分析法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)水平,采用免疫比浊法检测血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平,使用FC500型流式细胞仪检测外周血CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺细胞百分比。结果 在治疗结束时,观察组总有效率为97.0%,显著高于对照组的66.7%(P<0.05);观察组肝组织PPARγ₂ mRNA相对水平为(1.5±0.1),显著高于对照组【(1.1±0.2),P<0.05】;观察组血清TNF-α水平为(26.4±3.1)pg/mL,显著低于对照组【(32.8±6.9)pg/mL,P<0.05】,血清IL-6水平为(35.9±4.9)ng/L,显著低于对照组【(46.4±5.8)ng/L,P<0.05】,血清hs-CRP水平为(5.1±1.4)mg/L,显著低于对照组【(8.4±1.9)mg/L,P<0.05】;观察组外周血CD3⁺细胞百分比为(80.2±11.5)%,显著高于对照组【(60.5±7.7)%,P<0.05】,外周血CD4⁺细胞百分比为(44.7±5.8)%,显著高于对照组【(31.4±4.8)%,P<0.05】,CD4⁺/ CD8⁺细胞比值为(1.5±0.4),显著高于对照组【(1.1±0.3),P<0.05】。结论 联合应用非诺贝特和双环醇治疗NAFLD患者有短期疗效,可能与提高了肝组织PPARγ₂水平,降低了血清炎症细胞因子水平有关,值得进一步研究。     

microRNA194过表达抑制荷瘤小鼠肝癌细胞生长的实验研究

目的探讨micro RNA194过表达对肝癌细胞生长的抑制作用及其具体作用机制。方法通过细胞转染法构建过表达micro RNA194的肝癌细胞Hep3B,并将其接种于Balb/c裸鼠建立荷瘤小鼠。30只Balb/c裸鼠被随机分配为micro RNA194过表达组15只和对照组15只,采用荧光定量PCR法检测Hep3B细胞和荷瘤小鼠肝癌组织micro RNA194水平,采用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测肿瘤组织胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)水平及其蛋白表达情况。结果 Hep3B细胞和荷瘤小鼠肝癌组织micro RNA194 m RNA水平分别为(2.68±0.33)和(2.33±0.38),均显著高于对照组【分别为(1.00±0.12)和(1.00±0.16),P0.01】;在肝癌细胞接种第11 d、16 d和21 d时,micro RNA194过表达组小鼠肝肿瘤体积分别为(0.25±0.08)、(0.31±0.11)和(0.46±0.10)mm3,均显著小于对照组【分别为(0.56±0.13)、(0.73±0.20)和(0.95±0.22)mm3,P0.01】;在肝癌细胞接种第21 d时,micro RNA194过表达组小鼠肝肿瘤质量为(0.85±0.19)g,显著轻于对照组【(1.43±0.27)g,P0.01】;micro RNA194过表达组小鼠肝肿瘤IGF1R m RNA水平和其蛋白表达量分别为(0.78±0.12)和(0.81±0.17),均显著低于对照组【分别为(1.0±0.16)和(1.0±0.11),P0.01】。结论 micro RNA194过表达可以抑制肝癌细胞生长,有可能是通过抑制了下游靶基因IGF1R的表达而发挥作用的。     

曲美他嗪对急性肝衰竭小鼠肝组织NOX2和NOX4表达的影响

目的 探讨曲美他嗪对急性肝衰竭小鼠肝组织NOX2和NOX4表达的影响。方法 随机将65只C57BL/6小鼠分为对照组、模型组、小、中、大剂量曲美他嗪处理组和还原型谷胱甘肽处理组,除模型组15只外,其他组均为10只。采用D-氨基半乳糖联合脂多糖腹腔注射建立急性肝衰竭模型。取肝组织匀浆检测丙二醛(MDA)和过氧化物酶(CAT)含量,采用RT-PCR法和Western blot法分别检测肝组织还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶( NOX2/4) mRNA水平和蛋白表达。结果 模型组血清ALT、AST和肝匀浆MDA水平分别为(121.4±3.7)U/L、(208.9±27.4)U/L和(51.0±20.5)nmol/mg,均显著高于对照组【分别为(35.3±3.2)U/L、(49.9±4.4)U/L和(14.1±5.2)nmol/mg,P＜0.05】,而模型组肝匀浆CAT水平为(51.7±16.8)U/mg,显著低于对照组【(110.2±33.7)U/mg,P＜0.05】;模型组NOX2/4 mRNA和蛋白相对水平分别为(8.2±2.0)/(1.2±0.1)和(2.6±0.1)/(1.3±0.1),均显著高于对照组【分别为(1.0±0.2)/(0.5±0.1)和(1.0±0.1)/(0.4±0.1),P＜0.05】,中、大剂量曲美他嗪处理组血清ALT和AST及肝匀浆MDA水平分别为(86.4±1.00)U/L、(154.0±6.2)U/L和(22.5±1.9)nmol/mg及(81.1±1.5)U/L、(134.7±5.3)U/L和(20.1±3.7)nmol/mg,均显著低于模型组【分别为(121.4±3.7)U/L、(208.9±27.4)U/L和(51.0±20.5)nmol/mg,P＜0.05】,肝匀浆CAT水平分别为(99.4±15.5)和(102.3±15.5),均显著高于模型组【(51.6±16.8),P＜0.05】;肝组织NOX2/4 mRNA及蛋白相对表达量分别为(5.6±0.2)/(0.7±0.0)和(5.2±1.4/0.6±0.1)及(1.7±0.2)/(0.7±0.2)和(1.5±0.1)/(0.6±0.2),均显著低于模型组【(8.2±2.0)/(1.2±0.1)和(2.6±0.1)/(1.3±0.1),P＜0.05】。结论 曲美他嗪可能通过下调肝组织NOX2/4表达减轻氧化应激损伤,改善D-Galn/LPS诱导的急性肝衰竭小鼠肝损伤。     

蒙药额力根II号对肝纤维化大鼠的保护作用研究

目的 观察蒙药额力根II号对CCl₄诱导的肝纤维化大鼠的保护作用。方法 随机将58只SD大鼠分为对照组、模型组、蒙药额力根II号小、中、大剂量干预组,制备CCl₄肝纤维化模型,并给予蒙药干预。观察肝组织病理学变化,并采用免疫组化法检测肝组织α-SMA、I型胶原和III型胶原的表达。结果 与模型组比,中剂量药物处理组动物血清ALT、AST和透明质酸(HA)水平显著降低(P＜0.05),大剂量药物处理组血清ALT、AST、TBIL、HA、III型前胶原(PIIINP)和IV型胶原(CIV)水平降低更显著(P＜0.05);对照组、中和大剂量药物干预组肝组织α-平滑肌肌动蛋白表达水平分别为(0.0±0.0)、(4.9±1.0)、(3.4±0.9),显著低于模型组【(6.1±1.2),P＜0.05】,III型胶原蛋白分别为(2.4±1.3)、(5.0±2.4)和(3.7±1.8),显著低于模型组【(6.4±2.4),P＜0.05】;对照组和大剂量干预组肝组织I型胶原蛋白分别为(2.1±0.2)和(3.3±1.0),显著低于模型组【(6.0±2.5),P＜0.05】;与模型组比,中和大剂量药物处理组大鼠肝组织纤维化程度显著改善。结论 蒙药额力根II号对CCl₄诱导的肝纤维化大鼠具有保护作用,其机制可能与抑制了肝星状细胞活化,减少了细胞外基质的合成有关。     

BET抑制剂(+)-JQ1通过调节NF-KB信号通路保护小鼠急性肝衰竭实验研究*

目的 探讨溴结构域和额外末端结构域(BET)抑制剂(+)-JQ1对脂多糖/D-氨基半乳糖(LPS/D-Gal)诱导的小鼠急性肝衰竭(ALF)的保护作用及其作用机制。方法 将47只C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=15)、模型组(n=17)和(+)-JQ1干预组(n=15),采用腹腔注射LPS/D-Gal联合诱导ALF模型,其中在干预组造模前2 h腹腔注射(+)-JQ1。在造模4 h后每组处死5只小鼠,其余小鼠继续喂养至72 h,观察存活率。采用ELISA法检测血清TNF-α,采用RT-qPCR法和Western bloting法分别检测mRNA和蛋白表达。结果 模型组72 h小鼠存活率为16.7%(2/12),(+)-JQ1干预组为60.0%(6/10,P>0.05);ALF组血清ALT水平为(2779.0±200.6)U/L,显著高于对照组【(44.9±2.5) U/L,P＜0.05】,血清AST水平为(2885.0±143.6)U/L,显著高于对照组【76.0±5.7) U/L,P＜0.05】,而(+)-JQ1干预组血清ALT和AST水平较模型组显著降低 【分别为(948.7±46.3)U/L和(1704.0±42.1)U/L,P＜0.05】;ALF组肝组织TNF-αmRNA水平为(103.7±23.0),显著高于对照组【(1.2±0.2),P＜0.05】,IL-6 mRNA水平为(73.4±15.8) ,显著高于对照组【(1.1±0.1),P＜0.05】,IL-1B mRNA水平为(13.5±2.7) ,显著高于对照组【(1.0±0.1),P＜0.05】,而经(+)-JQ1干预后,三种细胞因子mRNA水平均较模型组显著降低【分别为(12.8±1.2)、 ( 11.7±0.7) 和 (1.5±0.3),P＜0.05】;ALF组血清TNF-α水平(631.6±57.5)U/L,显著高于对照组【(2.5±0.5)U/L,P＜0.05】,而(+)-JQ1干预组血清TNF-α水平为(139.8±8.1)U/L,显著低于ALF组(P＜0.05);ALF组肝组织P65和IKB蛋白表达显著增强,而(+)-JQ1干预后显著减弱。结论 (+)-JQ1对ALI小鼠肝脏具有保护作用,可能通过调节NF-KB信号通路下调促炎细胞因子的表达,从而减轻肝组织炎症反应。     

多功能蛋白APE1/Ref1在肝衰竭大鼠肝细胞不同部位的表达意义

目的研究多功能蛋白酶脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1/Ref1)在慢加急性肝衰竭大鼠肝细胞不同部位的表达意义。方法将30只SD大鼠随机分为对照组(n=15)和模型组(n=15)。采用四氯化碳(CCL4)联合D-氨基半乳糖(D-GalN)和内毒素(LPS)注射法制备肝衰竭模型,使用B超监测筛选成功模型。检测血清ALT、AST、总胆红素(TBIL),采用HE染色观察肝组织病理学变化,采用免疫组化和免疫印迹法检测肝组织胞浆蛋白、胞核蛋白、总蛋白APE1/Ref1的表达。结果本组实验,经B超筛选模型成功率达80%;正常对照组血清ALT、AST和TBIL水平分别为(56.5±16.0)U/L、(178.7±36.5)U/L和(3.2±0.6)μmol/L,均显著低于模型组【(620.4±347.5)U/L、(1077.7±666.1)U/L和(21.2±16.9)μmol/L,均P0.05】;免疫组化法检测模型组肝组织APE1/Ref1表达水平为(6.8±1.3)IOD,显著低于正常对照组的【(8.1±1.2)IOD,P0.05】,模型组胞浆蛋白水平为(0.91±0.08)IOD,明显高于正常对照组的【(0.18±0.01)IOD,P0.01】,而核蛋白和总蛋白水平分别为(0.71±0.01)IOD和(0.92±0.03)IOD,均明显低于正常对照组【(1.41±0.04)IOD和(1.15±0.01)IOD,P0.05】。结论慢加急性肝衰竭大鼠肝内APE1/Ref1表达呈现由细胞核内转向胞浆内表达的特征,总体表达呈下降水平。