染矽尘大鼠肺组织纤维化及自噬相关蛋白的变化

目的 探讨游离二氧化硅(SiO2)粉尘暴露大鼠肺组织不同时间点自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(Microtubules associated protein 1 light chain 3,LC3)和酵母自噬相关基因6(Beclin1)的变化。 方法 将72只无特定病原体级(SPF)Wistar雄性大鼠随机分为溶剂对照组和SiO2模型组,模型组大鼠采用非暴露式气管滴注法一次性给予SiO2悬浮液建立矽肺模型,溶剂对照组大鼠给予等量生理盐水。造模后两组分别于1、7、14、21、28、60 d处死6只大鼠,用苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察两组大鼠不同时间点肺组织常规病理变化和纤维化程度;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测肺组织匀浆中转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-1和肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平;用Western blot法检测肺组织中自噬相关蛋白LC3和Beclin1的相对表达水平。 结果 HE染色结果显示,模型组大鼠肺组织在第1天至第60天持续存在炎性反应,炎性评分均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Masson染色观察结果显示,模型组大鼠肺组织从第14天开始出现少量胶原纤维增生,至第60天可见大量胶原纤维,纤维化评分明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组大鼠肺组织未见胶原纤维增生。ELISA法测定结果显示,模型组大鼠在染尘后各时间点肺组织匀浆中IL-1、TNF-α和TGF-β的含量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,模型组大鼠肺组织Beclin1蛋白表达水平在第7、14、21、28和60天时呈下降趋势,均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠肺组织LC3II/LC3I的比值在第1、7、14、21、28和60天时呈下降趋势,均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 游离SiO2粉尘致大鼠矽肺发病过程中,自噬相关蛋白LC3和Beclin1的表达水平与矽肺的不同发展阶段有关。在大鼠染矽尘早期,肺组织以炎性变化为主;随着染矽尘大鼠纤维化程度的加重。     

姜黄素对矽肺大鼠肺组织水通道蛋白-1表达影响

目的 探讨姜黄素对矽肺大鼠肺组织水通道蛋白-1(AQP-1)表达的影响及意义.方法 雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、生理氯化钠溶液组、矽肺模型组、姜黄素组和溶剂对照组.后3组均一次性气管内给予质量浓度为50 g/L的矽尘混悬液1 ml,生理氯化钠溶液组一次性气管内注入等体积的生理氯化钠溶液.染尘第2天,姜黄素组给予质量浓度为20 g/L姜黄素300 mg·kg-1·d-1(0.5％羧甲基纤维素钠溶解),溶剂对照组给予质量分数为0.5％羧甲基纤维素钠15ml·kg-·d-1.于第29天处死动物,采用免疫组织化学、免疫印迹法、实时荧光定量聚合酶链反应法检测大鼠肺组织AQP-1及mRNA表达.结果 矽肺模型组、溶剂对照组肺组织中AQP-1表达较正常对照组和生理氯化钠溶液组减低(P＜0.05),姜黄素组肺组织AQP-1表达较矽肺模型组增强(P＜0.05).结论 姜黄素可使大鼠矽肺模型肺组织中AQP-1表达增强,提示姜黄素可能通过影响AQP-1的表达,在矽肺的发病过程中具有一定的保护作用.     

RNA干扰CD36表达对潜在转化生长因子-β1活化和矽肺纤维化的抑制

目的 观察大鼠矽肺模型中RNA干扰CD36基因表达对潜在转化生长因子-β1(L-TGF-β1)的活化及矽肺纤维化的抑制作用.方法 将Wistar大鼠分为生理盐水组、SiO2模型组(10 mg SiO2)、CD36 shRNA表达的重组慢病毒(SiO2+Lv-shCD36)组和对照慢病毒(SiO2+Lv-shCD36-NC)组,每组24只.染尘后7、21、28 d处死动物,貂肺上皮细胞增殖抑制实验检测肺泡灌洗液(BALF)中转化生长因子-β1(TGF-β1)的活性;HE和VG染色观察肺组织病理变化;碱裂解法测定肺羟脯氨酸含量.结果 染尘7d时,SiO2+Lv-shCD36组大鼠肺泡巨噬细胞CD36 mRNA的表达明显低于生理盐水组、SiO2模型组和SiO2+Lv-shCD36-NC组,差异有统计学意义(P＜0.05).SiO2+Lv-shCD36组大鼠BALF中TGF-β1活化量和活化率均明显低于模型组和SiO2+Lv-shCD36-NC组,差异有统计学意义(P＜0.05).染尘28 d时,SiO2+Lv-shCD36组大鼠肺组织可见细胞性矽结节,而模型组和SiO2+Lv-shCD36-NC组大鼠肺组织可见纤维细胞性矽结节.染尘21d和28 d时,SiO2+Lv-shCD36组大鼠肺羟脯氨酸含量明显低于SiO2模型组和SiO2+Lv-shCD36-NC组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 大鼠矽肺模型中通过RNA干扰CD36基因表达能够对L-TGF-β1的活化和矽肺纤维化具有一定的抑制作用.     

染矽尘大鼠肺组织不同时间点FasL表达与细胞凋亡

目的探讨染矽尘大鼠肺组织FasL表达及细胞凋亡在矽肺病理变化中的意义。方法将96只Wistar大鼠随机分为对照组和染矽尘组。对染矽尘组以暴露式气管内一次注入二氧化硅粉尘悬液(1 ml,0．2 g/kg)建立大鼠矽肺模型,对照组气管内注入1 ml灭菌生理盐水。分别于处理后1、3、7、14、21和28 d,每组分别取8只大鼠处死取肺组织,用组织芯片技术结合免疫组化SP法检测大鼠肺组织不同时间点FasL的表达;末端脱氨核苷酸转移酶末端标记技术(TUNEL)法检测大鼠肺组织细胞凋亡,并采用Image-Pro Plus Version 4．5 for windowsTM图像分析计算积分光密度。结果染矽尘组大鼠肺组织FasL在染矽尘后的7、14、21和28 d时,表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0．05),14 d时表达最高为157．50±23．12;染矽尘组大鼠肺组织凋亡阳性细胞在染矽尘后的1、3、7、14、21和28 d时,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0．05),7和14d,分别最高为32．95±20．40和31．07±7．15。结论矽尘能导致肺组织细胞凋亡;FasL在染矽尘大鼠肺组织多种细胞中表达并介导细胞的凋亡,凋亡细胞主要以炎性细胞为主。     

NLRP3/IL-1β/TGF-β1信号轴在矽肺肺纤维化大鼠模型中的表达及意义

目的探讨NLRP3/IL-1β/TGF-β1信号轴在矽肺肺纤维化大鼠模型中的表达情况及意义。方法选择健康SPF级Wistar雄性大鼠80只,随机分为4组,分别为高(100 mg/ml)、中(50 mg/ml)、低(25 mg/ml)浓度SiO2染尘组和正常对照组,每组20只。各组分别在SiO2染尘后7 d、14 d、28 d、56 d处死5只大鼠,观察肺组织肺泡炎程度及肺纤维化程度,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织中IL-1β、IL-18、TGF-β1含量,Western Blot法检测大鼠肺组织中NLRP3、Caspase-1蛋白表达情况。结果与正常对照组比较,各染尘组大鼠7 d、14 d、28 d、56 d的肺泡炎评分、纤维化程度明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);与正常对照组比较,各染尘组大鼠7 d、14 d、28 d、56 d的IL-1β、IL-18、TGF-β1浓度明显升高(P<0.01);与正常对照组比较,各染尘组大鼠肺组织中NLRP3、Caspase-1蛋白表达在7 d、14 d、28 d、56 d均升高(P<0.01);低、中、高浓度SiO2染尘组内NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18和TGF-β1表达量在7 d、14 d和28 d间两两比较,差异均有统计学意义(P<0. 05),均呈随着染尘时间的增加而升高的时间-效应关系。结论NLRP3及其下游因子Caspase-1、IL-1β、IL-18、TGF-β1在矽肺肺纤维化大鼠模型肺组织中高表达,提示NLRP3/IL-1β/TGF-β1信号轴可能与矽肺肺纤维化有密切的关系,在矽肺形成过程中发挥了作用。     

矽肺模型大鼠肺组织中IL-17A的表达

目的探索实验性矽肺大鼠肺组织中白细胞介素-17A(IL-17A)的表达,为开展IL-17A在矽肺纤维化的研究提供依据。方法16只健康雄性SD大鼠随机分为两组,矽肺组和对照组各8只,矽肺组大鼠气管非暴露注入粉尘50mg,对照组大鼠注入生理盐水。染尘40d处死大鼠,取肺组织进行病理学观察,实时荧光定量PCR(Realtime qPCR)法定量检测肺组织中IL-17A mRNA的转录水平,免疫组化法检测两组大鼠肺组织中IL-17A的蛋白表达水平。结果矽肺组大鼠肺组织中IL-17A mRNA与蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05)。结论IL-17A在矽肺大鼠肺组织中高表达,其可能参与了矽肺中晚期肺纤维化过程。     

染矽尘大鼠早期肺组织病理变化观察

目的探讨大鼠染矽尘早期肺组织病理改变。方法 Wistar大鼠随机分为对照组和15、30、60mg/ml染矽尘实验组,每组42只。一次性气管内注入染尘建立大鼠矽肺模型,每组分6个时间点(1、3、7、14、21、28d)分别取7只大鼠处死,取肺脏称重,福尔马林固定,石蜡包埋,HE染色,普通光镜下观察肺组织病理变化。结果各剂量染尘大鼠各时间点肺组织脏器系数均高于对照组(P<0.05),且随时间延长和染尘剂量增加其增高幅度增大(P<0.05);肺组织肉眼观察可见,随着染尘时间的延长,肺表面逐渐出现颜色变深、体积增大、不规则斑块增多、弹性减弱等症状;HE染色显示,大鼠染尘后28d内,肺组织以炎症反应为主伴发肺间质的弥漫性纤维化。实验大鼠炎症反应程度随染尘剂量的增加加重,在染尘后7～14d肺组织的炎症反应比较明显。肺间质纤维化程度随实验时间的延长及染尘剂量的增加有逐渐加重的趋势。结论矽肺早期炎症反应明显,主要表现为细胞浸润聚集,肺泡间隔增厚,纤维组织增生,肺泡正常组织发生改变。     

大鼠血清硅元素水平与转化生长因子-β1及肿瘤坏死因子-α的比较

目的探讨血清硅元素水平在矽肺发病机制中的意义和用于矽肺早期诊断的价值。方法采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)检测矽肺模型大鼠血清中硅元素水平,同时采用免疫组织化学-SP法观察转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在大鼠矽肺模型肺组织的表达。结果矽肺模型大鼠染尘后血清硅元素水平明显增高,1d内增长高峰为16h;其后的7、14、21和28d,其水平亦显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。大鼠染尘后肺组织TGF-β1表达与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),表达高峰是染尘后的第7天;TNF-α表达与对照组比较,在染尘后的7、14、21和28d显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),表达高峰为染矽尘后的第21天。结论矽肺模型大鼠血清硅元素水平早期即明显升高且早于TGF-β1、TNF-α的表达,血清硅元素水平变化可以作为矽肺的早期诊断指标。     

PI3K/Akt通路在大鼠矽肺纤维化中的作用研究

探讨PI3K/Akt通路在大鼠矽肺纤维化过程中的作用。将SD雄性大鼠75只均分成3组,矽肺组大鼠以非暴露式气管内注入50 mg/m l二氧化硅混悬液1 m l建立矽肺模型,于染尘3、7、14、21和28 d分别股动脉放血处死各组5只大鼠,取肺组织进行病理观察及总RNA和蛋白的提取,分别采用RT-PCR及WB检测PI3K、AktmRNA及p-Akt的表达变化。染尘3 d后肺组织出现炎性反应,7 d后见细胞性结节并进行性加重。PI3K、AktmRNA和p-Akt蛋白随着染尘时间延长有不同程度变化,但统计学差异不显著。提示PI3K/Akt通路可能在大鼠矽肺纤维化中发挥作用,但发挥作用的时间段有待进一步探讨。     

用HOPE-MED8050动式染尘控制系统建立大鼠矽肺模型

[目的]采用动式染尘控制系统建立大鼠矽肺模型.[方法]40只SD大鼠随机分为1d、3d、7d、2周、4周、8周、12周及对照组,每组5只;大鼠暴露的染尘浓度为170～ 190 mg/m3,每天染尘2h,至各组相应的染尘时间段处死动物(对照组于12周末处死),称量体重与肺脏重量,计算肺脏器系数,检测肺组织羟脯氨酸(Hyp)含量并对肺组织进行病理组织学观察.[结果]染尘室浓度稳定持久.肺脏器系数随染尘时间延长而逐渐增加;1d组肺组织轻度充血、水肿;7d组血管周围可见较多炎细胞围绕,以单核细胞和淋巴细胞为主;2周组可见肺泡内有红染物及泡沫细胞;4周组巨噬细胞呈结节状,肺泡上皮细胞部分脱落,少量纤维组织增生;8周组纤维性增生更甚,同时可见肺泡Ⅱ型上皮细胞腺营样增生;12周组出现纤维性结节,而对照组的大鼠肺部无明显异常.肺组织内Hyp含量随染尘时间延长而增加.[结论]采用动式染尘控制系统可建立大鼠矽肺模型.     

川芎嗪对染矽尘大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响

目的观察川芎嗪对染矽尘大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响。方法将大鼠随机分为对照组、染矽尘组、川芎嗪组,采用一次性气管内注入矽尘法建立矽肺动物模型,川芎嗪组每日腹腔注射川芎嗪注射液50mg/kg。染尘后按不同时间点取大鼠肺组织制作石蜡切片,采用天狼猩红染色结合偏振光显微镜观察Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达,ImageProPlus图像分析系统进行定量分析。结果染矽尘后第3天,Ⅲ型胶原开始增生,染矽尘后第7天,Ⅰ型胶原开始增生,直至染矽尘后第28天,这两种胶原进行性增加。与对照组相比,各时间点染矽尘组大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原面积百分比均有不同程度增加,而川芎嗪组Ⅰ型胶原面积百分比在第7、14、28天,Ⅲ型胶原面积百分比在第28天时明显低于染矽尘组。结论矽尘可以诱导大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原合成增加,两型胶原出现增生的时相有所不同;川芎嗪可以抑制矽尘诱导的Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成。     

牛磺酸对染矽尘大鼠肺组织Ⅰ和Ⅲ型胶原合成及比例的影响

目的 探讨牛磺酸对染矽尘大鼠肺组织不同时相Ⅰ、Ⅲ型胶原合成及比例的影响.方法 将Wistar大鼠144只随机分为对照组（生理盐水,普饲）、矽肺组（普饲）和牛磺酸组（牛磺酸饲料）给予气管内注入1 ml矽尘混悬液（50 mg/ml）,每组48只.分别在第1、3、7、14、21、28天时,用高效液相色谱法测定其血浆中牛磺酸含量;取肺组织制作石蜡切片,天狼猩红法染色,偏振光显微镜观察各组动物肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成及比例的变化,图像分析系统对其进行定量分析.结果 第7、14、21和28天,矽尘组Ⅰ型胶原含量分别比对照组增加3.84%、3.77%、3.73%、9.83%,差异有统计学意义（P＜0.01）.第7、21和28天时,牛磺酸组Ⅰ型胶原含量分别比矽尘组降低2.39%、1.62%和7.13%;与对照组比较,第14、21和28天Ⅰ型胶原含量分别增加2.12%、2.11%和2.70%,差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.第28天时,牛磺酸组Ⅲ型胶原含量比矽尘组减少2.62%,差异有统计学意义（P＜0.05）.矽尘组Ⅰ/Ⅲ型胶原比例第7天开始增加,第28天时达到最大比值1.87,牛磺酸组Ⅰ/Ⅲ型胶原比例从第7天开始增加,且增加幅度高于矽尘组,第28天时增加幅度低于矽尘组.结论 牛磺酸对矽尘诱导大鼠肺组织不同时相的Ⅰ、Ⅲ型胶原合成抑制作用不同.     

染矽尘大鼠MMP-9和MMP-2变化规律研究

目的 探讨染矽尘大鼠 肺组织、肺泡灌洗液(BALF)和血清中基质金 属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属 蛋白酶-9(MMP-9)的表达变化。 方法 选取雄性Wistar大鼠84只随机分为实验组(100mg/ml)和生理盐水对照组,采用非气管暴露法建立大鼠矽肺模型,于染尘第3、7、14、21、28、60d处死大鼠,取肺组织并收集血清和BALF。免疫组化法检测肺组织中MMP-9和MMP-2的表达;酶联免 疫吸附法(ELISA)检测血清和BALF中MMP-9和MMP-2的浓度。 结果 免疫组化染色结果,与对照组比较,MMP-9和MMP-2在染尘初期含量升高,且随着时间的延长呈增强趋势,分别在第14d和21d达到峰值;在染尘后期阳性表达仍较高,但与前几个时间点相比表达已减弱。ELISA结果显示,BALF和血清中MMP-9、MMP-2含量变化与肺组织中变化趋势相同,与染尘时间有相关关系(P<0.05),均呈先上升后下降的趋势,但血清和BALF中两指标相关性差(P>0.05)。 结论 MMP-9、MMP-2参与了矽肺早期炎症及后期的纤维化过程,其表达随着时间的延长呈先上升后下降的趋势。     

二氧化硅诱导巨噬细胞中核转录因子Sp1的表达活化

目的 研究二氧化硅（SiO2）刺激的巨噬细胞中核转录因子（Sp1）表达和定位的动态变化.方法 将40只健康SD大鼠随机分为实验组和对照组,每组各20只.采用非暴露式气管插管,实验组每只大鼠一次性注入1 ml无菌生理盐水与SiO2混悬液（0.2 g/kg）;对照组大鼠注入等量的无菌生理盐水;分别于灌注后第1、7、14、21和28天各处死4只.免疫组织化学检测体内SiO2刺激的肺巨噬细胞中Sp1蛋白表达的定位及其动态变化.体外培养小鼠腹腔巨噬细胞系（RAW264.7细胞）,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测体外SiO2刺激的巨噬细胞中Sp1 mRNA的动态变化;免疫细胞化学、Western blot法检测体外SiO2刺激的巨噬细胞中Sp1蛋白表达的定位及其动态变化.结果 实验组与对照组比较,肺巨噬细胞中Sp1蛋白表达上调,于第14天达高峰;体外SiO2作用RAW264.7细胞30～960 min,Sp1 mRNA表达明显升高,呈现先升高而后下降的趋势,峰值位于240 min;Sp1总蛋白和核蛋白表达亦呈现先升高而后下降的趋势,总蛋白表达峰值位于240 min,核蛋白峰值位于480 min;Sp1蛋白于120 min开始发生明显的核移位,480 min时核移位最明显.结论 SiO2能激活巨噬细胞中Sp1,Sp1可能在矽肺的发生发展过程中起重要的调控作用.     

应用基因芯片筛选矽肺纤维化相关差异基因表达谱的研究

目的研究染矽尘大鼠肺组织纤维化有关基因的表达。方法将大鼠随机分为染尘组及对照组,每组8只,采用气管灌注法1次染矽尘。应用基因芯片技术,研究染尘后第28天大鼠肺组织中差异表达基因。采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)实验进行验证。结果本次实验筛选出的有效基因22 107个,差异基因2 096个,其中fold值>5差异基因,主要有SPP1、LCN2、RETNLA、RASA1、CD68、PI4K2A。经过GO数据库分类注释的功能簇包括生物过程723个、细胞组分153个、分子功能161个。real-time PCR实验结果显示,染矽尘大鼠肺组织中GM-CSF基因相对表达量与对照组比较,4组上调,1组下调。结论染矽尘大鼠通过多种基因、多种信号共同参与生物学调控过程,最后诱导形成肺纤维化。GM-CSF是导致矽肺纤维化发生、发展的一个重要基因。     

手掌参醇提取物处理染矽尘大鼠肺纤维化及肿瘤坏死因子-α表达的变化

目的研究手掌参醇提起物对染矽尘大鼠肺纤维化及组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法将120只Wistar大鼠随机分为对照组、染矽尘组和手掌参醇提取物与SiO2联合处理组(联合处理组)。采用气管暴露法给予染矽尘组和联合处理组大鼠气管内灌注矽尘,对照组大鼠气管内则给予灌注等量生理盐水。联合处理组自染尘后第1天起每日灌胃手掌参醇提取物2ml(10g/kg),对照组和染矽尘组则给予等量生理盐水每日灌胃直至大鼠处死。天狼猩红染色法结合偏振光显微镜观察肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原合成。制作大鼠肺组织芯片,用免疫组织化学PV法检测组织芯片TNF-α的表达。结果与染矽尘组比较,联合处理组的大鼠各时间点的肺系数明显降低(P<0.01)。与染矽尘组比较,联合处理组各时间点Ⅰ胶原低于染矽尘组(P<0.01);与染矽尘组比较,联合处理组各时间点Ⅲ胶原均低于染矽尘组,14天和21天差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。与染矽尘组比较,联合处理组各时间点肺组织TNF-α的积分光密度低于染矽尘组(P<0.01)。结论手掌参醇提取物可抑制矽尘诱导的大鼠肺纤维化和大鼠肺组织TNF-α蛋白的表达。     

大鼠染矽尘后不同时间重复移植人脐带间充质干细胞对肺纤维化的影响

目的 探讨人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSCs）在不同时间窗的重复移植对染矽尘大鼠肺纤维化的疗效。
方法 将48只健康雄性SD大鼠随机分为4组:对照组、矽肺模型组、预防性干预组和治疗性干预组（每组12只）。采用非暴露式气管插管内灌注法,对照组注入0.5 mL生理盐水,其余各组均注入0.5 mL二氧化硅（SiO₂）混悬液（50 mg/mL）,1周后重复1次。首次染尘后,预防性干预组在第1、7、14、21天,治疗性干预组在第28、35、42、49天,经尾静脉缓慢注射0.5 mL HUCMSCs细胞悬液（3.0×109/L）。在第70天统一处理动物,以HE染色和Masson染色,观察肺组织病理改变并进行Aschcroft肺纤维化评分,检测肺系数、肺组织羟脯氨酸（hydroxyproline,Hyp）及转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、血清白细胞介素-6（IL-6）的水平。
结果 肺组织病理显示,对照组肺泡结构正常,其余各组肺脏有不同程度纤维化病变,矽肺模型组见细胞纤维性肉芽肿形成,预防性干预组和治疗性干预组与矽肺模型组比较,胶原纤维明显减少;Aschcroft评分、肺系数、肺组织Hyp和TGF-β₁、血清IL-6比较,染尘各组均明显高于对照组（P < 0.01）,而预防性干预组和治疗性干预组明显低于矽肺模型组（P < 0.01）,预防性干预组和治疗性干预组之间以上指标差异均无统计学意义（P>0.05）。
结论 采用重复注射HUCMSCs的方法,无论在以肺泡炎为主的阶段还是在以纤维化为主的阶段进行干预,均可以有效减轻矽尘导致的大鼠肺纤维化。
     

槲皮素对矽肺大鼠转化生长因子β1 信号转导通路的调节作用

［目的］ 观察槲皮素（Quercetin）对矽肺大鼠转化生长因子β1（transforming growth factor,TGF-β1）信号转导通路的调节作用。 ［方法］ 将75 只SPF 级Wistar 雄性大鼠随机分为对照组、模型组、槲皮素治疗组,每组25 只。模型组与槲皮素治疗组大鼠采用非暴露法气管内一次性注入二氧化硅（SiO2）悬液（250 mg/kg）复制动物矽肺模型。槲皮素治疗组自注射SiO2 后每天腹腔注射槲皮素50 mg/kg/1.0 mL生理盐水,对照组以同样方法注入等量生理盐水,共连续处理14 d。动物分别在注射SiO2 后第3、7、14、21、28 天处死。应用羟脯氨酸试剂盒检测肺组织中总胶原蛋白含量,免疫组织化学 法检测肺组织TGF-β1 表达,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测TGF-β1 直接底物p-Smad3/7 蛋白表达情况。 ［结果］模型组肺组织中总胶原蛋白含量与同期对照组比较明显增加,分别是对照组的6.28、13.11、11.59 倍（P 〈 0.01）。槲皮素治疗组与模型组相比,总胶原蛋白含量明显下降,分别是同期模型组的43.05%、38.92%、37.40%（P 〈 0.01）。槲皮素治疗组的TGF-β1 阳性表达低于模型组,而明显高于对照组,各时间点与对照组比较,差异有统计学意义（P 〈 0.01,P 〈 0.05）。模型组大鼠肺组织中p-Smad3 表达量高于对照组及槲皮素治疗组,各时间点比较,差异均有统计学意义（P 〈 0.01）。槲皮素治疗组各时间点与相应模型组相比,p-Smad3 表达减少,但仍高于相应对照组（P 〈 0.01）。模型组大鼠肺组织中p-Smad7表达量低于对照组及槲皮素治疗组,各时间点比较,差异均有统计学意义（P 〈 0.01）。槲皮素治疗组各时间点与对照组、模型组相比,p-Smad7 表达量升高（P 〈 0.01）。 ［结论］ 槲皮素通过减少Smad3 蛋白,增加Smad7 蛋白表达,抑制矽肺过程中胶原蛋白的产生。     

吡非尼酮对大鼠矽肺纤维化的抑制作用

目的 探讨吡非尼酮(PFD)对大鼠矽肺纤维化的抑制作用.方法 75只SD雄性大鼠,随机分成未处理对照组、生理盐水组、生理盐水+PFD组、SiO2组、SiO2+PFD组,每组15只,采用非暴露式气管内染尘法,SiO2组和SiO2+PFD组注入SiO2粉尘悬液(25 mg/ml),生理盐水组和生理盐水+PFD组注入等量生理盐水,染尘后第2天灌胃给予PFD(50 mg/kg),分别观察7、21、42 d后处死.HE、VG和Foot染色观察肺组织的病理形态学改变并进行病理分级,测定肺组织中羟脯氨酸(HYP)的含量.结果 大鼠肺组织病理观察显示,SiO2+PFD组肺组织纤维化程度比同期SiO2组明显减轻,胶原纤维形成缓慢,矽结节分级评分降低.第42天时,SiO2+PFD组大鼠肺组织HYP含量[(0.75±0.12)mg/g肺组织]比SiO2组[(1.19±0.17)mg/g肺组织]明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PFD能降低大鼠矽肺纤维化程度并减少肺组织中HYP的含量,对实验性大鼠矽肺纤维化具有抑制作用.