黄芪多糖对大鼠原代成骨细胞的影响及其机制研究

目的研究黄芪多糖对体外培养大鼠原代成骨细胞增殖、分化及矿化的影响及其作用机制。方法体外培养的新生SD大鼠颅骨原代成骨细胞体系中分别加入不同质量浓度(0.1、0.3、1、3、10、30、100μg/mL)的黄芪多糖,24、48 h后MTT法检测细胞增殖,碱性磷酸酶(AKP)活性检测法检测细胞分化,茜素红染色法观察黄芪多糖10μg/mL对细胞矿化的影响,Western blotting法检测黄芪多糖1、10μg/mL作用于细胞24 h后,对细胞中骨形成蛋白(BMP-2)的表达、MAPK信号通路中关键蛋白ERK、P38、p-ERK、p-P38等表达的影响。结果黄芪多糖能剂量相关地促进大鼠原代成骨细胞的增殖、分化及矿化,同时上调BMP-2、p-ERK、p-P38蛋白的表达,提高p-ERK/ERK、p-P38/P38值。结论黄芪多糖可通过促进BMP-2的表达、上调其下游的ERK MAPK和P38 MAPK的磷酸化水平来促进成骨细胞增殖、分化。     

ERK1/2信号通路参与美洲大蠊提取物诱导肝癌细胞凋亡的研究

目的:观察美洲大蠊提取物抗肝癌细胞的凋亡作用是否与胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)介导的凋亡通路有关。方法:以人肝癌SMMC-7721细胞株为研究对象,MTT法检测肿瘤细胞抑制率; Annexin V-FITC/PI染色观察细胞凋亡情况; JC-1染色观察线粒体膜电位情况;蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测细胞核内凋亡诱导因子(AIF)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、大鼠肉瘤蛋白(Ras)、快速反应肉瘤蛋白(Raf)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达。结果:与阴性对照组相比,40、80μg/ml的美洲大蠊提取物可不同程度地抑制SMMC-7721细胞的增殖,诱导其凋亡,降低线粒体膜电位。Western Blot结果显示,与阴性对照组相比美洲大蠊提取物可使核AIF、caspase-3表达增多,而ERK1/2通路的Ras、Raf、p-ERK蛋白表达均有不同程度降低。ERK1/2抑制剂PD98059在抑制ERK1/2信号通路的同时,抑制了SMMC-7721增殖,诱导其凋亡。结论:美洲大蠊提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡,抑制其增殖,机制可能与下调Ras/Raf/ERK1/2信号通路有关。     

斑蝥酸钠维生素B6对肝癌细胞侵袭力的抑制作用及机制

目的探讨斑蝥酸钠维生素B6(SCAVB6)对人肝癌细胞侵袭力的影响,以及其与胞外信号调节激酶(ERK)信号传导通路的关系。方法不同质量浓度的SCAVB6作用于人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,体外培养24、48、72 h后,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖情况,Transwell侵袭实验检测肝癌细胞侵袭力的变化,Western blot法检测ERK1/2和磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白表达。结果 MTT实验结果显示,SCAVB6能够抑制肝癌细胞的体外增殖能力,具有剂量-时间依赖性;侵袭实验结果显示,SCAVB6作用48 h,肝癌细胞侵袭力随SCAVB6质量浓度的增加而减弱;Western blot结果显示,与对照组比较,各实验组ERK1/2蛋白表达无显著性差异,而各实验组p-ERK1/2蛋白的表达量显著降低;各实验组之间比较,斑蝥酸钠维生素B6 2.0μg/m L组p-ERK1/2蛋白的表达显著低于其他3组。结论 SCAVB6能抑制人肝癌细胞的增殖和侵袭力,其作用机制可能与其抑制ERK1/2的磷酸化有关。     

珍珠梅黄铜纳米粒通过调节MAPK通路诱导人肝癌HepG2细胞凋亡和保护性自噬的实验研究

目的探讨中药珍珠梅黄酮纳米粒(5,2’,4’-trihydroxy-6,7,5’-trimethoxy flavone nanoparticle,TTF1-NP)处理HepG2细胞后是否发生凋亡和自噬、自噬和凋亡关系及其可能的作用机制。方法不同浓度(0,40,80,120μmol·L~(-1)) TTF1-NP处理HepG2细胞24 h后,MTT法检测细胞的增殖能力;通过Hoechst染色观察TTF1-NP处理HepG2细胞后的形态学变化;利用流式细胞术检测细胞凋亡比例; HepG2细胞转染GFP-LC3质粒后,荧光显微镜观察自噬情况;Western blot检测自噬标志蛋白LC3B I/II,凋亡相关蛋白Cleaved caspase3,以及MAPK通路相关蛋白p38MAPK,ERK1/2,JNK活性变化;采用自噬抑制3-甲基腺苷(3-methyladenine,3-MA)处理细胞后,进一步检测细胞凋亡及MAPK通路相关蛋白的表达。结果 TTF1-NP能够抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡及自噬; Western blot结果显示,TTF1-NP增加LC3B-II蛋白表达,并上调MAPK通路相关分子JNK,下调ERK的活性;加入自噬抑制剂3-MA后,细胞增殖进一步下降,细胞凋亡进一步增加。结论 TTF1-NP可以诱导人肝癌HepG2细胞发生凋亡及保护性自噬,其作用机制可能与调节MAPK通路有关。     

淫羊藿苷通过影响MAPK信号通路抑制ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞增殖作用研究

研究淫羊藿苷(ICA)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用,以及对增殖细胞核抗原(PCNA)表达和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。以ox-LDL(50 mg·L-1)诱导VSMC增殖,采用MTT法检测ICA对ox-LDL诱导VSMC增殖的抑制作用;Real-time PCR和Western blot方法检测ICA对ox-LDL诱导增殖VSMC内细胞周期相关蛋白PCNA基因及蛋白表达的影响;Western blot方法检测ICA对ox-LDL诱导增殖VSMC内p38MAPK,ERK1/2,JNK信号通路相关信号蛋白磷酸化的影响。结果显示,经ox-LDL(50 mg·L-1)刺激后,VSMC增殖活性显著增强,细胞存活率显著提升,S期、G2/M期细胞显著增加,G0/G1期细胞显著减少;同时,PCNA基因及蛋白表达水平显著提升;不同浓度的ICA(40,20,10μmol·L-1)可显著抑制ox-LDL诱导的VSMC增殖,减少S期、G2/M期细胞,增加G0/G1期细胞,降低ox-LDL诱导的PCNA基因及蛋白的表达水平,下调ox-LDL诱导的p-p38和p-ERK1/2蛋白的表达,但不影响p-JNK蛋白的表达。上述结果表明,ICA对ox-LDL诱导的VSMC增殖具有抑制作用,可能通过降低PCNA表达和阻断p38MAPK和ERK1/2信号通路抑制VSMC增殖。     

泰山白首乌醇提物对HepG2肝癌细胞增殖与凋亡的调节作用

目的:研究泰山产白首乌醇提物对HepG2肝癌细胞增殖与凋亡的调节及其相关分子机制.方法:白首乌95%的乙醇提取物,通过D101大孔吸附树脂梯度洗脱.MTT法检测不同洗脱部位对:HepG2细胞增殖的影响;流式细胞术检测HepG2细胞周期的变化;FTTC-AnnexinV/PI双标记检测90%乙醇洗脱部位对肝癌细胞凋亡的影响;免疫印迹法检测ERK,JNK1,p38/MAPK磷酸化水平的变化.结果:泰山白首乌50%乙醇洗脱部位和90%乙醇洗脱部位可明显抑制HepG2细胞增殖,减少细胞的增殖指数(PI),且90%乙醇洗脱部位可诱导HepG2细胞发生凋亡,抑制ERK磷酸化并促进.JNK1的磷酸化.结论:泰山白首乌醇提物可抑制HepG2肝癌细胞的增殖并诱发凋亡,其分子机制可能与调节MAPK信号通路中ERK和JNK磷酸化水平的平衡相关.     

ERK/FoxO3a信号轴在牡荆脂素VB-1抑制肝癌HepG2细胞系增殖中的作用

目的： 探讨ERK/FoxO3a信号轴是否介导牡荆脂素（VB-1）对人肝癌HepG2细胞系增殖的抑制作用。方法：MTT法观察不同浓度VB-1对人肝癌HepG2细胞系和永生化人胚肝L-02细胞系增殖的影响,集落形成法检测细胞生长,Western blot检测ERK1/2,FoxO3a蛋白磷酸化水平。结果：VB-1以浓度依赖方式抑制HepG2细胞增殖活性,对L-02细胞作用微弱。VB-1有效抑制HepG2细胞锚定依赖生长,并降低p-ERK1/2,p-FoxO3a表达水平,呈浓度依赖性。MEK抑制剂PD98059增强VB-1抑制HepG2细胞增殖和ERK1/2,FoxO3a磷酸化的作用。结论：VB-1通过阻断ERK/FoxO3a信号轴抑制肝癌HepG2细胞增殖活性。     

知葛通脉汤对糖尿病周围神经病变大鼠背根神经节MAPK / ERK通路的影响

目的:研究知葛通脉汤对糖尿病周围神经病变背根神经节丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路的影响。方法:选取无特定病原体级SD雄性大鼠50只为研究对象,随机选取10只作为对照组,其余40只为研究组,随机分为四组:知葛通脉汤低、中、高剂量组:分别按照每日2.5g/kg、7.5g/kg、15g/kg体重标准灌胃知葛通脉汤,模型组灌胃给予等量生理盐水,连续给药6周,观察记录大鼠背根神经节中磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、p38MAPK、ERK、磷酸化ERK(p-ERK)活性和表达水平以及p38MAPK、ERKmRNA水平。结果:模型组p-p38MAPK、p-ERK活性和蛋白表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);知葛通脉汤低、中、高剂量组p-p38MAPK、p-ERK活性和蛋白表达水平明显低于模型组(P0.05);知葛通脉汤高剂量组p-p38MAPK、p-ERK活性和蛋白表达水平明显低于低剂量组(P0.05),各组之间p38MAPK、ERK活性和蛋白表达水平无明显差异(P0.05);模型组p38MAPK、ERKmRNA表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);知葛通脉汤低、中、高剂量组p38MAPK、ERKmRNA表达水平明显低于模型组(P0.05);知葛通脉汤高剂量组p38MAPK、ERKmRNA表达水平明显低于低剂量组(P0.05)。结论:知葛通脉汤可降低p-p38MAPK、p-ERK活性和蛋白表达水平,有效抑制背根神经节MAPK/ERK通路。     

南蛇藤对人肝癌HepG2细胞侵袭能力的影响

目的:研究南蛇藤乙酸乙酯提取物(Celastrus orbiculatus extracts,COE)对人肝癌HepG2细胞侵袭能力的影响。方法:不同浓度COE(20、40、80、160、320μg/ml)处理人肝癌HepG2细胞24 h后,用MTT法检测细胞毒作用;Transwell小室法检测细胞的侵袭能力;Western blot法检测人肝癌HepG2细胞蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又名Akt)、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)、NF-κBp65、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases2,MMP-2)、MMP-9蛋白的表达水平。结果:COE(20、40、80、160、320μg/ml)能显著抑制人肝癌HepG2细胞的增殖能力,呈明显的剂量依赖性;COE(20、40、80μg/ml)能降低人肝癌HepG2细胞的穿膜细胞数;COE(20、40、80、160μg/ml)下调人肝癌HepG2细胞中p-Akt、NF-κBp65、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平。结论:COE能抑制人肝癌HepG2细胞侵袭能力,其机制可能与下调p-AKT、NF-κBp65、MMP-2和MMP-9蛋白的表达有关。     

苦参颗粒对兔耳痤疮模型P38MAPK/ERK相关信号通路的影响

目的:探讨苦参颗粒溶液对兔耳痤疮模型P38MAPK/ERK相关信号通路的影响及其治疗效果。方法:家兔除空白对照组外,其余各组用kligman法建立兔耳痤疮模型,于造模成功后,予模型组、夫西地酸乳膏组、苦参颗粒100、200、400mg/ml组分别涂敷生理盐水和相应药物,每日一次,连续14d。通过HE染色显微镜下判断其治疗效果;免疫组化检测TNF-α、IL-6、IL-8蛋白的表达;Western blot法检测p-p38MAPK、p-ERK、p38MAPK、ERK蛋白表达;ELISA测定法p-p38MAPK、p-ERK蛋白的含量。结果:与空白组比较,模型组TNF-α、IL-6、IL-8 MOD值和p-p38MAPK、p-ERK表达明显升高,p38MAPK、ERK表达明显下降;与模型组相比,给药各组TNF-α、IL-6和IL-8 MOD值和p-p38MAPK、p-ERK表达明显降低,p38MAPK、ERK表达明显增加。结论:苦参颗粒溶液能降低TNF-α、IL-6、IL-8含量,下调p-p38MAPK、p-ERK蛋白表达,上调p38MAPK、ERK蛋白表达,干预ERK、p38MAPK通路,从而干预痤疮的形成,对痤疮有疗效。     

三七皂苷单体Rb1在低氧高二氧化碳肺动脉收缩中的保护作用及机制

目的 探讨三七皂苷单体Rb1在低氧高二氧化碳性肺动脉收缩(hypoxia hypercapnia-induced pulmonary vasoconstriction,HHPV)中的保护作用及机制。方法 原代培养健康雄性SD大鼠肺动脉平滑肌细胞,取第2～5代细胞至低氧高二氧化碳(1%O2,6%CO2)条件下继续培养,并分别用8、40、100 mg/L Rb1孵育24 h后收集细胞,分别采用Western blot测定磷酸化细胞外调节蛋白激酶（ERK）蛋白表达,半定量RT-PCR检测ERK1和ERK2 mRNA表达。结果 常氧组p-ERK蛋白及ERK1、ERK2 mRNA表达均呈弱阳性,低氧高二氧化碳组p-ERK蛋白及ERK1、ERK2 mRNA表达均明显增加(P<0.01);经不同浓度Rb1干预后,p-ERK蛋白及ERK1、ERK2 mRNA表达均明显降低(P<0.05,P<0.01),并呈剂量依赖关系,以100 mg/L效果最好。Rb1各浓度组p-ERK蛋白表达与ERK1和ERK2 mRNA表达均呈显著正相关(r分别为0.500、0.977,P<0.01)。结论 ERK1/2信号通路可能介导大鼠HHPV;三七皂苷单体Rb1可能通过抑制ERK1/2通路减轻HHPV。     

四君子汤加减对脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织ERK1/2，Akt，Bax表达的影响

目的:观察四君子汤加减对脑缺血/再灌注损伤大鼠细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2),蛋白激酶B(Akt),细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)的影响,探讨其保护神经细胞可能作用机制。方法:将55只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、四君子汤加减低、中、高剂量组(3.69,7.38,14.76 g·kg-1)。采用线栓法制备大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,治疗7 d后处死,取大鼠缺血侧脑组织,运用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2),磷酸化Akt(p-Akt),Bax蛋白含量。应用实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)测定脑缺血再灌注后脑组织内ERK1/2,Akt,Bax mRNA的表达变化。结果:与假手术组比较,模型组p-ERK1/2,p-Akt蛋白及mRNA表达显著下调(P0.01);Bax蛋白及mRNA表达显著上调(P0.01);与模型组比较,四君子汤加减低、中、高剂量组p-ERK1/2,p-Akt蛋白及mRNA表达明显上调,Bax蛋白及mRNA表达明显下调,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:四君子汤加减可能通过上调p-ERK1/2,p-Akt,下调Bax蛋白表达发挥脑保护作用。     

电针通过抑制下丘脑细胞外调节蛋白激酶5信号通路改善手术创伤大鼠脾脏自然杀伤细胞的功能

目的:观察下丘脑内细胞外调节蛋白激酶(ERK)5信号通路在电针改善手术创伤大鼠脾脏自然杀伤(NK)细胞功能中的作用及机制。方法:SD雄性大鼠随机分为对照组、创伤组、创伤+电针组、创伤+未电针组、创伤+低剂量BIX 02188组、创伤+高剂量BIX 02188组,每组6只。采用手术创伤模型,创伤+电针组选取双侧"足三里"穴,术后立刻电针,创伤+未电针组针刺双侧"足三里"穴,但不接电针仪,均持续30min,创伤+低剂量BIX 02188组、创伤+高剂量BIX 02188组于造模前1周进行侧脑室埋管,手术创伤前30min注射BIX 02188。免疫组化法和Western blot法观察下丘脑ERK 5磷酸化水平和蛋白表达,及促肾上腺皮质激素释放激素(CRF)蛋白表达,乳酸脱氢酶释放法和Real-time PCR法检测脾脏NK细胞杀伤功能及穿孔素(Perforin)和颗粒酶B(Granzyme B)的mRNA表达。结果:创伤组大鼠下丘脑内ERK 5信号通路显著激活,ERK 5磷酸化水平及蛋白表达均升高(P0.01,P0.05),电针及ERK 5抑制剂均可抑制ERK 5的磷酸化(P0.05,P0.01);手术创伤后,脾细胞Perforin及Granzyme B的mRNA明显下调,脾脏NK细胞的杀伤活力下降(P0.01,P0.05),电针治疗可增加Perforin及Granzyme B的基因表达,进而提高脾脏NK细胞的杀伤活力(P0.05);下丘脑内CRF的表达在创伤后明显上升(P0.01),给予ERK 5抑制剂或电针均可下调其表达(P0.01)。结论:电针改善手术创伤引起的脾脏NK细胞杀伤活力降低的机制之一可能是下调下丘脑内ERK 5信号通路的激活,减少CRF的产生,从而抑制下丘脑-垂体-肾上腺轴激活。     

粉防已碱对血管紧张素II诱导心肌肥大及p-ERK1/2表达的影响

目的：观察粉防已碱(tetrandrine, Tet)对血管紧张素II(angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ)诱导的心肌肥大及p-ERK_1/2表达及活性的影响。方法：培养新生大鼠心肌细胞,用相差显微镜计数心肌细胞搏动频率、细胞图像分析系统测量细胞体积、考马斯亮蓝法测定心肌细胞总蛋白含量、［₃H］-亮氨酸掺入法测定蛋白合成速率作为心肌肥大指标；以ERK免疫沉淀活性试剂盒测定ERK活性,Western-blot测定p-ERK_1/2表达。结果：Tet能显著抑制Ang II诱导的心肌细胞搏动频率、体积、总蛋白含量、蛋白合成速率的上升；对p-ERK_1/2表达及活性具有剂量依赖性的抑制作用。结论：Tet可以明显抑制Ang II诱导的心肌肥大,机制与降低p-ERK_1/2表达及活性有关。     

中药QHF复方抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭的机制研究

摘要：目的 研究中药QHF复方对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其可能的作用机制,为QHF的临床应用提供理论依据。方法 体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,以对数生长期的细胞为研究对象,予以不同浓度QHF复方及其他药物,CCK8法检测QHF复方对乳腺癌MCF-7细胞生长增殖的影响。细胞划痕实验和Transwell实验检测QHF复方对乳腺癌MCF-7细胞迁移、侵袭的影响。Western blot检测QHF复方对乳腺癌MCF-7细胞HGF/c-Met及其下游PI3K/Akt、MAPK/ERK信号通路的影响。结果 CCK8实验结果显示：中药QHF复方可不同程度抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖且这种抑制作用可显著拮抗HGF对乳腺癌MCF-7细胞增殖的促进作用。细胞划痕实验和Transwell实验结果显示：中药QHF复方能明显抑制MCF-7细胞迁移、侵袭且这种抑制作用可拮抗HGF 对MCF-7细胞迁移、侵袭的促进作用。Western blot实验结果显示：中药QHF复方可明显抑制乳腺癌MCF-7细胞HGF、p-c-Met、p-Akt、p-ERK、VEGF、MMP-2、MMP-9的表达。结论 中药QHF复方抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭的机制可能与抑制乳腺癌MCF-7细胞异常活化的HGF/c-Met及其下游PI3K/Akt、MAPK/ERK信号通路有关。     

氧化苦参碱保护醛固酮诱导的心肌细胞损伤作用机制分析

目的:研究氧化苦参碱(OMT)抑制细胞外信号调节激酶ERK1/2磷酸化对醛固酮(ALD)诱导心肌细胞损伤的干预作用。方法:采用胰酶消化与差数贴壁分离纯化原代心肌细胞,免疫细胞化学分析心肌细胞纯度。实验分为空白组、模型组(1×10-5mol·L-1ALD)和OMT高(3.78×10-4mol·L-1),低剂量(1.89×10-4mol·L-1)组共4组。运用MTT法检测细胞存活率,LDH外漏法测定细胞膜损伤程度,蛋白免疫印迹法分析p-ERK1/2及ERK1/2蛋白表达,实时荧光定量PCR分析ERK mRNA表达。结果:OMT可抑制ALD诱导的细胞存活率降低和LDH外漏增加;与模型组比较,OMT预处理后p-ERK1/2蛋白表达明显下调。结论:OMT对ALD诱导的心肌细胞损伤具有保护作用,其作用与抑制ERK1/2蛋白磷酸化有关。     

育肾助孕方对卵巢储备功能降低大鼠卵巢颗粒细胞ERK1/2、JNK1/2蛋白活化的影响

目的:观察育肾助孕方对卵巢储备功能降低(DOR)大鼠卵巢颗粒细胞卵巢组织细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、c-Jun氨基末端激酶1/2(JNK1/2)蛋白活化的影响,初步探讨其作用机制.方法:选择48只雌性SD大鼠随机分为六组:对照组、模型组、补佳乐组和育肾助孕方低、中、高剂量组,每组8只.除对照组以外,其...     

人参三七组方对大鼠缺血心肌Ras信号通路的影响

目的探讨人参三七组方对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)大鼠缺血心肌Ras、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2)和C-Raf-1蛋白及mRNA表达的影响。方法采用Wistar大鼠冠状动脉左前降支结扎的心肌缺血模型,并设空白组、假手术组、模型组、倍他乐克组和人参三七组方大、小剂量组。通过Western blot法检测缺血心肌的Ras、ERK1/2、磷酸化ERK1/2(phosphor-ERK1/2,p-ERK1/2)及C-Raf-1的蛋白含量,Real-time PCR法检测缺血心肌Ras、ERK1、ERK2及C-Raf-1mRNA表达情况。结果模型组Ras、C-Raf-1、p-ERK1/2蛋白及其mRNA表达较空白组、假手术组增加(P<0.05);人参三七组方大、小剂量组及倍他乐克组Ras、C-Raf-1、p-ERK1/2蛋白及其mRNA表达均显著高于模型组(P<0.05);人参三七组方大剂量组较小剂量组Ras、C-Raf-1、p-ERK1/2蛋白及其mRNA表达增高更明显(P<0.05)。各组ERK1/2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论人参三七组方能够促进缺血心肌Ras信号通路上的关键靶点Ras、C-Raf-1及ERK1/2表达,提示人参三七组方可能通过Ras信号通路来促进血管新生,具有一定剂量依赖性。     

罗格列酮与维A酸联合应用对MCF-7细胞相关蛋白表达的影响

 目的研究PPARγ激动剂罗格列酮(ROZ)与维A酸联合应用对人乳腺癌MCF-7细胞相关蛋白表达的影响,阐明PPARγ激活后的抗肿瘤作用以及相关机制。方法MTT法检测ROZ、维A酸及两者联合应用对MCF-7细胞生长的作用。用荧光染料Hochest33342对细胞单染观察MCF-7细胞凋亡形态。用流式细胞仪检测MCF-7细胞的细胞周期分布。采用Western Blot法测定药物对MCF-7细胞相关蛋白表达的影响。结果ROZ对MCF-7细胞有一定的生长抑制作用,与维A酸合用后能显著抑制MCF-7细胞增殖,且两者呈协同作用(q>1.15)。维A酸能增强ROZ的凋亡诱导作用,表现为核碎裂和核固缩的细胞增多。流式细胞术分析二者合用可导致G1期细胞周期阻滞,S期细胞减少。Western Blot结果显示,ROZ可促进PPARγ、P53、Erk1/2、p-ERK1/2及JNK的表达,抑制ERα、C-myc及p-JNK的表达;与维A酸联合应用时可显著升高PPARγ表达,降低ERα、Bcl-2、C-myc及p-JNK表达的作用增强,并且抑制ERK的磷酸化。结论ROZ与维A酸联合应用可显著抑制MCF-7细胞的增殖,具有协同作用,可通过对Bcl-2、C-myc、P53、ERα和MAPK信号传导通路的影响而发挥抑制细胞增殖、诱导凋亡的作用。