葛根素降低ApoE-/-小鼠visfatin表达抑制动脉粥样硬化形成的研究

目的观察葛根素对载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠主动脉粥样硬化(AS)病变、血脂水平、内脏脂肪素(visfatin)及炎症因子IL-6及TNF-α表达的影响。方法 50只SPF级8周龄雄性Apo E-/-小鼠予高脂饲料喂养随机分为5组:葛根素低、中、高剂量组分别给予葛根素300,600,1200 mg·kg-1·d-1灌胃;辛伐他汀组灌服辛伐他汀5 mg·kg-1·d-1;模型组灌服等剂量生理盐水。另设10只相同基因背景和周龄的雄性C57BL/6J小鼠为对照组予普通饲料喂养。16周后测小鼠体质量、血清脂质及visfatin、血浆IL-6及TNF-α含量;HE染色观察小鼠主动脉组织AS斑块面积;western blotting测小鼠主动脉visfatin蛋白的表达。结果各给药组小鼠体质量增加值、血清visfatin、TG、TC、LDL-C水平、血浆IL-6及TNF-α含量、主动脉visfatin蛋白表达均显著低于模型组(P0.05),血清HDL-C高于模型组(P0.05);辛伐他汀组、葛根素中、高剂量组小鼠主动脉AS斑块面积百分比显著低于模型组(P0.05)。结论葛根素可通过降血脂、减小AS斑块面积、降低IL-6及TNF-α含量等发挥抗AS效应,其机制可能与降低visfatin表达有关。     

解毒活血中药配伍对载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉 NF-кB与MMP-9表达的调控作用

目的 观察解毒活血中药配伍对载脂蛋白E基因敲除小鼠[apolipoprotein E knocked-out mice,ApoE(-/-)mice]主动脉核因子-кB(NF-кB)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平的调控作用.方法 13周龄ApoE(-/-)小鼠分为高脂组(给予高脂饲料)和普通饲料组(给予普通饲料),同时设13周龄C57 BL/6J小鼠对照组(给予普通饲料).19周后进行干预,普通饲料模型组、C57BL/6J小鼠对照组灌服生理盐水,高脂组随机分为解毒组[灌服虎杖苷26.6 mg/(kg·d)],活血组[灌服芎芍胶囊110 mg/(kg·d)],解毒活血配伍高剂量组[灌服虎杖提取物53.2 mg/(kg·d),芎芍胶囊220 mg/(kg·d)];解毒活血配伍中剂量组[灌服虎杖提取物26.6 mg/(kg·d),芎芍胶囊110 mg/(kg·d)];解毒活血配伍低剂量组[灌服虎杖提取物13.3 mg/(kg·d),芎芍胶囊55 mg/(kg·d)],洛伐他汀组[灌服洛伐他汀3.3 mg/(kg·d)],高脂饲料模型组(灌服生理盐水).17周后,取主动脉做常规石蜡切片,免疫组化观察其NF-кB和MMP-9表达的程度.结果 模型组ApoE(-/-)小鼠主动脉及粥样斑块NF-кB和MMP-9表达明显增加,虎杖苷、芎芍胶囊、洛伐他汀及解毒活血配伍治则的虎杖苷与芎芍胶囊配伍均可降低其主动脉NF-кB和MMP-9表达(P＜0.01),且以解毒活血配伍高剂量组疗效最好(P＜0.01).结论 解毒活血配伍可降低ApoE(-/-)小鼠主动脉NF-кB和MMP-9表达,且优于单纯解毒和活血组.     

定心方降低脂质运载蛋白-2表达抑制ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化形成的研究

目的探讨定心方对动脉粥样硬化(AS)小鼠的防治作用及其机制。方法 50只载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠喂食高脂饲料并随机分为5组:定心方低、中、高剂量组分别给予定心方(DXR)9.375,18.75,37.5 g/(kg·d)灌胃;辛伐他汀组予辛伐他汀5 mg/(kg·d)灌胃;模型组予等剂量生理盐水。另设10只C57BL/6J小鼠喂食普通饲料为对照组。14周后测小鼠血清脂质运载蛋白-2(LCN-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及白细胞介素-6(IL-6)水平;HE染色观察主动脉组织病理形态学改变;Western blot检测主动脉LCN-2蛋白表达。结果DXR中、高剂量组及辛伐他汀组小鼠血清LCN-2、TNF-α、MCP-1及IL-6水平、主动脉LCN-2蛋白表达及主动脉AS斑块面积均显著低于模型组(P0.05或P0.01)。结论 DXR可能通过降低LCN-2表达,抑制炎症反应,显著减轻ApoE~(-/-)小鼠AS病变。     

基于ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型的四妙勇安汤活性部位配伍规律研究

目的:观察四妙勇安汤活性部位配伍方(N8,N16,N18)对载脂蛋白E基因缺陷(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响。方法:48只8周龄ApoE-/-小鼠随机分为6组:四妙勇安汤活性部位配伍方N8、N16、N18(1 g/kg.d)组、辛伐他汀组(15 mg/kg.d)、罗格列酮组(10 mg/kg.d)及模型组,各组同时饲以高脂饲料,对照组采用C57小鼠8只,给药第16周后,采用小动物成像系统观察主动脉弓动脉粥样斑块形成程度;主动脉根部切片、HE染色,测定斑块面积与管腔面积比值(PA/LA);酶法测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)含量。结果:与模型组比较,N16组可显著抑制ApoE-/-小鼠主动脉弓粥样硬化斑块的形成,明显减少PA/LA值;与模型组比较,N8、N16、N18各组均有降低ApoE-/-小鼠血清TC、TG、LDL水平的作用。结论:四妙勇安汤活性部位配伍方具有较好的抑制动脉粥样硬化形成的作用。     

苏木乙酸乙酯提取物对动脉粥样硬化模型大鼠血脂及MMP-9的影响

目的:应用苏木乙酸乙酯提取物对动脉粥样硬化(AS)大鼠模型进行干预,测定大鼠血脂及血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的水平,进而为苏木乙酸乙酯提取物抗AS化作用提供客观依据。方法:采用腹腔注射维生素D3建立AS模型。将SD大鼠随机分为空白组、模型组、苏木低、中、高剂量组、辛伐他汀组,苏木低、中、高剂量组分别给予苏木乙酸乙酯提取物溶液10 ml/(kg·d)灌胃,分别相当于生药量1.15 g/(kg·d)、2.30 g/(kg·d)、3.45 g/(kg·d);辛伐他汀组灌服辛伐他汀溶液4.20g/(kg·d),空白组与模型组灌服等体积的羧甲基纤维素钠溶液。4周后取各组大鼠胸主动脉及腹主动脉采血,取得血清,测定血脂水平,应用ELISA法检测各组大鼠血清MMP-9的水平。结果:与空白组相比,模型组的TG、LDL-C、MMP-9水平升高,差异具有统计学意义(P0.05);与辛伐他汀组相比,苏木高、中、低剂量组TG、LDL-C、MMP-9表达水平无明显差异(P0.05);与模型组相比,苏木高、中、低剂量组和辛伐他汀组的TG、LDL-C、MMP-9水平降低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:苏木乙酸乙酯提取物能够降低AS模型大鼠血脂及MMP-9的表达水平,其作用与辛伐他汀相当。     

黄连素降低ApoE-/-小鼠内脏脂肪素表达

目的:观察黄连素(Ber)对载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠主动脉粥样硬化(AS)病变、内脏脂肪素(visfatin)及炎症因子表达的影响。方法:50只SPF级8周龄雄性Apo E-/-小鼠予高脂饲料喂养随机分为5组:Ber低、中、高剂量组分别ip给予Ber 2.5,5,7.5 mg·kg-1·d-1;辛伐他汀组ig辛伐他汀5 mg·kg-1·d-1;模型组ig等量生理盐水。另设10只相同基因背景和周龄的雄性C57BL/6J小鼠为对照组予普通饲料喂养。16周后测小鼠体重、血清脂质及visfatin,血浆白介素(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;HE染色观察小鼠主动脉组织AS斑块面积;免疫组化法测AS斑块内visfatin的表达;Western blotting测小鼠主动脉visfatin蛋白的表达。结果:小鼠体重增加值,血清visfatin,总胆固醇(TG),三酰甘油(TC),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,血浆IL-6及TNF-α含量,主动脉visfatin蛋白表达方面,模型组均显著高于对照组(P0.05),各给药组均显著低于模型组(P0.05);辛伐他汀组,Ber中、高剂量组小鼠主动脉AS斑块面积比显著低于模型组(P0.05)。结论:Ber可通过降血脂、减小AS斑块面积、降低IL-6及TNF-α含量等发挥抗AS效应,其机制可能与降低visfatin表达有关。     

Visfatin在ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化发展中的作用及丹参酮ⅡA干预研究

目的 探讨visfatin蛋白在动脉粥样硬化（AS）病变形成中的作用,以及丹参酮ⅡA抗载脂蛋白E基因缺陷（apoE-/-）小鼠AS病变的可能机制。方法 将C57BL/6J背景的apoE-/-小鼠随机分为4组：模型组,丹参酮ⅡA高、低剂量组,阳性对照组（辛伐他汀组）,每组8只。并以8只C57BL/6J小鼠作为空白对照组。apoE-/-小鼠给予高脂饮食,并按分组情况给予丹参酮ⅡA磺酸钠（20,10 mg·kg-1）或辛伐他汀（5 mg·kg-1）干预。第14周后全部处死,HE染色观察动脉斑块形成程度,测定斑块面积与管腔面积之比。酶法检测血清脂质含量。ELISA方法检测血清高敏C反应蛋白（hs-CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、金属基质蛋白酶-9（MMP-9）含量。采用western blotting法检测主动脉壁visfatin表达。结果 （1）空白对照组主动脉未见动脉粥样硬化改变,模型组有较明显的主动脉内膜增厚及粥样斑块的形成。模型组血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平及hs-CRP、TNF-α、MMP-9表达、动脉壁visfatin表达显著高于空白对照组,而高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平则显著低于空白对照组（均P＜ 0.05）。（2）与模型组比较,丹参酮ⅡA高、低剂量组、辛伐他汀组均可显著减少斑块面积与管腔面积比值,降低血脂中TC、TG、LDL-C水平（P＜ 0.05）,升高HDL-C水平（P＜ 0.05）;明显降低血清细胞因子hs-CRP、TNF-α、MMP-9水平,降低小鼠主动脉壁visfatin表达。（3）在减少斑块面积、改善血脂水平、抑制炎症、抑制visfatin表达方面,丹参酮ⅡA均具有显著的剂量依赖性。丹参酮ⅡA高剂量在减少斑块面积、改善血脂水平方面与辛伐他汀差异无显著性意义,但在降低hs-CRP、TNF-α、MMP-9水平,以及下调主动脉壁visfatin表达方面显著优于辛伐他汀组。（4）apoE-/-小鼠动脉壁组织visfatin表达水平与血清hs-CRP、TNF-α、MMP-9水平具有显著的正相关关系。结论 visfatin参与了AS的发生发展,其参与机制可能与炎症机制有关。丹参酮ⅡA可能通过调节apoE-/-小鼠血脂代谢、抑制炎症细胞因子hs-CRP、TNF-α、MMP-9的表达,及下调主动脉壁visfatin表达,进而抑制apoE-/-小鼠AS病变的形成发展。     

解毒活血配伍方药对载脂蛋白E基因敲除小鼠血清超敏C反应蛋白的影响

目的 观察解毒活血配伍方药对载脂蛋白E基因敲除［apolipoprotein E gene knock out,ApoE( / ) mice］小鼠血清超敏C反应蛋白（hs CRP）的影响。方法 13周龄110只ApoE( / )小鼠分为高脂饲料组（98只,给予高脂饲料）,普通饲料组（12只,给予普通饲料）,同时设13周龄C57 BL/6J小鼠作为正常对照组（12只,给予普通饲料）。19周后随机抽取高脂饲料ApoE( / )小鼠2只确认易损斑块形成后,剩余96只随机分为8组（模型组、解毒组、活血组、解毒活血配伍高、中、低剂量组、洛伐他汀组和血脂康组）,每组12只。造模成功后每天给予药物干预,解毒组予虎杖提取物266 mg/kg;活血组予芎芍胶囊110 mg/kg;配伍高剂量组予虎杖提取物53.2 mg/kg,芎芍胶囊220 mg/kg;配伍中剂量组给予虎杖提取物26.6 mg/kg,芎芍胶囊110 mg/kg;配伍低剂量组给予虎杖提取物133 mg/kg,芎芍胶囊55 mg/kg;洛伐他汀组给予洛伐他汀3.3 mg/kg;血脂康组给予血脂康0.2 g/kg;以上药物根据剂量蒸馏水溶解,混匀后灌胃,每次0.4 mL。模型组、普通饲料组、C57BL/6J小鼠对照组均灌服生理盐水0.4 mL。用药17周后,下腔静脉取血,全自动酶标仪检测血清hs-CRP浓度。结果 模型组血清hs-CRP水平显著高于正常对照组和普饲组（P<0.05,P<0.01）;各给药组中,洛伐他汀组、解毒组和配伍高剂量组hs-CRP水平下降,与模型组比较,差异有统计学意义（P<0.01）;配伍高剂量组hs-CRP水平低于洛伐他汀组、血脂康组、单纯解毒或活血组及配伍中、低剂量组;解毒组hs-CRP水平低于活血组（P<0.01）。结论 解毒活血配伍方药可降低ApoE( / )小鼠血清hs-CRP水平。     

补肾化浊方联合粪菌移植对来曲唑诱导的多囊卵巢综合征大鼠生殖、代谢功能及相关炎症因子的影响

目的以肠道微生态为切入点探讨补肾化浊方联合粪菌移植治疗多囊卵巢综合征(PCOS)潜在机制。方法将30只6周龄SD大鼠随机分为空白组、模型组、中药组、粪菌移植组、中药+粪菌移植组,每组6只。来曲唑1 mg/(kg d)灌胃51 d,第22日起,中药组加灌补肾化浊方21.7 g/(kg d),粪菌移植组加灌新鲜粪便2 g/(kg d),中药+粪菌移植组加灌补肾化浊方21.7 g/(kg d)和新鲜粪便2 g/(kg d),连续30 d,另设空白组。干预结束后,腹主动脉取血检测大鼠血清性激素、空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FPG),ELISA检测大鼠血清白细胞介素(IL)-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,HE染色观察大鼠卵巢形态学变化。结果与空白组比较,模型组大鼠卵巢呈多囊样改变,体质量、睾酮、黄体生成素(LH)/促卵泡激素(FSH)、FPG、HOMA-IR、IL-18、TNF-α水平均明显升高(P<0.01,P<0.001);与模型组比较,中药+粪菌移植组可显著改善上述指标(P<0.05,P<0.01,P<0.001),中药组可显著改善除TNF-α外各项指标(P<0.05,P<0.01),粪菌移植组可显著降低PCOS大鼠LH/FSH、IL-18水平(P<0.01,P<0.001);在降低IL-18水平方面,中药+粪菌移植组作用显著优于中药组(P<0.01)。结论中药联合粪菌移植可显著改善PCOS大鼠生殖和代谢功能,改善慢性炎症状态。     

化浊解毒活血通络法对脑缺血再灌注损伤小鼠行为学及海马神经细胞形态学的影响

目的探讨化浊解毒活血通络法对脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法将50只昆明小鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、尼莫地平组,每组10只。采用线栓法制造小鼠右侧大脑中动脉脑缺血再灌注模型。手术造模成功后假手术组、模型组灌服生理盐水20ml/(kg.d),尼莫地平组灌服尼莫地平液19.6g/(kg.d),中药高剂量组、中药低剂量组分别给予化浊解毒活血通络中药19.6g/(kg.d)及9.8g/(kg.d)灌服。均每日1次,14天后进行行为学测试,并通过光镜观察小鼠海马CA1区的病理形态学改变。结果与模型组相比,中药高剂量组能提高脑缺血再灌注损伤小鼠的学习和记忆成绩,改善小鼠海马CA1区的神经细胞形态学表现,并且优于尼莫地平组和中药低剂量组(P<0.05)。结论化浊解毒活血通络法对脑缺血再灌注损伤小鼠的行为学能力及海马CA1区的神经细胞具有保护作用,这可能是该法对抗脑缺血再灌注损伤的机制之一。     

参芪复方中活血组分早期应用调控KKAy小鼠糖尿病大血管病变内质网应激相关基因的实验研究

目的通过基因芯片观察参芪复方中活血组分早期应用对KKAy小鼠主动脉内质网应激的调控,探讨早期应用活血法对糖尿病大血管病变的作用机制,为早期使用活血法防治糖尿病大血管病变提供理论依据及治疗新靶点。方法随机血糖2次≥13.9mmol/L的7～8周龄SPF级雄性KKAy小鼠50只,随机分为空白组(n=10);参芪复方组(简称复方组,n=10);活血组(n=10);阿托伐他汀组(简称他汀组,n=10);模型组(n=10)。适应性饲养1周后,除空白组以外,其他各组每日予以一氧化氮合成酶抑制剂—L-NAME[0.2mg/(ml·d)],加入饮用水中,同时给予高脂饲料连续造模5周,建立糖尿病动脉粥样硬化模型。在造模的同时给予药物治疗,空白组、模型组均按10ml/(kg·d)灌服生理盐水,复方组14.4g/(kg·d)、活血组按2.7g/(kg·d)灌服浸膏,他汀组按3.2mg/(kg·d)灌服阿托伐他汀悬液。实验期间观察各组小鼠的一般状况、检测造模前后随机血糖,检测血脂及高敏C反应蛋白,干预后第5周末处死小鼠,取出腹主动脉做内质网应激相关基因筛选。结果复方组与活血组一般状况优于模型组,活血组降糖效果不明显,活血组降低小鼠血清TC、TG、LDL—C水平、hs—CRP水平,升高小鼠血清HDL—C水平。基因芯片筛选后显示,通过模型组VS空白组与活血组VS模型组比较Hspa5、Casp12在模型组VS空白组比较中表达上调,经活血组分药物治疗后Bc12/XIAP在模型组VS空白组比较中表达下调。结论参芪复方活血组分可能直接通过缓解ERS,调控主动脉内质网UPR通路及细胞凋亡通路,影响炎症因子及ERS相关基因的表达,促进细胞生存保护大血管;同时,也可能通过调节内质网应激从而改善糖、脂代谢来防治糖尿病大血管病变的发生、发展。     

冠心康对载脂蛋白E基因敲除动脉粥样硬化小鼠主动脉粥样斑块及MCP-1、NF-κB表达的影响

目的 观察中药复方冠心康对载脂蛋白E(ApoE)基因敲除(ApoE-/-)动脉粥样硬化小鼠主动脉粥样斑块病理形态及病灶处单核细胞趋化蛋白l(MCP-1)、核因子-κB(NF-κB)的影响.方法 50 只6 周龄ApoE-/-小鼠予高脂饲料喂养建立实验性动脉粥样硬化小鼠模型.10 只6 周龄C57BL/6J 小鼠为正常组,给予普通饲料.至第12 周龄时,将ApoE-/-小鼠随机分为模型组、辛伐他汀组及冠心康高(3.456 g/mL)、中(1.728 g/mL)、低剂量组(0.864 g/mL),继续给予高脂饲料,每日灌胃给药1 次.连续灌胃8 周后,取主动脉进行苏木素-伊红染色观察病理形态改变,免疫组织化学法检测斑块处MCP-1、NF-κB 的表达含量.结果 与模型组比较,各给药组管腔面积(LA)大、血管内膜厚度(IMT)薄、斑块面积(PA)小、纤维肌性成分(FS)少、脂质中心面积(CA)小、最小纤维帽厚度(FCT)薄、斑块面积与管腔面积之比(PA/LA)小、脂质中心面积与斑块面积之比(CA/PA)小、脂质中心面积与纤维肌性成分之比(CA/FS)大,MCP-1 和NF-κB 平均光密度值小(P <0.05).冠心康高剂量组作用明显优于辛伐他汀组(P <0.05).冠心康低、中、高剂量组之间比较不存在量效关系,但以冠心康高剂量组作用最为明显.结论 冠心康对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化有一定的干预作用,可减少MCP-1、NF-κB 的表达,延缓动脉粥样硬化的进展.     

解毒活血中药配伍对载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉NF-κB与MMP-9表达的调控作用

目的 观察解毒活血中药配伍对栽脂蛋白E基因敲除小鼠[apolipoprotein E knocked-outmice,ApoE（-／-）mice]主动脉核因子-κB（NF-κB）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达水平的调控作用。方法 13周龄ApoE（-／-）小鼠分为高脂组（给予高脂饲料）和普通饲料组（给予普通饲料）,同时设13周龄C57BL／6J小鼠对照组（给予普通饲料）。19周后进行干预,普通饲料模型组、C57BL／6J小鼠对照组灌服生理盐水,高脂组随机分为解毒组[灌服虎杖苷26．6mg／（kg·d）],活血组[灌服芎芍胶囊110mg／（kg·d）],解毒活血配伍高剂量组（灌服虎杖提取物53．2mg／（kg·d）,芎芍胶囊220mg／（kg·d）];解毒活血配伍中剂量组[灌服虎杖提取物26．6mg／（kg·d）,芎芍胶囊110mg／（kg·d）];解毒活血配伍低剂量组（灌服虎杖提取物13．3mg／（kg·d）,芎芍胶囊55rag／（kg·d）],洛伐他汀组[灌服洛伐他汀3．3mg／（kg·d）],高脂饲料模型组（灌服生理盐水）。17周后,取主动脉做常规石蜡切片,免疫组化观察其NF-κB和MMP-9表达的程度。结果 模型组ApoE（-／-）小鼠主动脉及粥样斑块NF-κB和MMP-9表达明显增加,虎杖苷、芎芍胶囊、洛伐他汀及解毒活血配伍治则的虎杖苷与芎芍胶囊配伍均可降低其主动脉NF-κB和MMP-9表达（P〈0．01）,且以解毒活血配伍高剂量组疗效最好（P〈0．01）。结论 解毒活血配伍可降低ApoE（-／-）小鼠主动脉NF-κB和MMP-9表达,且优于单纯解毒和活血组。     

铁皮石斛对ApoE-/-小鼠血脂及TNF-α,IL-6的影响

目的:考察铁皮石斛对ApoE-/-小鼠血脂、炎症相关蛋白的影响,探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制.方法:将ApoE-/-小鼠以高脂饲喂养4w构建AS小鼠模型,分别用辛伐他汀(3 mg·kg-1)、铁皮石斛(1.5,3 g·kg-1)对小鼠灌胃给药,8w后处死,酶法检测血清血脂;ELISA检测血清中TNF-α,IL-6表达;苏丹Ⅳ染色观察主动脉瓣处斑块形成情况;HE和油红0染色观察小鼠主动脉管腔内粥样斑块;免疫组化法检测TNF-α和IL-6在主动脉壁的表达.结果:铁皮石斛可显著降低小鼠血清中TG,TCHOL,LDL-C水平,下调血清中TNF-α,IL-6表达;可明显减少ApoE-/-小鼠主动瓣处粥样斑块的面积和ApoE-/-小鼠主动脉管腔内粥样斑块的面积,可明显降低TNF-α,IL-6在主动脉内表达.结论:铁皮石斛能有效降低ApoE-/-小鼠血清中有关脂质含量,降低血清和主动脉内TNF-α,iL-6的表达,降低炎症反应的发生,缓解动脉粥样硬化损伤.     

香青兰总黄酮对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化病变中TGF-β1/Smad信号通路及基质金属蛋白酶表达的影响

研究香青兰总黄酮(TFDM)对高脂饮食诱导载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化形成的影响及其相关机制。采用40只SPF级8周龄雄性ApoE~(-/-)小鼠予高脂饲料喂养,随机分为5组:香青兰总黄酮低、中、高剂量组分别给予21,42,84 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃;辛伐他汀组灌服辛伐他汀3.5 mg·kg~(-1)·d~(-1);模型组灌服等剂量生理盐水。另设8只相同基因背景和周龄的雄性C57BL/6J小鼠为对照组予普通饲料喂养。各组均灌胃干预12周,采用HE染色观察主动脉病理形态学变化;qRT-PCR法检测组织中TGF-β1,Smad2,Smad3,MMP-2和MMP-9基因的水平。实验结果显示:与模型组比较,HE染色观察TFDM给药组表现主动脉粥样硬化组织损伤明显减轻;TFDM不同剂量组可在一定程度上抑制高脂饲料诱导的ApoE~(-/-)小鼠主动脉TGF-β1,Smad2,Smad3,MMP-2,MMP-9 mRNA的表达,且呈现一定的剂量依赖关系趋势。提示TFDM具有减缓小鼠动脉粥样硬化形成的作用,其作用机制可能与干预TGF-β1/Smad信号转导有关。     

散结通脉方对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化主动脉钙库操纵性钙通道信号分子及血清炎症因子的影响

目的研究散结通脉方对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化模型血清中炎症因子含量及主动脉根部Orai1、STIM1蛋白表达的影响。方法采用高脂饲料(2%胆固醇、0.4%胆酸盐、10%脂肪、69.6%普通饲料)喂养ApoE~(-/-)小鼠12周建立动脉粥样硬化斑块模型,造模同时灌胃给予供试药品混悬液治疗。给药周期结束,检测各组动物血清TC、TG、HDL-cho、LDL-cho含量及TC/HDL-cho比值;血清hs-CRP、E-selectin、IL-6含量;主动脉根部STIM1、Orai1蛋白表达。结果散结通脉方13.5、6.75和3.40 g/kg 3个给药组具有明显降低模型动物血清TC、TG和LDL-cho的作用,与动脉粥样硬化模型组比较,分别为P0.01或P0.05;13.5 g/kg剂量组血清E-selectin、IL-6水平明显低于模型组,具有统计学差异(P0.05);13.5、6.75 g/kg 2个剂量组主动脉根部Orai1、STIM1蛋白表达及血清中hs-CRP水平均明显低于模型组,具有统计学差异(P0.01或P0.05);3.40 g/kg剂量组主动脉根部Orai1蛋白表达明显低于模型组,具有统计学差异(P0.05)。结论散结通脉方可以通过下调钙离子信号蛋白的表达抑制血管平滑肌细胞增殖迁移,并通过发挥调脂、抗炎等多种效应,对动脉粥样硬化发生发展过程中多因素多环节起到调节作用,进而延缓甚或逆转不稳定斑块的病理进程。     

金顶侧耳提取物拮抗环磷酰胺致小鼠肝损伤作用的研究

目的探讨金顶侧耳提取物拮抗环磷酰胺致小鼠肝损伤的作用。方法小鼠以环磷酰胺(85 mg/kg×2)腹腔注射制备肝损伤模型,金顶侧耳提取醇沉上清部分按1.6,0.8,0.4 g/(kg.d)分为3个剂量组,沉淀部分按0.8,0.4,0.2 g/(kg.d)分为3个剂量组,腹腔注射给药(正常对照组注射生理盐水)13 d后测定各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性和丙二醛(MDA)的含量及肝组织MDA含量。结果与正常对照组比较,模型组小鼠ALT、AST和MDA含量明显提高(P均<0.05);与模型组比较,金顶侧耳提取物沉淀部分0.8 g/(kg.d)组和0.4 g/(kg.d)组小鼠ALT和AST的活性明显降低(P<0.05或0.01);上清部分0.4 g/(kg.d)组小鼠血清AST的活性明显降低(P<0.05);金顶侧耳提取物沉淀部分0.4 g/(kg.d)组和上清部分0.4 g/(kg.d)组小鼠血清MDA含量明显降低(P均<0.05)。结论金顶侧耳提取物具有一定的拮抗环磷酰胺致小鼠肝损伤的作用,其中沉淀部分的生物活性较强。     

马黛通络饮对小鼠动脉粥样硬化血管内皮损伤的保护作用

目的:研究马黛通络饮对动脉粥样硬化(AS)小鼠模型血管内皮损伤的保护作用机制。方法:选取5周龄雄性AopE-/-鼠48只,随机分为模型组、辛伐他汀组和马黛通络饮高、低剂量组,相同遗传背景C57BL/6J雄性小鼠为正常对照组,共5组,每组12只。除正常对照组外,其余各组给予高脂饲料喂养4周造模,马黛通络饮高、低剂量组每天给予马黛通络饮煎剂20 g/(kg·d)、10 g/(kg·d)灌胃,辛伐他汀组每天给予辛伐他汀稀释液0.01 g/(kg·d)灌胃,正常对照组和模型组灌胃等体积的生理盐水。连续灌胃8周后,采用ELISA法检测各组小鼠主动脉组织中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、内皮源型一氧化氮合酶(eNOS)水平,Western blot法检测核转录因子-κB(NF-κB)的水平。结果:与正常对照组比较,模型组、辛伐他汀组、马黛通络饮低剂量组、马黛通络饮高剂量组小鼠主动脉组织中的TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1、MCP-1、NF-κB水平显著升高,eNOS显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,辛伐他汀组、马黛通络饮低剂量组、马黛通络饮高剂量组小鼠主动脉组织中的TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1、MCP-1、NF-κB显著降低,eNOS显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:马黛通络饮通过抑制NF-κB信号通路的活性,降低Apo E基因敲除小鼠主动脉内TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1、MCP-1等炎性因子、黏附分子、趋化因子水平,增加了eNOS的表达,达到抑制炎症浸润、保护血管内皮的作用。     

马黛通络饮对动脉粥样硬化小鼠血管内皮损伤的保护作用

目的:研究马黛通络饮对动脉粥样硬化(AS)小鼠模型血管内皮损伤的保护作用机制。方法:选取5周龄雄性AopE-/-鼠48只,随机分为模型组、辛伐他汀组和马黛通络饮高、低剂量组,相同遗传背景C57BL/6J雄性小鼠为正常对照组,共5组,每组12只。除正常对照组外,其余各组给予高脂饲料喂养4周造模,马黛通络饮高、低剂量组每天给予马黛通络饮煎剂20 g/(kg·d)、10 g/(kg·d)灌胃,辛伐他汀组每天给予辛伐他汀稀释液0.01 g/(kg·d)灌胃,正常对照组和模型组灌胃等体积的生理盐水。连续灌胃8周后,采用ELISA法检测各组小鼠主动脉组织中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、内皮源型一氧化氮合酶(eNOS)水平,Western blot法检测核转录因子-κB(NF-κB)的水平。结果:与正常对照组比较,模型组、辛伐他汀组、马黛通络饮低剂量组、马黛通络饮高剂量组小鼠主动脉组织中的TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1、MCP-1、NF-κB水平显著升高,eNOS显著降低,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。与模型组比较,辛伐他汀组、马黛通络饮低剂量组、马黛通络饮高剂量组小鼠主动脉组织中的TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1、MCP-1、NF-κB显著降低,eNOS显著升高,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:马黛通络饮通过抑制NF-κB信号通路的活性,降低Apo E基因敲除小鼠主动脉内TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1、MCP-1等炎性因子、黏附分子、趋化因子水平,增加了eNOS的表达,达到抑制炎症浸润、保护血管内皮的作用。     

消癥通络中药对糖尿病肾病大鼠胃排空的影响

目的 观察消癥通络中药对糖尿病肾病大鼠胃排空的干预作用并探讨其可能机制.方法 选择雄性SD大鼠50只,随机分为空白组、模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,用左肾切除术加腹腔注射链脲佐菌素制作糖尿病肾病模型,中药低、中、高剂量组分别灌服消癥通络中药5.29g/(kg·d)、10.58g/(kg·d)、21.16g/(kg·d),空白组、模型组大鼠灌服相当剂量的生理盐水,连续6周.实验结束测定胃排空率、血清瘦素、胰高血糖素水平.结果 与空白组比较,模型组大鼠胃排空率明显下降(P<0.05),血清瘦素、胰高血糖素水平明显升高;与模型组比较,消癥通络中药能明显改善糖尿病大鼠胃排空,明显降低大鼠血清瘦素、胰高血糖素水平(P<0.05);血清瘦索、胰高血糖素水平与胃排空率呈明显负相关.结论 消瘕通络中药能明显改善糖尿病肾病大鼠胃排空功能,其机制可能与降低大鼠血清瘦素、胰高血糖素水平有关.