不同程度肺型氧中毒大鼠血气指标变化的实验研究

目的 通过测定高压氧暴露不同时间后大鼠的血气分析值,探究肺型氧中毒时体内酸碱平衡的动态改变.方法 50只雄性SD大鼠,随机分为5组,分别暴露于2.3绝对压(ATA)、100％氧气中3、6、9、12 h,空气暴露组作为对照.出舱后观测大鼠生存率、行为改变、肺组织湿干比.抽取股动脉血,行血气分析.结果 在2.3 ATA、100％氧气暴露后大鼠体内酸碱平衡呈现动态改变.与空气暴露组相比,血气分析值在暴露后3h无明显改变;暴露6及9h组与暴露3h相比有显著的统计学差异;而暴露12h组与6及9h相比又有显著性差异.肺湿干比的结果显示,暴露3h组与空气暴露组相比无明显差异,暴露6、9及12 h组显著上调,12 h组与3、6及9h组相比明显增高.结论 高压氧导致的肺型氧中毒动物体内酸碱平衡紊乱,从代偿期向失代偿碱中毒过渡,最后发展至失代偿性酸中毒.血气分析值在判断肺型氧中毒的疾病发展阶段具有重要的指导意义.     

巨噬细胞炎症蛋白-2抗体对肺型氧中毒小鼠肺组织的保护作用

目的 观察吸入巨噬细胞炎症蛋白-2(macrophage inflammatory protein-2,MIP-2)拮抗剂对肺型氧中毒小鼠肺组织的保护作用.方法 40只健康C57 BL/6雄性小鼠随机数字法分为5组:对照组、0.2 MPa-224 min组,0.2 MPa-289 min组、高压常氧组、抗体组.小鼠在密闭氧舱中吸入高压纯氧建立肺型氧中毒模型;对照组吸入空气;高压常氧组吸入氮氧混合气,氧分压与空气中氧分压相同;抗体组雾化吸入MIP-2抗体气溶胶.动物出舱后0.5 h解剖取肺,肺组织用于病理检查和免疫组化方法检测MIP-2的含量.结果 高压氧暴露组与对照组相比,肺组织MIP-2含量明显增高(P<0.05);高压常氧组与对照组相比,肺组织MIP-2含量变化不明显(P>0.05);吸入MIP-2抗体后的抗体组肺组织损伤程度明显减轻.结论 随着高压氧暴露时间的延长,炎症损伤呈加重趋势,吸入MIP-2抗体可以在一定程度上减轻肺组织的炎症损伤.     

230 kPa纯氧暴露不同时程小鼠肺组织TLR4基因表达的变化

目的 观察TLR4基因在肺型氧中毒中的表达情况,探讨TLR4在肺型氧中毒发病过程中的作用.方法 将40只小鼠随机分为对照组(肺型氧中毒剂量单位UPTD=0),230 kPa(绝对压)纯氧暴露2 h组(UPTD=347)、6 h组(UPTD=1044)、10 h组(UPTD=1740),和常氧高氮组(UPTD=0).分别进行病理学观察,检测肺湿/干质量比和肺组织TLR4基因表达情况.结果 随着暴露时间的延长,肺组织损伤严重程度逐渐加深,肺湿/干质量比值逐渐增加,TLR4表达逐渐降低,TLR4表达量与UPTD呈负相关(r=0.956,P<0.01).结论 TLR4可能参与了肺型氧中毒的发病过程,其机制有待进一步研究.     

脂肪间充质干细胞外泌体对脑创伤记忆障碍作用及机制研究

目的 探讨脂肪间充质干细胞外泌体对脑创伤记忆障碍的作用及机制。方法 采用差速离心法提取脂肪间充质干细胞外泌体。将24只SD大鼠随机分为对照组、脑创伤组、外泌体组,每组各8只。对照组大鼠不作处理,脑创伤组、外泌体组大鼠采用落体撞击法建立脑创伤模型,外泌体组在模型建立成功后静脉注射脂肪间充质干细胞外泌体300μg。7 d后,通过水迷宫评价大鼠记忆能力,通过湿干重、Tau和S100β蛋白评价脑组织损伤及修复情况。采用酶联免疫吸附法检测大鼠脑组织神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。采用蛋白免疫印迹法检测大鼠脑组织TrkA和TrkB蛋白表达。结果 脑创伤组大鼠湿干比、Tau和S100β蛋白表达水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);外泌体组大鼠湿干比、Tau和S100β蛋白表达水平低于脑创伤组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与脑创伤组比较,外泌体组大鼠第2～5天逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加,目标象限时间延长,脑组织NGF、BDNF、TrkA和TrkB蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 脂肪间充质干细胞外泌体能够...     

核因子-κB在大鼠肺型氧中毒发病中的作用

目的 探讨核因子(NF)-κB在大鼠肺型氧中毒发病中的作用.方法 32只SD大鼠随机分为正常对照组及230 kPa高压氧暴露2、6、10 h组.观察肺组织病理变化以及NF-κB和肿瘤坏死因子a(TNF-α)在肺组织中含量的变化.结果 (1)病理检查发现肺组织在高压氧暴露6 h组出现炎症改变,10 h组肺损伤加重.(2)肺组织细胞核中NF-κB P65含量在高压氧暴露2 h组中明显增高,6 h组中达高峰,10 h组中下降但仍高于正常对照组.(3)肺组织TNF-α mRNA表达及肺匀浆中TNF-α浓度在高压氧暴露6 h组中明显增高,10 h组中继续增高.结论 高压氧可以通过活化NF-κB诱导TNF-α高表达从而介导氧中毒的肺损伤.     

肺型氧中毒小鼠肺组织巨噬细胞炎症蛋白-2 mRNA表达的改变

目的观察高压氧暴露后小鼠肺组织巨噬细胞炎症蛋白-2（macrophage inflammatory protein-2，MIP-2）mRNA表达的影响。方法40只健康C57BL/6雄性小鼠采用随机数字法分为5组：650 UPTD组、850 UPTD组、1100 UPTD组、高压常氧组和对照组。小鼠在密闭氧舱中吸入高压纯氧建立肺型氧中毒模型。对照组吸入空气，高压常氧组吸入氮氧混合气，氧分压与空气中氧分压相同。动物出舱后解剖取肺，肺组织用于病理检测和RT-PCR方法检测MIP-2 mRNA的表达。结果（1）高压氧暴露组与对照组相比，MIP-2 mRNA表达明显增高（P〈0．05）；（2）高压常氧组与对照组MIP-2 mRNA表达没有明显变化（P〉0．05）。结论随着高压氧暴露剂量的增加，MIP-2 mRNA的表达明显增多，并且炎症损伤也呈增加趋势。     

PPAR-δ在高压氧诱导大鼠肺组织损伤中的作用

目的研究过氧化物酶增殖物激活受体-δ（PPAR-δ）在高压氧（hyperbaric oxygen,HBO2）诱导大鼠肺组织损伤中的作用。方法 60只雄性SD大鼠随机分为6组：air＋vehicle,air＋GW0742,air＋GSK0660,HBO2＋vehicle,HBO2＋GW0742,HBO2＋GSK0660,每组10只,分别暴露于常压空气或2.3 ATA纯氧中8 h。分别于进舱前1、6、12 h给予大鼠腹腔注射溶于10%二甲亚砜（DMSO）中的生理盐水（0.3 ml）、PPAR-δ激动剂GW0742（0.3 mg/kg,ip）、PPAR-δ阻滞剂GSK0660（1 mg/kg,ip）。出舱后30 min检测肺组织湿干比、肺泡灌洗液蛋白含量、肺组织病理形态变化。结果与结论与空气对照组比较,HBO2＋GW0742组大鼠肺组织湿干比、支气管肺泡灌洗液蛋白含量、组织病理学损伤改变减轻,而GSK0660应用能加重肺组织损伤。PPAR-δ激活对高压氧诱导的肺型氧中毒具有保护作用。     

高压氧对小鼠支气管肺泡灌洗液髓过氧化物酶活性的影响

一定压力一时程的高压氧暴露可以引起肺型氧中毒，其损伤以炎症渗出为主。小鼠支气管肺泡灌洗术(bronchoalveolarlavage，BAL)是研究动物呼吸系统机能变化的重要实验技术。本研究运用优化BAL方法，对高压氧暴露后小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中髓过氧化物酶(myeloperoxidse，MPO)活性变化进行探讨。     

双光气病理损害的实验研究 Ⅱ.双光气作用于呼吸系统不同部位对肺水肿的发生与程度的影响

本文观察了双光气作用于家兔呼吸系统上部及下部与肺水肿的发生和程度的关系。结果表明:双光气单独刺激上呼吸道不会引起肺水肿,其肺湿干比和相对肺水量分别为4.70±0.30和78.42±1.35%;与正常对照无差别。下呼吸道单独吸入双光气可引起严重的肺水肿,肺湿干比和相对肺水量为7.90±0.58和87.37±0.93%,而全呼吸道中毒和上、下呼吸道同时分别中毒的肺水肿程度无显著差别,但都比下呼吸道单独吸入组轻。结果提示双光气对上呼吸道刺激引起的反应可能具有减轻肺水肿程度的作用。     

CXCR4抑制剂对大鼠肺型氧中毒肺损伤的干预作用

目的：研究趋化因子受体4（chemokine receptor 4,CXCR4）特异性拮抗剂AMD3100在大鼠肺型氧中毒（ pulmonary oxygen intoxication）肺组织损伤中的干预作用。方法40只雄性SD大鼠随机分为常压空气PBS组、常压空气抑制剂组、纯氧暴露PBS组及纯氧暴露抑制剂组,每组10只。纯氧暴露PBS组及纯氧暴露抑制剂组利用0．23 MPa纯氧加压暴露,出舱后通过HE染色切片观察大鼠肺组织病理改变,ELISA法测定炎症因子TNF-α及IL-1β含量变化,应用Western印迹方法研究大鼠肺组织caspase-3含量变化。结果纯氧暴露抑制剂组大鼠肺组织淤血、水肿、出血与纯氧暴露PBS组相比程度较轻。纯氧暴露抑制剂组TNF-α、IL-1β及活化的caspase-3含量均低于纯氧暴露PBS组。结论应用AMD3100阻断CXCR4来减轻肺型氧中毒肺损伤是有效的。     

急性氧中毒小鼠肺组织IL-1β和IL-10含量的变化

氧中毒一般发生于高压氧治疗或常压下长时间吸入高浓度氧时,主要损伤部位是脑、肺和眼等组织。氧中毒最严重表现是惊厥发作,此时会伴有明显肺损伤,即发生肺型氧中毒[1-2]。肺型氧中毒发病机制错综复杂,其中炎症反应受到人们越来越多的重视。本研究应用酶联免疫吸附法( ELISA)检测急性氧中毒小鼠肺组织白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）和白细胞介素-10( interleukin-10,IL-10)水平的变化,以探讨炎症细胞因子在肺型氧中毒发生过程中的作用和意义。     

高压氧预处理对新生大鼠脑缺血损伤的保护作用

目的 观察高压氧预处理后缺氧缺血型脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage,HIBD)新生大鼠脑组织神经干细胞增殖变化以及后期脑发育和功能.方法 将6日龄新生大鼠进行0.25 MPa高压氧预处理150 min,24 h后制作HIBD模型,然后暴露于8%氧、92%氮的混合气中90 min.观察皮层和海马神经干细胞的增殖情况、损伤后大鼠体质量增长率和成年后脑形态,水迷宫检测学习记忆功能.结果 高压氧预处理组神经干细胞增殖显著,发育情况、脑形态和学习记忆功能与HIBD组有显著差异.结论 高压氧预处理可能通过促进神经干细胞增殖发挥对新生大鼠HIBD的保护作用并影响后期脑发育.     

富氧吸入对大鼠模拟急性高原肺水肿的防护作用

目的 探讨富氧吸人对大鼠模拟急性高原肺水肿的防护作用.方法 将44只健康雄性Wistar大鼠随机分为4组,分别为对照组、低压低氧组、连续富氧组、夜间富氧组,每组11只.除对照组外,其余3组均置于模拟6000 m海拔高度的低压舱中48 h.富氧干预48 h后,测定各组大鼠的肺湿干比、肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）血清和肺组织匀浆一氧化氮（nitric oxide,NO）含量、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）及肺组织病理学改变.结果 与对照组相比,低压低氧组大鼠BALF蛋白浓度及肺湿干比显著升高（P＜0.01）、血清及肺组织匀浆中NO 含量、NOS降低（P＜0.01）.病理学显示低压低氧组大鼠有肺泡间隔增宽、间质充血、炎细胞浸润等间质性肺水肿表现.连续富氧及夜间富氧均可降低肺泡灌洗液的蛋白浓度及肺湿干比,提高大鼠血清和肺组织内的NO含量、NOS活性,减轻肺泡间隔增厚、炎细胞浸润及肺泡出血,且连续富氧组与夜间富氧组各项指标差异无统计学意义.结论 富氧吸人可以通过提高体内的NO含量、NOS活性来防护大鼠急进高原肺水肿,夜间富氧与连续富氧防护效果无明显差别.     

大鼠头部暴露全氟异丁烯中毒致肺损伤实验模型的建立

目的：建立大鼠头部暴露吸入染毒致急性肺损伤实验模型以便进行全氟异丁烯(pefluoroisobutylene，PFIB)毒理及防治药物研究。方法：用设计的大鼠头部暴露吸入PFIB染毒装置致动物中毒，测定动物中毒后肺灌流液(BALF)中总蛋白含量和肺湿干比变化，在染毒过程中同时用气相色谱连续监测DFIB浓度。结果：在大鼠头部暴露吸入染毒中，PFIB染毒浓度比较稳定。大鼠吸入PFIB0．18mge／L(8—10min)致肺损伤实验模型比较明显，各项指标变化显著，中毒性肺水肿程度与HFIB浓时积(染毒浓度乘以时间，即CT值)呈正相关，动物中毒后12～24h肺灌流液中总蛋白含量和肺湿干比显著升高。结论：建立了大鼠头部暴露动态吸入PFIB中毒致急性肺损伤实验模型，该模型比较稳定，可用于观察动物PFIB中毒性肺水肿程度，也可作为：PFIB毒理及防治药物研究实验方法。大鼠PFIB中毒途径主要通过呼吸道吸入中毒，其吸入毒性至少比腹腔毒性大10倍。     

高压氧在急性硫化氢中毒治疗中的应用

急性硫化氢中毒症状出现特别快，严重在数秒钟内死亡，抢救须分秒必争，而及早进行高压氧治疗可有效保护大脑功能，减少损害，利于尽快苏醒康复，同时减轻肺部炎症及其它合并症。经抢救6例急性硫化氢中毒患(采用立即吸氧，大量维生素C、硫代硫酸钠、亚甲蓝静脉注射等)，结合高压氧治疗，8～15d全部痊愈出院。     

高压氧预暴露对急性氧中毒大鼠模型惊厥潜伏期影响的实验研究

目的 研究高压氧预暴露对大鼠急性氧中毒潜伏期的影响并探讨其机制.方法 将40只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为对照组和高压氧预暴露组,每组20只,其中高压氧预暴露组于高压纯氧(0.3 MPa)下暴露20 min,然后减至常压行空气通风20 min,如此循环4次.24 h后,将2组大鼠暴露于高压纯氧(0.5 MPa),观察40 min.检测指标包括惊厥潜伏期变化、大鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和一氧化氮(NO)含量变化,进行HE染色以观察脑组织病理改变.结果 高压氧预暴露后,大鼠惊厥潜伏期[(29.79±2.13)min]比对照组[(24.25±3.76)min]延长,脑组织NO含量[(2.93±0.39)nmol/g]比对照组[(7.46±1.11)nmol/g]减少,而SOD活性与HE染色结果 显示2组差异无统计学意义.结论 高压氧预暴露可以延长大鼠惊厥潜伏期,其机制可能是高压氧降低了脑组织中的NO含量.     

高压氧干预对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺损伤模型的保护作用及其机制

目的比较高压氧和常压氧处理对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺损伤的保护作用及其机制。方法选取体重(200±20)g Wistar大鼠32只, 按照随机数字表法分为4组, 对照组(n=8)予以生理盐水注射, 另外24只大鼠采用脂多糖(LPS)二次打击造模成功后分为模型组、常压氧组和高压氧组, 每组8只。模型组建模成功后不进行其他处理, 常压氧组给予2 h氧吸入, 高压氧组予以0.25 MPa高压氧干预。分别于建模后和干预3 d后测定动脉血氧分压(PaO2)和吸入氧气浓度百分比(FiO2);检测血D-乳酸、内毒素和血浆二胺氧化酶(DAO)水平;测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;检测大鼠肺组织中丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽GSH)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性、髓过氧化物酶(MPO)活性;并进行大鼠肺组织病理评分, 计算湿/干肺重量比(W/D)。结果高压氧组大鼠D-乳酸、内毒素、DAO水平、肺W/D比、肺组织病理评分、肺组织的MPO、MDA、GSH及灌洗液中IL-1β、IL-6和T...     

高压氧治疗婴幼儿脑瘫的疗效分析

目的探讨高压氧治疗婴幼儿脑瘫的效果。方法选择90例脑瘫患儿随机分为治疗组及对照组,各45例;对照组采用常规药物治疗,治疗组在对照组基础上加用高压氧治疗。结果治疗组治疗前后发育商评分和运动功能评分显著高于对照组(P<0.05);治疗组总有效率为91.1%,显著高于对照组的71.1%(P<0.05);治疗组在高压氧舱治疗过程中未发现眼型、肺型氧中毒的不良反应。结论使用高压氧治疗婴幼儿脑瘫能使患儿运动、言语、智力等功能达到最佳功能状态,且方法简便、不良反应少,是减轻残疾的有效手段之一。     

外泌体miRNA在脑卒中的作用机制研究进展

外泌体作为合适的基因载体并能精确调控基因而被认为是生物治疗靶点。外泌体因其自身特点可以规避细胞疗法的限制,静脉注射不仅便捷,而且其疗效近似于来源干细胞。miRNA作为外泌体主要内容物参与机体众多生理过程,如血管新生、神经修复、炎症和氧化应激,这与脑卒中的病理生理机制高度重合。近年来,大量研究表明外泌体miRNA治疗脑卒中效果显著。本文现对外泌体miRNA在脑卒中的作用机制作简要综述。     

间充质干细胞外泌体修复骨缺损的机制及作用研究进展

骨缺损是由于严重的创伤、感染、肿瘤切除、先天性畸形等引起的骨质丧失, 难以自然修复的骨缺损需要通过骨移植技术、膜诱导技术或干细胞骨组织工程技术修复。骨移植相关技术存在应用范围局限、操作复杂等缺点;膜诱导技术存在骨水泥降解速率不可控制, 需要二次手术等缺点;干细胞骨组织工程技术仍存在干细胞不定向分化等不稳定因素。外泌体是细胞之间通信的关键脂质体, 而工程化外泌体相较于天然干细胞外泌体有产量大、免疫原性低的优势, 有望代替干细胞应用于临床。笔者就间充质干细胞(MSC)外泌体修复骨缺损的机制及基于MSC的工程化外泌体修复骨缺损的作用研究进展进行综述, 为骨缺损的基础研究及临床治疗提供新思路。