抗DDVP和敏感淡色库蚊不同发育期非特异性酯酶活力变化的研究

目的 研讨非特异性酯酶（Non-specific esterase,NSE）活力在抗DDVP和敏感品系淡色库蚊不同发育期的变化,为应用生物化学方法检测蚊虫抗药性及科学合理地进行蚊虫化学防治提供依据。方法 以β－乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,用微量滴定板法测定蚊虫NSE活力。结果 敏感品系和抗DDVP品系淡色库蚊NSE活力水平在不同发育 变化,Ⅰ-Ⅲ龄幼虫较低,Ⅳ龄幼虫最高,蛹期略下降,成虫期较高,各发育期抗DDVP品系NSE活力均高于敏感品系,Ⅳ龄幼虫期二者差别明显。结论 测定NSE检测蚊虫抗药性可选择Ⅳ龄幼虫或3日龄未吸血雌成蚊;蚊虫化学防治中应选择低龄幼虫期施药。     

不同品系淡色库蚊各发育阶段的非特异性酯酶和乙酰胆碱酯酶活力变化

研究并探讨非特异性酯酶（NSE）和乙酰胆碱酯酶（AChE）活力在不同品系淡色库蚊（Cules pipiens pallens）各发育阶段的变化，为应用生物化学方法检测蚊虫抗药性及科学合理地进行蚊虫化学防治提供依据。用微量滴定板法测定单个蚊虫NSE和AChE活力，结果显示，敏感品系、DDVP抗性品系和残杀威抗性品系淡色库蚊NSE活力水平在不同发育阶段有变化，I－Ⅲ龄幼虫较低，Ⅳ龄幼虫、蛹和3日龄雌成蚊较高，在各发育阶段均是DDVP抗性品系NSE活力最高，残杀威抗性品系次之，敏感品系最低，其中Ⅳ龄幼虫、蛹和3日龄雌成蚊阶段三个品系间NSE活力差别更明显；三个品系淡色库蚊AChE活力在I－Ⅳ龄幼虫和蛹期较低，3日龄雌成蚊较高，三个品系间AChE活力稍有差异，从高到低依次为残杀威抗性品系、DDVP抗性品系和敏感品系。测定蚊虫NSE活力判断抗药性可选择Ⅳ龄幼虫、蛹和3日龄未吸血雌成蚊；测定蚊虫AChE不敏感性判断抗药性可选择3日龄未吸血雌成蚊；蚊虫化学防治中应选择低龄幼虫阶段施药。     

非特异性酯酶在淡色库蚊对不同杀虫剂抗性中的作用研究

目的　探讨非特异性酯酶（Non-specific esterase,NSE）在淡色库蚊对不同杀虫剂抗性中的作用。方法　以β-乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,测定室内5个品系淡色库蚊的NSE活力。结果　5个品系淡色库蚊中以抗DDVP品系NSE活力水平最高,其次为抗DDVP降解品系和抗残杀威品系。抗氯氰菊酯品系较低,与敏感品系相近。结论　NSE在淡色库蚊对有机磷类杀虫剂的抗性中起重要作用,也是对氨基甲酸酯类杀虫剂产生抗性的机制之一,与对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性关系不大。     

非特异性酯酶在淡色库蚊对不同杀虫剂抗性中的作用研究

目的：探讨非特异性酯酶（Non-specific esterase,NSE)在谈色库蚊对不同杀虫剂抗性中的作用。方法：以β－乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,测定室内5个品系淡色库蚊的NSE活力。结果：5个品系淡色库蚊中以抗DDVP品系NSE活力水平最高,其次为抗DDVP降解品系和抗残杀威品系,抗氯氰菊酯品系较低,与敏感品系相近。结论：NSE在淡色库蚊对有机磷类杀虫剂的抗性中起重要作用,也是对氨基甲酸酯类杀虫剂产生的机制之一,与对拟除虫菊类杀虫剂的抗性关系不大。     

滤纸法测定淡色库蚊乙酰胆碱酯酶活性的实验研究

用滤纸法根据颜色变化测定淡色库蚊敏感品系和抗性品系的乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）活性情况，以区分单个蚊虫的抗性情况。结果显示：敏感品系个体的ＡＣｈＥ随杀虫剂浓度的增高而被抑制（不显色）；抗性品系个体则不被抑制（显色明显）。说明两品系间ＡＣｈＥ的含量和活性有所不同。此法可快速地测定淡色库蚊内的ＡＣｈＥ活性，简单易行，可作为一种淡色库蚊抗药性定性测定的方法，便于在现场中推广应用。     

滤纸法测定淡色库蚊乙酰胆碱酯酶活性的实验研究

用滤纸法根据颜色变化测定淡色库敏感品系和抗性品系的乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）活性情况，以区分单个蚊虫的抗性情况，结果显示：敏感品系个体的ＡＣｈＥ随杀虫剂浓度的增高而被抑制（不显色）；抗性品系个体则不被抑制（显色明显）说明两品系间ＡＣｈＥ的含量和活性有所不同，此法可快速地测定淡色库蚊内的ＡＣｈＥ活性，简单易行，可作为一种淡色库蚊抗药性定性测定的方法，便于在现场中推广应用。     

酯酶滤纸法检测淡色库蚊抗药性的研究

为探讨简捷灵敏的蚊虫抗药性早期测报技术,以α-乙酸萘酯为底物,坚硬固蓝B盐为显色剂,用滤纸法测定实验室和现场淡色库蚊（Cx.pipien pallens)酯酶活力,结果显示三个抗性品系淡色库蚊以抗DDVP品系抗性个体频率最高,其次为抗残杀威品系,抗氯氰菊酯品系较低,与敏感品系相近;三个现场淡色库蚊均对DDVP和残杀威产生不同程度抗性,其抗性个体频率均较高,表明酯酶滤纸法可用于检测蚊虫对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性水平,该方法操作简便快速,观察结果直观灵敏,具有实用价值。     

用微量板法测定淡色库蚊非特异性酯酶判别抗药性

抗药性检测是抗性治理工作的基础 ,是预防抗性产生和发展的前提[1] 。我们根据抗性产生的生化机制 ,利用微量滴定板法对实验室和现场淡色库蚊进行了单个蚊虫非特异性酯酶测定 ,以判断其抗性。材料与方法1　供试蚊虫敏感 (Ｓ)品系 :室内常规饲养的淡色库蚊。抗性品系 :在室内分别用ＤＤＶＰ、残杀威、氯氰菊酯逐代汰选的抗ＤＤＶＰ(Ｒｄ)、抗残杀威 (Ｒｐ)、抗氯氰菊酯 (Ｒｃ)品系淡色库蚊。Ｒｄ降解品系 :Ｒｄ品系淡色库蚊连续 2 0代未用药物选育 ,进行常规饲养 ,其抗性自然减退的种群。现场种群 :分别在济宁市的李营、唐口、长沟三地采集的…     

微板法测定抗药性醋酶检测淡色库蚊抗药性的研究

目的 研究简捷灵敏的蚊虫抗药性早期测报技术。方法 以β-乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,用酯酶微板法测定实验室和现场单个淡色库蚊体内非特异性酯酶活力。结果 实验室5个品系淡色库蚊以抗DDVP品系非特异性酯酶活力水平最高,其次为抗残杀威品系和抗DDVP降解品系,抗氯氰菊酯品系较低,与敏感品系相近;3个现场淡色库蚊种群对DDVP抗性为4.15～9.36倍,对残杀威抗性为1.02～3.81倍,其非特异性酯酶活力水平均较高。结论 酯酶微板法测定非特异性酯酶能够检测蚊虫对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性水平,能够早期预测抗性发展趋势,便于制订抗药性克服对策。     

微板法测定抗药性酯酶检测淡色库蚊抗药性的研究

目的研究简捷灵敏的蚊虫抗药性早期测报技术. 方法以β-乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,用酯酶微板法测定实验室和现场单个淡色库蚊体内非特异性酯酶活力. 结果实验室5个品系淡色库蚊以抗DDVP品系非特异性酯酶活力水平最高,其次为抗残杀威品系和抗DDVP降解品系,抗氯氰菊酯品系较低,与敏感品系相近;3个现场淡色库蚊种群对DDVP抗性为4.15～9.36倍,对残杀威抗性为1.02～3.81倍,其非特异性酯酶活力水平均较高. 结论酯酶微板法测定非特异性酯酶能够检测蚊虫对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性水平,能够早期预测抗性发展趋势,便于制订抗药性克服对策.     

南京市浦口区蚊媒种群密度调查

在浦口区共捕捉到成蚊2842只,分别为淡色库蚊(24.6%)、白纹伊蚊(0.20%)、三带喙库蚊(14.2%)、骚扰阿蚊(50.4%)、中华按蚊(10.6%),6-9月为蚊虫活动高峰期。中华按蚊在人房内仅占1.2%,而在畜房内占16.4%;圩区中华按蚊数明显高于山区。     

南京市2013年蚊虫密度、种群及季节消长情况分析

目的了解南京市2013年蚊虫密度、种群及季节消长情况。方法按照《全国病媒生物监测方案（试行）》要求,采用诱蚊灯法在南京市开展蚊虫监测。结果 2013年南京市共捕蚊3 268只,蚊密度为0.57只/（h·灯）,捕获的蚊虫隶属2亚科4属5种,优势蚊种为淡色库蚊和三带喙库蚊,分别约占58.05%和17.59%,季节消长呈7月和10月双高峰曲线。结论南京市蚊虫具有种群多样性,淡色库蚊和三带喙库蚊为优势蚊种,每年7月和10月为密度高峰季节,可供当地蚊虫防制措施的指定提供参考。同时要关注蚊虫孳生地情况及气象因素对蚊虫密度的影响。     

沃尔巴克氏体与淡色库蚊溴氰菊酯抗性关系初步研究

目的 目的 探讨沃尔巴克氏体与淡色库蚊溴氰菊酯抗性间的相关性。 方法 方法 以PCR鉴定本实验室饲养的淡色库 蚊体内的沃尔巴克氏体, 采用实时定量PCR技术 （qRT?PCR） 测定并比较淡色库蚊溴氰菊酯抗性和敏感品系中沃尔巴克 氏体表达差异。 结果 结果 本实验室饲养的淡色库蚊体内含有沃尔巴克氏体。淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系卵、 一龄蚊、 二 龄蚊、 三龄蚊、 四龄蚊、 雌蚊、 雄蚊体内沃尔巴克氏体表达水平分别是敏感品系的18.42、 3.69、 4.43、 3.96、 6.31、 1.55、 3.76 倍, 差异均有统计学意义 （P均< 0.05）, 而抗性品系和敏感品系蛹中沃尔巴克氏体表达水平差异无统计学意义 （P > 0.05）。南京江心洲溴氰菊酯抗性雌蚊体内沃尔巴克氏体表达水平是敏感雌蚊的2.64倍。 结论 结论 沃尔巴克氏体可能与 淡色库蚊对溴氰菊酯产生抗性有关。     

安徽省中北部淡色库蚊对多种杀虫剂抗性及其kdr基因突变研究

目的 目的 了解安徽省中北部地区淡色库蚊对多种杀虫剂的抗药性现状及其kdr基因突变情况。方法 方法 2014年 6-9月在淮北市、 蚌埠市和滁州市3地采集淡色库蚊幼虫, 带回实验室饲养至成虫, 采用WHO成蚊接触筒药膜滤纸接触 法对其进行0.05%溴氰菊酯、 5%马拉硫磷、 0.1%噁虫威、 4%DDT抗性生物测定。以PCR扩增经溴氰菊酯抗性测定的库蚊 抗性相关kdr基因并进行测序, 统计L1014位点突变情况。结果 结果 上述3个地区淡色库蚊对溴氰菊酯、 马拉硫磷、 噁虫 威、 DDT 4种杀虫剂都产生了不同程度的抗药性, 对DDT产生的抗性较高; 虽然3地淡色库蚊接触DDT后的死亡率差异 无统计学意义 （F = 1.027,P > 0.05）; 但接触溴氰菊酯、 马拉硫磷、 噁虫威后的死亡率差异均有统计学意义 （F = 23.823、 33.955、 128.841, P均< 0.01）。3地淡色库蚊种群的kdr基因1014位点均存在L1014F、 L1014S 这2种非同义突变; L1014F 突变频率与溴氰菊酯抗性水平呈正相关 （r 2 = 0.718, P < 0.01）。结论 结论 安徽省中北部地区淡色库蚊对溴氰菊酯、 马拉硫 磷、 噁虫威、 DDT均产生了较强的抗性, kdr基因L1014F突变频率与溴氰菊酯抗性水平呈正相关; 各地区卫生部门需加强 对媒介蚊虫抗性的动态监测。     

微板法测定淡色库蚊体内非特异性酯酶检测其对杀虫剂抗性的研究

目的　探讨简捷灵敏的蚊虫抗药性早期测报技术。方法　以 β -乙酸萘酯为底物 ,坚固蓝B盐为显色剂 ,用微板法测定实验室和现场单个淡色库蚊体内非特异性酯酶活力。结果　实验室五个品系淡色库蚊以抗DDVP品系非特异性酯酶活力水平最高 ,其次为抗残杀威品系和抗DDVP降解品系 ,抗氯氰菊酯品系较低 ,与敏感品系相近 ;三个现场淡色库蚊种群对DDVP抗性为 4 15～ 9 36倍 ,对残杀威抗性为 1 0 2～ 3 81倍 ,其非特异性酯酶活力水平均较高。结论　微板法测定非特异性酯酶能够检测蚊虫对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性水平。方法简便快速 ,结果客观准确 ,可重复性强 ;可测出抗性频率 ,早期发现抗性的存在 ;可测知抗性机制 ,便于制订抗药性克服对策     

冰冻储存对淡色库蚊成虫乙酰胆碱酯酶活性的影响

-20℃冰冻0、7、14、21和28d的残杀威抗性品系和敏感品系淡色库蚊3d龄雌成虫AChE活性均无显著变化。表明-20℃冰冻不影响淡色库蚊AChE活性。因此可将现场采集的蚊虫带回实验室冻存后集中测定AChE。     

2018-2019年江苏省库蚊监测结果分析

目的 了解2018-2019年江苏省库蚊种群分布、密度变化及淡色库蚊对杀虫剂的抗性水平.方法 2018-2019年6-10月,选择江苏省苏南、苏北和苏中6个县(市、区)作为监测点,采用全通宵诱蚊灯法调查库蚊种群密度.采集苏中地区南通市海安市和盐城市盐都区淡色库蚊,采用WHO推荐的接触筒强迫接触法测定子1代雌性淡色库蚊对...     

济宁市太白湖新区越冬成蚊现状监测分析

目的 调查济宁市太白湖新区越冬蚊的种类、密度及分布情况。 方法 于2015年12月至2016年3月,在济宁市太白湖新区选取成蚊监测点采用目测法观察蚊虫数量并记录结果,同时捕捉成蚊在解剖镜下分类鉴定并观察吸血情况。随机选取50%进行解剖,观察蚊虫体内脂肪体累积和卵巢发育情况。 结果 共捕获成蚊1 677只,均为淡色库蚊。蚊虫越冬以地瓜窖、花房较多,成蚊阳性率分别为98.25%（56/57）和81.36%（48/59）。雌蚊2月下旬体内脂肪体骤减,3月上旬开始出现吸血和卵巢发育,3月中旬体内脂肪开始消失。 结论 济宁市太白湖新区淡色库蚊以成蚊越冬,主要越冬场所为地瓜窖、花房,应在越冬期加强成蚊的控制工作。     

淡色库蚊kdr等位基因突变及抗药性检测方法的研究

目的 了解山东省不同地区的淡色库蚊成蚊对溴氰菊酯的抗药性水平及其kdr等位基因的突变与抗药性水平间的关联情况,并探索建立蚊虫抗药性的现场检测方法。方法 采用RT-PCR和AS-PCR技术,使用特异性引物克隆不同地区野生淡色库蚊成蚊kdr基因序列,并进行基因测序。利用线性回归分析判断其突变情况与抗药性的关联情况。结果 成功克隆出kdr等位基因, 通过基因序列分析发现在淡色库蚊钠通道第II结构域S6节段1014位点上存在2种突变,即L1014F：TTA突变为TTT,相应的亮氨酸(L)被苯丙氨酸(F)取代,L1014S：TTA突变为TCA,相应的亮氨酸(L)被丝氨酸(S)取代。Kdr基因L1014F突变 和L1014S突变与淡色库蚊对溴氰菊酯的抗性表型呈正相关。RT-PCR和AS-PCR技术对蚊虫抗药性现场检测的结果一致。结论 淡色库蚊kdr基因突变与溴氰菊酯抗药性表型呈正相关,RT-PCR和AS-PCR技术都可以应用于蚊虫抗药性的现场检测。