紫杉醇对血管外膜成纤维细胞表型转化的影响

目的 观察紫杉醇(抗癌药)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠降主动脉外膜成纤维细胞(AF)表型转化的影响.方法 选取雄性SD大鼠,贴壁法培养降主动脉外膜AF,分别以0,10,30,90 nmol·L-1的紫杉醇干预12 h,确定对AF生存活力无影响的紫杉醇浓度.取AF分成2组:AngⅡ组及AngⅡ+9 nmol·L-1紫杉醇组,分别采用RT-PER法和Western印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)mRNA及α-SM-actin蛋白表达.结果 低于10 nmol.L-1时,紫杉醇对成纤维细胞的杀伤作用较弱,与未加紫杉醇组无明显差异;低浓度紫杉醇在mRNA水平和蛋白水平均有效降低AngⅡ诱导的AF α-SM-actin表达(P<0.05).结论 微量紫杉醇可抑制大鼠AF的表型转化,可能为紫杉醇支架减缓血管再狭窄的机制之一.     

银杏叶提取物对大鼠肺成纤维细胞表达CTGF和α-SMA的影响

目的观察银杏叶提取物(GBE)对大鼠肺成纤维细胞表达CTGF和α-SMA的影响。方法大鼠气管内一次性滴注博来霉素制备肺纤维化模型,原代培养大鼠肺成纤维细胞,分为4组:对照组、GBE 25,50,100 mg/L组,共培养24 h,采用免疫细胞化学法和流式细胞技术检测GBE对各组细胞表达CTGF和α-SMA的影响。结果与对照组比较,50,100 mg/L组细胞表达CTGF和α-SMA依次降低,各组间比较有统计学意义(P<0.05)。结论银杏叶提取物能部分抑制大鼠肺成纤维细胞的表型转化。     

紫杉醇对血管外膜成纤维细胞增殖和迁移的影响

目的观察紫杉醇对血管外膜成纤维细胞(AF)增殖、表型转化和迁移的影响。方法选取雄性SD大鼠,用贴壁法培养胸主动脉外膜AF,用免疫荧光法检测AF增殖细胞核抗原(PCNA),用流式细胞仪检测细胞周期,用Transwell法测定细胞迁移能力。结果 10 nmol.L-1紫杉醇对成纤维细胞存活率较空白组无明显差异,表明其对成纤维细胞无明显杀伤作用。与空白组比较,9 nmol.L-1紫杉醇可显著增加G0/G1期AF细胞百分比(P<0.05),降低G2/M及S期细胞百分比(P<0.05),并显著降低AF细胞PCNA表达,抑制其迁移能力(P<0.01)。结论低浓度紫杉醇在不影响成纤维细胞生存活力的情况下,能显著抑制细胞增殖和迁移能力。     

银杏叶提取物对牙龈卟啉菌膜泡抑制牙周膜成纤维细胞活性的影响

目的：探讨银杏叶提取物（GBE）对牙龈卟啉菌（Pg）膜泡（ECV）的影响。方法采用酶动力学方法,测定银杏叶提取物对膜泡生物活性的阻断作用和膜泡对人牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性的影响。结果与空白对照组相比,50μg/ml ECV可明显抑制人牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶（ALP）的活性（P＜0.01）,与膜泡组相比差异有统计学意义（P＜0.01）,且随着浓度升高而升高。结论膜泡生物活性可被银杏叶提取物有效阻滞,从而促使牙周膜成纤维细胞向成骨细胞转化,有利于病变的愈合。     

实验型兔动脉损伤后血管外膜成纤维细胞的变化

外科治疗下肢动脉硬化闭塞症(arteriosclerosis obliterans,ASO)的目的在于改善肢体缺血症状或者挽救肢体.血管形成术(PTA)后较高的再狭窄率严重影响其远期疗效,在血管再狭窄机制的研究中,大多数学者的研究集中在血管的内膜和中膜,目前国内外对血管外膜成纤维细胞增殖和迁移的研究较少,本文将对以上问题作以研究.     

银杏叶提取物对大鼠局灶性脑缺血后血管新生的影响

目的探讨银杏叶提取物是否可以促进大鼠局灶性脑缺血后梗死周围区的血管新生,寻求促使脑缺血后血管新生、开发脑储备能力的有潜力的中医药疗法。方法采用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,术后24h采用银杏叶注射液以10mg／（kg体重·d）的剂量连续腹腔注射治疗6d,于缺血后第7d、14天分别观察银杏叶组和对照组大鼠脑梗死体积、脑梗死灶周围血管密度（层粘连蛋白,Laminin的表达）和神经功能缺失评分的变化。结果与对照组比较,大鼠局灶性脑缺血后第7天和14天银杏叶组的梗死体积明显减小,梗死周围血管密度较对照组明显增加,并显示出更好的神经功能评分（P〈0．05）。结论银杏叶提取物可促进局灶性脑缺血后大鼠脑梗死周围区的血管新生,从而开发脑储备能力,这可能是银杏叶提取物改善脑缺血后神经功能恢复的机制之一。     

血管紧张素Ⅱ对血管外膜成纤维细胞亚群增殖的影响

<正>血管损伤后发生的管壁结构重塑是血管重建术后再狭窄、动脉粥样硬化等多种心血管疾病发病的共同病理基础。已有研究表明血管外膜并非仅起支撑作用,在血管损伤和高血压中也起重要作用。特别是在某些刺激因子作用下,成纤维细胞表型转化为肌成纤维细胞,表达α-平滑肌肌动蛋白,迁移至内膜下区域和新生内膜中并增殖,同时胶原合成增     

紫杉醇对血管外膜成纤维细胞MAPK/ERK通路的影响

目的观察紫杉醇对血管外膜成纤维细胞MAPK/Erk通路的影响。方法选雄性SD大鼠,贴壁法培养胸主动脉外膜成纤维细胞并鉴定。以0,9 nmol.L-1紫杉醇分别干预,用Western Blot法,分别检测磷酸化ERK1/2的表达并进行比较。结果磷酸化ERK1/2的表达,在9 nmol.L-1较0 nmol.L-1紫杉醇明显降低;9 nmol.L-1紫杉醇组ERK蛋白的磷酸化水平为0 nmol.L-1紫杉醇组的62%(P<0.05)。结论紫杉醇通过抑制血管外膜成纤维细胞MAPK/ERK通路,能延缓冠脉动脉介入术后再狭窄。     

阿托伐他汀对自发性高血压大鼠去外膜颈动脉血管功能的影响

目的：观察阿托伐他汀对自发性高血压大鼠（SHR）去外膜后血管阻力及对去甲肾上腺素（NE）的收缩性的影响。方法：36只16周龄雄性SHR去除一侧颈动脉外膜后，随机分为3组：阿托伐他汀组、缬沙坦组、SHR对照组，分别给药4、8周分两次处死。给药前及给药后每2周测量大鼠尾动脉SBP；测定双侧颈动脉血流量和血管张力。结果：给药4周时，阿托伐他汀组SBP下降，至6、8周时较SHR对照组显著下降（P〈0．05，P〈0．01）；去外膜侧早期血管阻力指数轻度降低，至8周时则大于正常侧；而阿托伐他汀组和缬沙坦组血管阻力指数均较SHR对照组显著减小（P〈0．05，P〈0．01）。去外膜侧颈动脉对NE的收缩反应在4周和8周时均显著低于正常对照侧（P〈0．01）；4周时阿托伐他汀组较SHR对照组显著增加双侧颈动脉对NE的最大收缩反应（P〈0．05），而8周时较SHR对照组减小。结论：去外膜后早期SHR血管阻力轻度下降，但后期高于正常侧，而阿托伐他汀可显著降低SHR的血管阻力，包括未去外膜血管。去外膜后，SHR的颈动脉环对NE的收缩性显著低于正常对照侧血管。早期阿托伐他汀可提高去外膜血管对NE的收缩反应，但至后期则可降低其对NE的收缩性。     

聚合胶原对小鼠成纤维细胞表型转化的影响及其机制探讨

目的 探讨聚合胶原对肌成纤维细胞表型转化的促进作用及其可能机制.方法 用聚合胶原培养小鼠成纤维细胞,观察聚合胶原对成纤维细胞形态学及生长曲线影响.蛋白印迹法分析PTEN及Akt Ser473及p42/44磷酸化水平的情况.结果 在聚合胶原中培养的成纤维细胞可以向肌成纤维细胞转化.在聚合胶原的诱导下,成纤维细胞内PTEN含量减少,磷酸化Akt增多,同时细胞内磷酸化p42/44MAPK含量增多.结论 聚合胶原可以诱导成纤维细胞向肌成纤维细胞转化.其机制可能与PTEN和p42/44MAPK信号通路相关.     

银杏叶提取物对小鼠免疫功能的影响

目的:了解银杏叶提取物对小鼠免疫功能的影响。方法:采用体外抗体形成细胞检测法检测银杏叶提取物对小鼠脾细胞产生抗体的影响;采用间接免疫荧光法测定银杏叶提取物对小鼠CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群的影响;采用3 H-TdR掺入法检测银杏叶提取物对小鼠淋巴细胞转化活性的影响。结果:银杏叶提取物有促进小鼠体液免疫功能的作用(P<0.01);能通过调整CD4+/CD8+T细胞亚群的比值来增强小鼠免疫功能(P<0.05);能增加小鼠淋巴细胞转化活性(P<0.001)。结论:银杏叶提取物能增强小鼠免疫功能。     

银杏叶提取物对大鼠背部皮肤皲裂模型的疗效观察

目的:探究银杏叶提取物对大鼠背部皮肤皲裂模型的疗效。方法:取SD大鼠60只随机分为6组,每组10只,制备大鼠背部皲裂模型,分别背部皮肤给药,观察高、中、低剂量银杏叶提取物组（5%、1%、0.2%）,空白对照组,模型组,市售尿素组对其的疗效。HE染色观察其病理组织,采用碱水解法检测皮肤羟脯氨酸（hydroxyproline,Hyp）含量。结果:观察大鼠皮损愈合情况与病理切片综合评分情况,以及测定大鼠受损处皮肤Hyp含量,结果表明,空白对照组,模型组,尿素组,低、中、高剂量银杏叶组的大鼠综合评分分别为0,13.2,7.4,11.0,5.8,6.6,大鼠皮肤Hyp的含量分别为（4.57±0.07）,（2.41±0.27）,（3.29±0.57）,（2.55±0.31）,（3.24±0.26）和（3.37±0.24）μg·mg^-1。高、中剂量银杏叶提取物组与模型组差异有统计学意义（P<0.05）,与市售尿素组差异无统计学意义（P>0.05）。结论:银杏叶提取物对于大鼠皮肤皲裂模型有一定的疗效,为银杏叶提取物外用制剂的研究提供了实验依据。     

银杏叶提取物对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的 :研究银杏叶提取物对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :肾缺血40min再灌注3h建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型 ,用不同剂量的银杏叶提取物预处理。通过检测肾皮质丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性及血浆肌酐、尿素氮水平变化和电镜观察肾组织病理改变。结果 :缺血再灌注后 ,肾组织出现明显病理改变 ,肾皮质丙二醛含量升高 ,超氧化物歧化酶活性下降 ,血浆肌酐、尿素氮水平升高。银杏叶提取物预处理能降低血浆中肌酐、尿素氮水平以及肾皮质丙二醛含量 ,且肾皮质超氧化物歧化酶活性明显升高 ,与缺血再灌注组比较有显著性差异 (P<0 05)。电镜观察肾组织的病理改变明显好转。结论 :银杏叶提取物对肾缺血再灌注损伤有保护作用 ,其机制可能与清除自由基、减轻脂质过氧化有关。     

银杏叶提取物总黄酮含量分析方法的研究

确定银杏叶提取物总黄酮含量测定方法。用紫外可见分光光度法和高效液相色谱法对提取物中的银杏叶总黄酮含量进行测定,并相互比较,确立紫外可见分光光度法为快速、简便、准确的方法,作为银杏叶总黄酮含量测定的常用方法。     

银杏叶提取物对大鼠高氧肺损伤的影响

目的:明确银杏叶提取物(EGb)能否减轻高氧诱导的大鼠急性肺损伤.方法:SD大鼠随机分为EGb组、高氧组和对照组.EGb组和高氧组大鼠置于＞95％氧箱中,对照组置于空气中.实验开始及高氧暴露24h、48 h时,EGb组大鼠均管饲EGb100 mg/kg,另外两组大鼠予等量生理盐水.检测胸水含量、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞和中性粒细胞计数、总蛋白、细胞因子IL-6、IL-1β及TNF-α含量、肺组织丙二醛(MDA)含量以及病理学改变.结果:EGb组大鼠胸水含量和BALF中白细胞、中性粒细胞计数明显低于高氧组(P＜0.05).EGb组和高氧组总蛋白含量差异无统计学意义,均明显高于对照组(P＜0.01).EGb组BALF中IL-6含量显著高于另外两组(P＜0.01).三组大鼠BALF中均未检测到IL-1β和TNF- α,肺组织MDA含量差异无统计学意义.EGh组和高氧组肺组织学评分差异无统计学意义(P＞0.05).结论:EGb可部分减轻高氧诱导的大鼠急性肺损伤,机制可能与促进肺组织IL-6产生有关.     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠抗氧化能力的影响

目的研究银杏提取物对糖尿病大鼠的抗氧化能力。方法将36只2型糖尿病模型Wistar大鼠按血糖分层随机分为模型对照组、银杏叶提取物高和低剂量(6和3 mg/kg)组,每组各12只。另取12只健康Wistar大鼠作为正常对照。连续给药4周。测定大鼠体质量、心脏/体质量比,血清及心脏丙二醛(MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH)、超氧歧化酶(SOD)和糖基化终产物(AGEs)含量,以及血清糖化血红蛋白(HbA1C)。结果与正常对照组相比,模型对照组体质量、血清和心脏GSH、SOD含量显著降低(P<0.01或0.05),而心脏/体质量比、血清HbA1C以及血清和心脏体MDA、AGEs含量显著升高(P<0.01或0.05);与模型对照组相比,银杏叶提取物高和低剂量组大鼠体质量、血清和心脏GSH和SOD含量显著升高(P<0.01或0.05),而心脏/体质量比、血清HbA1C含量以及血清和心脏体MDA、AGEs含量显著降低(P<0.01或0.05)。结论银杏叶提取物可降低糖尿病大鼠的心脏氧化应激反应,此作用可能与银杏叶提取物预防糖尿病心脏病有关。     

RP HPLC测定家兔血浆中银杏叶提取物浓度方法研究

目的:建立用反相高效液相色谱(RP HPLC)测定家兔血浆中银杏叶提取物(extract ginkgo biloba, EGB)浓度的方法,对银杏叶提取物在家兔体内的药物动力学进行研究.方法:采用ODS Hypersil色谱柱(100 mm×2.1 mm,5 μm)柱温22℃,甲醇 水 磷酸为流动相(32∶67.6∶0.4),流速1.0 mL&#8226;min 1,紫外检测波长368 nm等条件下进行分析测定.结果:最低检测浓度1.25 μg&#8226;mL 1,方法平均回收率分别为98.82%和101.06%精密度为107.80%,相对标准差(RSD)＜4%(n＝3),线性范围2.50～5.00 μg&#8226;mL 1(r＝0.997 2,n＝5)和6.25～15.00 μg&#8226;mL 1(r＝0.995 7,n＝5).结论:该法具有操作简单、干扰小、准确灵敏等优点.为临床应用EGB提供实验依据.     

高效液相色谱法测定银杏叶及其提取物中黄酮类成分的含量

采用高效液相色谱法测定银杏叶及其提取物(EGB)中银杏总黄酮的含量。以甲醇-0.4％磷酸溶液(1:1)为流动相,并用磷酸调pH2.5,流速1.0ml·min~(-1),进样体积10μl,检测波长368nm,柱温:25℃。样品水解后的三种主要甙元槲皮素、山萘酚和异鼠李素分离较好。该法简便、重现性好、准确度高。     

银杏叶提取物对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨银杏叶提取物对大鼠心肌缺血-再灌注损伤引起的氧化应激损伤的保护作用。方法将SD大鼠随机分为3组,假手术(Sham)组、缺血-再灌注损伤(MIR)组和银杏叶提取物组,每组10只。建立心肌缺血-再灌注模型。银杏叶提取物在造模前给药14d。再灌注结束后采血,测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、乳酸脱氢酶同工酶1(LDH1),测量心肌梗死面积。结果银杏叶提取物能明显降低血浆中AST、LDH、LDH1和MDA的含量,提高SOD活性,减少心肌梗死面积。结论银杏叶提取物对大鼠心肌缺血-再灌注损伤引起的氧化应激损伤的有保护作用。