大鼠肾脏哺乳动物雷帕霉素靶蛋白随增龄变化的研究

目的 研究大鼠肾脏哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)随增龄表达的变化规律. 方法 选取3月龄、12月龄及24月龄健康大鼠,分别取大鼠肾组织及原代系膜细胞做衰老相关β-半乳糖苷酶活性(SA-βgal)染色,采用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法(Western blotassay)分别在基因及蛋白质表达水平上检测肾脏组织和细胞中mTOR及磷酸化mTOR(p-mTOR)的表达变化,采用免疫组化和荧光法分别检测mTOR在肾组织及细胞中的表达与定位. 结果 随增龄,大鼠肾脏组织SA-βgal活性增强,且肾小球系膜细胞SA-β-gal染色阳性率逐渐增加,3、12及24月龄阳性率分别为(11.9±3.6)%,(39.0±4.0)%及(86.9±7.4)%,mTOR mRNA表达随增龄逐渐增强,不间月龄比较差异有统计学意义(P<0.05).Western印迹亦显示mTOR及p-mTOR蛋白表达随鼠龄增加逐渐增强(P<0.05).免疫组化结果 显示,mTOR蛋白表达于大鼠肾小球系膜区,其在肾小管一间质也有表达;随增龄,与增龄所致的肾脏病变呈正相关性(与增龄引起小球及小管-间质病变的相关性分别为r=0.838;r=0.742,均为P<0.01);免疫荧光结果 显示,mTOR在大鼠系膜细胞胞浆及胞核内皆有表达,随增龄表达的荧光强度逐渐升高(P<0.05). 结论 mTOR在大鼠肾组织及肾小球系膜细胞中的表达随龄增加,其可能参与了肾脏衰老的进程.     

p21~(WAF1/CIP1/SDI1)在大鼠肾脏组织的增龄性变化及意义

目的 研究p21野生型p53活化片段1/细胞周期蛋白依赖性激酶影响蛋白1/衰老细胞衍生抑制剂1(p21WAF1/CIP1/SDI1)在大鼠肾脏中随年龄增长的表达变化规律. 方法 取3月龄、12月龄及24月龄健康雄性Wistar大鼠肾组织进行衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)活性染色,TUNEL法检测细胞凋亡,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法(Western blot assay)分别在基因及蛋白质表达水平上检测肾脏组织中p21WAF1/CIP1/SDI1的表达变化,并用免疫组化法检测p21WAF1/CIP1/SDI1在肾脏组织中的表达与定位. 结果 大鼠肾脏组织SA-β-gal活性随年龄增长逐渐增强,凋亡细胞也随年龄增长逐渐增加(P＜0.05);p21WAF1/CIP1/SDI1 mRNA表达随年龄增长逐渐增强,不同月龄比较差异有统计学意义(P＜0.05).Western印迹亦显示p21WAF1/CIP1/SDI1蛋白表达随鼠龄增加逐渐增强(P＜0.05).免疫组化结果显示,p21WAF1/CIP1/SDI1蛋白表达于大鼠肾小球足细胞,其在肾小管与间质细胞中也有表达,且随年龄增长表达增加(P＜0.05). 结论 p21WAF1/CIP1/SDI1在大鼠肾脏组织中的表达随年龄增加而增强,可作为肾脏组织中重要的衰老指标.     

大鼠肾小球系膜细胞表型的增龄性变化

目的 观察大鼠肾小球系膜细胞随增龄细胞表型及功能的变化特点. 方法取3、12、24月龄健康雄性Wistar大鼠原代系膜细胞进行培养,MTT法检测细胞增殖能力,进行SA-β-gal染色,采用RT-PCR和Western印迹法分别检测p21~(WAF1/CIP1/SDI1)基因及蛋白质的表达变化,并用免疫荧光法检测系膜细胞中p21~(WAF1/CIP1/SDI1)的表达与定位. 结果大鼠肾小球系膜细胞增殖能力随增龄逐渐减弱(P<0.05),SA-β-gal染色阳性率随增龄逐渐增加(P<0.05),p21~(WAF1/CIP1/SDI1) mRNA及蛋白质表达随增龄逐渐增加(P<0.05).免疫荧光结果示p21~(WAF1/CIP1/SDI1)主要在细胞核内表达,荧光强度随增龄逐渐增强 (P<0.05). 结论大鼠肾小球系膜细胞随增龄细胞形态、增殖能力与衰老相关蛋白表达发生明显改变,出现了复制性衰老表型.     

梓醇对糖尿病大鼠肾脏保护作用及机制探讨

探讨梓醇对糖尿病大鼠肾脏是否具有保护作用及其可能机制.RT-PCR、免疫组化和Western印迹法检测糖尿病大鼠肾脏组织中胰岛素样生长因子I和蛋白激酶B表达,结果发现两者mRNA及蛋白表达均上调,梓醇可下调其表达并减轻肾脏损伤.     

健康大鼠血管衰老性重塑与血管衰老相关基因的关系

目的通过研究健康大鼠血管衰老性重塑形态学变化及衰老相关基因表达,探讨血管衰老性重塑可能的分子调控机制,为临床有效干预血管衰老提供分子靶点。方法观察主动脉组织形态及内皮细胞显微结构变化,应用Western blotting分析4、10、16月和24月龄大鼠血管重塑p16INK4a和p21cip1蛋白表达变化。结果随增龄,大鼠主动脉管壁增厚,纤维化程度增高,内皮细胞形态呈现衰老改变,p16INK4a和p21cip1蛋白表达呈时间依赖性上调。结论血管衰老性重塑的分子机制之一可能与上调细胞周期蛋白p16INK4a和p21cip1的表达有关。进一步阐明其调控机制可为延缓血管衰老,防治动脉粥样硬化提供理论依据。     

肾脏VDR表达与衰老密切相关-来自多个数据库的综合分析

目的 维生素D缺乏是老年人常见的健康问题。肾脏是产生活性维生素D的重要器官,也是维生素D受体(Vitamin D receptor, VDR)表达较多的器官之一。作为体内最早发生衰老的器官之一,肾脏VDR缺乏与肾脏衰老的关系既往未见报道。本研究拟通过人类和小鼠数据库分析,探究肾脏VDR表达随增龄的变化及与肾脏衰老的关系,并在动物中进行验证。方法 首先通过人类和小鼠公共数据库明确肾脏VDR的表达情况;其次对VDR高表达器官分析VDR随增龄的变化趋势,通过免疫组化及免疫印迹方法在6月、 15月、 21月龄的雄性野生型小鼠肾组织中进行验证;对上述野生型小鼠肾组织进行p16免疫组化染色,并进行VDR和p16的相关性分析;最后,基于基因表达微阵列进行基因富集分析(Gene Set Enrichment Analysis, GSEA),在人类肾脏数据中探索与肾小球VDR相关的生物学途径。结果 人类和小鼠数据库都提示肾脏是VDR表达最多的器官之一,随着增龄,肾脏VDR的表达呈下降趋势。基于基因表达微阵列的GSEA分析显示低VDR表达组富集更多的衰老基因。野生型小鼠肾脏免疫组化和免疫印迹结果提示肾脏V...     

缬沙坦对老龄高血压大鼠肾脏重构及MMP-9、c-fos表达的影响

目的 评价应用缬沙坦阻断RAAS系统对老龄自发性高血压(SHR)大鼠(SHR)肾脏MMP-9、c-fos的影响.方法 20只40周龄老龄SHR随机分组:SHR对照组、缬沙坦组,另设老龄WKY对照组.12 w后取肾脏标本,免疫组化法检测肾脏Ⅳ型胶原的表达;RT-PCR检测MMP-9、c-fos mRNA的表达,Western印迹检测MMP-9、c-fos蛋白的表达水平.结果 免疫组化显示:与WKY对照组比较,SHR对照组Ⅳ型胶原水平明显增高,缬沙坦组能明显降低SHR肾脏Ⅳ型胶原表达水平;实时定量RT-PCR和Western印迹显示,与WKY对照组比较,SHR对照组MMP-9、c-fos mRNA和蛋白表达明显增高,药物组显著降低其表达水平.结论 应用缬沙坦阻断RAAS系统能够有效地改善和逆转老龄SHR大鼠的肾脏重构.     

Shc相关磷酸化酪氨酸适配蛋白在大鼠血管衰老中的调控作用

目的 探讨Shc相关磷酸化酪氨酸适配蛋白p66shc在血管衰老表达的变化,对阐明血管衰老对动脉粥样硬化的诊治具有重要意义.方法 将Wistar大鼠分为4、10、16、24月龄组,测定各组血浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,同时采用恒速注入流体方法测定大鼠颈动脉血管的顺应性,并利用蛋白免疫印迹法分析各组p66shc、半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3水平.结果 随增龄,大鼠主动脉管壁增厚,纤维化程度增高,MDA浓度明显升高(与4月龄和10月龄相比,均P<0.01),SOD浓度明显降低(与4月龄相比,均P<0.01;与10月龄相比,均P<0.05),颈动脉血管的顺应性增高、弹性速率和弹性面积的差异有统计学意义(与4月龄相比,均P<0.01;与10月龄相比,均P<0.05),p66shc、Caspase-3蛋白表达呈时间依赖性上调.结论 血管衰老性重塑的分子机制之一可能与上调p66shc、Caspase-3蛋白的表达有关,进一步阐明其调控机制可为延缓血管衰老、防治动脉硬化提供理论依据.     

高表达Klotho基因对糖尿病大鼠肾脏保护作用的机制

目的探讨Klotho基因对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用的机制。方法取2月龄Wistar大鼠,腹腔注射STZ诱导产生糖尿病,2 w后检测大鼠尿微量白蛋白增高证明糖尿病肾病(DN)大鼠模型制备成功,另取18只正常大鼠腹腔注射等量柠檬酸缓冲液作为对照组(Con组)。将54只DN模型大鼠随机分成DN组、Ad组和Klotho组,Klotho组每隔2 w大鼠尾静脉注射含Klotho基因病毒3×108PFU,Ad组注射等量不含Klotho基因的病毒,Con组和DN组注射等体积生理盐水。四组大鼠均至第4、8、16周处死,取肾组织。病理观察肾脏形态学变化,免疫组化观察Klotho蛋白和PAI-1的表达与分布;RT-PCR检测基因Klotho、TGF-β1、p15、p21、p27、PAI-1 mRNA在肾组织的表达,Quantity one图像分析软件分析其表达量差异。结果免疫组化检测结果显示,与Con组对比,4、8、16 w时,DN组和Ad组大鼠肾小球、肾小管及肾间质内Klotho蛋白表达量减少,而Klotho组大鼠肾脏Klotho蛋白表达量变化不明显,与Con组接近;与Con组相比,DN组和Ad组PAI-1蛋白表达量增加,Klotho组的PAI-1蛋白表达量变化不明显,接近Con组。RT-PCR结果显示,Klotho、TGF-β1、p15、p21、p27、PAI-1基因PCR产物与预期扩增产物大小一致,与Con组对比,在4、8、16 w时DN组和Ad组的Klotho mRNA表达量明显减少(P=0.010～0.001),Klotho组Klotho mRNA表达量变化不明显,但高于DN组和Ad组(P=0.002～0.001)。DN组和Ad组TGF-β1、p15、p21、p27、PAI-1 mRNA表达量明显高于Con组(P=0.041～0.002),Klotho组变化不明显,接近Con组,但低于DN组和Ad组(P=0.048～0.002)。结论 Klotho基因通过下调TGF-β1、PAI-1、p15、p21、p27基因的表达而实现对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。     

褪黑素降低糖尿病大鼠肾皮质转化生长因子β1的表达

采用实时荧光定量RT-PCR、免疫组化和Western印迹法观察到糖尿病大鼠在褪黑素治疗后，大鼠肾皮质转化生长因子β1（TGF-β1）mRNA及蛋白表达水平下降。提示褪黑素对糖尿病肾脏的保护作用来源于其抗氧化特性及对TGF-β1表达的抑制。     

预防性电针对不同月龄大鼠骨骼肌形态和腓肠肌中AKT、mTOR、p70S6K蛋白表达的影响

目的探讨预防性电针对不同月龄大鼠骨骼肌形态和IGF/AKT通路下与蛋白合成相关蛋白表达的影响。方法雄性SD大鼠30只,随机分为正常对照组、电针组,各组又分为8月正常组(8 MN),14月龄正常组(14 MC)、16月龄正常组(16 MC)、14月龄电针6个月组(14MEA6)、16月龄电针6个月组(16MEA6)和16月龄电针8个月组(16MEA8)。麻醉后快速取腓肠肌HE染色并测量骨骼肌横截面积,Western印迹测定大鼠腓肠肌中AKT、m TOR、p70S6K和p-p70S6K相关蛋白表达。结果 14MEA6、16MEA6组SD大鼠腓肠肌的肌肉湿重/体重比值显著升高;电针预防性干预的14MEA6、16MEA6组细胞核中心化、肌纤维小角化变少,骨骼肌横截面积显著升高;预防性电针首先通过AKT或磷酸化AKT表达上调,活化了p70S6K促进骨骼肌蛋白合成翻译。结论预防性电针干预增龄性大鼠骨骼肌萎缩的较佳月龄为8月龄,较佳干预周期为6个月。预防性电针干预减缓增龄性大鼠骨骼肌萎缩与IGF-1/AKT通路有关,并促进了骨骼肌蛋白合成。     

糖尿病大鼠肾组织中AKT的表达及意义

目的 观察Akt1和Akt2在糖尿病大鼠肾组织中的表达并探讨其是否参与糖尿病肾病(DN)发病过程.方法 链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠糖尿病(DM),分为2、4、8、12、16w和24w组,每一时点均设相应的正常对照组.测定各组血糖、24h尿蛋白、血肌酐(Scr)、肾脏指数.HE和PAS染色光镜观察肾脏病理改变.免疫组化方法检测肾皮质Akt1、Akt2、TGF-β1、α-SMA和FN的表达,Western印迹和RT-PCR法检测Akt1、Akt2蛋白及mRNA表达水平.结果 DM各组大鼠的血糖、24h尿蛋白、血肌酐、肾脏指数均较正常对照组明显升高(P＜0.05,P＜0.01),免疫组化显示DM各组TGF-β1、α-SMA和FN阳性染色较正常组明显增多(P＜0.01),以12 w增多最为明显,分别为19.67±2.73、9.50±3.45、22.17±2.79,免疫组化、Western印迹及RT-PCR显示DM各组Akt1及Akt2蛋白和mRNA表达较正常组明显增多(P＜0.01).免疫组化显示Akt1与TGF-β1、FN蛋白表达水平呈显著正相关(r＝0.694,r =0.532,P＜0.01),Akt2与rGF-β1、FN蛋白表达水平呈显著正相关(r=0.789,r=0.743,P＜0.01).结论 Akt1、Akt2蛋白在DM大鼠肾组织过度表达,提示PI3 K/Akt信号通路可能参与了DN的发病机制.     

外源性睾酮通过诱导自噬致大鼠肾脏损伤

目的 探索外源性睾酮(TP)致大鼠肾脏损伤的作用及可能机制.方法 SD雄性大鼠48只,随机分为6组(每组8只):control组、TP组、TP+氯喹(CQ)组、TP+甘草甜素(Gly)组、CQ(自噬抑制剂)组、Gly〔高迁移率族蛋白(HMG)B1抑制剂〕组.各组大鼠处理21 d后,测量其体重、肾脏湿重、计算肾脏指数;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾脏组织病理形态学变化;免疫组化法和Western印迹印迹法分析大鼠肾脏组织自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ、Beclin1、P62、HMGB1的定位和表达情况.结果 与control组比较,TP组大鼠肾脏湿重、肾脏指数无明显变化(P>0.05);肾小球毛细血管襻多呈分叶状改变,肾小囊间隙变窄,肾小管上皮细胞水肿,管腔变窄;肾脏组织LC3B-Ⅱ、Beclin1和HMGB1蛋白表达水平上调(P<0.05),联合给予TP与CQ后,仅见少数肾小体血管球呈分叶状改变,肾小管水肿明显减轻;Beclin1、LC3B-Ⅱ和HMGB1蛋白表达水平均下调(P<0.05);TP+Gly组大鼠肾脏组织病理学改变及自噬相关蛋白表达水平结果 与TP+CQ组类似.结论 外源性TP可能通过上调细胞自噬致大鼠肾脏组织损伤的发生,HMGB1可能参与此过程自噬水平的调节.     

松花粉对衰老大鼠睾丸p53/Rb细胞转导通路相关基因和蛋白表达的影响

目的 通过检测p53、Rb、p16、p19、p21在D-半乳糖所致衰老大鼠睾丸组织的表达,探讨松花粉对睾丸组织p53/Rb细胞传导通路的影响.方法 采用RT-PCR检测p53、Rb基因在睾丸的表达;Westem印迹检测大鼠睾丸磷酸化Rb(p-Rb)、p16、p19、p21蛋白表达.结果 模型组睾丸组织p53、Rb基因和p16、p19、p21蛋白的表达明显高于正常组(P<0.01);p-Rb蛋白表达显著低于正常组(P<0.01).而松花粉能降低p53、Rb基因和p16、p19、p21蛋白的表达提高p-Rb的表达,且明显好于阳性对照组(P<0.05).结论 松花粉通过调节睾丸组织p53/Rb细胞传导通路相关蛋白及基因的表达,起到延缓睾丸组织衰老的作用.     

大鼠脊髓腰节段神经元存活信号转导通路及凋亡调控因子的增龄变化

目的 观察大鼠脊髓腰节段神经元存活信号转导通路中重要因子和调控凋亡相关因子的增龄变化及与老化的关系.方法 按月龄将雄性SD大鼠分为1、3、6、12、18、24月龄6组.应用免疫组织化学染色和Western印迹法观察增龄大鼠脊髓腰节段神经元存活信号转导通路中的转导因子PI3K、p-p70S6K、磷酯化环腺苷酸应答元件结合蛋白(p-CREB)及凋亡调控因子Bax和Bcl-2的表达情况.结果 大鼠脊髓腰节段神经元p-p70S6K和p-CREB随增龄变化明显,1月龄时表达量较低,3月龄时有所增高,至6月龄、12月龄达高峰,24月龄时明显减低;而PI3K的变化不大.大鼠脊髓腰节段Bax表达随年龄增高逐渐增加,至24月龄表达量达高峰;Bcl-2表达随年龄增加而逐渐降低,至24月龄时降至最低点.与6月龄(青年期)大鼠相比,24月龄(老年期)大鼠脊髓腰节段神经元p-p70S6K、p-CREB和Bcl-2表达明显降低,Bax表达显著增高.结论 老年大鼠脊髓腰节段p-p70S6K、p-CREB和Bcl-2的表达明显降低, Bax表达显著增多,提示脊髓老化与神经元存活信号转导通路和凋亡调控因子的变化有关.     

Wnt信号通路相关分子在肝纤维化中的表达水平变化及其意义

目的 观察Wnt信号通路相关分子在实验性肝纤维化组织中表达水平的变化.探讨其在肝纤维化发生中的作用.方法 建立大鼠肝纤维化动物模型.用Wnt信号通路PCR array功能基因芯片观察Wnt信号通路相关分子在肝纤维化模型中表达水平的变化.以模型组较正常组表达上调或下调2倍为差异表达基因;利用免疫组化及Western印迹观察平滑肌肌动蛋白、Wnt4、Frizzled2、β-钙粘蛋白在肝纤维化组织表达水平的变化.结果 芯片检测发现共有36条基因发生了显著改变,模型组较正常组上调2倍的基因有25个,上调基因主要包括Wnt5a类基因,如Wnt4、Wnt5a、Wnt11等,分别上调了13.9、16.5和2.17倍;较正常组下调2倍的基因有11个,主要为Wnt1、Wnt3等.分别下调了2.32、2.15倍.免疫组化及Western印迹检测发现模型组肝组织Wnt4、Frizzled2的表达水平较正常组显著上升,而磷酸化的β-钙粘蛋白的表达水平下降.结论 经典及非经典Wnt信号通路均可能参与了实验性肝纤维化的发生机制.     

老年大鼠学习记忆相关基因egr1表达变化的机制及补肾益气方药的调整作用

目的探讨DNA甲基化老年大鼠学习记忆相关基因egr1表达变化的机制及补肾益气方药——左归丸、益气聪明汤的调整作用。方法以自然衰老(24月龄)SD雄性大鼠为动物模型,随机分为老年对照组、老年补肾组、老年益气组、老年合剂组和老年拮抗组,另设一组青年对照组(5月龄)。采用RT-PCR法及Western印迹法观察大鼠学习记忆相关基因egr1 mRNA和蛋白表达变化,采用亚硫酸氢盐转化结合高通量测序法检测基因egr1启动子区甲基化状态,同时观察补肾益气方药对上述指标变化的调整作用。结果与青年对照组相比,老年大鼠egr1基因mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05),其启动子区甲基化增高,左归丸、益气聪明汤能不同程度地改善egr1的表达,并降低egr1启动子区甲基化率。结论补肾益气方药改善老年大鼠增龄性学习记忆退化可能与抑制基因egr1启动子DNA甲基化而提高egr1的表达有关。     

北京市健康人群DNA聚合酶δ1的增龄性变化

目的 探讨北京市健康人群外周血白细胞DNA聚合酶δ1表达水平的增龄性变化,建立其与增龄间的相关数学模型.方法 RT-PCR﹑Western 印迹方法测定各年龄组健康人群外周血白细胞DNA聚合酶δ1 mRNA及蛋白表达水平,将其与内参甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)条带灰度的扫描比值与年龄做相关分析. 结果北京健康人群DNA聚合酶δ1 mRNA及蛋白质水平随增龄显著下降,且与年龄呈直线负相关,DNA聚合酶δ1 mRNA水平与年龄的相关系数r=0.971,回归方程y=226.2-179.2x;DNA聚合酶δ1 蛋白表达水平与年龄的相关系数r=0.981,回归方程y=93.42-38.667x.结论 北京市健康人群外周血白细胞DNA聚合酶δ1水平随增龄显著下降.     

血管紧张素Ⅱ和NADPH氧化酶与血管衰老的相关性研究

目的探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）和NADPH氧化酶在血管衰老中的地位及作用机理.方法健康Wistar大鼠分为青年组、老龄组、Valsantan组,分析各组大鼠主动脉形态结构及功能;测定血浆和主动脉AngⅡ水平、主动脉活性氧水平;分别应用RT-PCR和Western bolt检测各组大鼠AngⅡ1型和2型受体（AT1R和AT2R）、NADPH氧化酶p22phox的mRNA及蛋白表达.结果随增龄大鼠主动脉管壁增厚,纤维化程度增高,内皮功能受损,活性氧产生增加;主动脉AngⅡ含量增高,AT2R、p22phox的mRNA及蛋白表达上调,AT1R表达下降;Valsantan（AngⅡ1型受体特异性阻断剂）干预后,p22phox表达下降,活性氧水平降低,衰老血管形态结构和功能异常有所改善.结论衰老血管有其特征性结构和功能改变;AngⅡ经由AT1R上调NADPH氧化酶的基因表达可能是血管衰老的重要机制之一.     

脂质与糖尿病大鼠肾小球TGF-β/Smad信号通路的关系

目的 探讨脂质对糖尿病大鼠肾小球TGF-β／Smad信号通路的影响。方法 糖尿病大鼠随机分成普通饲料组，高脂饲料组、高脂饲料加辛伐他汀干预组（辛伐他汀组）和正常对照组。16周后，采用RT-PCR、免疫组化和Western印迹法检测大鼠肾小球转化生长因子β1（TGF-β1）、转化生长因子Ⅱ型受体（TβRⅡ）、Ⅵ型胶原（ColⅥ）mRNA和蛋白和磷酸化Smad2（p—Smad2）表达的变化。结果 与正常对照组比较，普通饲料组、高脂饲料组、辛伐他汀组肾小球TGF-β1、TβRⅡ、ColⅥmRNA和蛋白及p-Smad2表达均上调，高脂饲料组上调最为明显；与高脂饲料组比较，辛伐他汀组TGF-β1、TβRⅡ、ColⅥ和p-Smad2表达明显下调。结论 脂质通过激活TGF-β／Smad信号通路，加剧糖尿病肾脏病变；辛伐他汀抑制TGF-β／Smad通路的激活，延缓糖尿病肾病的进展。