载药纳米微粒的临床应用研究进展

载药纳米微粒是纳米技术与现代医药学结合的产物 ,是一种新型的药物输送载体。它缓释药物、延长药物作用时间 ,透过生物屏障靶向输送药物 ,建立新的给药途径等等 ,在药物控释方面显示出其他输送体系无法比拟的优势。近年来载药纳米微粒在临床各个领域的应用基础研究势头强劲 ,并取得了可喜的成绩。本文综述了载药纳米微粒在临床各领域应用的研究成果 ,并对其发展应用前景进行展望     

载5-FU纳米微粒抗肿瘤的实验研究

目的： 研究抗癌药5-FU纳米控释静脉注射微粒的制备工艺及其体内外抗肿瘤作用。方法： 以聚乳酸 (PLA)作为基质材料，采用超声乳化-溶剂挥发法制备PLA包载5-FU的纳米微粒（5-FU-NPs）。扫描电镜观察5-FU-NPs形态，通过激光光散射实验测定5-FU-NPs的粒径分布。利用高效液相色谱(HPLC)测定5-FU-NPs的载药率，以MTT方法检测5-FU-NPs体外杀伤癌细胞效应，用5-FU-NPs不同剂量、给药频度条件下体内抑瘤实验。结果： 电镜观察5-FU-NPs为表面光滑的球形微粒，粒径分布平均值是191.1 nm，呈正态分布。5-FU-NPs载药率为15.2%。体外MTT实验提示5-FU-NPs作用明显优于5-FU（P<0.05）。体内抑瘤实验表明：5-FU-NPs间隔给药疗效优于未包载药物每日给药的疗效，量-效关系明显，且毒性减低。结论： 5-FU-NPs可以作为5-FU的有效载体，实现药物控制释放并减低毒性，发挥药物更佳的抗肿瘤作用。     

具有靶向抗癌功能的纳米高分子材料───阿霉素免疫磁性毫微粒的体内磁靶向定位试验

首次设计出同时在给药部位近端和远端进行９９ＭＴｃ４＋标记的阿霉素免疫磁性毫微粒（ＡＩＭＮ）的体内磁靶向定位试验，该试验从兔耳缘静脉给予９９ＭＴｃ４＋标记的ＡＩＭＮ后，采用国际最先进的ＥＣＴ显像技术，动态观察了ＡＩＭＮ在体内的磁靶向定位情况。结果表明，ＡＩＭＮ具有超顺磁特性，在给药部位近端和远端磁区均能产生放射性富集，富集强度为给药量的６０～６５％，同时其在脏器的分布显著减少，从而证实了ＡＩＭＮ具有较强的磁靶向定位功能，为靶向治疗肿瘤奠定了结实的基础。     

PLGA/O-CMC载药纳米微粒的体外降解及释药行为研究

本研究以聚乳酸-乙醇酸共聚物（PLGA）和自行制备的O-羧甲基壳聚糖（O-CMC）为原料，以5-氟尿嘧啶（5-FU）为抗癌药物模型，采用自身设计的改良复乳法制备了载药纳米微粒。微粒平均粒径为98.5nm，粒径分布指数为0.192，粒子表面∈电位为61．48eV，载药率高达18.9％。然后用SEM动态监测载药纳米粒子降解过程中表面形貌的变化，并连续追踪粒子降解过程中的质量损失和降解介质的pH变化。载药纳米粒子在PBS中的释药行为研究表明，（1）前12h的释药动力学符合Huguchi方程，具有一级释放特性；（2）在20d内的释药动力学符合零级释放特性。细胞凋亡实验结果表明载药纳米粒子对TJ905脑胶质瘤细胞增殖有明显的抑制作用。     

免疫纳米微粒靶向胰腺癌细胞输送siRNA的方法研究

 目的：构建一种向胰腺癌细胞安全、高效输送siRNA的免疫纳米载体。方法：检测纳米载体IONP-PEI（非靶向组）及其与siRNA复合物的表征;通过琼脂糖凝胶电泳检测siRNA结合力、MTS法检测细胞活力和流式细胞术检测转染率以确定其复合siRNA的最佳N/P比值;细胞免疫荧光和普鲁士蓝染色观察scFvCD44v6偶联IONP-PEI的靶向纳米载体（靶向组）在细胞内分布;流式细胞术、荧光显微镜观察、real-time PCR和Western blotting检测靶向组和非靶向组的转染率和转染siKRAS后的干扰效果。结果：IONP和PEI的最适质量比为0.75;纳米载体复合siRNA的最佳N/P比值为20;IONP-PEI/siRNA复合物的电位为（21.73±8.07）mV,粒径为（51.3±2.2）nm。荧光显微镜显示,非靶向组和靶向组转染后均在细胞内,靶向组的转染率为（89.75±1.81）%,高于非靶向组的（59.87±4.52）%,且靶向组的荧光强度高于非靶向组。靶向组的KRAS mRNA的相对表达量为（34.02±615）%,低于非靶向组的（51.09±6.70）%;Western blotting显示靶向组的KRAS蛋白表达量低于非靶向组。结论：非靶向组和靶向组均能够将siRNA转染进细胞内,且靶向组具有更高的转染效率和更好的干扰基因表达效果。本课题构建的scFvCD44v6-IONP-PEI是一种高效、安全和靶向识别胰腺癌细胞的免疫纳米载体。     

聚乳酸载药纳米微粒的表面修饰及体外评价

本研究的目的是用O 羧甲基壳聚糖作乳化剂和表面修饰剂 ,采用超声乳化法制备聚乳酸载药纳米微粒 ,并对聚乳酸载药纳米微粒进行表面修饰 ,然后分别对载药纳米微粒的表面形貌、粒径分布、微粒结构、表面元素、体外释放和肿瘤细胞抑制率等微粒性能进行考察与评价。实验证明 ,O 羧甲基壳聚糖可用于制备纳米药物载体系统 ,对聚乳酸载药纳米微粒的制备起到很好的乳化性能和表面修饰作用。采用复乳法制备包载 5 Fu的PLA/O CMC纳米微粒的平均粒径在 5 0nm ,在PBS缓冲溶液中释放时间可达 12d。在对胃癌、乳腺癌和大肠癌三种肿瘤细胞的抑制率测定实验中 ,PLA/O CMC纳米微粒的肿瘤细胞抑制率分别可以达到 72 .8%、77.3%和 75 .6 % ,接近或等同于游离 5 Fu药物的抑制率。在作用时间上 ,PLA/O CMC载药纳米微粒也显示出良好的缓释效应。     

肝靶向纳米给药系统治疗肝纤维化的研究进展

肝纤维化是慢性肝损伤早期重要的病理特征,可以通过药物治疗逐渐逆转消退.传统药物存在药效下降及对正常器官的毒副作用等问题.运用纳米技术开发的给药系统,可以保护药物,克服生物屏障,将药物定向递送到指定区域发挥作用.在肝损伤修复过程中,肝实质细胞(HC)、肝星状细胞(HSC)、枯否细胞(KC)和肝窦内皮细胞(LSEC)均起到关键作用.肝靶向纳米药物可专门针对肝脏细胞,基于它们的摄取能力和调节能力实现药物靶向性,更有效地发挥药物抗炎和抗纤维化治疗作用,降低毒副作用,逆转肝纤维化.就纳米技术应用于肝纤维化靶向治疗的研究进展作一综述.     

马钱子碱免疫纳米微粒的研制及药代动力学特点

背景：由于马钱子碱具有剧毒、难溶于水、静脉应用治疗窗窄、中毒量与治疗量接近等缺点,限制了其临床应用于肝癌等恶性肿瘤的治疗。 目的：研制马钱子碱免疫纳米微粒,观察马钱子碱免疫纳米微粒体内药物代谢特点。 方法：利用阴离子聚合和化学改性技术制备羧基化聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物,采用超声乳化技术制备羧基化聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物马钱子碱纳米微粒,化学偶联技术将马钱子碱纳米微粒与抗人甲胎蛋白单克隆抗体结合,研制具有免疫靶向特点的药物制剂马钱子碱免疫纳米微粒。 结果与结论：马钱子碱免疫纳米微粒外观圆整,大小较均一,平均粒径(249±77) nm,Zeta电位(-18.7±4.19) mV。马钱子碱包封率(76.0±2.3)%,载药量(5.6±0.2)%。马钱子碱免疫纳米微粒在释放介质中24 h累积释放80%以上,48 h释放完全。马钱子碱免疫纳米微粒在体内代谢过程属于非房室模型,半衰期为(15.69±3.77) h,显著长于马钱子碱半衰期(P < 0.01)。提示实验成功研制了免疫靶向药物马钱子碱免疫纳米微粒,马钱子碱免疫纳米微粒在体内代谢过程属于非房室模型,表现出明显的缓释性。     

酮康唑连续给药对犬肝毒性的病理学观察

为了更深入地研究酮康唑对肝的毒性损害，采用杂种犬作了为期一个月的长期毒性实验，分别用电镜和光镜技术对犬的肝进行了细胞超微结构和病理组织学观察。实验设３个剂量组，给药剂量为大剂量组７０ｍｇ／（ｋｇ．ｄ），中剂量组３５ｍｇ（ｋｇ．ｄ），小剂量组为１７．５ｍｇ（ｋｇ．ｄ），另一组为溶煤对照组，连续灌胃３０天。     

人胰腺癌PANC-1细胞裸鼠移植瘤模型建立及其用于观察载siRNA纳米微粒体内效应的研究

 目的：探讨建立人胰腺癌PANC-1裸鼠移植瘤模型的最佳实验方法,并应用该模型进行载基因纳米微粒体内效应的研究。方法：将不同数量PANC-1细胞悬液接种于BALB/c (nu/nu)小鼠右侧背部皮下,当肿瘤体积达100 mm3时尾静脉注射siRNACY5.5纳米复合物进行活体荧光成像。此外,于尾静脉注射负载siRNAKras纳米复合物,蛋白印迹及免疫组织化学染色法观察肿瘤组织Kras蛋白表达水平。结果：1×107 cells/300 μL 接种成瘤率达100%,成瘤时间＜2周。荧光呈像及组织学检查显示载siRNA纳米微粒可靶向聚集在肿瘤组织发挥体内基因沉默效应。结论:本研究报道的人胰腺癌裸鼠移植瘤模型建立方法成瘤率达100%,成瘤时间短,是研究药物示踪和观察疗效的理想模型。     

莪术油明胶微球栓塞犬肝动脉的病理改变

目的观察莪术油明胶微球栓塞Beagle犬肝动脉后的病理改变,为临床实验提供依据.方法 Beagle犬随机分为生理盐水组(10ml/kg)、空白微球组(15mg/kg)、莪术油微球低剂量组(7.5mg/kg)和莪术油微球高剂量组(15mg/kg),每4周经肝动脉给药1次,连续给药3次,停药后观察4周.观察肝病理组织学改变.结果明胶微球肝动脉栓塞可致肝组织不可逆性损伤,高剂量组广泛全小叶坏死,低剂量组灶性坏死,空白微球组改变类似高剂量组,生理盐水组未见肝组织损伤.结论莪术油微球重复经Beagle犬肝动脉给药,可因肝动脉栓塞造成肝脏不可逆性缺血坏死.     

莪术油明胶微球栓塞犬肝动脉的病理改变

目的 观察莪术油明胶微球栓塞Beagle犬肝动脉后的病理改变,为临床实验提供依据。方法 Beagle犬随机分为生理盐水组(10ml/kg)、空白微球组(15mg／kg)、莪术油微球低剂量组(7．5mg／kg)和莪术油微球高剂量组(15mg／kg),每4周经肝动脉给药1次,连续给药3次,停药后观察4周。观察肝病理组织学改变。结果 明胶微球肝动脉栓塞可致肝组织不可逆性损伤,高剂量组广泛全小叶坏死,低剂量组灶性坏死,空白微球组改变类似高剂量组,生理盐水组未见肝组织损伤。结论 莪术油微球重复经Beagle犬肝动脉给药,可因肝动脉栓塞造成肝脏不可逆性缺血坏死。     

肝癌破裂出血的急诊介入治疗

目的：评价急诊肝动脉栓塞术（Transcatheter arterial embolization，TAE）治疗肝癌破裂出血的疗效。方法：采用Seldinger技术穿刺，使用明胶海绵、碘化油对14例肝癌破裂出血患者行肝动脉栓塞术，其中4例同时加用表阿霉素行栓塞化疗。结果：14例肝癌破裂出血患者全部止血成功，无严重并发症，术后无复发出血。其中2例术后2个月死于肝功能衰竭，其余12例生存4～25（平均7．6）个月。结论：TAE是治疗肝癌破裂出血的有效方法。     

安体舒通对实验兔动脉粥样硬化斑块的保护作用

目的探讨安体舒通对兔颈动脉粥样硬化斑块(CAP)模型的保护作用和机制。方法通过高脂喂养建立兔CAP模型,随机分为A组(对照组,n=20)、B组(来适可组,n=20)、C组(安体舒通 来适可组,n=20)三组。观察8周后各组CAP数量、形态、面积,纤维帽厚度、动脉中层厚度及斑块占管腔面积比。结果安体舒通联合来适可组能减少兔CAP的形成,增加其稳定性,使中膜厚度增加,纤维帽厚度减小,斑块占管腔总面积比变小。结论安体舒通对CAP有保护作用,能减少CAP形成,增加稳定性。     

Distribution and Systemic Effects of Intranasally Administered 25 nm Silver Nanoparticles in Adult Mice

Previous work indicates that silver nanoparticles (AgNPs) given IP to mice alter the regulation of inflammation- and oxidative stress-related genes in brain. Here we assessed the distribution and toxic potential of AgNP following intranasal (IN) exposure. Adult male C57BL/6J mice received 25-nm AgNP (100 or 500 mg/kg) once IN. After 1 or 7 days, histopathology of selected organs was performed, and tissue reduced glutathione (GSH) levels were measured as an indicator of oxidative stress. Aggregated AgNP were found in spleen, lung, kidney, and nasal airway by routine light microscopy. Splenic AgNP accumulation was greatest in red pulp and occurred with modestly reduced cellularity and elevated hemosiderin deposition. Aggregated AgNP were not associated with microscopic changes in other tissues except for nasal mucosal erosions. Autometallography revealed AgNP in olfactory bulb and the lateral brain ventricles. Neither inflammatory cell infiltrates nor activated microglia were detected in brains of AgNP-treated mice. Elevated tissue GSH levels was observed in nasal epithelia (both doses at 1 day, 500 mg/kg at 7 days) and blood (500 mg/kg at 7 days). Therefore, IN administration of AgNP permits systemic distribution, produces reversible oxidative stress in the nose and in blood, and mildly enhances macrophage-mediated erythrocyte destruction in the spleen.     

超选择性肝动脉栓塞治疗肝血管瘤的临床应用

目的 探讨超选择性动脉插管栓塞治疗肝血管瘤的临床应用效果.方法 本组38例,男13例,女25例.肝血管瘤瘤体最大直径5-18cm,将导管超选择插入血管瘤供血动脉,在监视器下缓慢注入平阳霉素和超液化碘油乳剂.最后用明胶海绵颗粒栓塞供血动脉.术后定期复查.结果 总有效率92%,栓塞后碘油沉积良好,复查病例瘤体均显示不同程度的缩小,并发症少.结论 超选择动脉插管栓塞肝血管瘤是一种安全、有效的治疗手段.     

肝动脉与肾动脉分支变异1例

笔者在制作教学标本过程中,发现肝动脉分支变异和肾动脉分支变异l例,报道如下。材料：成年女尸,身长158cm,约50岁。     

参麦注射液对肝脏缺血再灌注损伤的临床研究

目的 观察参麦注射液对肝切除手术时肝脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法 择期行肝切除术的患者62例,随机分为参麦组(n=33)和对照组(n=29).在肝门阻断前30min,对照组经静脉滴入5%葡萄糖盐水250ml;参麦组滴入5%葡萄糖盐水250ml+参麦注射液2ml/kg体重,术后第1～3天继续使用.两组患者分别在肝门阻断前及肝门开放后24小时和48小时,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH).在肝门阻断前和肝门开放后60min切取肝脏组织匀浆取上清,ELLISA方法进行髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的检测.结果 两组患者在肝门阻断之前检测血ALT、AST、LDH均正常,MPO、MDA、SOD的测定值组间差异无统计学意义(P＞0.05);术后24小时和48小时,参麦组患者ALT、AST、LDH水平均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);肝门阻断开放后60min参麦组患者MPO、MDA水平低于对照组,SOD高于对照组,组间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 参麦注射液对肝切除手术时肝脏缺血再灌注损伤具有一定保护作用.     

肝动脉的应用解剖

在 6 3例成尸上观察了肝动脉的起源和行程 ,腹腔干及主要分支外径和腹腔干至肠系膜上动脉间的距离。结果肝右、左动脉 ,肝固有动脉 ,肝总动脉和腹腔干外径分别为 3.1± 0 .5 ,2 .8± 0 .3,4.0± 0 .12 ,5 .3± 0 .2 2和 7.4± 0 .4mm ;正常型肝动脉占 5 0 .79% (32例 ) ;Hiatt 、 型分别占 19.0 5 % (12例 )和 6 .34% (4例 ) ;腹腔干至肠系膜上动脉间距离为 7.4± 0 .33 mm。讨论了肝动脉变异及其临床意义。     

一氧化氮对胎兔动脉导管胱硫醚-γ-裂解酶/硫化氢体系的影响

目的探讨H2S、NO对早产胎兔动脉导管的作用及其相互影响,进一步探索动脉导管开放与关闭的病理生理机制、意义及其影响因素,为临床上全面认识动脉导管的开放与关闭提供理论依据。方法将孕21d日本大耳白兔24只随机分成四组：空白对照组及三个处理组,处理组待孕龄23d和25d时分别腹腔注射以不同剂量的一氧化氮前体-硝普钠,待孕龄26d时解剖孕兔取胎兔,胎兔心脏取血1mL后立即解剖胎兔取动脉导管组织,进行实验。结果随着注射硝普钠浓度的增加,胎兔血浆中硫化氢含量、动脉导管组织CSEmRNA表达量均逐渐随注射剂量的增加而增加。各组间相比较,P<0.01,具有显著性差异。结论早产兔血浆中有H2S存在,早产兔动脉导管组织中存在CSEmRNA表达;给孕兔注射不同剂量硝普钠(在一定范围内)对早产兔动脉导管中H2S/CSE体系具有浓度依赖性促进作用。