4种烤瓷合金材料诱导L929细胞凋亡的研究

目的:研究4种临床常用牙科烤瓷合金材料诱导L929细胞凋亡的情况。方法:选择镍铬合金、钛合金、钴铬合金和金合金4种牙科烤瓷合金材料,制备4种合金材料的浸提液,用浸提液培养L929细胞,应用流式细胞技术检测细胞凋亡情况。结果:镍铬合金组和钛合金组的细胞凋亡率较钴铬合金组、金合金组和对照组高(P<0.05),镍铬合金组较钛合金组高(P<0.05);钴铬合金组、金合金组和对照组之间结果没有差异性(P>0.05)。结论:不同牙科烤瓷合金材料诱导L929细胞凋亡存在差异性,镍铬合金和钛合金可以增加L929细胞的凋亡,钴铬合金和金合金对L929细胞的凋亡没有影响。     

In-Ceram全瓷冠与金属烤瓷冠对成纤维细胞株L929细胞活力及相关基因表达的影响

目的:研究In-Ceram全瓷冠与金属烤瓷冠对成纤维细胞株L929细胞活力及相关基因表达的影响。方法:培养成纤维细胞株L929,分别用In-Ceram全瓷冠、镍铬合金烤瓷冠、钴铬合金烤瓷冠的浸提液处理,检测细胞活力、血清细胞因子含量以及细胞中Fas、FasL、Apo-1、mTOR、P70S6k的mRNA含量。结果:镍铬合金组、钴铬合金组细胞的OD值低于阴性对照组;In-Ceram组细胞的OD值高于镍铬合金组、钴铬合金组;镍铬合金组、钴铬合金组细胞培养基中TNF-α、IL-6、IL-8的含量明显高于阴性对照组,In-Ceram组细胞培养基中TNF-α、IL-6、IL-8的含量明显低于镍铬合金组、钴铬合金组且与阴性对照组无差异;镍铬合金组、钴铬合金组细胞中Fas、FasL、Apo-1的mRNA含量高于阴性对照组,mTOR、P70S6k的mRNA含量低于阴性对照组,In-Ceram组细胞中Fas、FasL、Apo-1的mRNA含量低于镍铬合金组、钴铬合金组且与阴性对照组无差异,mTOR、P70S6k的mRNA含量高于镍铬合金组、钴铬合金组且与阴性对照组无差异。结论:In-Ceram全瓷冠具有良好的组织相容性,不会影响成纤维细胞株L929的细胞活力以及炎性因子的生成、凋亡和增殖相关基因的表达。     

三种烤瓷合金金瓷结合强度的比较

目的比较镍铬合金、钴铬合金、钯银合金的金瓷结合强度。方法根据ISO9693标准,用三点弯曲测试分别检测镍铬合金、钴铬合金、钯银合金常规热处理条件下的金瓷结合强度。结果金瓷结合强度分别为:镍铬合金(38.09±2.2)Mpa;钴铬合金(39.21±2.05)Mpa;钯银合金(45.44±1.98)Mpa。镍铬合金组和钴铬合金组之间的差异没有统计学意义(P0.05),这2种合金与钯银合金组之间的差异都有统计学意义(P0.05)。结论 (1)镍铬合金、钴铬合金、钯银合金金瓷结合强度都大于临床所要求的最低金瓷结合强度值25Mpa;(2)钯银合金的金瓷结合强度大于镍铬合金及钴铬合金。     

不同全瓷冠材料对成纤维细胞活力的影响及可能分子机制的初步探究

目的:研究不同全瓷冠材料对成纤维细胞活力的影响及可能分子机制。方法:培养成纤维细胞株L929,制备硅藻土陶瓷、铸造陶瓷、热压铸造陶瓷、渗透陶瓷、镍铬合金烤瓷的浸提液,用浸提液处理L929细胞后检查细胞凋亡情况、细胞周期比例以及Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达量。结果:硅藻土陶瓷组、铸造陶瓷组、热压铸造陶瓷组、渗透陶瓷组的细胞凋亡指数、早期凋亡数目、凋亡样坏死数目以及G1期、S期、G2期细胞的比例以及Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达量均与阴性对照组无差异;硅藻土陶瓷组、铸造陶瓷组、热压铸造陶瓷组、渗透陶瓷组的细胞凋亡指数、早期凋亡数目、凋亡样坏死数目、G2期的细胞比例以及Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达量均低于镍铬合金烤瓷组,G1期、S期细胞比例以及Bcl-2的表达量均高于镍铬合金烤瓷组。结论:不同全瓷冠材料对成纤维细胞活力的影响无差异且影响均弱于镍铬合金烤瓷冠,硅藻土陶瓷的生物相容性与铸造陶瓷、热压铸造陶瓷、渗透陶瓷、镍铬合金烤瓷相当;不同全瓷冠材料调节细胞活力的机制包括Bcl-2/Bax通路以及Caspase通路。     

150例不同金属烤瓷冠修复的临床比较

目的探讨金钯合金,钴铬合金及镍铬合金烤瓷修复体的临床效果,为临床上应用提供参考.方法随机抽取我科门诊患者修复的金属烤瓷冠150颗,分成金钯合金、钴铬合金、镍铬合金三组基底冠烤瓷修复后治疗牙体缺损,3年后进行随访研究,检查三种基底冠烤瓷修复后患牙成功率、龈缘黑线及过敏反应情况.结果金钯合金烤瓷组、钴铬合金烤瓷冠组明显优于镍铬合金烤瓷冠组(P<0.05).结论金钯合金、钴铬合金与镍铬合金基底烤瓷冠相比生物相容性更佳.     

镍铬合金的细胞毒性及对L929细胞Bax和Bcl-2表达的影响

目的 研究镍铬合金金属离子与L929细胞凋亡的关系,探讨在分子水平上评价材料生物相容性的方法. 方法 应用镍铬合金的浸提液培养小鼠成纤维细胞L929,以含10％胎牛血清的RPMI1640培养液做为阴性对照,采用MTT法(四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法)评价镍铬合金的细胞毒性,采用免疫组化法检测其对L929细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响. 结果 镍铬合金的细胞毒性为0级;镍铬合金组Bax表达增高(t=2.841,P＜0.05);镍铬合金组Bax/Bcl-2表达的比值高于阴性对照组(t =5.365,P＜0.05). 结论 镍铬合金浸提液可引起小鼠成纤维细胞L929凋亡相关蛋白Bax表达增高,可能通过线粒体通路诱导细胞凋亡.     

两种牙科金属材料细胞毒性及对L929细胞Bax和Bcl-2表达的比较

目的 :通过检测牙科常用金合金及镍铬合金的细胞毒性及两种金属材料浸提液对小鼠成纤维细胞L929凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响,来研究金属离子与L929细胞凋亡的关系,探讨在分子水平上评价材料生物相容性的方法。方法:应用金合金(A组)及镍铬合金(B组)的浸提液培养小鼠成纤维细胞L929,以含10%胎牛血清的RPMI1640培养基做为阴性对照(C组),采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)评价2种金属材料的细胞毒性,采用免疫组化法及ELISA法(酶联免疫吸附实验)检测2种金属材料对L929细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。结果:2种材料的细胞毒性均为0级;镍铬合金组Bax/Bcl-2表达的比值高于阴性对照组及金合金组,差异有统计学意义。结论:镍铬合金浸提液可引起小鼠成纤维细胞L929凋亡相关蛋白Bax表达及Bax/Bcl-2比值增高,这一结果可能为将来在分子水平上建立评价生物材料生物相容性的方法提供新的思路。     

铸造钴铬合金含银抗菌涂层对L929细胞增殖及凋亡的影响

目的:观察铸造钴铬合金含银抗菌涂层对小鼠成纤维细胞(L929)增殖及凋亡的影响。方法:应用等离子喷涂技术制备含银抗菌涂层钴铬合金试件10个,制作不含涂层的钴铬合金试件10个作为对照,用2组试件的浸提液培养L929细胞24、48和72 h后,利用MTT法检测细胞增殖情况;通过免疫细胞化学染色观察用浸提液原液处理48 h后L929细胞中Bcl-2和Bax蛋白的表达情况。结果:经含银抗菌涂层钴铬合金试件浸提液培养后,L929细胞增殖状态与对照比较差异无统计学意义(P>0.05),浸提液对L929的细胞毒级为0~1级;细胞内Bcl-2和Bax蛋白表达水平与对照比较,差异也无统计学意义(P>0.05)。结论:钴铬合金含银抗菌涂层具有良好的细胞相容性。     

不同前牙全冠修复体的临床效果分析

目的评价镍铬合金、钴铬合金、钯银合金、金铂合金4种金属烤瓷冠及铸瓷冠在前牙修复中的临床应用效果。方法对2008年6月～2009年3月青岛正仁诊所需要行全冠修复的138名患者的上前牙300颗,根据患者的要求分别制作铸造镍铬合金、镀金镍铬合金钴铬合金、钯银合金、金铂合金4种金属烤瓷冠及铸瓷冠各60例,并进行2年的临床追踪观察。对各组全冠进行修复体表面和颜色、解剖形态、边缘完整性、牙龈染色及牙龈健康情况评价。结果铸瓷冠颜色效果好,与各种金属烤瓷冠比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;金铂合金烤瓷冠在边缘适合性方面优于钯银合金、铸瓷冠、钴铬合金和镍铬合金（P〈0.05）,钯银合金烤瓷冠与铸瓷冠差异无统计学意义;镍铬合金烤瓷冠在颜色、边缘着色、牙龈健康状况方面不及铸瓷冠、贵金属合金烤瓷冠及钴铬合金烤瓷冠（P〈0.05）。结论铸瓷冠在美学效果方面优于其他4种修复体;金铂合金烤瓷冠在边缘密合度方面优于其他4种修复体,铸瓷冠及贵金属合金烤瓷冠在牙龈健康和边缘着色方面优于非贵金属合金烤瓷冠。     

不同齿科合金对成纤维细胞增殖凋亡的影响及机制研究

目的 探讨不同齿科合金对成纤维细胞增殖凋亡的影响及机制。方法 小鼠成纤维L929细胞分为阴性对照组、金合金组、镍铬合金组和铜合金组,各组细胞培养48h后,MTT实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率;Western blot法检测Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达。结果 金合金组和镍铬合金组细胞增殖率与阴性对照组比较,差异无统计学意义（P>0.05）,铜合金组细胞细胞增殖率显著低于阴性对照组（P<0.01）;金合金组G₁期、S期和G₂期细胞与阴性对照组差异无统计学意义（P>0.05）,镍铬合金组和铜合金组G₁期细胞显著低于阴性对照组,S期和G₂期细胞显著高于阴性对照组（P<0.05）;金合金组细胞凋亡率及Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达与阴性对照组差异无统计学意义（P>0.05）,镍铬合金组和铜合金组细胞凋亡率及Bax、cleaved caspase-3蛋白表达均显著高于阴性对照组,Bcl-2蛋白表达显著低于阴性对照组（P<0.01）。结论 金合金组、镍铬合金组和铜合金组对成纤维细胞增殖凋亡均有一定的影响,金合金组的影响最小,不同齿科合金引起成纤维细胞凋亡的机制可能与调控Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达有关。     

肉桂醛促进子宫内膜癌RL95-2细胞凋亡的机制

【目的】探讨肉桂醛对子宫内膜癌RL95-2细胞凋亡的影响及其作用机制。【方法】选取肉桂醛作用子宫内膜癌RL95-2细胞,噻唑蓝（MTT）比色法检测子宫内膜癌RL95-2细胞的增殖活性和肉桂醛的IC50,Hoechst33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态学改变,流式细胞术检测RL95-2细胞的凋亡百分率,Western blot检测肉桂醛对RL95-2细胞Cleavedcaspase-3、Caspase-3、NF-κB、IL-6和IGF-R蛋白表达的影响。【结果】肉桂醛可降低子宫内膜癌RL95-2细胞的增殖率,与药物浓度和作用时间有关;与溶剂对照组比较,肉桂醛组（0.29、0.59和1.20mg/mL）作用48h后RL95-2细胞的凋亡百分率明显增高（P<0.01）,出现典型的凋亡小体,Cleavedcaspase-3蛋白的表达明显增加（P<0.01）,Caspase-3蛋白的表达无明显变化（P>0.05）,而NF-κBp65、IL-6和IGF-R蛋白的表达均明显降低（P<0.05）。【结论】肉桂醛可降低RL95-2细胞NF-κB·p65、IL-6和IGF-R蛋白的表达,促进RL95-2细胞的凋亡,从而起到抗子宫内膜癌作用。     

棕榈酸诱导大鼠主动脉内皮细胞凋亡

目的研究棕榈酸对大鼠主动脉内皮细胞凋亡的影响。方法 0.5%BSA或0.5%BSA及不同浓度的棕榈酸(0.1、0.2和0.3 m m)作用于大鼠主动脉内皮细胞24 h,M TT法检测细胞活性,流式细胞仪AnnexinⅤ/PI法检测细胞凋亡,分光光度计检测C aspase-3活性。结果 M TT检测结果提示棕榈酸组较对照组细胞活性下降;AnnexinⅤ/PI法检测结果提示棕榈酸组较对照组细胞凋亡增加(P<0.05或P<0.01)。棕榈酸组较对照组C aspase-3活性增加(P<0.05或P<0.01)。结论棕榈酸能够诱导内皮细胞凋亡,说明高水平的游离脂肪酸对内皮细胞有直接的伤害作用。     

钴铬合金烤瓷全冠边缘适合性的实验研究

目的:探讨应用钴铬合金制作烤瓷基底冠的边缘适合性。方法:分别用钴铬合金、含铍镍铬合金、镍铬合金、金铂钯合金在统一规格模型上制作铸造金属基底冠32个,以粘固剂粘固于代型后切割制成剖面,测试各组冠边缘和轴壁部位的粘固剂厚度,比较其边缘适合性。结果:钴铬合金基底冠边缘粘固剂的平均厚度与镍铬合金基底冠相比没有差异(P>0.05),其边缘适合性稍差于金铂钯合金基底冠(P<0.05)。结论:钴铬合金基底冠的边缘适合性符合临床要求,值得临床应用和推广。     

结核分枝杆菌分泌蛋白ESAT-6对小鼠巨噬细胞凋亡的诱导作用

【目的】研究结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）分泌蛋白ESAT-6（early secreted antigenic target of 6 kD）对小鼠巨噬细胞凋亡的影响及机理。【方法】应用流式细胞仪分析稳定表达ESAT-6和经重组ESAT-6蛋白作用的小鼠RAW264.7细胞的凋亡;应用Caspase-3检测试剂盒检测caspase-3活性变化;进一步应用Western blotting分析稳转细胞系ESAT-6表达情况。【结果】RAW-EGFP-ESAT-6细胞系培养48 h后的凋亡率与caspase-3活性显著高于RAW264.7和RAW-EGFP细胞系（P〈0.05）;RAW-flag-ESAT-6细胞系培养48 h后的凋亡率与caspase-3活性显著高于RAW264.7和相应对照细胞系（P〈0.01）。10μg/ml重组ESAT-6可显著诱导RAW264.7细胞凋亡,而5μg/ml重组ESAT-6无明显诱导细胞凋亡效果。稳转细胞系RAW-flag-ESAT-6细胞内flag-ESAT-6浓度大约只有500 ng/ml。【结论】胞内低水平表达结核分枝杆菌分泌蛋白ESAT-6可依赖caspase-3信号通路诱导小鼠RAW264.7细胞凋亡。     

缺血预处理对大鼠神经细胞凋亡的影响

目的通过观察缺血预处理后大鼠局灶脑缺血后神经细胞凋亡变化,探讨脑缺血预处理减少神经细胞凋亡的机制。方法成年健康SD大鼠72只,随机分为预处理组、缺血组、假手术组,用大脑中动脉栓塞法制作脑缺血动物模型,每组在造模成功后24h、48h、72h取出大鼠脑组织,应用原位末端转移酶标记技术（TUNEL染色）观察各个时间观察点细胞的凋亡情况。结果原位末端转移酶标记技术（TUNEL染色）结果显示,缺血组凋亡细胞数最多,预处理组次之,假手术组最少。各组凋亡细胞数随时间呈上升趋势。结论脑缺血预处理可抑制神经细胞凋亡。     

姜黄素抗白血病细胞活性及其机制

目的 探讨姜黄素对白血病细胞的致凋亡作用及其相关作用机制.方法 MTT细胞毒实验检测姜黄素对白血病HL-60细胞的生长抑制作用,Annexin V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡的发生,提取细胞总蛋白Western blot检测survivin蛋白、caspase-9和caspase-3剪切带的表达.结果 姜黄素对白血病HL-60细胞显示了高效的细胞毒活性,IC50值为(1.66±0.31)μmol/L.0、2、4和8μmol/L的姜黄素处理HL-60细胞48h后,细胞的凋亡率分别为(2.44±1.24)％、(17.12±3.61)％、(34.82±6.63)％和(53.94±8.17)％,各处理之间差异有显著性(P＜0.01).Western blot结果显示姜黄素诱发了HL-60细胞内caspase-9的裂解和继发的caspase-3剪切,同时姜黄素也剂量依赖性的下调了HL-60细胞内survivin蛋白的表达.结论 姜黄素对人白血病细胞具有高效的致凋亡作用,下调细胞survivin蛋白的表达激活线粒体凋亡途径是其致凋亡的主要作用机制.     

两种合金烤瓷冠对牙龈组织的影响

目的：比较镍铬合金烤瓷冠和钴铬合金烤瓷冠对牙龈组织的影响。方法：对100例单个后牙金属烤瓷冠修复患者分别制作镍铬合金、钴铬合金烤瓷冠各50件,1年后以牙龈指数为标准,评价牙龈健康状况。结果：牙龈健康状况：钴铬合金烤瓷冠A40例、B8例、C2例、D0例;镍铬合金烤瓷冠A28例、B10例、C7例、D5例。两者比较,差异有统计学意义（χ2=10.118,P=0.018）。结论：钴铬合金对牙龈组织的不利影响较镍铬合金轻。     

Angiopoietin/Tie2系统在大鼠高动力型肺动脉高压形成中的作用

目的 研究angiopoietin家族成员在高动力型肺动脉高压形成中的作用.方法 通过左颈总动脉和左颈外静脉分流手术建立大鼠高动力型肺动脉高压模型.术后第1、2、4、8和12周检测肺组织内Ang-1、Ang-2、Ang-3、Tie2和激活型caspase-3的变化.结果 高动力引起肺动脉高压,出现肺动脉内皮细胞增生肥大.在肺动脉高压形成的过程中,肺组织内Ang-1和Tie2的表达显著增高,而Ang-3的表达明显降低.肺微小动脉内皮细胞Tie2的磷酸化水平逐渐升高但激活型caspase-3却降低.Ang-2的表达未见明显变化.结论 内皮细胞凋亡减少可能是高动力型肺动脉高压形成的一个重要的病理机制.Ang-1/Tie2可能通过抑制内皮细胞凋亡来促进高动力型肺动脉高压的形成.Ang-3的表达量下降可能也促进了这一过程.在高动力型肺动脉高压的形成过程中Ang-2可能不发挥作用.