复合环孢素同种异体骨与冻干同种异体骨移植后免疫学比较

目的：比较复合环孢菌素同种异体骨（cyclosporine-impregnated allograft bone,CAB）与冻干同种异体骨（freeze-dried allograft bone,FDAB）移植后的免疫学反应。方法60只新西兰大白兔随机分为材料提供组、实验组和对照组,每组20只。取材料提供组双侧髂骨制备CAB及FDAB。实验组、对照组动物制备右侧桡骨中段10 mm的骨与骨膜缺损,实验组植入CAB修复,对照组植入FDAB修复。术后2周、4周、8周、12周每组各取5只动物,进行全血及移植部位骨组织IL-2、TNF-α浓度测定。结果术后2周、4周、8周、12周血中IL-2、TNF-α浓度两组之间无差异。术后2周、4周移植部位骨组织中IL-2、TNF-α浓度实验组低于对照组（P值分别为0.000、0.015）,术后8周、12周移植部位骨组织中IL-2、TNF-α浓度两组之间差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 CAB移植后不会引起全身免疫反应,其引发的移植局部免疫排斥反应弱于FDAB。     

重组成骨生长肽对兔同种异体骨移植的成骨影响

目的　观察重组成骨生长肽 (rOGP)静脉应用对兔同种异体骨移植愈合过程中成骨活性的影响。方法　4 2只日本大耳白兔选择一侧前肢造成桡骨中段骨缺损 ,植入常温储存的异体骨 ,随机分成二组。实验组从术后第1d开始每天注射rOGP0 .5 μg kg ,至取材前 1d ,对照组注射同样剂量的生理盐水。术后 4、8、1 2周每组各处死 7只 ,测血清ALP、BGP水平 ,同时取材摄X线片。结果　放射线学显示 ,实验组术后 8周植骨与宿主骨愈合 ,对照组术后 1 2周植骨与宿主骨愈合。实验组血清碱性磷酸酶 (ALP)、骨钙素 (BGP)水平高于对照组 ,术后 4周差异非常显著 (P <0 .0 1 ) ,术后 8、1 2周显著差异 (P <0 .0 5 )。结论　全身应用rOGP通过提高宿主体内成骨细胞的活性 ,促进同种异体骨移植的愈合。     

冷冻同种异体骨软骨移植修复大面积关节软骨缺损的可行性研究

目的观察冷冻同种异体骨软骨移植修复大面积关节软骨缺损的可行性，为临床应用提供实验依据。方法共选取36只新西兰兔，随机数字表法分成供体组、实验组和对照组，每组12只。供体组制备冷冻同种异体胫骨内侧髁骨软骨移植物后处死；实验组将经程序深低温冷冻保存的同种异体胫骨内侧髁移植；对照组将取下的胫骨内侧髁原位植入。所有实验动物在术后12周处死。应用苏木精-伊红染色观察关节软骨组织的病理学变化，软骨缺损的组织学评分以半定量的改良Wakitani score法评估，内容包括：细胞种类、髓质染色、表面完整性、软骨的厚度、移植软骨在受体周围组织的完整性5个方面，采用0、1、2、3、4评分，最高总分14分。观察两组动物的大体标本、X线片、组织学检查、Waki-tani score评分及免疫组织化学检查结果。结果①移植软骨的大体观察：两组动物关节活动度正常，关节腔无粘连、无积液，实验组移植软骨颜色及高度与周围关节软骨大致相同，关节面较平整，基底部界限模糊。对照组关节软骨面平整、无塌陷，厚度不变。②两组动物关节X线片均见骨折线已模糊，对位、对线良好。③组织学检查：两组动物关节软骨均已被透明软骨覆盖，细胞排列有序，软骨基质大量分泌，未见淋巴细胞和浆细胞浸润。④两组动物关节软骨Wakitani score评分结果无显著性差异，总评分相近（P〉0.05）。⑤两组修复软骨Ⅱ型胶原免疫组织化学染色强阳性。结论冻存同种异体骨软骨移植后可完全修复大面积关节软骨缺损，并与自体骨软骨块修复兔的关节软骨缺损在组织学上相近，未见免疫排斥反应。     

多聚赖氨酸表面改性后同种异体骨的骨传导能力研究

目的:探讨多聚赖氨酸表面改性兔同种异体骨后骨传导能力的变化。方法:采用冻干法,将多聚赖氨酸覆盖在实验组兔同种异体骨的微孔表面,对其进行表面改性,并将未经表面改性的同种异体骨设为对照组。兔骨髓基质干细胞（BMSCs）种植于2组的微孔表面,进行培养,并向成骨方向诱导。采用扫描电镜观察、MTT法检测BMSCs在同种异体骨微孔表面黏附、增殖情况,检测2组细胞表达的碱性磷酸酶的活性;将2组复合自体BMSCs的同种异体骨回植入兔双侧桡骨缺损处,1、2、3和4个月后分别对标本进行螺旋CT三维重建,观察新骨生成情况。结果:实验组中BMSCs在同种异体骨微孔表面黏附、增殖以及表达碱性磷酸酶的情况明显优于对照组（P<0.01）,实验组兔桡骨缺损处的修复情况优于对照组（P<0.01）。结论:同种异体骨经多聚赖氨酸表面改性后,其在体内和体外的骨传导能力得到了显著的增强。     

重组成骨生长肽对同种异体骨移植愈合的实验研究

目的　观察重组成骨生长肽 (rOGP)对兔同种异体皮质骨移植愈合的影响。方法　采用日本大耳白兔造成桡骨中段 1.0cm缺损植以同种异体骨的动物模型 ,4 2只兔被分成实验组和对照组 ,每组 2 1只。从术后第 1天至取材的前 1天实验组动物每日经耳缘静脉注射rOGP 0 .5 μg/kg ,对照组注射同等剂量的生理盐水。于术后第 4 ,8,12周取材分别行大体、放射线和HE染色组织学观察愈合情况。结果　实验组和对照组组织愈合情况相似 ,实验组有多量的纤维结缔组织包裹连接处 ,放射线观察第 12周骨髓腔通畅及骨改建好于对照组。术后第 8,12周实验组移植骨和宿主骨连接处新生骨小梁多于对照组 (P <0 .0 5 )。结论　全身应用rOGP能促进兔的同种异体骨移植的愈合     

重组合冷冻同种异体皮质骨修复大段负重骨缺损的实验研究

目的 比较不同处理方式的深低温冷冻同种异体皮质骨修复兔大段负重骨缺损的效果，为临床大段负重骨缺损的重建提供新方法．方法 40只新西兰大白兔随机分为5组，造成左侧股骨中上段缺损2cm的模型，A组植入异体骨 rhBMP-2 ACS，B组植入异体骨 rhBMP-2，C组植入异体骨 ACS，D组单纯植入异体骨，E组植入自体骨。术后3、6、9、12周照X线片，观察骨愈合情况并测量骨痂形成面积。术后12周处死动物，对标本进行三点弯曲力学测试，检测新骨形成率、骨孔隙率。结果 A组在X线表现、骨痂形成面积、三点弯曲破坏负荷、新骨形成率及骨孔隙率等方面均优于B、C、D组，与E组相仿。结论 同种异体皮质骨、rhBMP-2和ACS复合移植既具有高效持续的骨诱导作用，又能提供足够的机械强度，是修复大段负重骨缺损的好方法。     

凝血酶肽复合人工骨修复兔桡骨大段骨缺损的实验研究

目的 探讨凝血酶肽(TP508)复合人工骨对兔桡骨大段骨缺损的修复效果。方法 随机选取新西兰大白兔42只,建立双侧桡骨1.5cm骨-骨膜缺损模型。随机 选取其中36只,将右侧作为实验侧,骨缺损处植入羟基磷灰石人工骨材料并注入TP508;左侧为对照组,仅植入上述人工骨材料;剩余6只作为空白对照组,骨缺损处不 植入任何物质。术后4周、8周、12周分批处死实验动物,对实验段桡骨进行X线及组织学分析。结果 术后4周、8周、12周实验组X线评分、组织学评分及骨缺损区 新生骨组织面积百分比均优于同期对照组(P均<0.05);术后12周空白对照组骨缺损区无骨连接形成,X线评分及组织学评分明显低于同期实验组及对照组(P均 <0.05)。结论 TP508在骨缺损修复过程中具有促进愈合作用,复合人工骨植骨对兔桡骨大段骨缺损的修复效果良好。     

同种异体骨髓间充质干细胞复合胶原海绵修复兔桡骨缺损的实验研究

目的：了解兔骨髓间充质干细胞（BMscs）同种异体移植的存活分布情况及同种异体兔BMscs复合胶原海绵（CS）情况,观察其对兔桡骨1.5 cm缺损的修复效果,为将来的进一步应用奠定实验基础。方法：采集、培养、纯化扩增新西兰大白兔BMscs,用eGFP荧光标记BMscs,与胶原海绵联合培养,植于同种异体动物臀大肌,观察存活及分布情况。建立兔桡骨缺损（1.5 cm）模型,45只新西兰大白兔随机分为3组：同种异体BMscs/CS组（A组）,单纯胶原海绵组（B组）,空白对照组（C组）。术后分阶段行X线、组织学检查及生物力学检查,评价其修复效果。结果：eGFP标记的BMscs异体移植存活时间超过3周。X线示12周A组大白兔5只中有4只达到骨性连接。新生骨量呈A组-C组递减,至12周无一愈合。随着时间推移,A组编织骨髓腔和骨小梁增多,修复过程优于B、C组。A组生物力学指标均低于健侧正常对照组,但各指标能达到正常组的80%～90%。结论：同种异体MSCs复合CS可以修复1.5 cm兔桡骨缺损。     

同种异体骨脱钙骨基质联合BMP修复兔桡骨骨缺损的实验研究

目的：探讨异体脱钙骨基质（DBM）骨泥复合骨形态发生蛋白（BMP）修复家兔桡骨节段性骨缺损的作用。方法：日本大耳白兔54只,雌雄不限,随机分为3组,A组：空白组（缺损区不植入任何材料）,B组：对照组（缺损区植入金世植骨灵）,C组：实验组（缺损区植入DBM骨泥）。建立家兔单侧桡骨骨缺损模型,采用同种异体骨DBM骨泥复合BMP进行修复,复合骨泥中加入骨胶原作为塑形剂,术后4、8、12周观察新骨生成情况,通过形态学、X线、组织学及计算机图像分析等观察指标,并与对照组及空白组进行比较,客观评价骨泥诱导成骨及骨缺损修复能力。结果：DBM与BMP复合骨泥易根据骨缺损大小塑形,术中操作简单。术后A组骨缺损未获骨性修复,B、C组骨缺损均获得骨性愈合,且新骨面积测定显示B、C组间成骨速度无明显差异（P〉0．05）,比A组快（P〈O．01）。结论：异体DBM骨泥复合BMP具有良好的骨修复作用。     

同种异体兔骨髓间充质干细胞复合纳米晶胶原基骨修复胫骨缺损的实验研究

目的 探讨同种异体兔骨髓间充质干细胞(marrow mensenchymal stem cells,MSCs)与纳米晶胶原基骨(nano-hydroxyapa-tite/collagen,NHAC)修复材料构建的组织工程骨修复兔胫骨缺损的可行性.方法 24只新西兰大白兔胫骨中段形成10mm长的骨缺损,右侧骨缺损处植入组织工程骨作为实验组,左侧骨缺损处植入单纯NHAC作为对照组.术后3、6、9、12wk分批处死动物,行一般情况、缺损区大体观察、X线、组织学染色分析等指标检测,行统计学分析,比较各组修复骨缺损的效果.结果 24只新西兰大白兔均进入结果分析.①术后一般情况:各组兔术后恢复及进食均正常,伤口无炎症反应,愈合良好.②大体观察:实验组术后6wk骨缺损部分修复,9、12wk骨缺损完全修复,3、6、9、12wk骨缺损修复情况明显好于对照组.③X线:实验组缺损区术后3wk可见有骨痂生长,9wk骨缺损基本修复,对照组术后12wk缺损区基本修复,各观察时间点实验组骨缺损修复情况明显好于对照组.④组织学染色:实验组缺损区新生类骨样组织、编织骨和板状骨出现的时间较对照组早,并且不经软骨介导即可直接成骨,而对照组以"爬行替代"方式修复骨缺损.结论 同种异体兔MSCs复合NHAC修复骨缺损的能力较单纯NHAC强且迅速,能够对大段骨缺损进行快速有效的修复.     

重组合同种异体皮质骨修复大段负重骨缺损的组织计量学研究

目的 :比较不同处理方式的深低温冷冻同种异体皮质骨修复兔大段负重骨缺损的组织计量学效果 ,为临床大段负重骨缺损的重建提供新方法。方法 :4 0只新西兰大白兔随机分为 5组 ,造成左侧股骨中上段缺损 2cm的模型 ,分别采用重组人骨形态发生蛋白 2 (rhBMP 2 )和Ⅰ型可吸收胶原海绵 (ACS)对各组移植骨进行处理 ,其中A组植入异体骨 +rhBMP 2 +ACS ,B组植入异体骨 +rhBMP 2 ,C组植入异体骨 +ACS ,D组单纯植入异体骨 ,E组植入自体骨。术后 1 2周处死动物 ,移植骨和宿主骨远、近结合部及移植骨中段分别取材 ,做不脱钙磨片 ,在荧光显微镜和普通光镜下测量新骨形成率、骨孔隙率、骨单位半径和哈佛氏管直径。结果 :A组在新骨形成率、骨孔隙率、骨单位半径和哈佛氏管直径等方面均优于B、C、D组 ,与E组相仿。结论 :同种异体皮质骨、rhBMP 2和ACS复合移植具有高效持续的骨诱导作用 ,能平衡骨吸收 /骨形成活动 ,移植骨愈合质量好 ,是修复大段负重骨缺损的好方法。     

金葡液对冻干异体骨移植愈合影响的实验研究

目的 观察金葡液对冻干异体骨移植愈合的影响，并探讨其作用机制。方法 24只兔右侧桡骨造成15mm缺损模型，植入冻干异体骨，随机分成两组，每组12只。术后第10d开始，实验组局部注射金葡液，对照组注射等体积的生理盐水。术后不同时间分别行X线片、组织学和放射性核素骨扫描检查，并测定血清钙、磷及碱性磷酸酶(ALP)含量。结果 实验组术后不同时间的骨代谢活性、新骨生成和血清P及ALP含量均高于对照组，而血清Ca低于对照组。实验组异体骨90d完全愈合，对照组仍未愈合。结论 金葡液作为一种促进骨折愈合药物，可有效加快冻干异体骨的愈合，加速新骨生成。     

同种脱钙骨脊柱融合实验研究

本文用21只兔研究同种脱钙骨的实验性脊柱融合，实验动物分三组：脱钙骨粉组；脱钙骨条组；脱钙骨粉加明胶赋形剂组。手术在胸_(10)～腰_3椎体侧后方施行，作者观察术后1、2、3、5个月的结果表明：X线片及组织学都证明三组均有诱导新生骨形成。     

同种异体骨移植后骨愈合的实验研究

目的：通过有关的动物实验来探讨有关异体骨移植骨愈合的规律，以达到加速异体骨移植骨愈合的目的。方法：24只新西兰大白兔为实验动物，随机分为实验组和对照组。实验组用梯度降温、深低温保存的股骨外侧髁植入，在接触的骨面置入骨形态发生蛋白(BMP)骨基质，以金属螺钉固定；对照组用取下的自体股骨外侧髁原位植入，用与实验组相同的内固定方法固定；术后4、8和12周行大体标本观察，并行苏木精-伊红(H-E)染色及BMP免疫组化染色，观察异体骨愈合的情况。结果：深低温保存的同种异体骨移植愈合与自体骨相似。BMP染色在新生骨及其周围类基质表达阳性。其愈合是从宿主骨向移植骨，从周围向中央，从哈佛管向其四周逐渐进行爬行替代的过程。结论：同种异体骨移植愈合过程主要通过骨传导实现成骨，骨诱导亦发挥积极作用。使用BMP、合适的内固定、大小适合的移植物，可以使异体骨愈合的过程与自体骨相似。     

脱钙骨基质复合牛骨形态发生蛋白修复兔桡骨缺损实验的放射学评价

目的:对异体脱钙骨基质复合BMP修复节段性骨缺损能力进行放射学评价.方法:64只新西兰大白兔采用桡骨15 mm节段性骨缺损模型,随机分为4组,A组植入异体脱钙骨基质(Demineralized BoneMatrix,DBM)与牛骨形态发生蛋白(Bovine Bone Morphogentic Protein,bBMP)复合材料,B组植入异体DBM,C组植入异体骨粒,D组为空白对照组.术后4 w、8 w、12 w、16 w,进行放射学检查和相应的组织学检查.结果异体DBM与bBMP复合材料组X线和组织学检查显示骨愈合修复情况要明显优于异体DBM组、异体骨粒组和空白对照组.结论:DBM经bBMP复合后,可提高修复骨缺损的能力,是一种较为理想、具有高效成骨活性的植骨材料.     

异体脱钙骨基质复合bBMP修复兔桡骨骨缺损

目的：探讨异体脱钙骨基质复合BMP修复节段性骨缺损的能力。方法：64只新西兰大白兔采用桡骨15mm节段性骨缺损模型，随机分为4组，A组植入异体脱钙骨基质(Demineralized Bone Matrix,DBM)与牛骨形态发生蛋白(Bovine Bone Morphogentic Protein,bBMP)复合材料，B组植入异体DBIM，C组植入异体骨粒，D组为空白对照组。术后4、8、12、16w，进行放射学检查、病理组织学检查和计算机图像分析新生骨面积。结果：异体DBM与bBMP复合材料组骨生成、新骨面积和骨连接情况明显优于异体DBM组、异体骨粒组和空白对照组。结论：异体DBM复合BMP材料通过骨诱导和骨传导两种方式修复骨缺损，是一种较为理想、具有高效成骨活性的植骨材料。     

同种异体皮质骨和松质骨愈合的组织学研究

目的探讨同种异体皮质骨和松质骨愈合方式的差异。方法兔左侧尺骨中段植人冻干异体骨,分为皮质骨组和松质骨组,均为32只。术后2、4、8、16周分批处死,取材进行Ⅰ型胶原基因的原位杂交研究,以及皮质骨孔隙率和松质骨平均小梁宽度的组织学定量分析。结果异体皮质骨内先出现大量的骨吸收陷窝,然后在陷窝内出现表达1型胶原mRNA的成骨细胞;其孔隙率先增大,然后缓慢减小。异体松质骨内早期就有大量表达五型胶原mRNA的成骨细胞沉积在原有骨小梁表面,附近同时有破骨细胞的活动;其平均小梁宽度持续上升。结论同种异体皮质骨的愈合是在吸收的基础上成骨,而同种异体松质骨内则可以直接成骨。     

放射性骨显像在组织工程骨修复骨缺损实验中的应用

目的观察修复兔桡骨大段骨缺损时复合了血管内皮祖细胞（EPCs）的组织工程骨的血管化及成骨情况。方法自体骨髓通过不同方法的体外培养,分别获得EPCs及经成骨诱导的骨髓间充质干细胞（MSCs）,与脱钙骨基质（DBM）构建组织工程骨修复兔桡骨大段骨缺损,通过放射性核素骨显像技术评价术后不同时期组织工程骨的血管化进程及成骨情况。结果感兴趣区（ROI）计数和摄取比值显示：术后3d,各组间差异无统计学意义,但低于正常对照。术后2、4、8周,各组均呈逐渐上升的趋势,4周和8周时达到峰值,实验组在各个时相点均高于自身对照及阴性对照组。术后12周,各组均开始下降,其中延迟相结果显示：实验组与自身对照组差异无统计学意义,但二者均高于阴性对照组。术后16周,血池相结果显示：实验组低于自身对照组,与阴性对照组无差异;延迟相结果各组差异无统计学意义。结论放射性核素骨显像对骨修复过程中的血管化及成骨具有良好的监测作用。EPCs可以促进组织工程骨的血管化,加速骨愈合。     

珊瑚人工骨复合骨形成蛋白修复狗下颌骨缺损

应用珊瑚人工骨（ＣＡＢ）／骨形成蛋白（ＢＭＰ）材料修复１０只狗下颌骨缺损，观察４～２６周，分别于术后第４、８、１４、２０、２６周处死动物（每次１组，每组２只），取材作Ｘ线拍片和组织切片，结果表明ＣＡＢ是ＢＭＰ又一良好载体，ＣＡＢ／ＢＭＰ复合材料是一种较为理想的骨缺损修复材料。