大黄素收缩大鼠结肠平滑肌细胞信号机制研究

目的　观测大黄素对结肠平滑肌细胞收缩、胞浆钙离子浓度和蛋白激酶Cα的影响 ,探讨大黄素发挥作用的细胞内信号转导机制。方法　取Wistar大鼠远端结肠 ,采用含 0 1%Ⅱ型胶原酶、0 0 1%大豆胰蛋白酶抑制剂的消化液消化 ,收集分离的细胞供实验用。应用图象分析系统随机测定 5 0个细胞的长度计算收缩反应。Fluo 3AM标记平滑肌细胞钙后 ,采用激光扫描共聚焦显微镜动态观测平滑肌细胞内钙离子浓度改变。免疫荧光方法标记蛋白激酶Cα后 ,采用激光扫描共聚焦显微镜观测静息时和大黄素刺激后蛋白激酶Cα的空间分布变化。结果　分离的结肠平滑…     

肠平滑肌细胞在肠道炎性疾病中作用的研究进展

肠平滑肌细胞(ISMC)作为胃肠道主要成员之一,在肠管蠕动、结肠运输、肠道内环境稳态等方面发挥重要作用,其结构及功能改变参与肠道炎性疾病发病过程。肠道炎性疾病常伴肠功能亢进、肠腔狭窄等症状。明确ISMC在肠道炎性疾病中的作用将为其临床治疗提供新思路。     

细胞外基质对血管平滑肌细胞的作用

血管平滑肌细胞表型的转变、迁移、增殖和凋亡,与血管成型术后再狭窄的发生关系密切,细胞外基质通过与平滑肌细胞表面整合素受体的粘连,形成粘着斑,激活粘着斑激酶,影响细胞内的信号转导,从而对再狭窄的发生和发展产生一定作用。     

2.125大黄素收缩大鼠结肠平滑肌细胞信号机制研究

目的观测大黄素对结肠平滑肌细胞收缩、胞浆钙离子浓度和蛋白激酶Cα的影响,探讨大黄素发挥作用的细胞内信号转导机制. 方法取Wistar大鼠远端结肠,采用含0.1%Ⅱ型胶原酶、0.01%大豆胰蛋白酶抑制剂的消化液消化,收集分离的细胞供实验用.     

大黄素对人血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 观察大黄素对人血管平滑肌细胞周期时相和cyclin D1表达的影响,探讨大黄素抑制平滑肌细胞增殖的作用机制。方法 取对数增长期的平滑肌细胞同步于G0期,药物组:加入含37.5mg·L-1大黄素10％胎牛血清的培养液,对照组:仅加入10％胎牛血清的培养液;作用12、24、36、48 h后分别用流式细胞仪和Westemblot法进行细胞周期时相和cyclin D1表达的测定。结果 与对照组比较,药物组在各相同时间点C0/G1期细胞百分比升高,S期细胞百分比下降,且随着时间的延长差值增大,cyclin D1表达高峰延迟,表达量下调,细胞周期受阻于G0/G1期。结论 大黄素在抑制平滑肌细胞增殖的过程中通过下调,cyclin D1表达,从而阻滞细胞周期进程。     

消炎利胆胶丸对胆道及肠道平滑肌的作用

消炎利胆胶丸是我院中医学教研室研制的一种复方中药制剂,临床应用证实对胆囊炎、胆石症有较好的疗效。我们将其药用成分用沸水浸泡后制成不同浓度的溶液,观察了其对胆汁分泌及平滑肌的作用。 1.胆汁分泌:将200～250g大鼠随机分成4组,分別灌胃给予消炎利胆胶丸2.49g     

大黄素抗肿瘤作用及相关机制

大黄素(emodin)分子式C15H10O5,化学名为:1,3,8-三羟基-6-甲基蒽醌。临床上用作抗菌、抗肿瘤以及治疗便秘等。文献报道大黄素能够抑制肿瘤细胞增生、诱导凋亡、防止肿瘤细胞向远处转移,而且还能有效地抑制肿瘤细胞摄取葡萄糖,导致细胞膜相关功能的改变,最终导致细胞死亡。其抗肿瘤机制的研究受到众多学者的重视,本综述旨在综述最新的研究报道,重点放在大黄素作用的分子机制上。1体外研究1.1抑制肿瘤细胞的生长和增殖大量的研究表明,大黄素可以抑制多种肿瘤细胞的生长与增殖,研究发现大黄素的C1和C3位点是抗肿瘤的重要功能位置[1]。而大黄…     

川芎嗪对小动脉平滑肌细胞离子通道内向电流的作用

本文旨在用Patch clamp技术研究川芎嗪(Ligustrazine)对小动脉平滑肌细胞膜离子单通道的内向电流的作用。取Wistar大鼠(雄性,体重200～300克)的肠系膜小动脉(口径50μ左右),经酶法分离制备成单个平滑肌细胞。实验时置细胞于盛有溶液的小池中。池内液成份为(浓度mM):NaCl 125;MgCl_2 1.2;NaH_2PO_4 1.2;HEPES 10;     

脑肠肽对胃肠平滑肌细胞动力调节的信号转导机制

脑肠肽对胃肠平滑肌细胞动力调节的信号转导机制王玲，周吕（中国医学科学院，中国协和医科大，学基础医学研究所生理研究室北京１００００５）脑肠肽是指双重分布于中枢神经系统和胃肠道的肽类物质，目前已知有６０多种。近年来随着分子生物学技术的应用与发展，许多脑肠...     

大黄素对急性胰腺炎大鼠的治疗作用及机制研究

目的:观察大黄素对急性胰腺炎模型大鼠的治疗作用并从细胞因子IL-1、TNF-α探讨其作用机制。方法:大黄素组(25mg.kg-1)和阴性组(0.04%氢氧化钠溶液)分别给大鼠小肠给药0.5ml后,用3%牛磺胆酸钠4μl.g-1在脾部胰腺被膜下均匀注射,复制急性胰腺炎模型,并于之后的12、24、48h分别处死动物,取血观察血淀粉酶、血脂肪酶、IL-1、TNF-α,并取组织作病理切片,光镜下检查,评分。结果模型组在12、24、48h均可明显增加血淀粉酶、血脂肪酶、IL-1、TNF-α的水平,24h引起胰腺凝固性坏死,肝细胞脂肪变性,小肠绒毛脱落,根据小肠脱落的程度进行评分;大黄…     

大鼠肺动脉平滑肌细胞Rho激酶对 p-Smad1核迁移的作用及机制

目的: 研究Rho激酶对p-Smad1核迁移的作用及信号转导途径,探讨它们在肺血管重构中的作用机制。方法: 分离培养大鼠远端肺动脉平滑肌细胞,应用血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)启动肺动脉平滑肌细胞Rho激酶信号通路,应用骨形态发生蛋白2(BMP-2)启动BMP信号通路,并用Rho激酶抑制剂Y-27632、MEK抑制剂U0126进行干预。培养细胞分成5组:(1)对照组;(2)BMP-2组;(3)BMP-2+PDGF-BB组;(4)BMP-2+PDGF-BB+Y-27632组;(5)BMP-2+PDGF-BB+U0126组。免疫荧光染色标记p-Smad1在细胞核内外的分布并计算p-Smad1核迁移阳性细胞百分数(即核迁移率)。分离平滑肌细胞核蛋白和胞浆蛋白,Western blotting分析p-Smad1在细胞内的总量和细胞核内外相对含量的变化。Kit-WST-8试剂盒检测细胞增殖。结果: BMP-2组p-Smad1在细胞内的总量、在细胞核中的相对含量和核迁移率明显高于对照组(P<0.05);BMP-2+PDGF-BB 组p-Smad1的核迁移率和在细胞核中的相对含量明显低于BMP-2组(P<0.05),但是细胞内p-Smad1总量无明显改变(P>0.05);BMP-2+PDGF-BB+ Y-27632组和BMP-2+PDGF-BB+U0126组细胞内p-Smad1的总量、在细胞核中的相对含量和核迁移率与BMP-2组基本相似(P>0.05)。BMP-2组的A值明显小于对照组(P<0.05);PDGF-BB+BMP-2组的A值明显大于BMP-2组(P<0.05)且大于对照组(P<0.05);BMP-2+PDGF-BB+Y-27632组和BMP-2+PDGF-BB+U0126组的A值均小于PDGF-BB+BMP-2组(P<0.05)。结论: 在大鼠肺动脉平滑肌细胞,PDGF-BB激活的Rho激酶通过MEK/ERK1/2抑制BMP-2引起的p-Smad1核迁移,促进平滑肌细胞增殖。     

UTP对猪冠状动脉平滑肌细胞BK_(Ca)通道作用机制的研究

目的:利用膜片钳技术,研究UTP对急性酶分离的猪冠状动脉平滑肌细胞上BKCa通道的作用,探讨生理条件下UTP调节BKCa通道的机制。方法:应用Cell-attached技术记录急性酶分离的猪冠状动脉平滑肌细胞上BKCa电流。用pCLAMP9.0软件系统进行数据采集及分析。结果:在Cell-attached膜片上,80μM UTP可明显激活BKCa通道(P0.05,n=21)。PLC抑制剂U73122可抑制UTP对BKCa的激活作用(P0.05,n=5)。PKC激动剂PMA(10nM),可使BKCa通道开放概率明显降低(P0.05,n=9)。UTP(80μM)预处理细胞之后,IP3抑制剂2APB(80μM),可使BKCa通道开放受抑(P0.05,n=6)。结论:在Cell-attached膜片上,UTP能激活猪冠脉平滑肌细胞BKCa通道。PLC信使转导通路中的IP3介导的胞内Ca2+释放是UTP激活BKCa通道的重要途径。     

中药下法药物对肠道平滑肌收缩和细胞电活动的影响

中药下法药物对肠道平滑肌收缩和细胞电活动的影响杨文修，李俊英，许文胜，于海鹰，陈学群（南开大学物理系生物物理教研室）田在善，吴咸中（天津市中西医结合急腹症研究所）联合应用肠道平滑肌张力测量和细胞内微电极记录技术，观测了中药下法药物对豚鼠结肠带平滑肌收...     

细胞自噬促进血管平滑肌细胞向合成表型转化的作用与机制

血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)具有两种不同表型,即分化表型(收缩表型)和去分化表型(合成表型).VSMCs来自中胚层,由低分化合成表型发育至高分化收缩表型.在成熟动脉,生理状态下的VSMCs处于分化静止状态,稳定在具有成年特性的收缩表型,主要维持血管的收缩功能[...     

铃蟾肽对交感神经节细胞的易化作用及离子机制探讨

目的：观察铃蟾肽（BOM）对豚鼠离体交感神经节细胞膜电位和膜电阻的影响及初步离子机制。方法：细胞内生物电记录技术。结果：BOM在大部分细胞上引起的缓慢去极化与剂量相关，可为特异性受体阻断剂Tyr^4,[D-phel2]BOM所阻断；BOM使去极化电位幅度增大并转化为动作电位（AP），并使电刺激突触前神经所致的使兴奋性突触后电位（f-EPSP)转化为AP。多数细胞膜电阻的减小及离子替换等显示Na^ 、K^ 可能参与该反应。结论：BOM通过相应受体对交感神经节内神经元兴奋性起易化作用；非单一离子参与该作用。     

Genistein对大鼠冠状动脉平滑肌细胞BKCa调控机制研究

目的 探讨Genistein对大鼠冠状动脉平滑肌细胞BKCa的调控机制.方法 通过急性酶分离法获取SD大鼠冠状动脉平滑肌细胞,并经由全细胞膜片钳技术分析Genistein对BKCa通道电流的调控机制.结果 电流幅度、通道开放概率、平均开放时间与膜电位相关(P<0.05);有钙外液中行10-5 mol/L Genistein干预后外向电流(+60 mV)为(303.58±70.36)pA,显著高于对照的(173.02±42.68)pA(P<0.05),而无钙外液孵育0.5 h后行Genistein干预后外向电流与对照比较无显著差异(P>0.05);四乙胺+Genistein干预后外向电流(65.32±6.34)pA,显著低于Genistein干预的(303.58±70.36)pA(P<0.05);BAPTA-AM加入后给予Genistein干预,两组外向电流比较无显著差异(P>0.05).结论 大鼠冠状动脉平滑肌细胞BKCa单通道开放概率、电流幅度与膜电位密切相关;Genistein能快速激活BKCa通道,可能与促使内钙释放有关.     

缺氧肺微血管内皮细胞培养液对平滑肌细胞的作用观察

缺氧肺微血管内皮细胞培养液对平滑肌细胞的作用观察第三军医大学新桥医院呼吸内科研究所（重庆６３００３７）王关嵩杨晓静胡义德钱桂生黄绒目的：观察缺氧肺微血管内皮细胞（ＰＶＭＥＣ）和平滑肌细胞（ＳＭＣ）间的相互作用。方法：缺氧ＰＶＭＥＣ的上清液加入无血清培...     

低氧肺微血管内皮细胞培养液对肺动脉平滑肌细胞的作用

慢性阻塞做肺病作为临床上的常见病，严重危害人们健康，对其病理进程已有多年研究，认识到低氧可以导致肺血管平滑肌细胞增生，肺腺泡及微血管的构型改建。既往人们注意到肺内皮细胞可以分泌一些物质调节一滑肌细胞增生。关于肺做血管内皮细胞（pulmonarymicrovascularendotheliacell，PMEC低氧状态下与平滑肌细胞的关系研究甚少，然而，肺做血管内皮细胞却是最早感受低氧的细胞之一。本研究通过离休培养的大鼠PMH：和大鼠肺动脉平滑肌细胞（pulmonaryarterialsmoothmusclecellPASMC），从细胞相互作用的角度研究低氧对PASMC的作用…     

血小板源生长因子对冠脉再狭窄中平滑肌细胞的作用

冠状动脉再狭窄是影响冠脉成形术远期疗效的重要问题。在其形成过程中，诸多生长因子参与作用。血小板源生长因子具有促进血管平滑肌细胞增殖和迁移作用，从而导致再狭窄的发生