重组钙调磷酸酶B亚基纯化工艺及质量稳定性控制研究

目的在实验室研究的基础上,已进行了表达rhCNB的中试发酵工艺研究和纯化方面的探讨。表达量可达到700mg/L以上,rhCNB纯度可达到95%以上。方法在此基础上进行了以下两方面工作的研究:①为了达到生物制品的质量标准,进一步改进了rhCNB的纯化工艺。②为了能够对rhCNB进行有效的质量稳定控制,该文对制备的3批注射用rhCNB进行了分子结构确证与理化特性鉴定。结果我们表达的重组hCNB与天然hCNB的结构完全一致。使rhCNB有效期保证在2年以上。     

重组人钙调蛋白磷酸酶B亚基在大鼠体内的药动学和组织分布特征

目的研究重组人钙调蛋白磷酸酶B亚基(rhCNB)在大鼠体内的药动学和组织分布特征。方法利用双抗体夹心ELISA法,对组织样本中rhCNB检测的选择性、线性范围、精密度、回收率和稳定性等进行方法学验证。SD大鼠单次iv给予rhCNB 5,10和20 mg·kg-1,多次iv给予rhCNB 20 mg·kg-1,于给药前及给药后0.033,0.25,0.5,1,2,4,8和12 h采血,用ELISA法测定rhCNB浓度,用DAS3.0软件计算药动学参数。大鼠单次iv给予rhCNB 10 mg·kg-1后,分别在0.25,1,2和8 h采集脑、心、肝、脾、肺、肾、全胃、睾丸或卵巢、体脂、骨骼肌、胸腺和血浆,用ELISA测定血浆和组织样品中rhCNB浓度。结果 rhCNB 5,10和20 mg·kg-1单次给药,主要药动学参数为:消除半衰期(t1/2)分别为0.95±0.28,0.85±0.27和(0.91±0.32)h;药时曲线下面积(AUC0-12 h)分别为41.0±4.3,59.5±9.1和(150.6±18.9)mg·h·L-1;血浆峰浓度(Cmax)分别为44.6±14.4,62....     

Studies of calcineurin B subunit from genetic engineering for use in medicine

Calcineurin is the only calcium‐ and calmodulin‐dependent protein phosphatase. Calcineurin B is its regulatory subunit with a molecular weight of 19 kD. In order to study the function of calcineurin B subunit alone, we effectively expressed at high levels and purified calcineurin B subunit from Escherichia coli. Approximately 500 mg of electrophoretically pure protein was obtained from 1 liter of culture. Our experiments demonstrated that calcineurin B subunit by itself produces physiological and pharmacological effects. Preliminary cell and immune studies indicated that while calcineurin B subunit has no direct effect on cell growth, it is a valuable immune regulation reagent. The anti‐cancer effect of calcineurin B subunit was remarkable, especially in vivo, since it reduced the ascites and growth of cancer in the mouse and prolonged the life of the mouse with cancer. The toxicity of calcineurin B was negligible according to results from the acute toxicity experiment. The calcineurin B subunit appears to be a significant biological response modifier. Drug Dev. Res. 56:40–43, 2002. © 2002 Wiley‐Liss, Inc.     

重组人血小板生成因子注射液的Ⅰ期临床耐受性试验

目的:研究国产重组人血小板生成因子注射液(rhTPO)在健康志愿者体内的耐受性和安全性。方法:随机选择健康志愿者27例,分别单次皮下注射rhTPO 0．5,1．0,2．0μg·kg-1,进行耐受性研究,动态观测健康志愿者用药后血象、血小板形态、凝血酶原时间和血清生化指标等。结果:除1例受试者用药36 h后四肢出现皮疹外,其余未观察到明显毒性反应;血小板计数约于给药后14 d达高峰,给药后21 d基本回落至基础水平,血小板升高时形态、功能及凝血酶原时间无明显改变。结论:单次皮下注射rhTPO 0．5～2．0μg·kg-1对人体是安全的,不良反应轻微,具有特异性和剂量依赖性升高血小板作用,对血小板形态和功能无明显影响。推荐Ⅱ期临床给药剂量为皮下注射1．0μg·kg-1,qd,连续7 d。     

重组人血小板生成素注射液上市后不良反应监测研究

目的研究重组人血小板生成素(rh TPO)上市后不良反应发生特点,完善其安全性信息,为临床合理用药提供参考。方法采用全面监测联合重点监测方案,观察实体肿瘤化疗后血小板减少患者及特发性血小板减少性紫癜患者应用rh TPO后的不良反应发生情况,对患者基本信息、原患疾病、合并用药及不良反应发生情况、严重程度、关联性评价、转归等进行分析。结果自2008年5月至2014年4月,共收集了6 829例应用rh TPO患者的信息,其中有87例发生药物相关不良反应,不良反应整体发生率为1.27%,男性、女性患者间不良反应发生率无显著差异(0.95%vs.1.42%,P>0.05)。77.01%患者不良反应发生在用药后5 d内,症状以全身症状为主,未发现说明书以外新的不良反应症状。儿童、老年人及妊娠人群中未出现非预期不良反应,≤14岁患儿不良反应发生率高于15~64岁患者组(3.4%vs.1.16%,P<0.05)和≥65岁患者组(3.4%vs.1.24%,P<0.05)。结论 rh TPO安全性良好,不良反应可控,但应注意对患者用药后的持续监测以应对迟发型不良反应损害。     

聚乙二醇化重组人胰岛素注射液Beagle犬毒动学研究

目的 研究毒性剂量暴露下聚乙二醇化重组人胰岛素注射液（PEG-Det）的毒动学（TK）,以评价系统暴露与剂量、时间及毒性结果之间的关系,通过重复给药分析药物在体内是否存在蓄积及代谢方式是否改变等特性。方法 32只健康Beagle犬随机分为4组,每组8只,雌雄各半,分别sc低、中、高剂量（37.5、75.0、150.0 μg/kg）PEG-Det及溶媒,每周给药2次,重复给药9个月。分别于首次（d1）、中期（d89）和末期（d260）给药后采用放射免疫分析（RIA）法检测不同时间血药浓度,采用罗氏血糖仪同步测定动物血糖水平。试验数据采用DAS 3.0药动程序拟合分析并计算TK参数。结果 各剂量组动物sc给药后,随血药浓度升高伴随血糖降低,且与给药剂量呈正相关;随给药频率增加,血糖降低幅度减小;单次和多次给药后,PEG-Det的C_max和AUC与剂量均呈正相关;随给药频率增加,各剂量组的C_max和AUC_ss降低,且给药末期（9个月）的蓄积指数（R_Cmax和R_AUC）均小于1;各剂量组在给药不同阶段的消除半衰期t_1/2z为20~30 h;达峰时间T_max和清除率CL_z/F均在一定范围内波动,不与剂量相关。结论 Beagle犬重复sc给予PEG-Det 37.5、75.0、150.0 μg/kg,随给药剂量增加,药物暴露量增大;经多次给药后,血浆中胰岛素浓度趋于平稳,体内无药物蓄积;且血糖降低幅度减少,在维持有效浓度和药效的基础上,降低了由低血糖带来的安全性风险。     

重组羧肽酶B的稳定性研究

目的筛选重组羧肽酶B(rCPB)酶液的保存方法以及rCPB的冻干保护剂。方法将添加和不添加甘油的两组rCPB酶液置于不同温度下保存,定期测定活力;在rCPB酶液中加入不同浓度的不同保护剂,比较冷冻干燥后的活性保留率,并从赋型性和溶解性方面评价冻干保护剂的作用。结果 4℃下,含25%甘油的rCPB酶液在6个月内活力保持不变;添加3%甘露醇和5%海藻糖的rCPB冻干品的酶活保留率分别为102%和100%。结论甘油能显著提高rCPB酶液的稳定性;从冻干保护效果和冻干品外观来评价,3%甘露醇可作为rCPB冻干过程中的最佳保护剂。     

维生素B6注射液对注射用头孢地嗪钠稳定性的影响

目的考察维生素B6注射液在5%葡萄糖注射液中对注射用头孢地嗪钠稳定性的影响。方法观察配伍液的外观及pH值的变化,采用HPLC法测定头孢地嗪钠含量。结果室温时,配伍液在6 h内无明显的外观、pH值、含量的变化。结论室温时,维生素B6注射液在6 h内对头孢地嗪钠的稳定性无影响。     

注射用头孢地嗪钠与果糖注射液配伍稳定性考察

目的考察注射用头孢地嗪钠与果糖注射液的配伍稳定性。方法采用紫外分光光度法测定配伍液在室温条件下放置6h内不同时间点的含量变化,并观察其外观及测定pH值。结果6h内配伍液澄明,色泽无变化,pH值、头抱地嗪钠含量无明显变化。结论室温时注射用头抱地嚷钠与果糖注射液配伍6h内稳定。     

Preparation and stability study of lansoprazole for injection

In the present study, we aimed to assess the preparation method of sterile lansoprazole powder for injection, as well as its quality and stability. By cryodesiccation technology in combination with the control of its quality and stability, the optimal formulation and preparation route were screened. Through small-scale and pilot-scale production validation, the formulation and preparation route were confirmed, in which mannitol was used as skeletal matter, meglumine was used as solubilizer and pH stabilizer, and sodium hydroxide was used as pH regulator. The formulation and preparation route were reasonable, showing good quality control and stability and fitting the pharmaceutical and clinical need.     

2种重组人生长激素冻干粉针剂的生物等效性

目的评价2种国产的重组人生长激素(r-hGH)的人体生物等效性。方法将24名健康受试者随机平均分为2组进行交叉试验,在每个给药周期,单次皮下注射r-hGH受试制剂或参比制剂0.067 mg.kg-1(0.2 IU.kg-1),给药后h 0、1、2、3、4、4.5、5、5.5、6、7、8、10、12、18、24采血,并用酶联免疫吸附分析(ELISA)法进行血药浓度检测,对ρmax和AUC0-24 h进行单双侧t检验并计算(1-2α)%置信区间。结果 2种制剂ρmax和AUC0-24 h无统计学差异(P>0.05)。受试制剂ρmax的90%置信区间落在参比制剂的102.7%～122.2%,AUC0-24 h的90%置信区间落在参比制剂的102.2%～115.0%之间。结论 2种注射用生长激素具有生物等效性。     

重组人红细胞生成素注射液中细菌内毒素凝胶检查法的研究

目的本文介绍了一种重组人红细胞生成素注射液的细菌内毒素检查法。方法应用鲎法检查重组人红细胞生成素注射液中的细菌内毒素,考察重组人红细胞生成素注射液对细菌内毒素检查法的干扰。结果重组人红细胞生成素注射液稀释150倍对细菌内毒素检查法无干扰。结论使用凝胶法检查重组人红细胞生成素注射液中的细菌内毒素是可行的,可用细菌内毒素凝胶法代替家兔热原检查法。