几种不同药物对大鼠全脑缺血再灌注时大脑c－fos基因表达影响的实验研究

新近研究表明，ｃ－ｆｏｓ基因表达在脑缺血再灌注损伤机制中发挥着第三信使的重要作用。应用ＲＮＡ分子杂交方法，研究尼莫地平等药物对全脑缺血再灌注时大脑ｃ－ｆｏｓ基因表达的影响，以期探讨脑缺血再灌注损伤保护的分子基因机制。缺血前３０分钟静注尼莫地平、安定、硫喷妥钠和吸入异氟醚、安氟醚，全脑缺血再灌注各３０分钟，提取大脑总ＲＮＡ，与ｃ－ｆｏｓＣＤＮＡ探针分子杂交，经过自显影，检测该时点ｃ－ｆｏｓ基因ｍＲＮＡ水平。结果显示：尼莫地平、安定、异氟醚能显著抑制缺血３０分钟再灌注３０分钟ｃ－ｆｏｓ基因表达，而硫喷妥钠、安氟醚对该时点该基因表达无影响。实验提示：ｃ－ｆｏｓ基因参与全脑缺血再灌注损伤保护的分子基因机制。本大学第二医院麻醉科     

几种不同药物对大鼠全脑缺血再灌注时大脑c—fos基因表达影…

新近研究表明，ｃ－ｆｏｓ基因表达在脑缺血再灌注损伤机制中发挥着第二信使的重要作用。应用ＲＮＡ分子杂交方法，研究尼莫地平等药物对全脑缺血再灌注时大脑ｃ－ｆｏｓ基因表达的影响，以其探讨脑缺血再灌注损伤保护的分子基因机制。缺血前３０分钟静注尼莫地平、安定、硫喷妥钠和吸入异氟醚、安氟醚，全脑缺血再灌注各３０分钟静注尼莫地平提取大脑总ＲＮＡ，与ｃ－ｆｏｓＣＤＮＡ探针分子杂交，经过自显影，检测该时点ｃ－ｆｏｓ     

地氟醚预处理对缺血再灌注心肌的保护作用

目的 从细胞生化、心脏收缩性能和心肌细胞超微结构等方面来探讨地氟醚对心肌缺血再灌注损伤的影响。方法 采用改良Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ离休大鼠心脏模型,将３０只大鼠随机分成３组：对照组（Ｃ）、缺血再灌注组（Ｉ－Ｒ组）和地氟醚组（Ｄ组）,每组各１０只,常温全心停灌３０分钟,再灌注３０分钟。结果 停灌前给１ＭＡＣ的地氟醚可以明显降低心肌丙二醛（ＭＤＡ）含量,促进心脏收缩功能的恢复和减轻心肌组织超微结构的损     

异丙酚在离体鼠心肌再灌注损伤中的保护作用

目的：研究异丙酚在心肌缺血再灌注损伤的作用。方法：采用Ｌａｎｇｅｎｄｒｆｆ离体鼠心脏模型，将３０只ＳＤ鼠随机分为５组，每组６只。对照组（Ｃ组）用Ｋ－Ｈ液恒温恒压持续往离体鼠心脏主动脉逆行流８０分钟；缺血再灌注组（ＩＲ组）用Ｋ－Ｈ液预灌注２０分钟，常温全心停灌３０分钟，再用Ｋ－Ｈ液恢复灌注３０分钟。５０μｍｏｌ／Ｌ异丙酚组（ＰＩ组）、２５μｍｏｌ／Ｌ异丙酚组（Ｐ２组）和脂肪乳剂组（ＩＮ组）从预灌第１     

硒对人心肌谷胱甘肽过氧化物酶基因表达影响的研究

目的：从基因表达水平研究临床心肌缺血／再灌注期间微量元素硒（Ｓｅ）对人心肌谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ）基因表达的影响，探讨硒拮抗自由基损伤的机制。方法：将心脏手术病人分为对照组和服硒组。得用生化、ＲＴ－ＰＣＲ、基因测疗等方法，分别对两组病人心肌缺血前和再灌注后３０分钟的心肌ＧＰＸ活性及心肌、血浆和血细胞Ｓｅ浓度、ＧＰＸ ｍＲＮＡ水平及其ｃＤＮＡ序列进行测定和组间比较。结果：口服７天Ｓｅ未引起服硒组     

c—fos原癌基因与心肌缺血再灌注

ｃ－ｆｏｓ原癌基因属瞬息基因，是病毒癌基因ｖ－ｆｏｓ的细胞同源物，其编码的产物位于核内并且有转录因子的特异结构，参与基因的表达调控，目前ｃ－ｆｏｓ基因与心肌缺血再灌注之间的关系越来越受到重视，局部或全心缺血再灌注可诱发心肌细胞ｃ－ｆｏｓ基轩的一过性表达，与蛋白合成抑制及Ｃａ＾２＋等有密切关系，且ｃ－ｆｏｓ基因还发挥第三信使的作用。     

心肌肌钙蛋白Ⅰ在评价心脏直视手术心肌缺血再灌注损伤的应用

目的探索心脏直视手术中心肌缺血再灌注损伤的快速准确的诊断方法。方法３５例患者按病种分为３组,组１：１０例风湿性心脏瓣膜病患者;组２：１５例先天性心脏病患者;对照组：１０例食管癌或肺癌患者。使用Ｂｅｃｋｍａｍ－ＣｏａｌｔｅｒＡｃｃｅｓｓ微粒子化学发光分析仪及配套试剂于转流前（组３为术前）、术毕、术后８～１２小时、２４小时、７２小时和７天对心肌肌钙蛋白Ⅰ（ｃａｒｄｉａｃｔｒｏｐｏｎｉｎⅠ,ｃＴｎＩ）、磷酸肌酸激酶同工酶（ｃｒｅａｔｉｎｅｋｉｎａｓｅＭＢｍａｓｓ,ＣＫ－ＭＢｍａｓｓ）以及肌红蛋白（ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ）３种指标进行检测,其结果结合临床资料和心电图分析比较。结果组１和组２患者都存在不同程度的心肌缺血再灌注损伤,３种检验的敏感性相同;ｃＴｎＩ较ＣＫ－ＭＢｍａｓｓ和肌红蛋白更特异反映心肌损伤;组１主动脉阻断时间长、ｃＴｎＩ浓度升高明显、持续时间也越长,反映了心肌缺血损害较重,与组２比较差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论ｃＴｎＩ在心脏直视手术心肌缺血再灌注损伤的诊断中具有高度的敏感性和特异性,ｃＴｎＩ浓度反映了心肌损害的程度,并对预后有直接影响。ＣＫ－ＭＢｍａｓｓ和肌红蛋白敏感性与ｃＴｎＩ相同,但特异性较差     

一氧化氮在大鼠肝脏缺血预处理中的作用

为探讨ＮＯ是否参与缺血预处理对肝脏的保护作用，本实验将动物分成四组：①正常对照组，不作肝门阻断；②再灌对照组：肝脏进行６０分钟的肝门阻断及３０分钟的再灌注；③预处理组：６０分钟的肝门阻断前先进行５分钟的肝脏缺血及５分钟的再灌注；④预处理加Ｌ－ＮＮＡ（Ｐ＋Ｌ）组：在预处理前先经门静脉注射Ｌ－ＮＮＡ。各组均在３０分钟再灌注完成时取肝组织标本及血标本检查ＡＴＰ、肝功能、脂质过氧化产物。结果显示：经过６０分钟的缺血及３０分钟的再灌注后，再灌对照组肝功能明显受损、ＡＴＰ浓度下降、脂质过氧化产物增加。预处理则能明显改善肝功能、增加ＡＴＰ储备和减少脂质过氧化。Ｐ＋Ｌ组则与再灌对照组无显著差异。结果表明：ＮＯ合成抑制剂Ｌ－ＮＮＡ能阻断缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用，说明ＮＯ参与大鼠肝脏缺血预处理     

细胞凋亡与心肌缺血再灌注损伤

细胞凋亡是细胞主动死亡方式,其过程受自身基因如：ｍｙｃ,Ｐ５３,Ｆａｓ,ｂｃｌ－２等调控。业已证明,细胞凋亡是心肌缺血／再灌注损伤的特征之一,抑制细胞凋亡可预防缺血／再灌注损伤。本从细胞凋亡的特征、基因调控、检测方法以及心肌缺血／再灌注损伤过程中心肌凋亡证据等方面进行综述,并从细胞及分子水平探讨心肌缺血／再灌注缶伤的发病机制,为心肌保护提供理论依据。     

钾通道开放剂对离体兔心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

目的　观察三磷酸腺苷敏感性钾通道开放剂（ＫＣＯｓ）Ｐｉｎａｃｉｄｉｌ（１０μｍｏｌ／Ｌ）对兔心肌缺血／再灌注损伤的保护作用。方法　采用离体兔心Ｌａｎｇｅｎａｏｒｆｆ灌注实验模型,离体兔心１６只随机等分成对照组和Ｐｉｎｎａｃｉｄｉｌ组。离体兔心肌缺血４０分钟后再灌注２０分钟,Ｐｉｎａｃｉｄｉｌ组于心脏停跳前增加Ｐｉｎａｃｉｄｉｌ（１０μｍｏｌ／Ｌ）灌注１５分钟,对比观察再灌注后５、１０、１５、２０分钟心功能的恢复率以及再灌注２０分钟心肌形态学结构、腺苷酸含量、脂质过氧化物丙二醛的变化。结果　再灌注后Ｐａｉｎａｃｉｄｉｌ组心率的恢复率、心肌收缩力的恢复率明显高于对照组,心肌ＭＤＡ的含量明显低于对照组（Ｐ＜０．０５或０．０１）,ＡＴＰ、ＴＡＮ、ＥＣ含量明显高于对照组,形态学观察Ｐｉｎａｃｉｄｉｌ组结构损伤较轻。结论Ｐｉｎａｃｉｄｉｌ（１０μｍｏｌ／Ｌ）预处理明显增强离体兔心肌缺血／再灌注期心功能的保护效果,降低 ＡＴＰ的消耗,减少脂质过氧化物的形成。     

舒芬太尼延迟预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨舒芬太尼延迟预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的影响及其可能机制.方法 雄性新西兰白兔36只,8～18月龄,体重2.0～2.4 kg,随机分为5组,心肌缺血再灌注组(IR组,n=9):静脉注射生理盐水2 ml/kg;舒芬太尼5μg/kg延迟预处理组(S1组,n=6)和10 μg/kg延迟预处理组(S2组,n=9):分别静脉输注舒芬太尼5、10 μg/kg,速率10 ml/h:纳洛酮组(N组,n=6):静脉输注纳洛酮10 mg/kg,速率10 ml/h;纳洛酮+舒芬太尼组(NS组,n=6):先静脉输注纳洛酮10 mg/kg,再静脉输注舒芬太尼5 μg/kg,速率均为10 ml/h.于给药结束后24 h时采用阻断左冠状动脉前降支30 min,再灌注3 h的方法 制备兔心肌缺血再灌注模型.于给药前(基础状态)、缺血30 min、再灌注1、2、3 h时记录心率(HR)、平均动脉压(MAP),并计算心率血压乘积(RPP);于再灌注3 h时测定心肌缺血面积和梗死面积,同时IR组和S2组采用TUNEL法测定心肌细胞凋亡情况,计算凋亡指数,并采用免疫组织化学法测定心肌Bcl-2和Bax的表达水平.结果 与基础值比较,各组心肌缺血再灌注时MAP、RPP下降,S2组HR降低(P<0.05),组间比较异差异无统计学意义(P>0.05);与IR组比较,S1组、S2组和NS组梗死面积减小(P<0.05),N组梗死面积无统计学意义(P>0.05),S2组凋亡指数降低,心肌Bcl-2表达上调,Bax表达下调(P<0.05);与S1组比较,S2组梗死面积减小(P<0.05),N组和NS组梗死面积增大(P<0.05);与S2组比较,N组和NS组梗死面积增大(P<0.05).结论 舒芬太尼延迟预处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与激活阿片受体,抑制心肌细胞凋亡有关.     

七氟醚对心肌缺血-再灌注幼兔心肌细胞凋亡及Fas/FasL蛋白表达的影响

目的探讨七氟醚对幼兔缺血-再灌注心肌细胞凋亡及Fas、FasL蛋白表达的影响。方法取30只日本大耳白幼兔随机均分为三组,缺血-再灌注组(IR组):结扎30min,再灌注120min;七氟醚预处理组(S组):缺血前吸入2.5%七氟醚30min,洗脱15min后处理同IR组;假手术组(C组):只穿线不结扎。观察三组兔心肌细胞凋亡和Fas、FasL蛋白表达情况,电镜观察细胞超微结构。结果心肌细胞凋亡率S组(13.71±6.01)%明显低于IR组(31.33±7.04)%(P<0.05),而C组(3.3±0.5)%明显低于IR组和S组(P<0.05)。S、C组Fas、FasL蛋白表达的平均灰度高于IR组(P<0.05)。电镜显示S组细胞损伤程度小于IR组。结论七氟醚能明显降低幼兔缺血-再灌注心肌细胞的凋亡。     

七氟醚预处理对大鼠心肌缺血再灌注时Toll 样受体4表达的影响

目的 探讨七氟醚预处理对大鼠心肌缺血再灌注时Toll样受体4(TLR4)表达的影响.方法 清洁级健康雄性SD大鼠30只,体重250～300 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=10):假手术组(S组)开胸暴露30 min,左冠状动脉前降支仅穿线不结扎;心肌缺血再灌注组(IR组)采用结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注2 h的方法 制备大鼠心肌缺血再灌注模型;七氟醚预处理组(SP组)吸入2.5%七氟醚30 min,洗脱15 min后制备模型.于再灌注2 h时处死大鼠取心脏,观察心肌组织病理学结果,采用Western blot法检测TLR4、NF-κB和TNF-α的蛋白表达水平.结果 与S组比较,IR组和SP组TLR4、NF-κB和TNF-α的蛋白表达上调(P＜0.05);与IR组比较,SP组TLR4、NF-κB和TNF-α的蛋白表达下调(P＜0.05).病理学结果 显示:SP组心肌细胞损伤较IR组减轻.结论 七氟醚预处理可通过抑制TLR4表达上调降低炎性反应,从而减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.

Abstract：

Objective To investigate the effect of sevoflurane preconditioning on the expression of Toll-like receptor 4(TLR4) during myocardial ischemia reperfusion(IR) in rats.Methods Thirty male SD rats weighing 250-300 g were randomly divided into 3 groups (n=10 each):sham operation group (S group) , IR group and sevoflurane preconditioning group(SP group).Myocardial ischemia was produced by temporary ligation of anterior descending branch of left coronary artery for 30 min followed by 2 h reperfusion. In SP group, the animals inhaled 2.5% sevoflurane for 30 min followed by 15 min washout before ischemia. The rats were sacrificed at 2 h of reperfusion, hearts removed and myocardial tissues obtained for microscopic examination.The expression of TLR4, NF-κB and TNF-α was detected using Western blot. Results The expression of TLR4, NF-κB and TNF-α was significantly up-regulated in IR and SP groups compared with group S (P＜0.05).The expression of TLR4, NF-κB and TNF-α was significantly down-regulated in group SP compared with group IR (P＜0.05).The myocardial injury was attenuated in group SP.Conclusion Sevoflurane preconditioning can attenuate myocardial IR injury by inhibiting the up-regulation of TLR4 expression and reducing the inflammatory response.     

PI3K/Akt 信号通路在舒芬太尼后处理减轻在体大鼠心肌缺血-再灌注损伤中的作用

目的探讨PI3K/Akt信号通路在舒芬太尼后处理减轻在体大鼠心肌缺血-再灌注损伤时细胞凋亡中的作用。方法取90只健康成年雄性SD大鼠,采用随机数字表法分为五组:假手术组(Sham组),只穿线不结扎;缺血-再灌注组(IR组),结扎左冠状动脉前降支造成心肌缺血30min,再灌注120 min;舒芬太尼后处理组(Sufen组),在灌注即刻,给予舒芬太尼1.0μg/kg输注3min,再灌注处理同IR组;舒芬太尼后处理~+LY294002(PI3K抑制剂)组(SL组),再灌注前10min给予LY294002 0.3mg/kg,并行舒芬太尼后处理;LY294002组(IL组),再灌注前10 min给予LY294002 0.3mg/kg,再灌注120min。在缺血前即刻(T_0)、缺血30min(T_1)、再灌注60min(T_2)和再灌注120min(T_3)时记录HR和MAP;再灌注末,测定心肌梗死面积(IS/AAR);再灌注15 min时,采用Western blot法测定心肌组织总的Akt和磷酸化的Akt蛋白含量;在再灌注末,用RT_-PCR检测Bax和Bcl-2mRNA的表达。结果五组大鼠组间组内HR差异无统计学意义;T_2、T_3时IR组、SL组和IL组MAP明显低于Sham组(P0.05);Sufen组IS/AAR明显低于IR、SL和IL组(P0.05);五组心肌总的Akt蛋白含量表达差异无统计学意义;与Sufen组比较,sham、IR、SL和IL组磷酸化的Akt表达明显下调(P0.05),IR组、SL和IL组Bax mRNA的表达明显升高,Bcl-2mRAN的表达明显降低(P0.05)。结论舒芬太尼后处理可减轻心肌缺血-再灌注损伤,可能与激活PI3K/Akt信号通路,降低Bax和增加Bcl-2蛋白表达而达到抑制心肌细胞的凋亡有关。     

缺血预处理对大鼠肺组织中缺血再灌注损伤相关基因表达的影响

目的 探讨缺血预处理(IPC)后大鼠肺组织中缺血再灌注损伤(IRI)相关基因的表达,为研究IPC减轻IRI的分子机制提供依据.方法 将雄性Wistar大鼠随机分为三组,缺血预处理组(IPC组,n:20)阻断左肺门5 min,开放10 min,如此重复3次,然后阻断左肺门,1 h后恢复血流灌注;缺血再灌注组(IR组,n=20)直接阻断左肺门,1 h后开放血流;假手术组(n=5)仅松解肺下部韧带,不做其它处理.IPC组和IR组分别于再灌注后1、3、6及24 h各取大鼠5只,切取左肺组织,采用含有22 226个大鼠基因点的Illumina RatRef-12全基因组表达谱微珠芯片检测肺组织中基因表达情况,比较IPC组与IR组各再灌注时间点基因表达的差异.结果 与IR组再灌注1 h相比,IPC组再灌注1 h时有1849个基因表达发生改变,其中上调的有918个,下调的有931个.与IR组再灌注3 h相比,IPC组再灌注3 h时有2568个基因表达发生改变,其中上调的有1377个,下调的有1191个.与IR组再灌注6 h相比,IPC组再灌注6 h时有1370个基因表达发生改变,其中上调的有563个,下调的有807个.与IR组再灌注24 h相比,IPC组再灌注24 h时仅有77个基因表达发生改变,全部为下调.结论 IPC对缺血再灌注损伤肺组织中基因表达的影响主要在再灌注后6 h内,以3 h最为明显;IPC可能通过影响凋亡相关基因、氧化应激相关基因、炎症反应及循环相关基因、能量代谢相关基因的表达来减轻IRI.     

Nuclear factor kappaB and anesthetic preconditioning during myocardial ischemia-reperfusion

BACKGROUND: Volatile anesthetic preconditioning (APC) protects against myocardial ischemia-reperfusion (IR) injury, but the precise mechanisms underlying this phenomenon remain undefined. To investigate the molecular mechanism of APC in myocardial protection, the activation of nuclear factor (NF) kappaB and its regulated inflammatory mediators expression were examined in the current study. METHODS: Hearts from male rats were isolated, Langendorff perfused, and randomly assigned to one of three groups: (1) the control group: hearts were continuously perfused for 130 min; (2) the IR group: 30 min of equilibration, 15 min of baseline, 25 min of ischemia, 60 min of reperfusion; and (3) the APC + IR group: 30 min of equilibration, 10 min of sevoflurane exposure and a 5-min washout, 25 min of global ischemia, 60 min of reperfusion. Tissue samples were acquired at the end of reperfusion. NF-kappaB activity was determined by electrophoretic mobility shift assay. The NF-kappaB inhibitor, IkappaB-alpha, was determined by Western blot analysis. Myocardial inflammatory mediators, including tumor necrosis factor alpha, interleukin 1, intercellular adhesion molecule 1, and inducible nitric oxide synthase, were also assessed by Western blot analysis. RESULTS: Nuclear factor kappaB-DNA binding activity was significantly increased at the end of reperfusion in rat myocardium, and cytosolic IkappaB-alpha was decreased. Supershift assay revealed the involvement of NF-kappaB p65 and p50 subunits. APC with sevoflurane attenuated NF-kappaB activation and reduced the expression of tumor necrosis factor alpha, interleukin 1, intercellular adhesion molecule 1, and inducible nitric oxide synthase. APC also reduced infarct size and creatine kinase release and improved myocardial left ventricular developed pressure during IR. CONCLUSIONS: The results of this study indicate that attenuation of NF-kappaB activation and subsequent down-regulation of NF-kappaB-dependent inflammatory gene expression plays an important role in the protective mechanism of APC against acute myocardial IR injury.     

心肌缺血-再灌注中核因子-kB活性变化及其对中性粒细胞黏附的影响

目的　研究心肌缺血 -再灌注时中性粒细胞 (PMN)内核因子 - k B(NF- k B)活性变化与 PMN细胞间黏附分子 (ICAM- 1)表达及其 PMN黏附的关系。　方法　新西兰白兔 2 4只 ,随机分为 3组 ,每组 8只。组 1:结扎兔左冠状动脉前降支造成心肌缺血 45分钟后再开放 ;组 2 :心肌缺血同组 1,用吡咯基二硫氨基甲酸酯 (PDTC)于心肌缺血前10分钟静脉注射 (15 mg/ kg) ;对照组 :不作动脉结扎。 3组分别于缺血前、再灌注 30分钟、6 0分钟、90分钟、12 0分钟、2 40分钟和 36 0分钟时用流式细胞仪检测 PMN ICAM- 1的表达 ,凝胶电泳迁移率分析检测 NF- k B的活性 ,测定PMN与脐静脉内皮细胞黏附率 (PMN- EC- 34 0 )。　结果　组 1中 PMN ICAM- 1的表达在心肌再灌注 12 0分钟时开始升高 ,并与 PMN- EC- 34 0黏附率变化有显著的相关性 ;NF- k B活性于心肌再灌注 30分钟后开始增高 ,12 0分钟达高峰 ,之后活性逐渐下降。组 2中 PMN ICAM- 1、NF- k B活化程度和 PMN- EC- 34 0黏附率升高幅度均低于组 1(P=0 .0 41,0 .0 2 9,0 .0 34 )。　结论　心肌缺血 -再灌注时刺激 NF- k B的活化 ,启动 PMN ICAM- 1的表达而参与缺血 -再灌注损伤的发生过程     

细胞周期调控基因Chk1在脑缺血再灌注损伤中的作用

目的 研究缺血再灌液时大脑细胞Chk1基因表达及其调控机制。方法 从正常及不同缺血再灌注时点大鼠的大脑提取RNA,采用半定量RT－PCR法,图象经分析测出正常及各缺血再灌注时点大脑Chk1基因mRNA的相对水平。结果 在正常成年大鼠大脑皮质中,有一定量的Chk1基因的表达,约为GAPDH表达量的一半左右;脑缺血再灌注损伤对Chk1mＲＮＡ的表达有影响。在缺血６０min再灌注６h,Chk1 mRNA表达明显下降,与对照组及其它组比较有显著差异。结论 提示Ｃhk1基因可能参与成年大鼠脑缺血再灌注损伤后细胞存活和细胞凋亡的调控。     

不同时点应用维拉帕米对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察不同时点应用维拉帕米(VP)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨其心肌保护的作用机制.方法 建立大鼠心肌缺血再灌注模型,将18只雄性SD大鼠随机分为3组,每组6只.Verapamil-1组于结扎前10 min开始泵入维拉帕米稀释液(0.25 mg/kg),Verapamil-2组于再灌前10 min开始泵入维拉帕米稀释液(0.25 mg/kg),IR组于结扎前10 min开始泵人生理盐水(2ml/kg).再灌注后60min处死大鼠.检测血清肌钙蛋白T(cTnT)含量、缺血区心肌组织Caspase-3表达水平;组织形态学分析心肌损伤程度.结果　Verapamil-1组血清cTnT含量、心肌组织Caspase-3表达量(4.60±1.12)ng/L,(39.51±5.01)%较IR组(7.70±1.31)ng/L,(51.10±5.30)%和Verapamil-2组(7.23±1.03)ng/L,(49.35±4.95)%明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);Verapamil-2组血清cTnT含量、心肌组织Caspase-3表达水平和IR组比较差异无统计学意义(P＞0.05);Verapamil-1组心肌组织形态学损伤程度较IR组和Verapamil-2明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);Verapamil-2组心肌组织形态学损伤程度和IR组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论　结扎前10 min开始给予维拉帕米对心肌缺血再灌注损伤有明显保护作用,再灌注前10 min开始给予维拉帕米对心肌缺血再灌注损伤无保护作用.

Abstract：

Objective To investigate the effect of verapamil administered at different time points on myocardial ischemia-reperfusion injury in rats, and explore the mechanism of myocardial protection.Methods The model of myocardial ischemia reperfusion in rats was established and 18 male SD rats were randomly divided into 3 groups,n =6 each. Verapamil dilution (0. 25 mg/kg) was pumped into verapamil1 group 10 min before ischemia, and verapamil dilution (0. 25 mg/kg) was pumped into verapamil-2 group 10 min before reperfusion. Normal saline (2 ml/kg) was pumped into IR group 10 min before ischemia.Rats were killed 60 min after reperfusion. The levels of serum cardiac Troponin T (cTnT) and the expression of myocardial Caspase-3 were evaluated. Histomorphological methods were used to analyze the extent of myocardial injury. Results The levels of serum cTnT and the expression of myocardial Caspase-3 in verapamil-1 group (4.60 ± 1.12) ng/L, (39.51 ±5.01)% were significantly lower than those in IR group (7. 70 ± 1.31 ) ng/L, (51.10 ±5. 30)% and verapamil-2 group (7. 23 ± 1.03) ng/L, (49. 35 ±4. 95 ) % ( P ＜ 0. 05 ). The levels of serum cTnT and the expression of myocardial Caspase-3 had no significant difference between verapamil-2 group and IR group (P ＞ 0. 05 ). The extent of myocardial injury in verapamil-1 group was significantly lower than that in IR group and verapamil-2 group (P ＜ 0. 05 ). The extent of myocardial injury had no significant difference between verapamil-2 group and IR group (P ＞0. 05). Conclusion Starting from 10 min before ischemia, verapamil has protective effects on myocardial ischemia/reperfusion injury. Starting from 10 min before reperfusion, verapamil does not provide protection on myocardial ischemia reperfusion injury.     

腺苷A_1受体激动剂后处理对兔心肌缺血-再灌注损伤的影响

目的 探讨腺苷A1受体激动剂(2-氯环戊腺苷,CCPA)后处理对兔心肌缺血-再灌注损伤的保护作用.方法 32只兔随机均分为四组:假手术组(S组,开胸后仅行左冠状动脉套线而不阻断160min)、缺血-再灌注组(IR组,行左冠状动脉前降支阻断40 min,再灌注120 min)、缺血后处理组(lPC组,结扎左冠状动脉前降支40 min,再通30 s,结扎30 s,重复3次,再灌注120 min)和CCPA后处理组(APC组,结扎左冠状动脉前降支40 min,开放左冠状动脉1 min内予以静推CCPA100 μg/kg,冉灌注120 min).分别于左冠状动脉前降支阻断前20 min(T1)、左冠状动脉前降支阻断20 min(T2)、左冠状动脉前降支阻断40 min(T3)、心肌再灌注1 h(T4)和心肌再灌注2 h(T5)抽取颈内动脉血测定血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)含量.再灌注末抽血离心测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),测定心肌梗死面积.结果 和IR组相比,IPC组和APC组再灌注各个时间点cTnI均降低(P<0.05);IPC组和APC组梗死面积均小于IR组(P<0.05);IPC组和APC组血清中sOD的活性高于IR组,MDA的含量低于IR组(P<0.05).结论 腺苷A1受体激动剂后处理具有类似缺血后处理的心肌保护作用.其机制可能是通过减少氧自山基的生成,增强心肌抗氧化能力.