参附注射液对再灌注期间肠黏膜上皮细胞凋亡的抑制

背景肠上皮细胞异常凋亡是缺血再灌注期间肠黏膜损伤的主要原因,参附注射液对小肠黏膜损伤有良好的防治作用.目的建立大鼠肠缺血再灌注模型,观察缺血再灌注时给予参附注射液对肠上皮细胞凋亡数目、凋亡相关基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、Bcl-2的表达及肿瘤坏死因子水平的影响.设计随机对照实验.单位武汉大学人民医院麻醉科.材料实验于2002-12/2003-06在武汉大学人民医院麻醉科实验室完成.选取健康清洁级SD大鼠24只,随机分为空白对照组、肠缺血再灌注组、参附注射液组,8只/组.方法各组大鼠给予氨基甲酸乙酯1 mg/kg腹腔注射麻醉,肠缺血再灌注组和参附注射液组用血管钳夹闭肠系膜上动脉1 h然后再灌注2 h,空白对照组不用血管钳夹闭肠系膜上动脉.参附注射液组于阻断前30 min静注参附注射液0.02 mL/g,空白对照组和肠缺血再灌注组静脉输注等量生理盐水.制备切片进行半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、Bcl-2蛋白的表达及细胞凋亡检测.主要观察指标①各组大鼠细胞凋亡指数的比较.②各组大鼠肠上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3及Bcl-2基因的表达.③各组肠粘膜匀浆中肿瘤坏死因子含量的比较.结果实验选用24只大鼠,全部进入结果分析.①各组大鼠细胞凋亡指数的比较参附注射液组的凋亡指数明显低于肠缺血再灌注组,但比空白对照组高[(7.75±1.89)%,(28.25±8.50)%,(4.25±2.63)%,P均＜0.01].②各组大鼠肠上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3及Bcl-2基因的表达参附注射液组组半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表达低于肠缺血再灌注组,但高于空白对照组[(0.211 6±0.087 5),(0.354 7±0.077 8),(0.194 1±0.057 4),P＜0.01,P＞0.05];Bcl-2的表达在肠缺血再灌注组比空白对照组显著增高(P＜0.05),参附注射液组的表达比肠缺血再灌注组明显降低(P＜0.01).③各组肠黏膜匀浆中肿瘤坏死因子含量的比较砀缺血再灌注组肿瘤坏死因子的表达显著高于空白对照组和参附注射液组[(189.7±56.3),(38.6±10.4),(47.5±18.7)mg/L,P均＜0.01],参附注射液组和空白对照组基本相似(P＞0.05).结论参附注射液通过抑制肿瘤坏死因子的含量、降低半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表达、上调Bcl-2基因而抑制缺血再灌注期间肠黏膜上皮细胞的凋亡,从而减轻肠黏膜缺血再灌注损伤.     

不同剂量参附注射液对兔心肌缺血再灌注损伤时胃肠微循环的保护作用

目的：心肌缺血再灌注损伤常致脏器功能障碍，观察此时参附注射液对胃肠微循环的影响，探讨参附注射液的保护作用机制。方法：实验于2003-04／07在青岛大学医学院附属医院麻醉研究室进行，40只健康大耳白色家兔随机分为4组，即缺血再灌注对照组(Ⅰ组)；参附注射液5mL／(kg&;#183;h)组(Ⅱ组)；参附注射液10mL／(kg&;#183;h)组(Ⅲ组)；参附注射液20mL／(kg&;#183;h)组(Ⅳ组)。实验前30min对照组给予乳酸钠林格氏液，各给药组静脉泵人相应剂量的参附注射液。于基础状态，心肌缺血60min。再灌注后60，90，180min 5点测定平均动脉压、心率、胃黏膜内二氧化碳分压值及血气分析，计算胃黏膜pH值。并作对比。结果：心肌缺血60min，对照组平均动脉压、心率、胃黏膜pH值分别为(70．50&;#177;4．50)kPa，(165&;#177;14)次／min，7．032&;#177;0．024，均较基础状态明显下降(P&;lt;0．05)。再灌注后60，90，180min后，对照组平均动脉压、心率、胃黏膜pH值亦分别较前明显下降(P&;lt;0．05)，而参附注射液各剂量组则较前无明显变化(P&;gt;0．05)，且各剂量组之间差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：参附注射液预先输注对兔心肌缺血再灌注损伤时胃肠微循环具有保护作用，但无明显的量效关系。     

不同剂量参附注射液对兔心肌缺血再灌注损伤时胃肠微循环的保护作用

目的:心肌缺血再灌注损伤常致脏器功能障碍,观察此时参附注射液对胃肠微循环的影响,探讨参附注射液的保护作用机制。方法:实验于2003-04/07在青岛大学医学院附属医院麻醉研究室进行,40只健康大耳白色家兔随机分为4组,即缺血再灌注对照组(Ⅰ组);参附注射液5mL/(kg·h)组(Ⅱ组);参附注射液10mL/(kg·h)组(Ⅲ组);参附注射液20mL/(kg·h)组(Ⅳ组)。实验前30min对照组给予乳酸钠林格氏液,各给药组静脉泵入相应剂量的参附注射液。于基础状态,心肌缺血60min,再灌注后60,90,180min5点测定平均动脉压、心率、胃黏膜内二氧化碳分压值及血气分析,计算胃黏膜pH值,并作对比。结果:心肌缺血60min,对照组平均动脉压、心率、胃黏膜pH值分别为(70.50±4.50)kPa,(165±14)次/min,7.032±0.024,均较基础状态明显下降(P<0.05)。再灌注后60,90,180min后,对照组平均动脉压、心率、胃黏膜pH值亦分别较前明显下降(P<0.05),而参附注射液各剂量组则较前无明显变化(P>0.05),且各剂量组之间差异无显著性意义(P>0.05)。结论:参附注射液预先输注对兔心肌缺血再灌注损伤时胃肠微循环具有保护作用,但无明显的量效关系。     

创伤修复期间参附注射液对肠黏膜的保护作用

背景创伤修复期间胃肠道存在再灌注损伤和灌注不全,引起肠黏膜损伤.目的观察人用等效剂量参附注射液对创伤修复期间家兔肠pH、肠黏膜一氧化氮、丙二醛、Ca2+含量、血清双胺氧化酶的影响.设计以实验动物为观察对象的随机对照实验.单位武汉大学人民医院麻醉科.材料实验于2003-08/10在武汉大学人民医院麻醉学研究室完成,选择健康家兔24只随机分为3组参附注射液治疗组、单纯创伤修复组和对照组,每组8只.干预措施通过股动脉放血[2 mL/(kg·min)],平均动脉压降至40mmHg并持续60 min,回输自体血及等量平衡盐液制备兔创伤修复模型;参附注射液组于回输自体血同时先静注参附注射液2.1 mL/kg,随后持续注入参附注射液5 mL/(kg·h).主要观察指标分别于实验前,创伤修复1 h,及再灌注1,3 h检测乙状结肠黏膜内pH、肠黏膜一氧化氮、丙二醛及钙含量、血清双胺氧化酶活性.结果24只家兔均进入结果分析.①参附注射液治疗组再灌注1,3 h肠黏膜pH为7.171±0.102,7.194±0.106,高于单纯创伤修复组(6.920±0.155,6.971±0.165,P＜0.05,P＜0.01)及对照组(7.329±0.038,7.322±0.101,P＜0.05).②参附注射液治疗组再灌注1,3 h血清双胺氧化酶为(35.090±1.184),(32.440±2.884)μkat/L,显著高于单纯创伤修复组[(50.994±2.684),(52.377±1.217)μkat/L,P＜0.01]及对照组[(15.970±1.734),(16.620±0.767)μkat/L,P＜0.05].③再灌注3 h肠黏膜一氧化氮、丙二醛含量参附注射液治疗组均显著低于单纯创伤修复组[(61.8±5.3,72.2±5.8)μmol/g,(68.2±4.9,96.9±8.5)μmol/L,P＜0.05].再灌注3 h肠黏膜Ca2+含量参附注射液治疗组为(2.43±0.27)μnol/L,低于单纯创伤修复组[(2.93±0.34)μmol/L,P＜0.05],高于对照组[(2.26±0.31)μnol/L,(P＜0.05)].结论给予家兔人用等效剂量的参附注射液,增加了肠黏膜灌注及氧合作用,抑制了肠黏膜一氧化氮活性和清除氧自由基及减轻钙超载,对创伤修复期间肠黏膜具有良好的保护作用.     

山莨菪碱对肠缺血再灌注大鼠肠黏膜血流量的影响

目的：探讨山莨菪碱能否改善肠缺血－再灌注损伤时的肠黏膜血流。方法：SD大鼠分为3组,先制作空肠袋,然后将激光多普勒探头和肠黏膜张力计旋转在空肠袋两端,用动脉夹阻断肠系膜上动脉血流60分钟后,再恢复灌流90分钟。于恢复灌流即刻分别向空肠袋内注射山莨菪碱、多巴酚丁胺和生理盐水,测定肠黏膜血流量和局部二氧化碳分压(PrCO2)。结果：恢复灌流过程中,与生理盐水组比较,山莨菪碱和多巴酚丁胺组肠黏膜血流量显著增加,肠黏膜PrCO2降低。山莨菪碱组与多巴酚丁胺组比较,再灌注30和60分钟时肠黏膜血流量和PrCO2无显著差别;但再灌注90分钟,山莨菪碱组肠黏膜血流量显著高于多巴酚丁胺组,PrCO2低于多巴酚丁胺组.结论：肠缺血后恢复灌流时,肠内给予山莨菪碱能增加肠黏膜血流量,降低肠黏膜PrCO2,作用较多巴酚丁胺持久。     

创伤修复期间参附注射液对肠黏膜的保护作用

背景：创伤修复期间胃肠道存在再灌注损伤和灌注不全，引起肠黏膜损伤。目的：观察人用等效剂量参附注射液对创伤修复期间家兔肠pH、肠黏膜一氧化氮、丙二醛、Ca^2＋含量、血清双胺氧化酶的影响。设计：以实验动物为观察对象的随机对照实验。单位：武汉大学人民医院麻醉科。材料：实验于2003-08／10在武汉大学人民医院麻醉学研究室完成，选择健康家兔24只随机分为3组：参附注射液治疗组、单纯创伤修复组和对照组，每组8只。干预措施：通过股动脉放血[2mL／（kg&;#183;min）]，平均动脉压降至40mmHg并持续60min，回输自体血及等量平衡盐液制备免创伤修复模型；参附注射液组于回输自体血同时先静注参附注射液2．1mL／kg，随后持续注人参附注射液5mL／（kg&;#183;h）。主要观察指标：分别于实验前，创伤修复1h，及再灌注1，3h检测乙状结肠黏膜内pH、肠黏膜一氧化氮、丙二醛及钙含量、血清双胺氧化酶活性。结果：24只家兔均进人结果分析。①参附注射液治疗组再灌注1，3h肠黏膜pH为7．171&;#177;0．102，7．194&;#177;0．106，高于单纯创伤修复组（6．920&;#177;0.155，6．971&;#177;0．165，P〈0．05，P〈0．01）及对照组（7．329&;#177;0．038，7．322&;#177;0．101，P〈0．05）。②参附注射液治疗组再灌注1，3h血清双胺氧化酶为（35．090&;#177;1．184），（32．440&;#177;2．884）μkat/L，显著高于单纯创伤修复组[（50．994&;#177;2．684），（52．377&;#177;1．217）μkat／L，P〈0.01]及对照组[（15．970&;#177;1．734），（16．620&;#177;0．767）μkat／L，P〈0．05]。③再灌注3h肠黏膜一氧化氮、丙二醛含量参附注射液治疗组均显著低于单纯创伤修复组[（61．8&;#177;5．3，72．2&;#177;5．8）μmol／g，（68．2&;#177;4．9，96．9&;#177;8．5）μmol／L，P〈0．05]。再灌注3h肠黏膜Ca^2＋含量参附注射液治疗组为（2．43&;#177;0．27）μmol／L，低于单纯创伤修复组[（2．93&;#177;0．34）μmol／L，P〈0．05]，高于对照组[（2．26&;#177;0．31）μmol／L，（P〈0．05）]。结论：给予家兔人用等效剂量的参附注射液，增加了肠黏膜灌注及氧合作用，抑制了肠黏膜一氧化氮活性和清除氧自由基及减轻钙超载，对创伤修第期间肠黏膜具有良好的保护作用。     

参附注射液影响大鼠缺血再灌注心肌Bcl-2Bax与c-Fos蛋白的表达

背景：研究证实，参附注射液对各种休克．心力衰竭、心肌缺血以及室上性／室性心律失常均有改善治疗作用，对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有良好的保护作用。 目的：观察参附注射液对急性缺血再灌注损伤大鼠心肌凋亡相关基因Bcl-2，Bax和c-Fos蛋白表达的影响。 设计：完全随机分组设计，对照实验。 单位：重庆医科大学附属第二医院麻醉科。 材料：实验于2004—04／12在重庆医科大学附属第二医院麻醉教研室完成。选用健康成年Wistar大鼠35只，由解放军第三军医大学大坪医院实验动物中心提供。参附注射液是中医“回阳救逆”参附汤的中药配方，其主要成分是人参皂甙及乌头类生物碱（雅安三九药业有限公司出品，规格10mL／支，批号：030110）。 方法：采用在体心脏缺血再灌注模型，35只大鼠按随机数字表法分为5组，每组7只。①假手术组：只穿线不结扎，静脉注射生理盐水8mL／kg，观察120min：②参附注射液30min组：结扎前15min静脉注射参附注射液8mL／kg，结扎左冠状动脉前降支40min，再灌注30min。③参附注射液120min组：再灌注120min，余同参附注射液30min组。④生理盐水30min对照组：结扎左冠状动脉前降支前15min静脉注射生理盐水8mL／kg，结扎左冠状动脉前降支40min，再灌注30min。⑤生理盐水120min对照组：再灌注120min，余同生理盐水30rain组。应用免疫组化法检测各组大鼠心肌凋亡相关基因Bcl-2，Bax和c-Fos蛋白的表达量主要观察指标：各组大鼠心肌凋亡相关基因Bcl-2，Bax和c-Fos蛋白的表达量。 结果：35只大鼠全部进入结果分析，无脱失。①与假手术组比较，生理盐水30min组和120min组大鼠心肌Bcl-2，Bax和c-Fos蛋白表达水平显著升高（P＜0．01），Bcl-2／Bax比率显著降低（P＜0．01）。②与相应生理盐水组比较，参附注射液30min组和120minBcl-2蛋白表达水平显著升高（P＜0．01），Bax和c—Fos蛋白表达水平显著降低（P＜0．01），Bcl-2／Bax比率显著升高（P＜0．01）。 结论：参附注射液对缺血再灌注心肌保护效应可能与其促进Bcl-2蛋白高表达、抑制Bax与c-Fos蛋白表达、增加Bcl-2／Bax比率，从而抑制心肌细胞凋亡有关。     

肿瘤坏死因子在肝缺血/再灌注损伤中的作用及异丙酚的干预

目的 探讨肿瘤坏死因子(TNF)在肝缺血/再灌注损伤(HIRI)中的作用及异丙酚对其的影响。方法 选择HIRI实验兔及肝癌手术患者,观察血浆TNF含量、谷丙转氨酶(ALT)活性、肝形态学的变化及异丙酚对上述指标的影响。结果 HIRI期间,TNF和ALT明显升高(P均<0.01),两者呈显著正相关(实验兔r=0.912,P<0.01;患者r=0.535,P<0.01),肝形态学发生异常变化;使用异丙酚后,上述指标的异常变化显著减轻,其差异有显著性意义(P<0.05和P<0.01)。结论TNF是HIRI的重要发病因素,异丙酚可通过降低TNF减轻HIRI。     

丙酮酸对大鼠小肠缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨丙酮酸( Pyruvate)对大鼠小肠缺血再灌注损伤的保护作用及其机制. 方法 建立大鼠小肠缺血再灌注损伤的动物模型,实验组和对照组分别经肠腔给予含有丙酮酸钠和等能量的右旋糖酐- 70营养液,对不同缺血再灌注时间的肠组织进行病理学观察并利用酶联免疫法检测肠组织中的肿瘤坏死因子α (TNF-α )和白细胞介素 6( IL 6)水平. 结果 经丙酮酸处理后的小肠组织损伤情况缺血 45 min为( 2.17± 1.17)分,再灌注 30 min为( 2.17± 0.98)分,再灌注 60 min为( 2.33± 1.03)分,较对照组明显减轻, P< 0.01, t值分别为 55.00, 57.00, 57.00.小肠黏膜组织中 TNF-α和 IL 6水平减低, TNF-α缺血 45 min,再灌注 30, 60 min分别为( 0.36± 0.06),( 0.87± 0.06),( 0.70± 0.17)μ g/L,与对照组比较 P< 0.01、 F值分别为 313.58, 815.77, 105.84. IL 6缺血 45 min,再灌注 30,60 min分别为( 122.88± 3.75),( 213.37± 8.91),( 154.53± 7.32) ng/L,与对照组比较 P< 0.01、 F值分别为 1587.18,1232.96,2447.93. 结论 丙酮酸对大鼠小肠缺血再灌注损伤具有保护作用;该保护作用与丙酮酸减少小肠组织中的 TNF-α和 IL-6水平有关.     

红景天对大鼠小肠缺血再灌注损伤的保护作用

目的：利用SD大鼠制备肠缺血再灌注模型，观察红景天对肠缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。 方法：实验于2005—08／2006—05在第四军医大学西京医院胃肠外科实验室完成。雄性SD大鼠30只，体质量200～250g，随机数字表法分为假手术组、缺血再灌注组、红景天处理组，每组10只。红景天液制法参照中药质量标准：取红景天生药102g，加水煎煮2次。第1次1．5h，第2次1h。滤过，滤液合并后加水调至120mL，每只大鼠2mL／d，相当于生药5g／（kg&;#183;d）。缺血再灌注模型制备：动物于术前12h禁食．不禁水。以2％盐酸氯胺酮（100mg／kg）腹腔注射麻醉。生理盐水2mL／d，连续灌胃5d后，取正中切口入腹后分离肠系膜上动脉，以无创伤血管夹阻断肠系膜上动脉根部造成小肠完全缺血60min。然后松夹进行再灌注60min。假手术组：生理盐水2mL／d，连续灌胃5d后，只分离肠系膜上动脉，但不作阻断。红景天处理组：红景天按5g/kg生药，溶于2mL水中灌胃给药，连续5d后，分离肠系膜上动脉。夹闭肠系膜上动脉60min后再灌注60min。检测各组大鼠小肠黏膜中肿瘤坏死因子α、白细胞介素-6水平，以及其中的超氧化物歧化酶和丙二醛的含量。 结果：30只大鼠均进入结果分析。①缺血再灌注组肿瘤坏死因子α、白细胞介素-6水平均高于假手术组和红景天处理组[肿瘤坏死因子α：（2．57&;#177;0．29），（0．32&;#177;0．06），（1．06&;#177;0．11）μg／L；白细胞介素-6：（965．73&;#177;42．01），（122．46&;#177;1．74），（385．03&;#177;13．50）ng／L。P〈0．01]。②缺血再灌注组丙二醮水平高于假手术组和红景天处理组[（0．68&;#177;0．11），（0．33&;#177;0．10），（0．54&;#177;0．12）nmol／g，P〈0．01]；超氧化物歧化酶水平低于假手术组和红景天处理组[（34．12&;#177;5．31），（92．63&;#177;3．82），（55．66&;#177;5．92）NU／g，P〈0．01]。 结论：红景天可通过抑制细胞因子表达及清除氧自由基的方式，对肠缺血再灌注损伤起到保护作用。     

Kinase suppressor of Ras-1 protects intestinal epithelium from cytokine-mediated apoptosis during inflammation

TNF plays a pathogenic role in inflammatory bowel diseases (IBDs), which are characterized by altered cytokine production and increased intestinal epithelial cell apoptosis. In vitro studies suggest that kinase suppressor of Ras-1 (KSR1) is an essential regulatory kinase for TNF-stimulated survival pathways in intestinal epithelial cell lines. Here we use a KSR1-deficient mouse model to study the role of KSR1 in regulating intestinal cell fate during cytokine-mediated inflammation. We show that KSR1 and its target signaling pathways are activated in inflamed colon mucosa. Loss of KSR1 increases susceptibility to chronic colitis and TNF-induced apoptosis in the intestinal epithelial cell. Furthermore, disruption of KSR1 expression enhances TNF-induced apoptosis in mouse colon epithelial cells and is associated with a failure to activate antiapoptotic signals including Raf-1/MEK/ERK, NF-kappaB, and Akt/protein kinase B. These effects are reversed by WT, but not kinase-inactive, KSR1. We conclude that KSR1 has an essential protective role in the intestinal epithelial cell during inflammation through activation of cell survival pathways.     

参附注射液对休克复苏时肠黏膜保护作用机制的实验研究

目的 探讨参附注射液（SF）对休克复苏期间肠黏膜损伤的保护作用机制。方法 通过兔失血性休克复苏模型,21只家兔随机分为参附注射液治疗组（A组）、单纯复苏组（B组）和假手术组（C组）;A组于复苏同时首剂静注参附注射液2．1ml/kg,随后静滴5ml/kg,直到观察结束。分别于实验前（S0）、休克1h（S1）及复苏1h(R1)、3h(R3）观察乙状结肠黏膜内pH（pHi)、肠粘膜NO、MDA及钙（Ca^ )含量。结果 A组R1和R3时肠pHi明显高于B组相应值（P＜0．05）,R3时肠黏膜NO、MDA及Ca^ 含量低于B组（均P＜0．05）;B组复苏期间场pHi维持在S1时的低水平状态,肠黏膜NO、MDA及Ca^ 含量均明显高于A组和C组（P＜0．05）。结论 SF对失血性休克复苏期间肠黏膜保护作用的机制可能为增加肠黏膜灌注及氧合、抑制NO的产生及抗炎效应、清除氧自由基及减轻钙超载。     

Tumor-specific apoptosis caused by deletion of the ERBB3 pseudo-kinase in mouse intestinal epithelium

Pharmacologic blockade of EGFR or the closely related receptor ERBB2 has modest efficacy against colorectal cancers in the clinic. Although the upregulation of ERBB3, a pseudo-kinase member of the EGFR/ERBB family, is known to contribute to EGFR inhibitor resistance in other cancers, its functions in normal and malignant intestinal epithelium have not been defined. We have shown here that the intestinal epithelium of mice with intestine-specific genetic ablation of Erbb3 exhibits no cytological abnormalities but does exhibit loss of expression of ERBB4 and sensitivity to intestinal damage. By contrast, intestine-specific Erbb3 ablation resulted in almost complete absence of intestinal tumors in the Apc^Min mouse model of colon cancer. Unlike nontransformed epithelium lacking ERBB3, intestinal tumors lacking ERBB3 had reduced PI3K/AKT signaling, which led to attenuation of tumorigenesis via a tumor-specific increase in caspase-3–mediated apoptosis. Consistent with the mouse data, which suggest that ERBB3-ERBB4 heterodimers contribute to colon cancer survival, experimentally induced loss of ERBB3 in a KRAS mutant human colon cancer cell line was associated with loss of ERBB4 expression, and siRNA knockdown of either ERBB3 or ERBB4 resulted in elevated levels of apoptosis. These results indicate that the ERBB3 pseudo-kinase has essential roles in supporting intestinal tumorigenesis and suggest that ERBB3 may be a promising target for the treatment of colorectal cancers.     

参附注射液对大鼠肠缺血再灌注损伤和修复时肠上皮细胞的保护作用

背景；细胞凋亡在肠缺血再灌注损伤和修复中起主要作用，参附注射液对肠缺血再灌注时肠上皮细胞凋亡的影响有待观察。目的；分析肠上皮细胞凋亡与肠缺血再灌注损伤和修复特征的关系一设计：随机对照动物实验。单位：湖北省咸宁市中心医院普外科及武汉大学人民医院普外科。材料：实验于2005-03／08在咸宁市中心医院中心实验室完成，选择54只健康雄性大鼠．体质量200～250g．购自武汉大学医学院动物实验中心。方法：随机摸球法将大鼠分为对照组6只．肠缺血再灌注组24只及参附处理组24只。①麻醉大鼠．分离其肠系膜上动脉．肠缺血再灌注组、参附处理组用无损伤血管夹阻断肠系膜上动脉血流1h，再灌注1，24，72h．参附处理组于阻断前30min经静脉输注参附注射液8mL／（k&;#183;h），20mL／（k&;#183;d），由人参和黑付子组成（雅安三九药液公司．批号：030302）：对照组不阻断肠系膜上动脉血流．对照组与肠缺血再灌注组于阻断前30min经静脉输注等量生理盐水．整个实验过程对大鼠进行面罩给氧。②肠缺血再灌注组和参附处理组分别于缺血后1h、再灌注1．24，72h取材．对照组于造模后取材．每组各6只。观察各组大鼠肠黏膜组织病理学改变（采用下列评分系统：0分，绒毛和腺体正常；1分部分绒毛顶端上皮轻度受损；2分．上皮下腺体轻度受损；3分．上皮下间隙扩大．毛细血管充血；4分，上皮与固有层中度分离．腺体受损；5分。部分绒毛顶端脱落；6分．绒毛明显脱落；7分．固有层绒毛脱落；8分．固有层开始消化分解；9分，出血、溃疡形成）和有丝分裂活性：③采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口未端标记实验结合激光共聚焦显微镜观察小肠黏膜上皮细胞凋亡情况，测定细胞凋亡指数，即每张切片随机取10个高位视野，每100个细胞中凋亡阳性细胞数。④在苏木精一伊红染色的肠黏膜上皮细胞间观察有丝分裂相．10个相邻肠黏膜上皮细胞间具有有丝分裂相的细胞数作为有丝分裂活性指数。主要观察指标：各组大鼠组肠黏膜组织病理学改变．细胞凋亡指数和有丝分裂活性的测定。结果：纳入大鼠54只全部进入结果分析。①参附处理组大鼠肠缺血1h、再灌注1，24h黏膜组织病理学改变评分分别为[（0．65&;#177;0．35），（3．87&;#177;0．86），（0．65&;#177;0.35）分．低于肠缺血一再灌注组[（7．11&;#177;1．01）．（8．05&;#177;1．34），（1．53&;#177;0．48）分．P〈0．05]。②参附处理组大鼠肠缺血1h、再灌注1，24，72h黏膜上皮细胞凋亡指数分别为（17．24&;#177;7．05），（24．20&;#177;9.87），（11．49&;#177;4．71），（6．02&;#177;2．16）个，低于肠缺血-再灌注组[（51．09&;#177;13．76），（54．89&;#177;15．58），（23．54&;#177;9．64），（12．47&;#177;5．52）个，P〈0．05]，缺血1h、再灌注1h有丝分裂活性分别为（10．37&;#177;2．03），（11．72&;#177;2．07）个．高于肠缺血一再灌注组[（8.24&;#177;1．69）．（9．95&;#177;1．93）个，P〈0．05]。结论：参附注射液能够降低肠黏膜上皮细胞凋亡，并增强肠黏膜上皮细胞有丝分裂活性．从而促进肠黏膜损伤的修复。     

参附注射液对大鼠肠缺血再灌注损伤和修复时肠上皮细胞的保护作用

背景:细胞凋亡在肠缺血再灌注损伤和修复中起主要作用,参附注射液对肠缺血再灌注时肠上皮细胞凋亡的影响有待观察。目的:分析肠上皮细胞凋亡与肠缺血再灌注损伤和修复特征的关系。设计:随机对照动物实验。单位:湖北省咸宁市中心医院普外科及武汉大学人民医院普外科。材料:实验于2005-03/08在咸宁市中心医院中心实验室完成,选择54只健康雄性大鼠,体质量200～250g,购自武汉大学医学院动物实验中心。方法:随机摸球法将大鼠分为对照组6只,肠缺血再灌注组24只及参附处理组24只。①麻醉大鼠,分离其肠系膜上动脉,肠缺血再灌注组、参附处理组用无损伤血管夹阻断肠系膜上动脉血流1h,再灌注1,24,72h,参附处理组于阻断前30min经静脉输注参附注射液8mL/(kg·h),20mL/(kg·d),由人参和黑付子组成(雅安三九药液公司,批号:030302)。对照组不阻断肠系膜上动脉血流,对照组与肠缺血再灌注组于阻断前30min经静脉输注等量生理盐水,整个实验过程对大鼠进行面罩给氧。②肠缺血再灌注组和参附处理组分别于缺血后1h、再灌注1,24,72h取材,对照组于造模后取材,每组各6只。观察各组大鼠肠黏膜组织病理学改变(采用下列评分系统:0分,绒毛和腺体正常;1分部分绒毛顶端上皮轻度受损;2分,上皮下腺体轻度受损;3分,上皮下间隙扩大,毛细血管充血;4分,上皮与固有层中度分离,腺体受损;5分,部分绒毛顶端脱落;6分,绒毛明显脱落;7分,固有层绒毛脱落;8分,固有层开始消化分解;9分,出血、溃疡形成)和有丝分裂活性。③采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口未端标记实验结合激光共聚焦显微镜观察小肠黏膜上皮细胞凋亡情况,测定细胞凋亡指数,即每张切片随机取10个高位视野,每100个细胞中凋亡阳性细胞数。④在苏木精-伊红染色的肠黏膜上皮细胞间观察有丝分裂相,10个相邻肠黏膜上皮细胞间具有有丝分裂相的细胞数作为有丝分裂活性指数。主要观察指标:各组大鼠组肠黏膜组织病理学改变,细胞凋亡指数和有丝分裂活性的测定。结果:纳入大鼠54只全部进入结果分析。①参附处理组大鼠肠缺血1h、再灌注1,24h黏膜组织病理学改变评分分别为[(0.65±0.35),(3.87±0.86),(0.65±0.35)分,低于肠缺血-再灌注组[(7.11±1.01),(8.05±1.34),(1.53±0.48)分,P<0.05]。②参附处理组大鼠肠缺血1h、再灌注1,24,72h黏膜上皮细胞凋亡指数分别为(17.24±7.05),(24.20±9.87),(11.49±4.71),(6.02±2.16)个,低于肠缺血-再灌注组[(51.09±13.76),(54.89±15.58),(23.54±9.64),(12.47±5.52)个,P<0.05],缺血1h、再灌注1h有丝分裂活性分别为(10.37±2.03),(11.72±2.07)个,高于肠缺血-再灌注组[(8.24±1.69),(9.95±1.93)个,P<0.05]。结论:参附注射液能够降低肠黏膜上皮细胞凋亡,并增强肠黏膜上皮细胞有丝分裂活性,从而促进肠黏膜损伤的修复。     

Kinetics of RNA synthesis in toad bladder epithelium: action of aldosterone during the latent period

Processing of RNA in the toad bladder was analyzed by polyacrylamide-gel electrophoresis to determine whether aldosterone causes any changes in the 1 hr before it potentiates transport of sodium ion. No change was found in the quantity or in the specific activity of bulk RNA labeled with uridine-5-(3)H. In vivo and in vitro with either uridine-5-(3)H or with methionine-(methyl)-(3)H as precursors, processing of RNA was extremely slow. Heterodisperse RNA was obvious after 30 min of continuous labeling, but labeling of the 40S precursor of ribosomal RNA was not apparent for 60 min. Labeling of mature 28S and 18S RNA first became apparent after 8 hr. approximately 7S RNA was the principal fastmigrating species labeled at 30 min, and 4S RNA was not heavily labeled until 1 hr. Aldosterone (5 x 10(-7) mole/liter) produced no changes. If care were not taken to inhibit metabolism of native bacteria colonizing the bladder, bacterial RNA of high specific activity predominated. We conclude that RNA metabolism in the toad bladder is extraordinarily slow, that a major acceleration of de novo synthesis in response to physiologic doses of aldosterone was not demonstrable, and that some reports to the contrary may have been influenced by artifacts from bacterial RNA metabolism. Earlier evidence for obligatory alterations in RNA metabolism during the latent period is not strong.