豚鼠壶腹嵴感觉细胞损伤与修复过程对前庭功能的影响

为观察庆大霉素损伤后豚鼠壶腹感觉细胞损伤与修复对前庭功能的影响，探讨前庭感觉上皮细胞损伤后自发修复与前庭功能恢复的关系。实验组动物连续１２天皮下注射１２５ｍｇ／ｋｇ庆大霉素，应用正旋摆支实验和旋转实验连续观察前庭功能的变化，结合没存活时间动物水平半规管腹嵴的扫描电观察和半薄切片壶腹嵴顶部不工毛细胞的定量分析，结果示：停药第２２天的１０只动物中有４只动物前庭功能有一定程度的恢复，但仍有明显前庭功能低     

庆大霉素致豚鼠前庭毛细胞破坏后再生及功能恢复

为探讨哺乳动物前庭毛细胞破坏后能否再生及前庭功能能否恢复，以豚鼠为研究对象。实验组动物每日给予庆大霉素皮下注射，连续１０天，对照组动物给予等量生理盐水。于停药后的第２、４、１２和２４周分别处死动物，扫描电镜观察发现，停药２周椭圆囊和壶腹嵴毛细胞破坏最明显的区域可见到不成熟的毛细胞纤毛丛，至停药２４周后继续存在。与对照组相比，停药１２周毛细胞密度下降明显（Ｐ〈０．０１），停药后２４周时毛细胞密度较１     

庆大霉素鼓室内注射后在内耳细胞中的分布

目的 观察鼓室内注射庆大霉素后，不同时间庆大霉素在前庭和耳蜗中的分布。方法 将庆大霉素同德州红连接形成庆大霉素-德州红耦联物后，行豚鼠鼓室内注射，注射后12h，1、2、3、4、7、14、28d处死动物，Phalloidin染色后运用激光共聚焦扫描显微镜观察基底膜、椭圆囊、球囊、外半规管壶腹嵴庆大霉素分布情况，并进行荧光分布半定量分析。结果 庆大霉素自注射后12h起在内耳所有细胞均见分布，在基底膜的外毛细胞、椭圆囊、球囊、外半规管壶腹嵴的感觉细胞聚集明显，主要聚集在毛细胞顶端纤毛下方的细胞质中，支持细胞分布较少。注射后第3天庆大霉素在内耳聚集达到最高峰，并在毛细胞内聚集较长时间。结论 庆大霉素-德州红耦联物是一个研究庆大霉素在内耳分布的良好的荧光探针，可用来检测庆大霉素的药代动力学和聚集机制．     

溴脱氧尿苷免疫细胞化学法观察豚鼠壶腹上皮细胞的修复过程

为观察给予庆大霉素后豚鼠在体椭圆囊壶腹嵴感觉细胞损伤后的恢复情况，实验组动物２５只连续１０～１４天注射１２５ｍｇ／ｋｇ庆大霉素。给药后的第１、３、７、１４、２２天处死各组动物，分别于处死前６小时给予动物腹腔内注射１５０ｍｇ／ｋｇ的５′－溴－２－脱氧尿苷（Ｂｒｏｍｏｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅ，ＢｒｄＵ）。取一侧内耳的壶腹进行连续半薄切片的观察，另一侧壶腹进行免疫细胞化学方法观察。结果显示：损伤后的豚鼠壶腹嵴上皮细胞可以进行有丝分裂，完成修复过程     

豚鼠椭圆囊斑微纹区和边缘区毛细胞损伤后恢复的比较观察

利用扫描电镜和连续半薄切片的观察，对豚鼠椭圆囊斑微纹区和边缘区的毛细胞损伤后的恢复情况进行研究。结果，正常豚鼠的椭圆囊斑微纹区的感觉细胞主要是Ⅰ型毛细胞，连续１２天皮下注射庆大霉素（１００ｍｇ／ｋｇ），豚鼠椭圆囊斑的损伤主要发生在微纹区，损伤后较长存活期实验组豚鼠的椭圆囊斑微纹区中，形态类似Ⅱ型毛细胞的感觉细胞占绝大多数。提示这些类似Ⅱ型毛细胞的感觉细胞是修复过程中产生的毛细胞。     

庆大霉素致豚鼠前庭毛细胞破坏后再生及功能恢复

为探讨哺乳动物前庭毛细胞破坏后能否再生及前庭功能能否恢复，以豚鼠为研究对象。实验组动物每日给予庆大霉素（１５０ｍｇ／ｋｇ）皮下注射，连续１０天，对照组动物给予等量生理盐水。于停药后的第２、４、１２和２４周分别处死动物，扫描电镜观察发现，停药２周椭圆囊和壶腹嵴毛细胞破坏最明显的区域可见到不成熟的毛细胞纤毛丛，至停药２４周后继续存在。与对照组相比，停药１２周毛细胞密度（毛细胞数／１００μｍ基底膜长度）下降明显（Ｐ＜０．０１），停药后２４周时毛细胞密度较１２周明显上升（Ｐ＜０．０５），但仍未达到正常水平（Ｐ＜０．０５）。另取豚鼠按上述方法进行庆大霉素注射，于注射前和停药后４、１２和２４周进行冰水诱发眼震电图检查，可见停药４～１２周平均慢相眼震速度（Ｖｍｅａｎ）明显下降（Ｐ＜０．０１），停药２４周后Ｖｍｅａｎ有明显恢复（Ｐ＜０．０５），但仍未达到正常水平（Ｐ＜０．０１）。提示：豚鼠周围前庭功能破坏后可以部分恢复，前庭毛细胞破坏后可以修复，其功能的恢复可能源于毛细胞再生。     

庆大霉素损伤后豚鼠前庭感觉上皮细胞凋亡和再生

目的 研究豚鼠前庭毛细胞庆大霉素损伤后前庭感觉上皮细胞凋亡和细胞增殖之间的关系。方法 成年豚鼠肌肉注射庆大霉素１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ连续１４ｄ,停用庆大在霉素后１ｄ和１０ｄ。腹腔注射Ｂｒｄｕ ３００ｍｇ／ｋｇ ６ｈ后处死实验动物,免疫组化显色壶腹嵴可见Ｂｒｄｕ标记细胞,同时应用ＴＵＮＥＬ技术原位显示凋亡细胞,观察应用庆大霉素后１ｄ和１０ｄ壶腹嵴毛细胞损伤区域细胞凋亡和细胞增殖状况,结果 损伤后１ｄ,     

豚鼠内耳前庭毛细胞自发再生

近年的研究表明哺乳动物出生后前庭耳石器毛细胞可以再生。本项研究采用扫描电镜技术，以豚鼠为研究对象，首次证实豚鼠不仅耳石器毛细胞而且半规管壶腹嵴毛细胞也可以自发再生。再生毛细胞散在分布于前庭上皮内，而某些脊椎动物再生毛细胞聚积在生长区内。结果提示豚鼠所有的前庭器，包括耳石器和壶腹嵴都保持着自发的毛细胞再生。     

豚鼠椭圆囊斑微纹区和边缘区毛细胞损伤后恢复的比较观察

利用扫描电镜和加续半薄切片的观察，对豚鼠椭圆囊斑微纹区和边缘区的毛细胞损伤后的恢复情况进行研究，结果，正常豚鼠的椭圆囊斑微纹区的感觉细胞主要是Ｉ型毛细胞，连续１２天皮下注射庆大霉素，豚鼠椭圆囊斑的损伤主要发生在微纹区，损伤后较长存活期实验组豚鼠的椭圆囊斑微纹区中，形态类似Ⅱ型毛细胞的感觉细胞占大多数，提示这些类似Ⅱ型毛细胞的感觉细胞是修复过程中产生的毛细胞。     

人前庭感觉上皮扫描电镜观察

为了解人前庭器官的超微结构，借助扫描电镜技术观察了５人（１０耳）的前庭感觉上皮。结果显示：①球囊斑呈“Ｌ”形，椭圆囊斑形如打开的贝壳；②Ⅰ型感觉细胞呈烧瓶样，Ⅱ型感觉细胞呈试管状；③感觉细胞纤毛排列呈阶梯状，动纤毛最长，且位于最长的静纤毛一侧，椭圆囊斑最长的静纤毛和动纤毛靠近微纹，其极性也向微纹，球囊斑则背离微纹，水平半规管壶腹嵴的动纤毛朝向椭圆囊侧，上、后半规管壶腹嵴则朝向半规管侧；④耳石形状大小不一致，呈现两端为锥形的圆柱状晶体。     

人前庭感觉上皮扫描电镜观察

为了解人前庭器官的超微结构，借助扫描电镜技术观察了５人（１０耳）的前庭感觉上皮。结果显示：①球囊斑呈“Ｌ”形，椭圆囊斑形如打开的贝壳；②Ｉ型感觉细胞呈烧瓶样，Ⅱ型感觉细胞呈试管状；③感觉细胞纤毛排列呈阶梯状，动纤毛最长，且位于最长的静纤毛一侧，椭圆囊斑最长的静纤毛和动纤毛造近微纹，其极性也向微纹，球囊斑则背离微纹，水平半规管壶腹嵴的动纤毛朝向椭圆囊侧，上、后半规管过来腹嵴则朝向半规管侧；④耳右形状     

磷酸化JNK在庆大霉素致豚鼠前庭毛细胞凋亡中的表达

目的:观察庆大霉素致豚鼠前庭毛细胞损伤特点,并探讨磷酸化cjun氨基末端激酶(JNK)在前庭毛细胞凋亡过程中的作用机制。方法:健康豚鼠随机分为实验组和对照组各15只,分别行100mg/(kg·d)庆大霉素和生理盐水连续肌肉注射7d,第8天全身麻醉下处死豚鼠,取壶腹嵴为观察对象,左耳铺片,硝酸银染色检测毛细胞损伤;右耳冷冻连续切片,DNA末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测毛细胞凋亡,免疫组织化学方法检测细胞中JNK磷酸化。结果:实验组中毛细胞受损,壶腹嵴顶端见凋亡细胞,并在细胞内观察到磷酸化JNK免疫阳性反应;对照组中未见毛细胞损伤及凋亡细胞,未见磷酸化JNK。结论:庆大霉素可以通过诱导凋亡造成内耳前庭毛细胞损伤,同时磷酸化的JNK标志着JNK途径的活化,提示JNK途径在细胞凋亡过程中发挥了一定作用。     

激光多普勒测量后半规管壶腹嵴血流

建立测定前庭血流的方法学是研究前庭微循环的关键。应用激光多普勒血流计测定１０只豚鼠的后半规管壶腹嵴血流。结果：耳蜗血流为３１８．３９±９１．６６ｍＶ，后半规管壶腹嵴血流为１９４．００±４５．２６ｍＶ，在测定过程中血压稳定在９．９９～１０．２７ｋＰａ。前庭和耳蜗血流分别占内耳血流的３７．８６％和６２．１４％，前庭血流约为耳蜗血流的二分之一。可以认为，后半规管壶腹嵴血流在一定程度上反映前庭血流变化。激光多普勒具有连续、动态、实时、直接观察、且能重复的优点。     

前庭毛细胞的反相激活模式

分布在内耳前庭各个终器的感觉毛细胞可分为两种类型,它们分别是I型毛细胞和II型毛细胞。这两种毛细胞无论是在静纤毛的长度,还是毛细胞细胞体的形状,或者神经末梢的连接方式以及与之相联系的前庭神经元都不一样。前庭毛细胞感受重力或体位改变刺激的机制是由于其插入到覆盖在其上方耳石膜或终帽内的纤毛随着这些辅助结构的惯性位移而发生弯曲,纤毛的弯曲引起毛细胞膜电位发生去极化或超极化改变,从而促使毛细胞的神经冲动信号发放增强或减弱。静纤毛朝着动纤毛的方向弯曲形成对毛细胞的兴奋性刺激,而静纤毛朝着背离动纤毛的方向弯曲则构成对毛细胞的抑制。球囊斑和椭圆囊斑都被从其中心穿越的一条狭窄的细胞带划分为两个区域,这条狭窄的细胞带被称之为微纹区,在椭圆囊斑微纹区两侧周边区毛细胞的动纤毛都排列在朝向微纹区的位置,而球囊斑微纹区两侧周边区毛细胞的动纤毛都排列在背离微纹区的位置,由此可见,每一个囊斑微纹区两侧毛细胞的极性正好完全相反。当机体沿着一个囊斑的平面从垂直于微纹区的方向产生一个加速运动时,该囊斑一侧周边区的毛细胞会因为静纤毛朝着动纤毛的方向弯曲使该侧毛细胞发生去极化而处于兴奋状态,而另一侧周边区的毛细胞却因静纤毛朝着离开动纤毛的方向弯曲使该侧毛细胞发生超极化而处于抑制状态。三个壶腹嵴上毛细胞的动纤毛都是朝着或背离椭圆囊的统一方向,其中外半规管壶腹嵴上每个毛细胞的动纤毛都是统一朝着椭圆囊,而上半规管和后半规管壶腹嵴上的每个毛细胞的动纤毛都是统一朝着半规管的方向。壶腹嵴是一个位于壶腹腔内的横位的马鞍形隆起,当其上方覆盖的胶状质终帽随着内淋巴液的流动发生相对位置移动时,壶腹嵴一侧的毛细胞纤毛必然会随着终帽顶部的偏移而发生方向一致的弯曲,从而使这半侧壶腹嵴毛细胞产生同步的去极化或超极化反应,然而壶腹嵴另外一侧毛细胞的纤毛却会因为内淋巴液在壶腹嵴上方推动终帽时在被壶腹嵴遮挡一侧的底部形成一个反方向的漩涡式回流使壶腹嵴另外一侧毛细胞的纤毛发生方向相反的弯曲,从而使壶腹嵴两侧毛细胞处于一侧兴奋而另一侧抑制的截然相反的不平衡状态。这意味着同样的加速运动方向对与之相对应的前庭终器两侧感觉上皮产生的是截然不同的刺激信号,从而造成该前庭终器两侧感觉上皮输入信号的不平衡。这种不平衡刺激模式经前庭周边神经元传入到前庭中枢神经系统,使整个从周边到中枢的前庭系统都是以这种不平衡刺激方式传递和感知机体的平衡状态。     

小鼠前庭器官的形态发生

目的了解小鼠前庭器官发育的形态学特征及演变规律.方法利用光镜、扫描电镜、透射电镜观察C57BL/6小鼠从胚胎第8天到刚出生期间前庭器官发育过程中的形态变化.结果 C57BL/6小鼠的前庭器官在胚胎第10.5天开始发育,胚胎第11.5天形成上、后半规管始基,到胚胎第12天水平半规管始基才逐渐形成,椭圆囊已出现许多原始的感觉纤毛,而到胚胎第13天,球囊才开始发育;到胚胎第15天,椭圆囊、球囊、壶腹嵴初具成熟形态,毛细胞和支持细胞也初具雏形,到出生时,前庭器官已基本发育成熟.结论 C57BL/6小鼠前庭感觉细胞在胚胎第12天开始分化,感觉上皮的形态从胚胎第12天至第18天变化最明显.椭圆囊、壶腹嵴的发生较早,随后才形成球囊,到出生时前庭感觉器官已基本发育成熟.     

Carboplatin对灰鼠前庭系统的影响

本研究目的在于调查一种抗肿瘤药Carboplatin（100m／kg）对灰鼠前庭器官功能与形态的影响。注射Carboplatin后，冷水诱发眼震持续时间明显缩短。急性形态学损害主要发生在Ⅰ型毛细胞的传入神经末梢和胞核。另外，壶腹嵴的形态学损害比球囊斑和椭园囊斑发生早而且更为严重。在囊斑内，微纹区是病变的主要部位。用药后30天，壶腹嵴和囊斑有较多Ⅰ型毛细胞缺失，然而Ⅱ型毛细胞未受明显影响。上述结果表明Carboplatin具有迅速的强烈的前庭毒性作用，Ⅰ型毛细胞和传入神经末梢是主要受损部位。     

前庭学

901218 压力波引起豚鼠前庭器损伤的电镜观察/王尔贵…//第四军医大学学报.-1990,11(1).-4～6 作者将豚鼠暴露于压力峰值为175.3dB(SPL)的压力波。爆震后行前庭功能检查及透射电镜观察。结果示前庭功能未发现异常。透射电镜发现半规管壶腹嵴和球囊斑、椭圆囊斑     

溴脱氧尿苷免疫细胞化学法观察豚鼠壶腹上皮细胞的修复…

为观察给予庆在霉素后鼠在体椭圆囊壶腹嵴感觉细胞损伤后的恢复情况，实验组动物２５只连续１０－１４天注射１２５ｍｇ／ｋｇ庆大霉素。给药后的第１，３，７，１４，２天处死各组动物，分别于处死前６小时给予动物腹腔内注射１５０ｍｇ／ｋ的５‘－－溴－２－脱氧尿苷。     

内耳前庭毛细胞再生的实验研究

本文应用庆大霉素皮下注射破坏豚鼠前庭毛细胞，连续１０天，停药后分别于当天及４，７，２８天处死。利用眼震电图检测前庭功能改变，电镜和光镜观察前庭感觉上皮损伤情况有再生增殖过程。结果表明：１．冰水试验ＥＮＧ检查发现停药后前庭功能严重受损，无前庭功能恢复征象。２．扫描电镜观察停药当天组前庭感觉上皮广泛破坏，以微纹区明显，４，７天组破坏加重。     

实验性头外伤后前庭迷路的组织病理变化

用无依托式头外伤装置，造成豚鼠轻型头外伤模型。痛觉恢复后立即处死６只（Ⅰ组），存活１５天处死５只（Ⅱ组）。颞骨火棉胶包埋，切片光镜观察，见两囊斑病变为大片耳石脱落、斑松解、剥离及感觉上皮空泡化、纤毛区大量球形体。１耳球囊斑脱落耳石靠近连合管。壶腹嵴病变为感觉上皮空泡化，上皮紊乱、松解，纤毛区大量球形体及嵴周嗜碱性颗粒附着。嵴周嗜碱性颗粒附着与嵴顶结石症病理变化一致。表明在头外伤后前庭病变，尤其是两囊斑的损害明显。其继发性病变，如嵴顶结石，连合管堵塞，可能是部分头外伤后听及前庭功能障碍的病理基础。