缺氧预处理心肌凝集素和琥珀酸脱氢酶的电镜细胞化学

目的：探讨缺氧预处理对缺血再灌注大鼠心肌的保护作用。方法：采用SD雄性大鼠，通过生物素化凝集素-刀豆素和麦芽素分别检测缺血再灌注、缺血预处理及缺氧预处理大鼠心肌细胞膜糖基的变化和琥珀酸脱氢酶(SDH)细胞化学变化。结果：正常组刀豆素和麦芽素对大鼠心肌细胞染色强阳性，电镜下细胞结构完好，SDH酶活性高；缺血再灌注组刀豆素和麦芽素染色弱阳性，电镜下细胞结构损伤明显，SDH酶活性明显降低；缺血预处理组、缺氧预处理组刀豆素和麦芽素染色处于上述二者之间，电镜下细胞结构保护完好，SDH酶的活性没有明显降低。结论：缺氧预处理和缺血预处理对缺血再灌注大鼠心肌有相似的保护作用。     

脑缺血再灌注后脑梗塞周围区生长相关蛋白—GAP43表达的变化及外源性神经生

目的：研究大鼠脑缺血再灌注后生长相关蛋白－４３（ＧＡＰ－４３）表达的变化规律及外源性神经生长因子（ＮＧＦ）的影响。方法：成年健康雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠７２只,随机分为假手术组、自然恢复组、人工脑脊液组和ＮＧＦ治疗组。采用线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注（ＭＣＡＯ）动物模型,应用免疫组织化学方法观察脑缺血再灌注后ＧＡＰ－４３的表达。结果：⑴脑缺血再灌注６ｈ后,缺血周围区ＧＡＰ－４３表达逐渐增高,第７天达高峰,以后逐渐降低,第２１天仍有表达。⑵应用外源性ＮＧＦ后,ＧＡＰ－４３表达较对照组有所增高,但无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论：提示中枢神经系统损伤后,神经元具有再生和修复的可塑性,外源性ＮＧＦ对ＧＡＰ－４３的调节有特进一步研究。     

牛磺酸对大鼠在体缺血再灌注心肌线粒体呼吸酶系的影响

观察牛磺酸对大鼠缺血再灌注损伤心肌线粒体呼吸酶活力变化的影响及机理。结果表明：牛磺酸保护组的琉珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）、细胞色素氧化酶（ＣＣＯ）、ＳＯＤ及ＧＳＨ·Ｐｘ活力均较缺血再灌注损伤非保护组有显著升高（Ｐ＜０．０１）,而ＭＤＡ含Ｒ则明显降低（Ｐ＜０．０１）。提小牛碘酸对缺血再灌注损伤心肌线粒体ＳＤＨ及ＣＣＯ活力有很好的保护作用,其机理可能是通过提高对氧自由基清除及抑制脂质过氧化作用而实现。     

白芍总甙对佐剂性关节炎大鼠的免疫调节作用及其与一氧化氮关系的研究

通过检测脾细胞增殖反应、不同细胞培养上清中亚硝酸盐含量以及采用一氧化氮（ＮＯ）合成酶抑制剂等工具药研究了白芍总甙（ＴＧＰ）对佐剂性关节炎（ＡＡ）大鼠免疫调节作用及其与ＮＯ的关系。结果表明，ＡＡ大鼠脾细胞低下的刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎＡ）增殖反应与其巨噬细胞（Ｍ）过量产生ＮＯ有关；ＴＧＰ５０ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）治疗７ｄ上调ＡＡ大鼠细胞低下ＣｏｎＡ反应是其下调Ｍ产生ＮＯ等抑制性介质的结果。结果还表明，ＴＧＰ可使ＡＡ大鼠腹腔Ｍ升高的ＮＯ和肿瘤坏死因子产生降低或恢复。     

大鼠心脏腺苷预处理心肌组化和细胞化学变化

目的：应用图象分析和电镜细胞化学方法,观察大鼠心脏腺苷预处理心肌琥到脱氢酶、细胞色素氧化酶及Ｃa＾２＋Ｍg＾２＋－ＡＴＰase活性变化。方法：采用ＳＤ雄性大鼠３２只 分４组,即正常对照组（ＮＣ）,缺血/再灌组（Ｉ/Ｒ）,缺血预处理组,腺苷预处理组。用图象分析检测琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶和Ｃa＾２＋Ｍa＾２＋－ＡＴＰase活性。 结果：在缺血预处理组及腺苷预处理组琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶、Ｃa＾２＋Ｍa＾２     

缺血预处置及磷酸肌酸对心肌缺血/再灌注羟自由基生成的影响

目的：探讨缺血预处置及磷酸肌酸对·ＯＨ的影响。方法：以离体大鼠心脏为模型,以水杨酸为捕捉剂,利用其与再灌注产生的羟自由基（·ＯＨ）反应生成的二羟苯甲酸（ＤＨＢＡ）为指标,用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法检测缺血心肌再灌注冠脉流出液和心肌组织中ＤＨＢＡ含量。结果：缺血再灌注冠脉流出液和心肌ＤＨＢＡ生成增多,与对照组相比差异非常显著,缺血预处置组与非处置组相比ＤＨＢＡ生成明显降低,而且四次预处置组低于一次预处置组;缺血前给予磷酸肌酸使ＤＨＢＡ生成明显减低,但与缺血预处置并用组无明显差异。结论：缺血预处置与磷酸肌酸可以通过减少缺血再灌注心肌·ＯＨ的生成保护心肌,但二者无协同作用,且缺血预处置有累加作用。     

大鼠心脏硫酸腺嘌吟预处理心肌酶活性变化

目的：实验观察经典缺血处理及硫酸腺嘌呤处理大鼠心肌细胞色素氧化酶和过氧化氢酶的活性变化。方法：采用ＳＫ雄性大鼠２４只,分４组：假手术组、缺血再灌注组、经典缺血预处理组、流酸腺嘌呤预处理组。术后速取左心室前壁肌行冰冻切片,以ＤＡＢ法测定细胞色素氧化酶和过氧化氢酶的活性。依Ｒidit法行显著性检验。结果：缺血再灌注组大鼠心肌过氧化氢酶和细胞色素氧化酶损伤性反应明显,经典缺血预处理组和硫酸腺嘌呤预处理组细胞     

培养的大鼠血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ受体的基因表达及调节

在培养的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和正常血压ＷＫＹ大鼠的主动动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）模型，应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，分别检测ＡＳＭＣ中碱性成纤维细胞生长因子（ｈＦＧＦ）和血管紧张素Ⅱ（ＡＮＧⅡ）Ｉ型受体（ＡＴ１Ｒ）的基因表达。结果表明：ＳＨＲＡＳＭＣ中ｈＦＧＦ基因的基础表达和ＡＮＧⅡ刺激后的表达水平元旦明显高于ＷＫＹ大鼠；ｂＦＧＦ（１０ｎｍ／ｍｌ）对两种     

缺血预处理对心肌细胞凋亡及血浆TNF水平影响的初步观察

目的探讨缺血预处理对心肌细胞凋亡及血浆TNF水平的影响。方法选择大鼠随机分为假手术组、持续缺血组、缺血再灌注组和缺血预处理组，以活结结扎左冠状动脉的前降支．分别造成阻断冠脉血流和再灌注。并通过以缺口末端标记法（TUNEL）标记凋亡细胞，采用放射免疫法等检测血浆TNF水平等指标判定其结果。结果凋亡细胞原位标记与半定量分析表明：缺血预处理组与持续缺血组、缺血再灌注组比较心肌细胞凋亡程度明显降低（P〈0．01）。而缺血预处理组与缺血再灌注组比较，降低TNF的作用很明显，差异十分显著（P〈0．01）。结论缺血预处理能降低TNF水平，对抗TNF引起的心肌损害，减轻心肌细胞凋亡程度，保护心肌细胞。     

缺血预处理抗缺血再灌注心肌间质损伤的实验研究

目的：观察缺血预处理（ＩＰＣ） 对大鼠缺血再灌注心肌间质胶原及心肌功能结构关系的影响,以进一步探讨ＩＰＣ 对心肌的保护作用。方法：实验采用体重（２５０ ±３０）ｇ 雄性ＳＤ 大鼠２４ 只,分３ 组,每组８ 只,即假手术对照（ＳＣ）组;缺血再灌注（Ｉ／Ｒ） 组和缺血预处理（ＩＰＣ） 组。用超微结构立体计量及羟脯氨酸浓度测定观察心肌间质胶原变化,多道记录仪测量心功能指标,透射电镜观察心肌超微结构。结果：Ｉ／Ｒ 时心肌间质胶原浓度显著低于ＳＣ 组（ Ｐ＜ ０－０１） ,心肌超微结构损伤严重,左室功能明显低于ＳＣ 组（ Ｐ＜ ０－０１） 。ＩＰＣ 组心肌超微结构破坏明显低于Ｉ／ Ｒ 组。同时,心肌间质胶原浓度、胶原纤维线密度及左室功能指标明显高于Ｉ／Ｒ 组（ Ｐ＜ ０－０５ ,Ｐ＜ ０－０１） 。结论：ＩＰＣ 的心肌保护作用不仅表现在对心肌细胞上,而且对心肌间质也有重要的保护作用。     

大鼠在体心脏缺血后处理模型的建立与优化

目的建立并优化大鼠在体心脏缺血后处理(I-postC)模型。方法采用冠状动脉左前降支垫扎球囊法建立在体心脏I-postC模型,健康雄性SD大鼠随机分为7组(n=8):缺血/再灌注(I/R)组(冠状动脉左前降支缺血45min/再灌注2h)、缺血预处理(IPC)组(I/R前先行3轮缺血5min/再灌注5min处理)、I-postC组(包括4个亚组,于冠脉缺血45min后先进行3或4轮再灌注30s/缺血30s或再灌注60s/缺血60s后处理后再进行冠脉再灌注)以及假手术(sham)组。氯化三苯四氮唑(TTC)法测定心肌梗死面积,试剂盒检测血浆乳酸脱氢酶(LDH)和心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果I/R引起明显的心肌梗死和组织损伤,采用冠状动脉左前降支垫扎球囊法进行I-postC可以显著减少I/R后心肌梗死面积,尤以3或4轮再灌注30s/缺血30s组保护作用明显,其梗死区占缺血区百分比分别比I/R组下降30.26%和58.81%(P分别<0.05),与IPC保护效果相近。结论I-postC可以减轻心肌I/R损伤,其中4轮再灌注30s/缺血30s诱导的I-postC在限制心肌梗死面积方面作用最明显,是理想的大鼠在体心脏I-postC模型。     

延迟预适应对兔心脏缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的:观察延迟缺血预适应(IschemicPreconditioning,IPC)对兔在体心脏缺血再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)损伤的保护作用。方法:方法18只兔随机分为3组:假手术组(CON组,n=6),缺血再灌注组(I/R组,n=6),预适应组(IPC组,n=6)。采用免疫组化方法检测诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)及内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)在心肌及冠状动脉内皮中的表达情况。结果:IPC组的梗死面积明显小于I/R组。在心肌中,IPC组iNOS表达明显高于I/R组与CON组,而eNOS无显著性差异。在内皮中,IPC组eNOS表达明显高于I/R组,与CON组无显著性差异,而iNOS均无表达。结论:延迟缺血预适应能缩小兔缺血再灌注后心肌梗死面积。     

预适应和后适应对缺血/再灌注损伤大鼠心肌组织炎症因子的影响

目的:观察缺血预适应(IPC)、缺血后适应(IPOC)对大鼠心肌组织缺血/再灌注(I/R)损伤后Toll样受体(TLR)及下游炎症因子的影响。方法:SD大鼠60只,通过SPSS软件随机分为假手术组(冠状动脉前降支下置线不结扎,n=15);I/R组(冠状动脉前降支结扎30min,再灌注60min,n=15);IPC组(冠状动脉前降支3次3min/5min的缺血/再灌注循环,然后结扎30min后,再持续灌注60min,n=15);IPOC组(冠状动脉前降支结扎30min,3次10s的缺血/再灌注循环,再持续灌注60min,n=15)。实验结束后测定大鼠血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌钙蛋白T(cTNT)水平;氯化硝基四氮唑兰(NBT)染色测定大鼠左室心肌梗死面积;免疫组织化学法测定心肌组织TLR-2、4的表达;酶联免疫吸附法测定心肌组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果:与I/R组比较,IPC组、IPOC组大鼠血清CK-MB和cTNT水平显著降低(P<0.01),心肌梗死面积显著减小(P<0.01),心肌组织TLR-2、4表达和炎症因子IL-6、IL-1β、MCP-1、TNF-α含量显著下降(P<0.05,P<0.01);与IPC组比较,IPOC组减小I/R大鼠心肌梗死面积,降低血清CK-MB及心肌组织IL-6等作用和IPC组无显著差异(P>0.05)。结论:IPOC与IPC同样具有减轻心肌I/R损伤程度和缩小心肌梗死范围等作用,抑制TLR-2、4的表达可能是其保护I/R心肌的一个重要途径。     

缺血预处理对缺血/再灌注脑的保护及其与微循环调节功能的关系研究

目的:探讨缺血预处理(IPC)是否对缺血/再灌注(I/R)脑细胞具有保护效应及其与微循环调节功能间的关系。方法:I/R与IPC组大鼠均复制脑I/R损伤模型,IPC组增加于I/R之前24h进行的短暂脑缺血预处理。动物均开颅窗观察缺血前、缺血后、再灌后脑软膜微循环指标;并取脑组织作红四氮唑(TTC)染色观察缺血损伤情况。结果:I/R组TTC染色后大多数出现不规则的缺血损伤的淡染区,而IPC组明显少见。IPC组缺血及再灌之后毛细血管累计总长度、微循环血流量、微血管内血流速度之相对增加值均大于I/R组。I/R组于再灌注之后有无复流现象;而IPC组此时呈灌注增加的过程。结论:IPC通过提高微循环的调节功能,促进毛细血管的相对性开放和血流的相对性加快,减轻缺血期组织血流低灌注和再灌注期无复流现象,从而对I/R脑产生一定保护作用。     

硫酸腺嘌呤预处理缺血再灌注大鼠心脏梗塞面积、心功能和心脏胶原的变化

探讨硫酸腺瞟呤心脏预处理的方法、效应。方法：采用雄性ＳＤ大鼠３２只,分为４组,即假手术对照组（ＳＣ）、缺血再灌组（Ｉ／Ｒ）、经典缺血预处理组（ＩＰＣ＋Ｉ／Ｒ）、硫酸腺瞟呤预处理组（ＡＳＰＣ＋Ｉ／Ｒ）。通过监测心肌梗塞面积、心功能和心脏胶原的变化评估预处理效应。结果：ＩＰＣ＋Ｉ／Ｒ、ＡＳＰＣ＋Ｉ／Ｒ与Ｉ／Ｒ组相比较,均能明显缩小梗塞面积（Ｐ<０．０１）,改善左心室功能（Ｐ＜０．０１）,使心脏胶原保存良好。结论：大鼠心脏硫酸腺瞟呤预处理能复制出与经典缺血预处理相类似的效应,其机制似与扩张冠状动脉、改善微循环有关。     

心脏硫酸腺嘌呤预处理大鼠心肌微循环及胶原纤维的变化

目的：观察经典缺血预处理及硫酸腺嘌呤预处理大鼠心肌微循环及心肌问质胶原纤维的变化并探讨其意义。方法：大鼠分假手术组(S)、缺血再灌注组(1／R)、经典缺血预处理组(IPC)、硫酸腺嘌呤预处理组(ASP)，通过电镜二维图像立体计量法，测量心肌毛细血管横截面积，并观察问质胶原纤维的变化。结果：S组、IPC组与ASP组心肌毛细血管的横截面积显著大于I／R组。与I／R组相比较，IPC、ASP组心脏胶原纤维明显增加。结论：心脏经典缺血预处理与硫酸腺嘌呤预处理均能明显扩张心肌间质中血管及促进心脏胶原明显增多。4     

Involvement of Ca(2+) in antiarrhythmic effect of ischemic preconditioning in isolated rat heart

We investigated the relationship between the effects of ischemic preconditioning (IPC) and Ca(2+) preconditioning (CPC) on reperfusion-induced arrhythmias. In the control group (noPC), Langendorff-perfused rat hearts were subjected to 5-min zero-flow global ischemia (I) followed by 15-min reperfusion (I/R). In ischemic preconditioning groups (IPC), the hearts were subjected to three cycles of 3-min global ischemia and 5-min reperfusion. In the CPC group, the hearts were exposed to three cycles of 3-min perfusion of higher Ca(2+) (2.3 mmol/l Ca(2+)) followed by 5-min perfusion of normal 1.3 mmol/l Ca(2+), and the hearts were then subjected to I/R. Verapamil was administered in several hearts of the IPC group (VR+IPC). Ventricular arrhythmias upon reperfusion were less frequently seen in the IPC and CPC groups than in the noPC and VR+IPC groups. IPC and CPC could attenuate conduction delay and enhance shortening of the monophasic action potential duration during ischemia. The ventricular fibrillation threshold measured at 1-min reperfusion was significantly higher in the IPC and CPC groups than in the noPC and VR+IPC groups. Verapamil completely abolished the salutary effects of IPC. These results demonstrate that Ca(2+) plays an important role in the antiarrhythmic effect of IPC during reperfusion.     

NO参与缺血预处理对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究缺血预处理(IPC)对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用及一氧化氮(NO)是否参与此保护作用。方法采用Wistar雌性大鼠,在左后肢跟部止血,同时使用血流监测仪测股四头肌的血流量,调整止血带的松紧程度,使血流量控制在上止血带前的30%。30只大鼠随机分成3组,分别为缺血再灌注组(n=10)、缺血预处理组(n=10)、缺血预处理+NAME组(n=10)。应用尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶2+2+(NADH)染色,检测股四头肌各型肌纤维横截面积,钙-腺苷三磷酸酶(Ca-ATPase)染色,观察细胞膜CaATPase分布。透射电镜观测肌细胞的超微结构变化。结果缺血再灌注组出现明显肌纤维破裂溶解,许多白细胞浸润,电镜下线粒体中含有大量空泡变性、肌纤维断裂、溶解和"Z线"排列整齐膜脂质过氧化物的增加。与缺血再灌注组相比,缺血预处理组显示了轻微的损害,正常的纤维和血管变形少,股四头肌各型肌纤维横2+截面积降低,细胞膜Ca-ATPase数量增加。缺血预处理+NAME组与缺血再灌注组相比没有明显改变。结论缺血预处理对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤有明显保护作用,NO参与这一保护作用。     

Ischemic postconditioning provides protection against ischemia-reperfusion injury in intestines of rats

In the present study, we investigated the protective role of ischemic postconditioning (IPOST) against intestine ischemia-reperfusion (I/R) injury in rats. Male Sprague-Dawley rats were divided into sham-operation group (S), I/R group (I/R), ischemic preconditioning group (IPC), ischemic postconditioning group (IPOST). After reperfusion, small intestines were resected for histopathologic evaluations. To evaluate DNA fragmentation, resolving agarose gel electrophoresis was performed. To measure cellular apoptotic rates in intestine tissues, we performed TUNEL staining. To examine lipid peroxidation, production of superoxide radicals and tissue neutrophil infiltration, we tested the content of malondialdehyde and activities of superoxidase dismutase and myeloperoxidase in intestine tissues, respectively. Under light microscope, intestinal mucosal impairment in IPOST and IPC groups was found milder than that in I/R group (P < 0.05). The number of apoptosis cells in I/R group was significantly higher than that in IPOST and IPC groups (P < 0.05). The content of malondialdehyde and activity of myeloperoxidase were significantly reduced in IPOST group and IPC group compared with I/R group, but the activity of superoxidase dismutase in IPOST group and IPC group was enhanced compared with I/R group (P < 0.05). These results suggest that IPOST results in protection against intestine I/R injury, which may be related to reduced production of reactive oxygen species, enhanced activities of antioxidant systems and inhibited apoptosis of intestinal mucosal cells.