MTT比色法在微囊培养动物细胞计数中的应用

观察了3种已报道的脱色液在MTT比色法中的使用效果,实验证明它们均存在一定的局限性,不适于微囊细胞的脱色。改良的脱色液配方为N,N-二甲基甲酰胺-Triton-水(DTW),它不仅可迅速完成脱色,呈色稳定,不引起蛋白质沉淀,且无需破囊和洗涤细胞,从而较好地解决了微囊固定化细胞计数的难题。     

琼脂培养—MTT法在实体瘤细胞化疗药敏中的应用

目的 探讨琼脂培养一四甲基偶氮唑蓝(MTT)法在实体瘤细胞药敏中对非瘤细胞干扰的排除作用及其与MTT药敏法的比较。方法 采用培养板底层预先加入100uL含0.3％琼脂的Enrich-McCoy’s5A培养基,上层用液体培养的MTT药敏法。结果 我们选用质硬、纤维组织较多的结肠癌、乳腺癌标本,用六种化疗药物同时用两法测定,琼脂培养—MTT法抑制率均高于MTT法。结论 琼脂培养—MTT法可有效地限制实体瘤组织中夹杂的纤维细胞生长,对提高肿瘤化疗药敏的特异性、准确性有明显的作用,该法尤其适用于合纤维细胞较多的实体瘤组织的药物敏感性测定。     

MTT法和CCK-8法检测悬浮细胞增殖的比较

在细胞学实验中,MTT比色法和1H-TDR掺入法常用于细胞毒性、细胞活性和细胞增殖的检测。因MTT法具有简便、经济、安全等特点,而被广泛使用,但其操作较繁琐,需加入DMSO溶解甲躜颗粒,且往往因溶解不全而对实验结果造成影响;而。H-TDR掺入法虽然灵敏度高、特异性强、稳定性好,但由于操作步骤多、存在放射性危害等限制了其使用。近年来,国外研发出了一种新型的检测方法CCK-8（cell counting kit-8）,其原理为活细胞线粒体脱氢酶转化的黄色结晶为高度水溶性,不需要裂解细胞,可直接进行比色。该法步骤简便,且准确性得到提高。     

蛋白质组学在放射生物学研究中的应用

蛋白质组(proteome)一词由Wilkin’s等于1996年首先提出，用来描述一个细胞、组织或有机体所表达的所有蛋白质。蛋白质组学(pmteomics)则是研究生物系统内特定时间或特定条件下蛋白质表达规律的科学。     

流式细胞仪在放射生物学研究中的应用

放射线通常是通过对细胞DNA的作用从而达到抑制或杀伤细胞效应的。由于细胞DNA含量与细胞周期密切相关,因而放射线上述作用的后果之一是不同程度地干扰了细胞周期的运动,使细胞周期中的时相分布发生显著的变化,引起细胞同步化或半同步化。研究放射对细胞动力学的影响成了临床放射生物学的重要课题。     

AL杂交细胞在放射生物学研究中的应用

AL杂交细胞是近年来研究负荷粒子致突变效应较理想的一种分析体系,可用于直接检测低剂量突变因子的效应.用此体系研究某些人类基因之间的连锁非常方便,体系灵敏度高,具有其他体系细胞所不具备的优势,在放射生物学中可作为研究致突变效应的一种很好的工具.     

AL杂交细胞在放射生物学研究中的应用

AL杂交细胞是近年来研究负荷粒子致突变效应较理想的一种分析体系,可用于直接检测低剂量突变因子的效应。用此体系研究某些人类基因之间的连锁非常方便,体系灵敏度高,具有其他体系细胞所不具备的优势,在放射生物学中可作为研究致突变效应的一种很好的工具。     

脾脏在放射生物学中的意义

脾脏是造血系统重要的实质器官之一。随着现代科学技术的发展,对脾的结构和功能,脾与其它造血器官及与外周血细胞的产生和分布之间的关系虽已有所了解,但对其全面生理功能的认识仍欠深入。     

MTT比色法检测兔膜上皮细胞活性

目的：建立一种定量检测角膜上皮细胞活性的方法,方法：造成兔角膜碱烧伤和激光烧伤模型,分别于伤后1,2,3周钻取板层角膜,37℃孵育1h,加MTT孵育4h,加DMSO充分溶解,于酶联免疫仪上490nm御测定D值,结果：经MTT比色法测定,碱烧伤和激光烧伤后不同时间点的兔角膜上皮细胞活性均明显低于正常对照组（P＜0．010,结论：MTT比色法可用于定量检测角膜上皮细胞活性,此方法可作为眼药效学定量评价指标之一。     

3种光敏剂对5株人鼻咽癌细胞PDT量效关系的研究

用ＭＴＴ法比较了不同能量的脉冲铜蒸气激光、不同浓度的３种光敏剂（ＰＳＤ－００７、ＢＨｐＤ和ＹＨ－ｐＤ）对５株人鼻咽癌细胞（ＣＮＥ２、ＨＮＥ１、ＨＮＥ２、ＨＮＥ３，和ＨｏＮＥ１的体外杀伤效应。结果表明：（１）激光合并光敏剂即令能量较低、剂量较小，也能显示明显的杀伤效应，而单用激光或单用光敏药物则只在较高能量和较大剂量时才显示轻微杀伤效应。（２）５株鼻咽癌细胞对３种光敏剂的ＰＤＴ敏感性彼此存在着差异。（３）在一定激光能量和光敏剂浓度时，ＰＳＰ－００７的杀伤效应优于ＢＨｐＤ和ＹＨｐＤ，而ＹＨｐＤ又稍优于ＢＨｐＤ。     

黑果小檗抗肿瘤细胞生物学作用的研究

目的开发新的的抗癌食物，为新疆可食用野生植物开发利用成抗癌、防癌保健食品提供理论依据。方法通过对人膀胱癌细胞（EJ）、人喉癌细胞（Hep-2）、人低分化粘液腺胃癌细胞（MGC-803）、人肝癌细胞（Q3）和人肺癌细胞（Spc-A-1）等肿癌细胞及小鼠成纤维细胞（3T3）的生物学作用，即对肿瘤细胞的增殖能力、存活量、蛋白质含量及形态的改变效应，研究该植物的抗肿瘤效应。结果对肿瘤细胞Hep-2和MGC-803细胞有较强的抑制杀伤作用，但对正常小鼠成纤维细胞也有一定的抑制作用。结论黑果小檗具有一定的抗肿瘤作用，但是对正常细胞又有一定的杀伤作用。     

氯氧喹对Lewis肺癌细胞及荷瘤小鼠的辐射增敏作用

目的 研究氯氧喹联合X射线对Lewis肺癌细胞及荷瘤小鼠的辐射增敏作用.方法 细胞及动物实验均设置为对照组、给药组、照射组及给药+照射组(联合组)4个组别.采用体外细胞培养MTT检测及荷瘤动物模型观察方法,分别予以不同处理因素后,细胞实验用MTT法检测各组别细胞吸光度(A)值;小鼠皮下接种Lewis肺癌细胞,予以相关处理因素后,观察记录肿瘤生长情况并测量其长、宽径从而计算出肿瘤抑制率及肿瘤生长延迟.照射结束后眼静脉采血,检测各组小鼠血液标本中细胞成分数量的变化情况.结果 MTT实验结果显示,细胞照射24 h后,给药+照射组SF值较单纯照射组有一定的降低,但差异无统计学意义(P＞0.05),而照射48 h后,在10、20、40和80 mg/L浓度下,两组间差异有统计学意义(t=3.22、4.23、4.46和4.58,P＜0.05).动物实验结果显示,给药+照射组的肿瘤生长曲线明显较单纯照射组低平,但差异无统计学意义;给药+照射组的肿瘤控制率及肿瘤生长延迟远高于单独给药组及照射组(t=3.15～3.59,P＜0.05).另外,氯氧喹并未增加辐射对小鼠血液细胞成分的不良反应.结论 氯氧喹对Lewis肺癌细胞及荷瘤小鼠均具有明显的辐射增敏作用,对小鼠血液系统未见明显不良反应,值得进一步深入研究.

Abstract：

Objective To study whether Chloroxoquinoline could enhance the radiation sensitivity of Lewis lung cancer cells and xenograft tumors in tumor-bearing mice.Methods Both cell and animal experiments were divided into control group,drug group,irradiation group and combination group.MTT assay was used to detect the optical density of Lewis lung cancer cells cultured in vitro.The model of tumor-bearing mice was established first and then the tumor diameters of different groups were measured to figure out the tumor control rates and tumor growth delay.After irradiation,the blood samples in each group were collected to detect the amount of blood cells.Results MTT showed 24 hours after irradiation,the cell survival fraction of combination group was lower than that of irradiation group,but no statistical differences (P ＞ 0.05).However,48 hours later,the cell survival fraction of combination group was obviously lower than irradiation group with statistically significant differences( t = 3.22,4.23,4.46,4.58,P ＜ 0.05).Animal experiments showed the tumor growth curve of combination group was significantly lower than irradiation group.The tumor control rate and tumor growth delay of combination group was more above the other groups ( t = 3.15-3.59,P ＜ 0.05 ).Additionally,according to the analysis of blood samples,the hematological toxicity of chloroxoquinoline on mice was not found.Conclusion Chloroxoquinoline shows its radiation sensitizing effect on Lewis lung cancer cells and xenograft tumors in mice without hematological toxicity.     

白介素6生物活性简易测定法及其临床应用

报道了应用白介素６（ＩＬ－６）依赖细胞株７ＴＤ１，以及ＭＴＴ比色法测定ＩＬ－６生物活性的简便方法。本法测定结果和￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入法一致；检测灵敏度为１ｐｇ或１Ｕ／ｍｌ以下；可用于正常人或病人血清中ＩＬ－６水平的测定。采用本法检测了我国正常成人５５例，血清ＩＬ－６活性为６．７５±２．９８Ｕ／ｍｌ；而１１例肺结核排菌者和１２例肺癌患者的血清ＩＬ－６活性分别为１４．２９±８．４６和１７．１４±９．１２Ｕ／ｍｌ，与正常人有显著差别（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．００１），为进一步临床应用奠定了基础。     

两种检测细胞活性的改良MTT法

四甲基偶氮唑盐(MTT)测定法是依靠线粒体琥珀酸脱氢酶催化MTT形成蓝色甲(月替)的多少来检测活细胞数和功能状态的。对影响甲(月替)溶解的助溶剂配方和用量作了实验比较,提出两种配方和合适用量,使此法的敏感性提高了25%,与~3H-TdR掺入法接近,并且相关性好(P<0.001)。改良MTT法重复性好、操作简便、较安全、费用低,可替代~3H-TdR法用于细胞活性的测定。     

Sourcing and using stem cell lines for radiation research: Potential,challenges and good stem cell culture practice

Abstract

Purpose: Exposition of best practice in management and experimental use of human stem cell lines in radiobiological research. This paper outlines the key challenges to be addressed by radiobiologists wishing to use human pluripotent stem cell (hPSC) lines in their research including human embryonic stem cell (hESC) lines and human induced pluirpotency stem (hiPSC) lines. It emphasises the importance of guidance already established for cell culture in general and outlines some further considerations specific to the culture of human pluripotent stem cell lines which may impact on the interpretation of data from radiobiological studies using these cells. Fundamental standards include obtaining cells from bona fide suppliers with suitable quality controls, screening cell lines to ensure absence of mycoplasma and authentication of cell lines by DNA profiling. For hESC and hiPSC lines, it is particularly important to recognise the significance of phenotypic and genetic stability and this paper will address approaches to reduce their impact. Quality assured banking of these two types of stem cell lines will facilitate reliable supply of quality controlled cells that can provide standardisation between laboratories and in the same laboratory over time.

Conclusions: hPSC lines could play an important role in future radiobiological research providing certain fundamental principles of good stem cell culture practice are adopted at the outset of such work.     

癌光啉—光照体外净化人白血病细胞的研究

作采用体外集落培养法研究了新卟啉类光敏剂癌光啉加光照对人白血病细胞系的体外选择性杀伤作用。加癌光啉１０μｇ／ｍｌ，体外３３７℃孵育１．５ｈ，照光４ｍｉｎ对Ｕ９３７、ＨＩＭｅｇ和ＨＬ６０等白血病细胞系和ＨＬ６０细胞与正常人ＭＮＣ混合细胞中的ＨＬ６０细胞集落的杀伤均大于４个对数级（ｌｏｇ），而对正常ＣＦＵ－ＧＭ的杀伤仅为０．６３±０．５９ｌｏｇ。说明癌光啉加光照确能选择性杀死白血病细胞，可用于自身骨     

铜蒸气激光照射下11种光敏剂杀伤强度的比较

目的　检测目前国内常用的和中国科学院化学研究所合成的共 11种光敏剂 ,比较它们对细胞杀伤效应的强弱 ,筛选出适于临床应用的新型光敏剂。方法　将乳腺癌MDAMB 5 4 3细胞接种于 96孔培养板 ,然后加入用RPMI16 4 0培养基配置的不同浓度的不同光敏剂 ,4h后照光 ,2 4h后用四唑盐比色法测定细胞存活率。以血卟啉衍生物 (HpD)作为标准对照。结果　在 5 10 6nm和 5 78 2nm的混合光照射下 ,竹红菌素A(HA)、竹红菌素B(HB)和 5 ,15 二芳基 2 ,3 二羟基卟吩 (DPCOH)比HpD有更强的杀伤效应。血啉甲醚 (HMME)的杀伤效应是HpD的 1 2左右。其他的一些化合物在此波长条件下杀伤效应较差 ,其中一些是因其溶解性不好而不能完全发挥其杀伤效能。结论　竹红菌素类光敏剂和DPCOH是很有应用开发前景的新型光敏剂