流式细胞术检测肺癌患者Th1／Th2细胞因子的免疫反应状态变化

目的：探讨流式细胞术检测肺癌患者Th1／Th2细胞因子的免疫反应状态变化。方法：做患者血清的细胞因子的ELISA分析。结果：肺癌不同病理组Th1型IFN-γ表达水平较正常对照组显著降低（P〈0．01）,不同病理组Th2型细胞因子IL-10表达水平较正常对照组升高（P〈0．05）。结论：了解肿瘤细胞中Th2类细胞因子的强势表达,对临床治疗具有重要指导意义。     

实验性矽肺大鼠肺组织中Th1/Th2型细胞因子的变化及意义

目的研究实验性矽肺大鼠在染尘后不同时间肺组织中Th1型细胞因子IFN-γ和Th2细胞因子IL-4的变化,初步探讨Th1/Th2型细胞因子与矽肺发病机制的关系。方法将30只健康雄性SD大鼠随机分为模型组18只、对照组12只。模型组以非暴露方式气管内一次性注入1 ml二氧化硅悬液（40 g·L^-1）建立大鼠矽肺模型,对照组气管内注入等量的灭菌生理盐水。分别在染尘后第1、7、14、21、28、35天各处死3只模型组和2只对照组大鼠,免疫组化SABC法观察肺组织中IFN-γ和IL-4的表达情况,用图像分析系统进行定量分析。结果与对照组相比,染尘后第1、7、14、21天,模型组大鼠肺组织中IFN-γ表达明显增强（P〈0.05）;IL-4的表达显著减少（P〈0.05）。染尘后第28、35天,模型组大鼠肺组织中IFN-γ表达与对照组没有显著性差异（P〉0.05）;而IL-4的表达量大量增加,明显高于对照组（P〈0.05）。结论矽肺发展早期以Th1型细胞因子发挥细胞免疫调节作用为主;后期Th2型细胞因子分泌增加,体液免疫增强。     

特应性皮炎患者单个核细胞Th1/Th2和IFN-γ及IL-4 mRNA表达

目的：探讨外周血单个核细胞Th1／Th2在特应性皮炎（AD）发病中的作用和IFN-γ及IL-4 mRNA表达的情况。方法：分别用流式细胞仪及RT—PCR方法检测97例AD患者（AD组）及20例健康人（对照组）外周血单个核细胞（PBMCs）Th1／Th2水平和IFN-γ、IL-4 mRNA表达。结果：AD组外周血Th1细胞百分比低于对照组（P〈0．01），而Th2百分比高于对照组（P〈0．01）；AD组PBMCs IFN-γ mRNA表达水平与对照组差异无统计学意义（P〉0．05），而IL-4 mRNA表达显著高于对照组（P〈0．01）。结论：AD患者体内存在Th1／Th2的失衡，并提示AD属Th2优势疾病。     

骨风宁胶囊对强直性脊柱炎Th1／Th2类细胞因子表达影响的研究

目的：观察骨风宁胶囊对强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,AS）患者体内Th1／Th2类细胞因子的影响。方法：19例AS患者随机分为两组,分别给予骨风宁（9例）和磺胺柳氮吡啶（SSZ）（10例）,采用ELISA法测定其治疗前后外周血单个核细胞（peripheral blood monono—clear cells,PBMC）中细胞因子干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-4（IL-4）的水平。结果：骨风宁治疗后AS患者PBMC中IFN-γ、IL-2的表达明显降低,与治疗前相比差异有显著性（P〈0．05）,IL-4的表达差异无显著性。SSZ治疗后AS患者PBMC中IFN-γ的表达水平明显降低（P〈0．05）,IL-4较治疗前明显升高（P〈0．05）,IL-2的表达无明显变化（P〉0．05）。结论：骨风宁胶囊能使IFN-γ、IL-2表达降低,促进AS患者的免疫应答从Th1型向Th2型转变,使病情缓解。SSZ可促使AS患者的免疫应答从Th1型向Th2型转变。     

白介素-18对肝癌裸鼠皮下移植瘤浸润的CD4+T细胞子集的影响

目的探讨白介素-18(IL-18)影响肝癌裸鼠皮下移植瘤浸润的T细胞子集变化的机制。方法以HepG2细胞在裸鼠皮下接种,形成人肝癌皮下移植瘤的同时,以不同剂量IL-18分为4组治疗,4组分别腹腔注射IL-18 0.75,1.00,1.25,0(模型组)μg(0.1 mL)/只,治疗4周,另设正常对照组。观察肿瘤的生长速度和瘤体大小的变化。4周后处死取肿瘤组织和脾组织,免疫磁珠阴选组织中CD4+T细胞,流式细胞术检测各组肿瘤组织及脾组织中IL-17+/IFN-γ-CD4+T(Th17细胞)、IL-17-/IFN-γ+CD4+T(Th1)和IL-17+/IFN-γ+CD4+T细胞的变化。结果 HepG2细胞株建立了裸鼠肝癌皮下移植瘤模型,IL-18抑制人肝癌皮下移植瘤的形成及转移,治疗时间越长剂量越大,抑制效果越明显;与正常对照组比较,肿瘤组织中Th17和IL-17+/IFN-γ+CD4+T细胞浸润数目增加,Th1细胞降低,与脾组织中一致,与正常对照组比较有显著差异(P<0.05)。给IL-18后,随着剂量的增加,Th1细胞增加,IL-17+/IFN-γ+CD4+T细胞和Th17细胞浸润数目降低,给药组与模型组比较有显著差异(P<0.05或0.01)。结论 IL-17+/IFN-γ+CD4+T细胞数目在裸鼠移植瘤及其脾组织中增加,可能是在肿瘤环境中,促进其向Th17细胞分化;IL-18通过诱导IFN-γ的生成促进Th1细胞的生成,呈正反馈效应抑制肿瘤的增殖和转移。     

免疫相关性全血细胞减少症患者骨髓Th细胞比例及功能变化

目的探讨免疫相关性全血细胞减少症（IRP）患者骨髓中辅助性T淋巴细胞（Th）亚群数量、功能改变及在发病中的作用。方法用流式细胞术同期对照研究16例正常对照组、15例初诊IRP组、24例再生障碍性贫血（AA）组、14例骨髓增生异常综合征（MDS）组骨髓Th细胞改变情况;RT-PCR方法检测10例正常人、25例初诊IRP患者、9例AA患者、9例MDS患者未经体外刺激的骨髓单个核细胞（BMMNC）中Th1细胞的代表因子IFN-γ、IL-2和Th2细胞的代表因子IL-4、IL-10的基因表达。结果（1）骨髓中Th1细胞、Th2细胞及Th1／Th2比值正常对照组为0．42％、0．24％和1．57;初诊IRP组为0．58％、1．95％和0．31;AA组为4．42％、0．41％和21．22;MDS组为0．44％、0．84％和0．96。IRP组Th1细胞与正常对照组及MDS组无显著差异（P〉0．05）,显著低于AA组（P〈0．01）;但IRP组Th2细胞显著高于正常对照组、AA组（P〈0．01）,与MDS组差异未达统计学意义（P=0．054）。IRP组骨髓中Th2细胞占优势,Th1／Th2比值显著低于正常对照组、MDS组及AA组（P〈0．01）。（2）与正常对照组比较,初诊IRP组Th2型细胞因子IL-4、IL-10 mRNA表达明显增高（P〈0．01）,而Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2mRNA表达无显著增高（P〉0．05）;AA组Th1型细胞因子显著增高（P〈0．01）,而Th2型无区别;MDS组未见细胞因子表达增高。结论IRP患者骨髓Th2细胞亚群增多,Th细胞平衡向Th2偏移,且Th2型细胞因子表达增高,细胞功能亢进,可能是IRP免疫发病环节之一,也表明IRP是一种不同于AA和MDS的全血细胞减少症。     

孟鲁斯特钠对毛细支气管炎患儿Th1/Th2细胞平衡的影响

目的 观察孟鲁司特钠对毛细支气管炎患儿Th1/Th2细胞平衡的影响.方法 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法分别测定30例毛细支气管炎患儿（毛支组）口服孟鲁司特钠片治疗前后及10例门诊健康体检婴幼儿（对照组）血清白介素（IL）-4及γ-干扰素（IFN-γ）水平.结果 毛支组患儿治疗前血清IL-4水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,而IFN-γ水平与对照组相似,差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗后血清IL-4水平及IL-4/IFN-γ比值较治疗前显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）,而血清IFN-γ水平与治疗前相似,差异无统计学意义（P〉0.05）.结论毛细支气管炎患儿Th1/Th2细胞处于失衡状态,白三烯受体拮抗剂--孟鲁司特钠可明显调节毛细支气管炎患儿Th1/Th2细胞失衡,预防喘息反复发作.     

支气管哮喘患者外周血Th1、Th2与Th17细胞表达水平及临床意义

目的 探讨外周血Th1、Th2与Th17细胞在支气管哮喘患者中的表达水平及临床意义.方法 选取2015年1月-2016年2月诊治的支气管哮喘40例,均为急性发作期,治疗1周后为缓解期,选取同期健康人40例作为对照组.检测支气管哮喘急性发作期、缓解期和对照组外周血Th1、Th2与Th17细胞水平,观察外周血中干扰素(IFN)-白介素(IL)-4及IL-17的表达情况.结果 支气管哮喘组急性发作期和缓解期Th1、Th1/Th2、IFN-γ的表达水平低于对照组,且急性发作期低于缓解期(P＜0.05);支气管哮喘组急性发作期和缓解期Th2、Th17、IL-4、IL-17表达水平高于对照组,且急性发作期高于缓解期(P＜0.05).结论 支气管哮喘患者外周血Th1、Th2与Th17细胞表达水平失衡,导致IFN-γ、IL-4及IL-17异常分泌,可能参与支气管哮喘的发病.     

辅助性T淋巴细胞因子在大肠癌手术治疗前后的作用

目的：检测大肠癌患者手术前后外周血辅助性T淋巴细胞因子的变化,探讨辅助性T淋巴细胞因子1/辅助性T淋巴细胞因子2（Th1/Th2）比值异常的意义。方法空腹抽取45例大肠癌患者（试验组）手术前、后的外周血和20例健康志愿者（对照组）外周血,运用ELISA法和流式细胞技术检测白介素-2（IL-2）、干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-4（IL-4）、白介素-6（IL-6）、白介素-10（ IL-10）及Th1/Th2比值并进行比较。结果试验组及不同Ducks分期患者术前IL-2、IFN-γ、TNF-α外周血浓度均显著低于对照组（ P ＜0膊．05）,IL-4、IL-6、IL-10外周血浓度均显著高于对照组（ P ＜0．05）,Th1/Th2比值较对照组差异有统计学意义（ P ＜0．05）;试验组Ducks分期Ⅲ、Ⅳ期患者术前IFN-γ显著高于Ⅱ期患者（ P ＜0．05）,IL-4显著低于Ⅱ期患者（ P ＜0．05）,Th1/Th2比值较II期患者术前差异有统计学意义（ P ＜0．05）。试验组术后IL-2、TNF-α和IFN-γ的水平较术前显著升高（ P ＜0．05）, IL-4、IL-6和IL-10水平较术前显著降低（ P ＜0．05）, Th1/Th2比值较术前差异有统计学意义（ P ＜0．05）。试验组术后IL-2、TNF-α和IFN-γ显著低于对照组（ P ＜0．05）,试验组Ⅲ、Ⅳ期患者术后Th1/Th2比值较试验组Ⅱ期患者及对照组均差异有统计学意义（ P ＜0．05）。结论大肠癌患者手术前外周血中Th1类细胞因子IL-2、IFN-γ、TNF-α水平显著下降,Th2类细胞因子IL-4、IL-6、 IL-10表达显著升高, Th1/Th2比值下降,机体免疫调定点向免疫耐受方向漂移,使机体对体内癌细胞免疫识别机免疫清除能力下降;大肠癌手术后Th1类细胞因子外周血水平显著升高,Th2类细胞因子外周血水平明显降低,Th1/Th2比值趋向正常状态,机体的免疫识别及免疫清除能力增强,机体的抗肿瘤机能有所恢复;大肠癌晚期患者较正常对照组和Ⅱ期大肠癌患者的Th1细胞免疫功能受损更严重。     

Th1／Th2／Th17 T／reg 对鉴别儿童支气管哮喘与单纯性肺炎的意义

目的：检测Th1（IFN-γ＋）、调节T细胞（CD2＋5Foxp3＋）、辅助T 细胞17（Th17）及细胞因子IL-2、IL -4、IL-17和IL-21在儿童支气管哮喘以及肺炎患儿外周血中的表达,探讨其在儿童支气管哮喘发病中的作用以及与肺炎鉴别的意义。方法收集哮喘患儿32例,肺炎患儿37例作为研究对象,选取同期体检的22例健康儿童为对照组。分离外周血单个核细胞,采用流式细胞术检测CD 4＋IFN-γ＋、CD 4＋CD 2＋5Foxp 3＋、CD4＋Th17＋细胞百分率。采用酶联免疫吸咐（ ELISA）法检测3组IL-2、IL-4、IL-17、IL-21表达水平。结果哮喘组患儿外周血CD4＋CD2＋5 Foxp3＋细胞占CD4＋T细胞的比率明显低于肺炎组及对照组;哮喘组患儿者外周血CD4＋IFN-γ＋细胞比例明显低于肺炎组和对照组;哮喘组患儿者外周血CD4＋Th17＋细胞所占比例高于肺炎组及对照组,差异均有统计学意义（ P ＜0*．05）。哮喘组患儿外周血IL-2的浓度明显低于对照组（ P ＜00．5）,肺炎组患儿外周血IL-2浓度明显低于对照组（ P ＜0．05）,但与哮喘组比较差异无统计学意义（ P ＞0．05）。哮喘组患儿外周血 IL4-、IL-17和IL-21的浓度明显低于肺炎组和对照组,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。结论 Th1／T2h ／Th17／Treg功能失调参与了儿童支气管哮喘的发病机制,临床上可以通过检测Th1／Th2／Th17／Treg相关细胞因子的变化评估儿童支气管哮喘病情并辅助与肺炎的鉴别。     

强直性脊柱炎外周血Th17细胞的检测及意义

目的 探讨Th17细胞在强直性脊柱炎(AS)患者外周血中的水平及意义.方法 取40例AS患者(分AS病情稳定组、活动组各20例)和健康人外周血单个核细胞(PBMC),免疫磁珠阴选CD4~+ T细胞,用或不用非特异性刺激剂(A-CD3、A-CD28),然后加PMA/Ion,经固定/透膜处理进行细胞内染色,流式细胞术(FCM)检测CD4~+T细胞内白细胞介素17(IL-17~+)/γ于扰素(IFN-γ~+)、IL-17~+/IL-6~+水平.结果 免疫磁珠阴选CD4~+T细胞纯度达90% 以上.AS病情活动组IL-17表达水平较病情稳定组和健康对照组显著增高(P<0.01).用A-CD3、A-CD28和IL-23刺激后,CD4~+ T细胞IL-17胞内表达水平较无刺激有一定的增加.AS患者CD4~+T细胞IFN-γ胞内表达水平呈现卜IL-17表达相似的特点.AS患者IL-17胞内表达水平与IFN-γ和IL-6无显著相关.结论 AS患者外周血CD4~+ T细胞胞内IL-17和IFN-γ高表达,提示分泌IL-17的Th17细胞和分泌IFN-γ的Th1细胞共同参与了AS发病过程.     

1型糖尿病并发血管病变患者Th1/Th2细胞亚群的研究

目的探讨1型糖尿病并发血管病变患者体内Th1/Th2细胞亚群的变化。方法用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测了15例1型糖尿病合并有下肢血管病变患者血清中Th1型细胞亚群分泌的细胞因子IFN-γ、TNF-α和Th2型细胞亚群分泌的细胞因子IL-4、IL-10的水平变化,20例无糖尿病早期合并症患者和20例健康志愿者做为对照组。结果1型糖尿病患者血清中Th1型细胞因子IFN-γ、TNF-α的水平显著高于对照组（P〈0.01）;Th2型细胞因子IL-4、IL-10的水平明显低于对照组（P〈0.01）;糖尿病并发血管病组Th1型细胞因子IFN-γ、TNF-α显著高于单纯糖尿病组（P〈0.05）,而Th2型细胞因子IL-4、IL-10的水平明显低于单纯糖尿病组（P〈0.05）。结论当1型糖尿病并发血管病变时,患者体内Th1/Th2细胞亚群发生了Th2-Th1的漂移改变。     

Th1/Th2型细胞因子与原因不明复发性流产的相关性研究

目的探讨Th1/Th2型细胞因子与原因不明复发性流产(URSA)发病及发病时间、次数的相关性。方法治疗组为150例URSA患者,给予主动免疫疗法治疗。对照组为100例正常早期妊娠要求人工流产妇女。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测治疗组治疗前后及对照组外周血清中IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4比值。结果治疗组治疗前IFN-γ、IL-4水平与对照组比较,有显著性差异(P<0.05)。治疗组治疗后IL-4、IFN-γ水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组治疗后较治疗前IL-4水平升高,IFN-γ水平下降显著,差异有统计学意义(P<0.05)。URSA妇女反复流产次数与IFN-γ/IL-4水平无关(P>0.05),流产时间与IFN-γ/IL-4水平有关(P<0.05)。结论正常妊娠表现为一种特殊的Th2现象,当Th1型细胞因子过度表达,Th2型细胞因子处于抑制状态时,将导致流产的发生。     

类风湿关节炎患者外周血Th1、Th2和Th17细胞亚群表达比例变化的特点

目的研究类风湿关节炎（rheumatoidarthritis,RA）患者外周血中Th1、Th2和Th17细胞亚群表达比例变化,分析RA免疫学发病机制。方法运用流式细胞术检测RA患者及对照组外周血单个核细胞（PBMCs）中Th1、Th2、Th17细胞表达比例。并用酶联免疫吸附法检测RA患者及对照组血清中IFN-γ、IL-4、IL-17的浓度。结果RA患者CD4＋T细胞明显高于健康对照组（P〈0．05）;活动期RA患者Th1、Th17及其分泌的细胞因子含量明显高于健康对照组（P〈0．05）;非活动期RA患者Th17也明显高于健康对照组（P〈0．05）。结论类风湿关节炎Th1、Th2、Th17平衡改变与其疾病的活动度有关,处于活动期Th1、Th17反应增强,非活动期Th1、Th2、Th17趋于平衡。通过调节Th1、Th2、Th17平衡,有可能为RA的治疗提供一条新思路。     

人促红素对溃疡性结肠炎小鼠血清Th17细胞因子表达的影响

目的:探讨人促红素(hEPO)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠血清Th17细胞因子的表达影响。方法:将30只BALB/C小鼠随机分为3组:正常组、DSS模型组和hEPO组,每组10只。葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠UC模型,观测小鼠疾病活动指数评分(DAI评分),第8 d处死小鼠取病变结肠病理切片和评分,采用Elisa法检测小鼠血清IL-6和IL-17A的含量。结果:各组小鼠DAI评分、血清IL-6和IL-17A含量、结肠病理评分均较正常组高;经hEPO治疗后小鼠的各指标均下降,与DSS组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:人促红素能有效减轻UC小鼠临床症状和肠道损伤,推测hEPO抑制了血清IL-6的表达和释放,从而减少Th17细胞分化生成IL-17A和达到治疗UC的目的。     

溃疡性结肠炎患者血清IL-10、IL-17水平及临床意义

目的研究溃疡性结肠炎（UC）患者血清白细胞介素（IL）-10、IL-17的含量,进一步了解其在溃疡性结肠炎发病中的作用。方法收集UC组45例及正常对照组20例的血清,应用血清酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清IL-10和IL-17。结果 UC组血清中IL-10含量中位数、四分位数间距和平均秩次均低于正常对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。UC组血清中IL-17含量中位数、四分位数间距和平均秩次均高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 IL-10在UC中可能是保护因子,而IL-17可能参与UC的发生与发展。     

特应性皮炎患者Th1/Th2细胞因子谱的检测及意义

目的：检测特应性皮炎（atopic dermatitis,AD）患者Th1/Th2细胞因子谱的变化,探讨其在AD发病中的作用。方法：采用Flowcytomix流式检测技术对35例青年成人期特应性皮炎患者血清中多种Thl/Th2细胞因子进行芯片式集成测定,同时以30名正常人作为对照组。结果：与对照组比较,特应性皮炎患者组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）水平显著降低（P〈0.05）;Th1型细胞因子白介素-1α（IL-1α）、IL-2及干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平显著降低;Th2型细胞因子白介素-4（IL-4）、IL-5、IL-6、IL-10水平显著升高。结论：Th1/Th2细胞因子网络失衡,在AD的免疫发病机制中发挥重要作用。     

肿瘤负荷对胃癌患者免疫功能的影响

目的探讨胃癌患者外周血T淋巴细胞、单核细胞的表面分子变化及Th1／Th2的漂移,并分析肿瘤负荷对胃癌患者的免疫功能的影响。方法选取胃癌患者30例及同期体检的健康志愿者30例,采用流式细胞仪检测和分析外周血T淋巴细胞、单核细胞的表面分子及Th1／Th2细胞因子的变化。结果T淋巴细胞中CD3^＋、CD4^＋28^＋／CD3^＋、CD8^＋28^＋／CD3^＋水平均低于对照组（P〈0．01）;CD8^＋3^＋,CD28^-较正常组升高（P〈0．01）;单核细胞的表面分子CD40与正常对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）,但是CD80与CD86均相对于正常水平降低（P〈0．01）;Th1细胞因子（IL-2、IFN-γ）降低（P〈0．01）;Th2细胞因子（IL-4、IL-10）的表达较正常组升高（P〈0．01）。结论胃癌患者的免疫功能受损,胃癌的发病可能与免疫功能低下有一定关系;Th1／Th2失衡,表明肿瘤细胞出现免疫逃避与胃癌的发展可能也有关系。     

Th17细胞相关细胞因子在结直肠癌患者体内的分布及临床意义

目的 探讨结直肠癌(CRC)患者体内Th17细胞相关细胞因子IL-17A、IL-17F、IL-23的表达情况及其临床意义.方法 选择30例CRC患者和15名健康者为对照,采用实时荧光定量PCR法检测肿瘤组织和正常瘤旁组织中细胞因子IL-17A、IL-17F、IL-23 mRNA表达水平,ELISA法检测外周血IL-17A、IL-23的水平;并作临床相关性分析.结果 肿瘤组织标本中IL-17A的mRNA、IL-23的mRNA相对表达量高于对照组瘤旁组织中的mRNA相对表达量,差异皆有统计学意义(P＜0.05);IL-17F的mRNA相对表达量低于对照组中的mRNA相对表达量,但两者差异无统计学意义(P＞0.05);外周血IL-17、IL-23水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).它们与患者的性别、年龄、肿瘤大小及肿瘤发生部位均无关(P＞0.05),而与有无淋巴结转移及临床分期有关(P＜0.05).结论 CRC患者体内存在着细胞因子IL-17A、IL-23的高表达,提示Th17细胞可能参与了结直肠癌的发生发展.