4种药用石斛对增强小鼠免疫功能效果的比较研究

目的 比较铁皮石斛、金钗石斛、鼓槌石斛和流苏石斛4种药用石斛对增强小鼠免疫功能的效果。方法 4种石斛以0.25,0.50 g·kg^-1连续给予正常小鼠30 d后,测定小鼠的T淋巴细胞增殖能力、巨噬细胞吞噬率和吞噬指数;4种石斛以0.25,0.50 g·kg^-1连续给予受环磷酰胺免疫抑制的小鼠30 d后,显微镜下用细胞计数法计数免疫抑制小鼠血液中的白细胞数、淋巴细胞数和中性粒细胞数。结果 4种石斛0.25,0.50 g·kg^-1剂量均能显著增强T淋巴细胞增殖能力,并显著增加血液中的淋巴细胞数和巨噬细胞吞噬指数;铁皮石斛0.25,0.50 g·kg^-1剂量均能显著提高小鼠巨噬细胞吞噬率、血液中的白细胞数、中性粒细胞数;鼓槌石斛和流苏石斛0.50 g·kg^-1剂量能显著提高小鼠巨噬细胞吞噬率和血液中的白细胞数;金钗石斛0.50 g·kg^-1剂量能显著升高血液中的白细胞数。结论 4种石斛均能增强小鼠免疫功能,但铁皮石斛在增强巨噬细胞吞噬能力及提高免疫抑制小鼠血液中的中性粒细胞数方面效果优于另外3种石斛。     

商陆皂苷甲对细胞间粘附的影响商陆皂苷甲对细胞间粘附的影响

目的研究商陆皂苷甲(EsA)对细胞间粘附的影响，并观察粘附分子ICAM-1和CD18 mRNA的表达水平。方法用血细胞计数仪计数的方法考察在脂多糖（LPS）诱导下，EsA对中性粒细胞与内皮细胞间粘附的影响。用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）的方法测定内皮细胞ICAM-1 mRNA和中性粒细胞CD18 mRNA的表达水平。结果EsA在3～12×10^-6　μmol·L^-1能降低LPS作用下中性粒细胞与内皮细胞间高水平的粘附率，且能降低LPS诱导下内皮细胞ICAM-1 mRNA和中性粒细胞CD18 mRNA的表达。结论EsA能抑制LPS作用下中性粒细胞与内皮细胞间的粘附可能是其抗炎机制之一，降低粘附分子的表达可能是其影响细胞间粘附的重要作用机制。     

商陆皂苷甲对大鼠Heymann肾炎的治疗作用及对细胞因子的影响

目的： 商陆皂苷甲(EsA)对大鼠Heymann肾炎(passive Heymann nephritis,PHN)的治疗作用及机理。方法： 大鼠sc Fx1A抗原的抗体制成自身免疫性肾小球肾炎,EsA 5,10和20 mg.kg^-1.d^-1 ip,连续14 d。结果： EsA可以显著减少肾炎大鼠尿蛋白的产生,电镜和免疫荧光检查发现EsA治疗后肾炎大鼠病理情况明显好转。EsA治疗对血清中炎性细胞因子肿瘤坏死因子（TNF）、白细胞介素1（IL-1）和白细胞介素6（IL-6）的产生具有显著的抑制作用。结论： EsA对大鼠Heymann肾炎具有显著治疗作用,抑制细胞因子产生可能参与EsA抗炎机制。     

商陆皂甙甲的抗炎作用

商陆皂甙甲(EsA)对多种急,慢性炎症模型有明显抑制作用,5～20mg·kg~(-1)EsAip明显抑制乙酸提高小鼠腹腔毛细血管通透性作用,也显著抑制二甲笨引起小鼠耳壳肿胀,5～30 mg·kg~(-1)EsA ip对大鼠足跖注射角叉菜胶引起肿胀有显著的抑制作用,作用持续5h以上,5mg·kg~(-1)·d~(-1)EsA ip连续7d,显示很强的抑制肉茅增生作用,且显著减轻胸腺重量,但对肾上腺重量无明显影响.EsA对摘除肾上腺的大鼠足跖注射角叉菜胶仍有明显抑制作用,提示其抗炎作用不通过垂体—肾上腺皮质系统。     

商陆多糖Ⅱ体外对小鼠脾细胞增殖及产生集落刺激因子的影响

用[³H]TdR参入法检测小鼠脾细胞增殖能力及产生集落刺激因子(colony stimulating factor. CSF)含量.证明商陆多糖Ⅱ(PAP-Ⅱ)在31～500 μg·m^-1范围内显著促进小鼠稗细胞增殖。PAP-Ⅱ,31～125 μg·ml^-1可剂量依赖性地促进Con A(1,2.8μg·ml^-1),LPS(3,10,30 μg·ml^-1)诱导的淋巴细胞细咆增殖,随着PAP-Ⅱ剂量加大,对丝裂原诱导的淋巴细胞增殖反呈抑制作用。PAP-Ⅱ。10～500μg·ml^-1呈剂量及时间依赖性地促进脾细胞产生CSF,其最适剂量为100 μg·ml^-1。最佳时间为5 d,提示PAP-Ⅱ能增强免疫及促进造血功能。     

银杏内酯B对脂多糖刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNFα生成及大鼠胸腔多形核白细胞NF-κB活化的影响

目的研究银杏内酯B对脂多糖刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNFα生成及大鼠胸腔多形核白细胞NF-κB活化的影响。方法用L929细胞结晶紫染色法检测TNFα的含量，用电泳迁移率改变检测法检测NF-κB的结合活性。结果1和10 μmol·L^-1银杏内酯B能够显著抑制LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNFα的生成，其IC₅₀为0.26 μmol·L^-1；1 mg·L^-1 LPS和1 nmol·L^-1 PAF均可活化大鼠胸腔多形核白细胞NF-κB；银杏内酯B能够抑制LPS或 PAF刺激的NF-κB活化。结论银杏内酯B能够抑制LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNFα生成及大鼠胸腔多形核白细胞NF-κB的活化。PAF参与LPS激活NF-κB的过程。     

商陆多糖Ⅰ联合白细胞介素2对小鼠脾细胞杀瘤活性的影响

商陆多糖Ⅰ(PAP-I),0.3～3μg·ml^-1和小鼠脾细胞培养3～5d可显著增强其杀伤P815肿瘤细胞活性及IL-2(250～500IU·ml^-1)诱导的LAK细胞活性,最适浓度为1μg·ml^-1。PAP-I及IL-2和脾细胞培养的上清液对P815肿瘤细胞无细胞毒作用,但能增强脾细胞及LAK细胞杀瘤活性。PAP-I,5,10及50mg·kg-1,ip可增强脾细胞杀伤P₈₁₅和L₉₂₉细胞的活性及IL-2诱导的LAK细胞活性。     

银杏内酯B对血小板活化因子引起的巨噬细胞趋化及细胞骨架改变的影响

目的考察银杏内酯B(ginkgolide B，BN52021)对血小板活化因子(PAF)引起的小鼠腹腔巨噬细胞趋化反应和丝状肌动蛋白(F-actin)聚合作用的影响。方法Boyden小室法检测化合物对巨噬细胞趋化的影响；流式细胞术检测特异性标记的巨噬细胞中F-actin的变化。结果PAF可显著刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生趋化效应，PAF受体拮抗剂BN52021(0.01 nmol·L^-1～0.1 μmol·L^-1)可明显抑制该作用。此外，在含钙缓冲液中，BN52021可显著抑制PAF引起的丝状肌动蛋白聚合。结论BN52021可能通过抑制丝状肌动蛋白的聚合作用，从而抑制PAF引起的巨噬细胞趋化，并且这种作用是钙依赖性的。表明BN52021的抗炎作用途径之一是抑制PAF诱导的趋化作用。     

GM-CSF及其动员的骨髓源性细胞在创伤愈合中的作用研究

目的 研究粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF）及其动员的骨髓源性细胞促进创伤愈合的作用途径。方法 采用正常小鼠及化疗、放疗引起的骨髓抑制小鼠模型,背部形成创面,分别给予皮下注射高、低剂量（50,17 μg·kg^-1）GM-CSF,测量创伤愈合程度;采用MTT观察不同浓度下猪髋动脉内皮细胞（pig iliac endothelium cells,PIECs）增殖状况;采用Matrigel基质胶培养人脐静脉内皮细胞和小鼠动脉环,并给予100 ng·mL^-1 GM-CSF,观察其微管结构形成情况。结果 在小鼠创伤愈合模型中,高剂量GM-CSF（50 μg·kg^-1）组创面修复较低剂量更为明显;在小鼠骨髓抑制模型中,低剂量GM-CSF促进骨髓抑制小鼠的创伤愈合;GM-CSF在0.01~781.25 ng·mL^-1明显促进PIECs的增殖;GM-CSF 100 ng·mL^-1明显促进人脐静脉内皮细胞和动脉环周围微管形成。结论 GM-CSF通过动员骨髓源性细胞和作用于内皮细胞促进创伤愈合。     

高寒乳白栓菌多糖免疫调节及体外抗氧化活性研究

目的 观察高寒乳白栓菌多糖（Alpine-TLBP）的免疫调节功能及体外抗氧化活性。方法 以Alpine-TLBP（50、100、200 mg/kg）口服给药,测定正常小鼠胸腺指数、脾脏指数和腹腔巨噬细胞吞噬功能水平;水杨酸捕捉法测定Alpine-TLBP对·OH 的清除能力;邻苯三酚自氧化法测定Alpine-TLBP 对O₂-·的清除能力。结果 在50～200 mg/L Alpine-TLBP 能显著增加正常小鼠的胸腺和脾脏的质量,提高脏器指数,且明显增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数;且在50～500 μg/mL具有较强的清除·OH 和O₂-·的能力,IC₅₀ 分别为142.2 μg/mL 和203.2 μg/mL,呈剂量相关性。结论 Alpine-TLBP 能增强正常小鼠的免疫功能,且具有较强的清除·OH 和O₂-·的能力。     

Effects of esculentoside A on production of interleukin-1, 2, and prostaglandin E2

AIM: To investigate the influence of esculentoside A (EsA) on immunological function and its mechanism of antiinflammation. METHODS: Interleukin-1 production was measured by thymocyte co-stimulating assay; the radioactivity of [^3H]arachidonic acid (AA) was used to evaluate the release of AA; prostaglandin E2 production was measured with radioimmunoassay (RIA); IL-2 and IFN-γ were detected by ELISA method. RESULTS: EsA (3-12μmol/L)could potently inhibit the production of IL-1 and PGE2 from both silent and LPS induced macrophages.EsA had no significant effect on the release of AA from murine macrophages. EsA could inhibit the production of IL-2 from murine lymphocytes induced by ConA, but not affect the production from silent lymphocytes. EsA showed no effect on the production of IFN-γ from both silent and ConA induced lymphocytes. CONCLUSION:EsA could affect the immunological function through inhibiting the production of IL-2 from activated splenocytes and the inhibition of production of IL- 1 and PGE2 might be one of the anti-inflammation mechanisms of EsA.     

水飞蓟宾对小鼠肝脏炎症损伤和肿瘤坏死因子的产生及活性的影响

建立了小鼠肝损伤模型及体内外肿瘤坏死因子(TNF)诱生的方法,研究水飞蓟宾(SB)对肝脏炎症损伤、TNF产生及其生物活性的影响。结果表明∶SB在体内外均可显著抑制脂多糖(LPS)诱导TNF产生;在体外能抑制TNF对肝细胞系GSG-7701和成纤维细胞系L929的细胞毒作用;在体内对LPS诱导的痤疮丙酸杆菌致敏的小鼠肝脏炎症损伤有保护作用。提示SB的保肝作用机理与其抑制TNF的产生和活性有关。     

白细胞介素类及白三烯类等炎性介质对肿瘤坏死因子α产生的影响

目的：研究白细胞介素类及白三烯类等炎性介质对小鼠腹腔巨噬细胞生成及分泌肿瘤坏死因子α(TNFα)的影响。方法：用L929作为靶细胞的结晶紫染色法测定巨噬细胞培养上清液及胞溶部分TNFα的含量。结果：重组鼠白细胞介素-1β(rmIL-1β)和重组人白细胞介素-8(rhIL-8)均能促进巨噬细胞产生TNFα,其中rhIL-8有很好的剂量相关性,对巨噬细胞胞溶部分的TNFα无影响;重组人白细胞介素-6(rhIL-6),白三烯B₄(LTB₄),白三烯C₄(LTC₄)及白三烯D₄(LTD₄)均不能促进巨噬细胞生成及分泌TNFα。结论：rhIL-8和rmIL-1β能促进小鼠腹腔巨噬细胞生成TNFα。rhIL-6, LTB₄, LTC₄和LTD₄对TNFα生成无影响。     

5种炎性刺激剂对小鼠腹腔巨噬细胞生成肿瘤坏死因子的影响

肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）主要由单核巨噬细胞分泌,近年研究表明,它在炎症中起重要作用,如诱发皮肤炎症反应,引起过敏性变态反应等。慢性炎症性疾病类风湿性关节炎与ＴＮＦα关系密切［１,２］。ＴＮＦα对血管内皮细胞、白细胞、单核巨噬细胞、破骨细胞、滑膜细胞等具广泛的调节效应［３］。ＴＮＦα能直接诱导中性多核白细胞释放嗜天青颗粒、氧自由基和溶酶体酶,既有杀伤病原体的有利作用,又有引起炎症部位组织细胞损伤的有害作用。本文研究了５种外源性刺激剂脂多糖（ＬＰＳ）、佛波脂（ＰＭＡ）、钙离子载体Ａ３２１８７、甲…     

Gn类化合物对小鼠腹腔巨噬细胞产生肿瘤坏死因子α的影响

目的　研究异单叶大黄素(isorhapotigenin, Gn-1), 白藜芦醇(resveratrol, Gn-2)和二苯乙烯低聚体(stilbene oligopolymer, Gn-3)等3种Gn类化合物对小鼠腹腔巨噬细胞产生肿瘤坏死因子α(TNF_α)的影响。 方法　用L929作为靶细胞的结晶紫染色法测定Gn类化合物对巨噬细胞经LPS或重组人白细胞介素-8(rhIL-8)产生TNF_α的影响。结果　Gn-1,Gn-2和Gn-3均能剂量依赖性地抑制巨噬细胞经LPS刺激产生的TNF_α,Gn-1和Gn-3均可剂量依赖性地抑制巨噬细胞经rhIL-8刺激产生TNF_α。结论　3种Gn类化合物可抑制小鼠腹腔巨噬细胞生成TNF_α,可能是它们抗炎作用的机制之一。     

关附甲素对实验性心律失常和心肌收缩性的影响

关附甲素(GFA)浓度为20～3oμg·ml^-1时,可以降低无K⁺高Ca²⁺液灌流离体大鼠心脏诱发VT和VF的发生率。清醒大鼠ivGFA2.5～10mg·kg^-1,可依剂量性显著增加北草乌头碱引起室性早搏的用量。清醒犬ivGFA10mg·kg^-1,可逆转哇巴因引起VT,并对麻醉犬(10～20mg·kg^-1),由ACh诱发房颤有明显的抑制作用。GFA10mg·kg^-1iv可明显减慢麻醉犬或清醒犬心率,对心肌收缩性(V_max和V_pm)只有轻度而短暂的抑制,但对左室收缩压,心搏量和心输出量无明显影响。     

胶束电动毛细管色谱法分离和测定几种大黄含量

建立了胶束电动毛细管色谱法分离和测定几种大黄中大黄素、芦荟大黄素、大黄酸含量的测定方法。缓冲液为含0.025mol·L^-1十二烷基磺酸钠(简称SDS)的0.025mol,L-13-环己氨基-1-丙烷磺酸(简称CAPS)-乙腈(100:10),pH0.96。线性范围:芦荟大黄素为0.0025～0.0175mg·ml^-1(r=0.9999),大黄素为0.005～0.05mg·ml^-1(r=0.9999),大黄酸为0.005～0.035mg·ml^-1(r=0.9996)。回收率:芦荟大黄素为98.2%～101.8%,大黄素99.9%～101.9%,大黄酸99.2/～101.2%。此法简便、快速、重现性好。     

灵芝多糖肽对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮产生的影响

目的　研究灵芝多糖肽 (GLPP)对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮产生的影响并探讨其作用机制。方法　以Griess法 ,观察GLPP对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮(NO)产生的影响 ;以免疫组化法检测诱导型一氧化氮合成酶 (iNOS)的表达 ,观察GLPP对iNOS的影响。结果　GLPP(2 5～ 2 0 0mg·kg-1)灌胃给药 5d或体外给药 (3 12 5～ 2 0 0mg·L-1)均可促进巨噬细胞NO释放 ,但对LPS刺激NO的释放影响不大 ;GLPP(10 0mg·kg-1)灌胃给药 5d或体外给药 (10mg·L-1)均可使巨噬细胞iNOS含量增加。结论　GLPP可增加小鼠腹腔巨噬细胞NO产生 ,其机制可能与其促进巨噬细胞iNOS合成有关。     

四氢原小檗碱类药物对培养大鼠单个心肌细胞内游离Ca2+的影响

用Fura-2/AM技术和AR-CM-MIC阳离子测定系统,直接测定了四氢小檗碱(tetrahy-droberberine,THB)、左旋四氢巴马汀(l-tetrahydropalmatine,THP)和左旋千金藤立定(l-stepholidine,SPO)对培养大鼠单个心室肌细胞内游离钙([Ca²⁺]i)的影响,并与维拉帕米(Ver)做了比较。结果显示,THB,THP,SPD浓度为10～100μmol·L^-1时,均可使静息[Ca²⁺]i轻度升高,河豚毒素不能抑制之;浓度为1～100μmol·L^-1时,可明显抑制高K+引起的[Ca²⁺]i增高;30μmol·L^-1对胞外高Ca²⁺和去甲肾上腺素引起的[Ca²⁺]i增高也有明显的抑制作用,但均较Ver的抑制作用为弱;THPB对哇巴因引起的[ca²⁺]i升高无明显抑制作用。结果提示,THB,THP,SPD在抑制电压依赖性钙通道从而影响细胞膜[ca²⁺]i内流方面与Ver相似,但比Ver弱。