西红花酸对单侧输尿管大鼠肾组织结缔组织生长因子表达的影响

目的：研究西红花酸对单侧输尿管结扎（UUO）大鼠肾组织结缔组织生长因子（CTGF）表达及肾间质纤维化的影响。方法：采用UUO大鼠模型，将大鼠随机分为3组：假手术组（SHAM组）、模型组（UUO组）、西红花酸组（C组）。SHAM组和UUO组给予标准资料30g／d，C组于术前3d至术后9d每天分别给予西红花酸50rag／kg.d灌胃，第9天处死各组大鼠。免疫组化法检测各组肾组织CTGF；HE、Masson染色评定各组肾小管间质损害程度。结果：UUO组CTGF的表达及肾小管间质损伤指数明显高于SHAM组（P〈0.05），而C组上述指标明显低于UUO组（P〈0.05）。结论：西红花酸可以一直肾纤维化CTGF表达，从而遏制肾纤维化的进展。     

维甲酸对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用

目的 探讨维甲酸（at-RA）对单侧输尿管梗阻大鼠（UUO）肾间质纤维化的影响.方法将26只大鼠随机分为假手术组、模型组、给药组,结扎单侧输尿管造成梗阻性肾病模型.术后9天处死大鼠,取梗阻侧肾做组织学检查,HE染色,用免疫组化方法检测肾组织中结缔组织生长因子（CTGF）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）.结果维甲酸显著减轻肾小管间质损害,治疗组肾间质炎细胞浸润和肾间质CTGF、α-SMA表达显著低于对照组.结论维甲酸减轻UUO模型大鼠肾小管间质损害和炎细胞浸润,降低CTGF表达,抑制α-SMA表达,从而减轻肾间质纤维化.     

α平滑肌肌动蛋白和转化生长因子β1在小管间质纤维化模型大鼠肾组织中的表达

目的 探讨肾小管上皮细胞－肌纤维母细胞表型转化在肾间质纤维化形成中的作用。方法 制备大鼠单输尿管梗阻模型，在光学显微镜下观察大鼠肾组织病理变化，采用免疫组化法检测肾组织中α平滑肌肌动蛋白（α－SMA）和转化生长因子β1（TGF－β1）的表达，并采用计算机图像软件进行定量分析。结果 肾脏病理检查显示形态学改变符合肾小管间质纤维化的病理变化；在输尿管梗阻14、28d后肾组织α－SMA和TGF－β1表达较对照组增加（P＜0.05）。结论 α－SMA可作为肾小管上皮细胞－肌纤维母细胞表型转化的重要标志物，TGF－β1可能参与了肾小管上皮细胞－肌纤维母细胞表型转化，且是进一步导致肾间质纤维化的重要因素。     

丹参红景天合剂对大鼠肾间质纤维化CTGF表达的影响

目的：观察丹参红景天合剂对大鼠肾间质纤维化结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响，验证其对大鼠肾间质纤维化的防治和对肾的保护作用，为临床用药提供依据。方法：采用大鼠单侧输尿管结扎（UUO）致肾间质纤维化模型。将雄性Wistar大鼠30只随机分为假手术组（打开腹腔后分离左侧输尿管，不结扎即关闭腹腔，正常饮水饮食）、模型组（打开腹腔后分离左侧输尿管并结扎，关闭腹腔，具体方法见文献，正常饮水饮食）和丹参红景天合剂组[造模同模型组，并于造模前1d开始灌胃给予丹参红景天合剂，剂量为10ml／（kg·d）]，每组10只，术后第9天处死大鼠，经免疫组织化学、Western蛋白印迹分析方法观察各组CTGF的表达部位及蛋白表达水平。用免疫组化半定量测定α—SMA的表达水平。用Masson染色评定各组肾小管间质损害程度。结果：模型组与假手术组的CTGF、α—SMA蛋白表达及肾小管间质损伤指数比较有显著性差异（P〈0．01），丹参红景天合剂组与模型组比较具有显著性差异（P〈0．01）。把各组CTGF蛋白水平与相应的纤维化指标进行相关性分析，结果显示，CTGF与α—SMA（r=0．985，P〈0．051、肾小管间质损伤指数（r=0．867，P〈0．05）均呈正相关。结论：丹参红景天合剂可以通过下调CTGF而减轻肾间质纤维化。     

苦参碱对肾小管间质CTGF和α-SMA影响的实验研究

目的观察苦参碱对UUO大鼠模型肾小管间质CTGF和α-SMA表达水平的影响,初步探讨其对小管间质纤维化的作用机制.方法实验采用UUO肾间质纤维化模型作为研究模型,分为正常组、假UUO组、手术组（UUO组）、福辛普利治疗组（F组）、苦参碱大剂量治疗组（苦大组）和苦参碱小剂量治疗组（苦小组）.运用免疫组化技术半定量分析实验第7,14天各组的CTGF和α-SMA表达水平.结果 UUO组和治疗组的CTGF和α-SMA的表达水平在UUO模型建立后的第7,14天均显著高于正常组和假UUO组（ P ＜0.05）,但3个治疗组的表达水平明显低于UUO组（ P ＜0.05）;CTGF和α-SMA在苦大组与F组间无统计学差异（ P ＞0.05）.结论苦参碱可以降低肾小管间质CTGF和α-SMA的表达水平,延缓肾小管间质纤维化的进程.     

罗格列酮对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用

目的 探讨罗格列酮（RSG）对单侧输尿管梗阻大鼠（UUO）肾间质纤维化的作用。方法 将24只大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组。对治疗组、模型组行单侧输尿管结扎术建立输尿管梗阻的动物模型。术后14天处死各组大鼠，取梗阻侧肾组织做HE和Masson染色及用免疫组化方法检测结缔组织生长因子（CT-GF）和α-平滑肌肌动蛋白（d—SMA）在肾组织的表达水平。结果罗格列酮可显著下调CTGF和α—SMA的表达，改善了肾脏病理改变。结论 罗格列酮对UUO所致的肾间质纤维化的形成有抑制作用。     

雌激素对实验性肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的探讨雌激素在单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化模型中对肾小管上皮细胞表型转化的影响。方法雌性SD大鼠30只，随机分为4组：对照组；生理雌激素组（单纯UUO）；低雌激素组（UUO＋OVX）；高雌激素组（UUO＋E2）。21d后处死各组大鼠，用光镜观察梗阻肾组织病理变化。并用免疫组化和RT-PCK方法检测肾组织α-SMA蛋白和mRNA的表迭。结果生理雌激素组出现肾小管间质纤维化改变，其肾组织α-SMA表迭上调，与对照组相比有统计学意义（P〈O．01）；和生理雌激素组相比，低雌激素组纤维化病变加重，α-SMA表达明显增多（P〈O．05）；而高雌激素组则病变减轻，上述表达减少（均为P〈O．05）。结论雌激素可能通过抑制UUO大鼠肾小管上皮细胞裹型转化而发挥延缓肾间质纤维化的作用。     

缺氧诱导因子-1α在实验性大鼠肾间质纤维化过程中的作用

目的：观察单侧输尿管梗阻（ulilateral ureteral obstruction,UUO）大鼠模型。肾组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达,探讨HIF-1α表达水平与肾小管间质纤维化的关系。方法：40只雌性SD大鼠随机分为2组,假手术组,UUO组（每组20只）。制备UUO大鼠模型,术后第7天、第14天处死大鼠,肾组织行HE和Masson染色,免疫组织化学和实时荧光定量PCR（RT—PCR）检测HIF-1α,Ⅰ型胶原（collagenⅠ,ColⅠ）及α-平滑肌肌动蛋白（α—smooth muscle actin,α—SMA）在肾组织中的表达。结果：假手术组与UUO组各时间点肾小管间质纤维化评分比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。术后HIF-lαmRNA水平随梗阻时间延长而递增。UU0组HIF-1α蛋白表达量随着肾间质损害加重而增加,HIF-1α蛋白主要分布在肾小管,其中以近曲小管表达最明显。HIF—1α表达水平与肾小管间质纤维化评分,α-SMA和ColⅠ的表达水平均存在正相关（R值分别为0．71,0．68,0．82,P均〈0．05）。结论：HIF-1α在肾小管上皮细胞内高表达可能参与了肾间质纤维化发生和发展的过程。     

UUO模型大鼠肾间质纤维化动态进展及α-SMA、TGF-β1和VDR表达变化

目的 观察单侧输尿管梗阻（UUO）模型大鼠肾小管间质纤维化动态进展,研究该病理过程中肾脏纤维化相关蛋白表达的变化.方法 32只清洁级SD大鼠随机分为假手术组（n=16）和UUO模型组（模型组,n=16）.两组大鼠分别于术后（模型组建模后）第2、5、9、14天分批（n=4）处死,留取手术侧（模型组梗阻侧）肾脏组织.分别采用HE和Masson染色、免疫组织化学染色及Western blotting等方法,评价肾小管间质纤维化损伤程度并检测肾脏组织α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、纤维连接蛋白（FN）、维生素D受体（VDR）及转化生长因子β1（TGF-β1）等相关蛋白的表达.结果 肾脏组织形态学观察显示,随着输尿管梗阻时间的延长,肾小管间质纤维化程度逐步加重.免疫组织化学染色显示,模型组大鼠建模后各时间点肾间质α-SMA和FN阳性面积百分比均显著高于假手术组（P＜0.05）,且随着梗阻时间的延长逐渐升高,至建模后第14天时达到高峰.Western blotting分析表明,模型组大鼠建模后各时间点α-SMA和TGF-β1相对表达量均显著高于假手术组（P＜0.05）,而VDR相对表达量显著低于假手术组（P＜0.05）;建模后第2天,模型组大鼠肾脏组织α-SMA相对表达量已显著增加;建模后第14天,模型组α-SMA和TGF-β1相对表达量分别增高至假手术组的12.7倍和8.8倍,而VDR相对表达量下降至假手术组的3%.结论 UUO模型大鼠建模后第14天可出现显著的肾间质纤维化;建模早期肾间质中α-SMA表达增加提示肾间质成纤维细胞的活化;VDR表达的进行性减少提示其与肾间质纤维化有关.     

三七总皂甙对单侧输尿管梗阻后大鼠肾间质纤维化的防治作用

目的　研究三七总皂甙对单侧输尿管梗阻后大鼠肾间质纤维化过程的防治作用。方法　随机分为假手术组、手术组和三七总皂甙治疗组,建立单侧输尿管梗阻肾间质纤维化模型,分别于造模后第3、7、14、2 1d处死大鼠,留取梗阻侧肾脏制备病理切片。光镜观察肾间质病理形态学变化;免疫组织化学染色法检测增殖细胞核抗原(PCNA)和α-平滑肌肌动蛋白(α- SMA)表达。结果　手术组呈进行性肾间质纤维化,肾小管上皮细胞及间质α-SMA表达明显增加。三七总皂甙治疗组肾间质纤维化减轻,肾小管上皮细胞PCNA表达明显增加,α- SMA表达明显减少,间质PCNA、α- SMA表达明显减少(P<0 .0 5 )。结论　三七总皂甙对单侧输尿管梗阻后的肾间质纤维化有抑制作用,可阻断肾小管上皮细胞-肌纤维母细胞的转分化。     

寡聚化α-突触核蛋白在不同年龄段食蟹猴消化道中的表达

目的 研究寡聚化α-突触核蛋白(oligomer-α-synuclein,oligo-α-Syn)在不同年龄段食蟹猴消化道中的表达差异.方法 Western blotting和ELISA方法检测oligo-α-Syn在不同年龄段食蟹猴消化道中的表达.结果 在老年食蟹猴的食管、胃底、十二指肠、空肠、回肠和结肠中,寡聚化α-Syn浓度较青年与中年猴显著增加,且差异有统计学意义(P＜0.01).结论 食蟹猴消化道的各部位中α-Syn寡聚体表达具有增龄性变化.     

原子力显微镜检测α-突触核蛋白转基因鼠线粒体微观结构的变化

目的 使用原子力显微镜检测α-突触核蛋白（α-synuclein,α-syn）转基因小鼠模型中,皮质线粒体表面微观结构的变化。方法 提取野生型和转基因小鼠皮质细胞线粒体,使用共聚焦显微镜检测其膜电势变化,使用原子力显微镜的敲击模式检测线粒体膜表面的微观结构。结果 JC-1染色法检测线粒体膜电势结果显示,转基因小鼠线粒体膜电势与野生组相比降低20.4%,差异有统计学意义（P<0.01）;原子力显微镜观察结果显示,转基因小鼠线粒体长度与野生组相比增加,表面光滑度减低,线粒体膜孔增多（P<0.05）。结论 α-Syn的转基因小鼠线粒体膜电势减低,线粒体膜完整性受到破坏。在原子力显微镜敲击模式下检测离体线粒体,能反映出转基因小鼠线粒体膜表面微观结构的变化。     

寡聚化和磷酸化α-突触核蛋白在不同年龄段食蟹猴脑不同部位突触小体中的表达分布

目的 研究寡聚化(oligomer-α-synuclein,oligo-α-Syn)和磷酸化α-突触核蛋白(phosphorylated-α-Synuclein,p-α-Syn)在不同年龄段食蟹猴脑不同部位突触小体中的表达差异。方法 酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测oligo-α-Syn与p-α-Syn在不同年龄段食蟹猴脑不同部位突触小体中的表达。结果 在老年食蟹猴的前额叶、枕叶、颞叶、海马、纹状体和丘脑中,突触小体中寡聚化与磷酸化α-Syn表达较青年与中年猴显著增加,且差异有统计学意义(P<0.01)。结论 食蟹猴颞叶、海马、纹状体和丘脑突触小体中α-Syn寡聚化与磷酸化表达呈增龄性增加。     

多项生化检测指标对诊断早期糖尿病肾病的价值

目的探讨糖尿病患者尿清蛋白／尿肌酐（UALB／UCr）、α1微球蛋白（α1—MG）、视黄醇结合蛋白（RBP）和血胱抑素C（Cys C）、C反应蛋白（CRP）的变化对早期糖尿病肾病的诊断价值。方法对60例早期肾损伤的糖尿病患者和40例健康人的标本采用免疫散射比浊法检测尿α1-MG的水平,使用免疫透射比浊法检测尿UALB／UCr和血Cysc、RBP、CRP的含量。结果糖尿病患者UALB／UCr、α1-MG、RBP、CysC、CRP显著高于健康A（P〈0．01）。结论联合检测UALB／UCr、α1-MG、RBP、CysC、CRP对糖尿病肾病的早期诊断和评估有重要的临床价值。     

α-突触核蛋白对大脑海马神经元NMDA受体影响的研究

目的 研究α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)对海马神经元N-甲基-D-天门冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptors,NMDARs)功能的影响.方法 采用全细胞膜片钳记录模式记录正常培养10～ 12 d左右的海马神经元和经α-Syn处理1h的海马神经元NMDA诱发电流.结果 与正常培养10～12 d左右的海马神经元相比,经α-Syn处理的海马神经元NMDA诱发电流明显减小.结论 α-Syn可减少海马神经元膜上NMDARs数量,并抑制NMDARs活性.     

醋酸甲羟孕酮暴露致食蚊鱼的雄激素效应

目的 探讨人工合成孕激素(醋酸甲羟孕酮,MPA)暴露对雌性食蚊鱼(Gambusia affinis)的雄激素效应.方法 将成年雌性食蚊鱼随机分为4组,包括对照组和40 ng/L(低密度组)、200 ng/L(中密度组)和1 000 ng/L(高密度组)等3个MPA实验暴露组,并设置平行组.持续暴露28 d后观察与测定食蚊鱼的体长(BL)、体质量(BW)、身体健康指数(CF)、臀鳍第3鳍条分节数(FJ)、第4、5、6鳍条长度(FL)变化和第14、15、16椎体脉棘的形态变化等5项指标,并在7d、14d、21 d、28 d测定了卵黄蛋白原基因(VTGα)、雄激素受体基因(ARα)和细胞色素P450芳香化酶基因(CYP19α)mRNA表达水平的变化.结果 食蚊鱼经MPA暴露28d后,与对照组相比,200 ng/L和1 000 ng/L实验组食蚊鱼的BL、BW和CF均无明显变化(分别P＞0.05).臀鳍第3鳍条分节数和第6鳍条长度变化不明显(P＞0.05),但第4、5鳍条的长度显著增加(P＜0.01).暴露在200 ng/L和1 000 ng/L MPA中、高浓度组食蚊鱼的第14椎体脉棘的总长(L)、尾部尖端到脊的高度(D)值,第15椎体脉棘的投影长(P)、P∶D值和第16椎体脉棘的P、L∶D、P∶D值分别呈现显著性变化(P＜0.05或P＜0.01),椎体脉棘伸长,且与脊椎骨接近垂直,显示形态雄性化效应.与对照组相比,低浓度组(40 ng/LMPA) VTGα,CYP19α基因的表达量上升(P＜0.01),而ARα表达被抑制(P＜0.05);中浓度组VTGα,CYP19α,ARα基因的表达量都显著上升(P＜0.01);高浓度组CYP19α,ARα基因的表达量显著上升(P＜0.01),而VTGα的表达量则被抑制(P＜0.01).结论 MPA暴露致雌性食蚊鱼骨骼出现形态雄性化,目标基因表达水平的变化结果证明MPA对食蚊鱼具雄激素效应,表明MPA是一种具有雄激素效应的孕激素.     

抗钠-钙交换体α-1和α-2重复序列抗体的制备和纯化

目的用人工合成的钠-钙交换体α-1和α-2重复序列作为抗原,制备并纯化抗α-1和α-2重复序列抗体.方法通过主动免疫大鼠,获得抗血清.采用酶联免疫吸附测定法(SA-ELISA) 测定抗体滴度,并将高滴度抗血清(≥1∶640)上样至HiTrap Protein G HP 进行亲和层析对抗体进行纯化.纯化效果用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,并采用Bradford蛋白质定量法对纯化后抗体进行定量.结果大鼠经主动免疫后,抗α-1抗血清滴度从免疫前的1∶(25.5±1.5)升高到1∶(905.1±2.2)(P＜0.01);抗α-2抗血清滴度从免疫前的1∶(26.4±1.5)升高到1∶(1 076.3±2.0)(P＜0.01).纯化后的抗α-1和抗α-2重复序列抗体电泳时都仅有一条带出现,分子量160 kDa左右,与IgG标准品相一致.用Bradford蛋白质定量法测得抗α-1和α-2抗体浓度分别为1.0 mg/ml和1.2 mg/ml. 结论本研究获得了高纯度、高滴度的抗α-1抗体,为下一步对其进行功能研究奠定了基础.     

重度烧伤早期肺组织炎症因子的表达

目的:观察重度烧伤后肺组织几种炎症相关基因表达变化,探讨其与肺损害的关系。方法:采用大鼠40%体表面积,深Ⅱ~Ⅲ度烫伤模型,于伤后0(正常组),3,6,12,48,72h,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-6(IL-6),白介素-10(IL-10)。结果:烫伤后3 h,TNF-α表达显著上调(P<0.01),此后一直维持高表达状态,于伤后48 h降至正常;IL-6于伤后6 h表达明显升高(P<0.01),伤后48h降至正常水平;IL-10于伤后下调并维持低水平。结论:炎症相关基因TNF-α、IL-6、IL-10参与了烧伤后肺组织局部失控性炎症反应,TNF-αI、L-6上调及IL-10表达下调可能是烧伤后早期肺组织损害的重要原因之一。     

PINK1减轻α-突触核蛋白引起的线粒体损伤

目的 证明PINK1对α-突触核蛋白(α-synuclein, α-syn)引起的线粒体损伤的影响。方法 将携带人源PINK1 和α-syn基因的质粒共转染MN9D多巴胺能神经细胞,流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)、线粒体渗透性转运孔(mitochondrial permeability pore, mPTP)的开放情况及线粒体膜电势(ΔΨ_m)变化;MTT和乳酸脱氢酶法检测细胞活力及细胞损伤情况。结果 PINK1减少α-syn引起的ROS的生成、线粒体膜孔的开放及线粒体膜电势降低,并减轻α-syn所致细胞活力下降及和细胞损伤。结论 PINK1可以减轻α-syn引起的线粒体损伤。     

甲磺酸伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病的临床观察

目的：：观察伊马替尼治疗Ph+慢性粒细胞白血病的疗效。方法：将46例Ph+慢性粒细胞白血病患者随机分为2组,治疗组(29例)采用伊马替尼治疗,对照组(17例)采用干扰素-α、羟基脲治疗;并比较2组治疗后血液学缓解率和细胞遗传学缓解率。结果：治疗组完全血液学缓解率和主要细胞遗传学缓解率均高于对照组(p<0.05),伊马替尼的不良反应轻微。结论：伊马替尼明显提高Ph+CML血液学缓解率和细胞遗传学缓解率,改善生活质量、延长无疾病进展生存期。