巢氏PCR检测血片中低密度间日疟原虫的研究

【摘要】目的 探讨巢式PCR应用于检测低密度疟原虫血片DNA的方法。 方法 以健康人抗凝血为稀释液提取不同浓度梯度间日疟原虫血片DNA,测定其最低检出限,将一份含有高密度间日疟原虫的抗凝血样按照1：10、1：100、1：1000、1：2000、1：4000、1：8000、1：16000、1：32000比例进行稀释,制成9个浓度梯度血样。每个浓度血样按照厚血膜5ul、薄血膜2ul同时制作2张血片,连续稀释（9个稀释度）一份含有高密度间日疟原虫的EDTA抗凝血样本,制作标准血片,同时进行所制得的血片中厚、薄血膜通过显微镜计数后,分别用以提取DNA,进行和巢式PCR检测。 结果 间日疟原虫血片厚血膜的检出限为1：16000（08个虫/μl血）,薄血膜检出限为1：100,与镜下计数水平一致。 结论 巢式PCR适用于低密度血片中间日疟原虫DNA的检测,具有较高的检测意义。     

两种疟原虫染色镜检效果比较

目的比较疟原虫血膜瑞氏染色法与姬氏染色法的优缺点。方法选取本院2016年1月至12月,疟原虫阳性患者3例,及未找到疟原虫患者7例为研究对象,每人抽取静脉血液2 m L为一份,每份血液样本制作疟原虫血涂片10张,共制得100张血涂片,随机分配50张做瑞氏染色,50张做姬氏染色。待血膜自然干燥后,变换顺序交由2位形态学经验丰富的医生镜检观察。结果瑞氏组中厚血膜脱落数为5张,薄血膜脱落数为2张;姬氏组厚血膜脱落数为6张,薄血膜均未脱落,从镜检来看,瑞氏组细胞胞质显示不清,有粘连,血膜背景暗红色,虫体结构模糊,颜色暗淡不清晰,核呈红褐色,浆呈暗蓝色,核质显示不清;姬氏组胞质显示清楚,少粘连,血膜显示背景青蓝色,虫体结构清晰,颜色鲜亮,核呈鲜红色,浆呈天蓝色,核质显示清楚。结论通过两组血膜结果比较,姬姆萨染色的疟原虫血膜稍优于瑞氏染色的疟原虫血膜。     

浓集法与薄血膜法镜检疟原虫方法比较

目的 寻找一种实用、快速、准确查找疟原虫的检验方法以提高疟原虫的检出率和检验人员镜检疟原虫的综合能力.方法 筛选10例疟原虫密度低且薄血膜法(虫数/100,内镜视野)检出小于10个疟原虫体的标本用浓集法(虫数/100,内镜视野)进行对比镜检.结果 发现本浓集法比薄血膜法检出疟原虫的密度大多高出40%以上.经t检验进行统计学分析,t=6.5336,P<0.01,差异有统计学意义.结论 浓集法的疟原虫的检出率比薄血膜法有较大的提高.     

薄血膜片与厚血膜片对猴肝囊原虫检出率的比较

薄血膜片与厚血膜片对猴肝囊原虫检出率的比较吴军＊赛白胡黎娅（中国实验动物云南灵长类中心，昆明６５０２１６）在检查猴肝囊原虫时，一般采用薄血片法。在薄血膜片中能清晰地观察到寄生在动物红细胞中原虫的形态特征，也便于同猴疟原虫相区别。但猴肝囊原虫在猴外周血...     

两种染色方法疟原虫镜检效果比较

目的：比较瑞氏染色法与姬氏染色法对疟原虫的镜检效果。方法：收集检出恶性疟原虫4名患者的抗凝血液4份,共制作血涂片80张,根据数字奇偶随机法分为瑞氏组和姬氏组,每组40张血涂片,瑞氏组采用瑞氏染色法,姬氏组采用姬氏染色法,比较两组镜检效果。结果：瑞氏组有4张血膜发生脱落,均为厚血膜;姬氏组共有9张血膜发生脱落,其中薄血膜3张,厚血膜6张。两组未脱落的血膜均着色成功。姬氏组整体染色效果稍优于瑞氏组,姬氏组染色疟原虫小滋养体的核、胞质分辨率较高,且疟色素明显,颜色明亮,虫体结果较分明。结论：姬氏组整体染色效果稍优于瑞氏组。瑞氏染色法适用于临时性和少量标本的检验;姬氏染色法适用于获得染色质量好或者大批量标本染色。     

薄血膜及滤纸片干血滴分离疟原虫DNA方法的比较

DNA检测以特异性强、敏感性高、简便快速 ,被广泛应用于疟疾的诊断及普查。疟原虫 DNA的分离方法虽多 ,但多以静脉血分离为主 [1 ] 。有学者应用指尖取血制作滤纸片干血滴及静脉全血制作的薄血膜进行疟原虫 DNA的分离 [2 ] 。本文就两种方法对疟原虫 DNA的分离进行比较 ,探讨其应用价值。1　材料与方法1.1　血样制备1.1.1　恶性疟原虫血样品制备 :用采自非疟疾流行区、经姬姆萨染色显微镜检查确诊恶性疟原虫阴性的正常人静脉血对人工培养的恶性疟原虫 FCR3株进行倍比稀释 ,制成恶性疟原虫浓度分别为 1.5× 10 4/μl、1.5× 10 3/μl、…     

疟原虫镜检的一些研究(摘要)

疟防工作中正确、快速地诊断疟疾极为重要,迄今为止,确诊疟疾仍然赖于镜检病原体的方法,即常用的厚、薄血膜检查疟原虫的方法。1980年世界卫生组织亦曾提出“在疟疾的寄生虫调查方面只有厚血膜用作常规检查”。但在常规厚血膜染色过程中,溶血、染色和冲洗等步骤往往使疟原虫腐蚀破     

湿血片荧光素吖啶橙染色法检验间日疟原虫的效果

厚血膜和薄血膜用荧光素吖啶橙染色检查疟原虫,国内外已证明有疟原虫易于发现和检出率高等优点;但应用于门诊检查,还不能适应快速诊断的要求,主要是厚血膜干燥要一定时间.为此,我们进行了湿血片吖啶橙染色检验疟原虫的研究,并与湿摁片吉氏伊红皂素染色法及厚、薄血膜常规染色法进行对照比较,现报告如下.材料与方法一、荧光素染液的配制:所用荧光素为吖啶橙粉,以吖啶橙粉1克加蒸馏水99毫升配成1%吖啶橙母液,置于棕色玻璃中,保存于4—8℃冰箱中备用.此次所用者为保存了三年多的吖啶橙母液.仍然有效.     

浓集法检查疟原虫

根据疟原虫侵入红细胞利用营养成分比重减轻，经离心浓度的原理，自行设计了一种检查疟原虫方法。经与薄箅片镜检法比较，阳性率提高近１０倍；与厚血片镜检法比较疟原虫形态不发生变化。该法易掌握，不需特殊仪器。     

血涂片镜检在血常规检验中的重要性研究

目的:探讨血涂片镜检在血常规检验中的重要性。方法:回顾性分析我院2013年1月-12月收治的192例需进行血常规检查患者,所有血标本均进行全自动血细胞分析仪检查和血涂片镜检,比较两种检查方式检查结果一致性。结果:192例血标本经全自动血细胞分析仪检测后显示:正常标本102例,异常标本90例;经血涂片镜检检查显示:正常标本112例,异常标本80例。血细胞分析仪检测为正常的血标本,经血涂片镜检为异常2例,假阴性率为2.0%;血细胞分析仪检测为异常的血标本,经血涂片检查为正常12例,假阳性率为13.3%。结论:全自动血细胞分析仪虽可提高血标本的检测效率,但如能结合血涂片镜检将为临床诊断提供更全面可靠的依据,降低漏诊和误诊的发生率。     

海南省4个市(县)基层疟原虫血片镜检复核结果分析

镜检血片、诊断疟疾 ,因操作简单、诊断准确仍是海南基层疟区主要的诊断方法 ,为了解基层疟原虫镜检站的镜检水平 ,我们于 1998～ 1999年分别收集五指山 ,陵水、保亭、万宁 4县市基层镜检站血片共 6 171片 ,复检分析血片制作染色质量和血片镜检结果符合率。为制订疟防措施提供依据。1　材料与方法1 1　血片来源　分别抽查“四热”病人全部阳性片和疟联防区 5 %～ 10 %和省疟防基地 15 %的阴性片。1 2　复检内容　血片制作和染色均分为优片、中片和差片三等级 ,血片制作优片和中片都有厚血膜和薄血膜 ,差为只有薄血膜难镜检 ;血片染色优良和…     

荧光素染色法检验间日疟原虫效果观察

为了比较荧光素染色法与常规染色法检验疟原虫的效果,我们对160例发热疑为疟疾的患者进行了检查.结果如下:材料与方法一、在疟疾流行季节,对医院门诊发热疑为疟疾的患者自耳垂取血约3立方毫米,在载玻片上制成半厚血膜(比厚血膜薄些).干后用甲醇固定,于2个月后用荧光素染色镜检.另外,同一患者按常规方法在载玻片上制成厚、薄血膜用吉氏染液染色镜检作为.对照.     

疟原虫三种检查方法的比较和评价

通过对疟原虫三种检查方法的观察，比较，离心浓集法检查疟原虫，阳性检出率显著高于薄片法及厚血片法，平均每年视野可见疟原虫的个数是薄血片法的１０倍。     

血涂片分析在血常规检验中的作用

目的:探讨血涂片分析在血常规检验中的作用。方法:选取84例进行血常规检验的受检者为研究对象,所有受检者均接受血涂片和血细胞分析仪检测,分析检测结果。结果:84例受检者经血涂片检查发现正常标本56例,异常标本28例,血细胞分析仪检测正常标本44例,异常标本40例,两种检验方法异常标本检出率差异有统计学意义(P<0.05)。血涂片检查中发现有1例标本中出现不同程度空泡、2例样本中有少许中毒颗粒、3例出现中心染色区扩大问题。结论:在血常规检查中应用血涂片能提高检查的准确率,减少误诊与漏诊,便于医者准确判断患者身体状况,具有较高应用价值。     

血细胞计数仪白细胞分类检测与手工检测法对比分析

目的：评价MS-9血细胞计数仪白细胞检测的临床应用。方法：采用MS一9血细胞计数仪检测临床血液标本，同时手工法血膜涂片分类对照。结果：96例临床患者单核细胞的计数仪器法与手工法有不同程度的差异。结论：MS-9血细胞计数对单核细胞计数增多的须通过血膜涂片检查以获得准确的结果。     

先天性疟疾15例临床分析

作者于 1997年 11月至 1999年 11月在西非贝宁共和国莫诺省医院儿科收治 15例先天性恶性疟疾 ,现报告如下。1　临床资料　新生儿 15例 ,男 9例、女 6例 ,日龄平均 3.5天 ,其中早产儿 3例、体重 15 0 0～ 2 0 0 0ｇ、>2 0 0 0～ 2 5 0 0ｇ 7例、>2 5 0 0ｇ 5例 ;均发热 ,体温 38 5℃～ 39.7℃ 7例 ,<38℃ 8例 ,腹泻 9例 ,呕吐 12例 ,肝脏轻度肿大 10例 ,轻度贫血 (ＨＢ85～ 110ｇ/Ｌ) 8例。血涂片检查均找到恶性疟原虫 ,其密度均大于 10 0 0 /ｍｍ3 ;同步母亲血涂片检查找到恶性疟原虫 ;追问病史均生活于恶性疟疾流行区 ,母孕时有疟疾病史。2…     

剩余稀释标本涂片复检在末梢血预稀释模式三分群血常规检查中的应用价值

目的探讨剩余稀释标本涂片细胞形态学复检在新生儿、婴幼儿末梢血预稀释模式三分群血常规检查中的可靠性。方法对新生儿、婴幼儿末梢血血常规检查标本以Sysmex-kx-21三分群血细胞分析仪预稀释模式进行检测,并对筛查的结果进行手工复检;对剩余稀释标本的手工复检以离心沉淀或静置沉淀的方式进行浓缩与涂片瑞氏染色,镜检至少观察200个白细胞,同时每例检查补充末梢血直接涂片1~2张瑞氏染色镜检作为细胞形态学复检比对的金标准。结果根据复检规则对仪器法检测结果进行统计学分析,得到真阳性率为4.6%,假阳性率为20.3%,真阴性率为74.0%,假阴性率为1.1%,复检率为24.9%,仪器法测定的敏感度为18.3%,特异度为98.6%,阳性预测值为81.3%,阴性预测值为78.5%,准确性为78.6%;两种涂片方式复检结果一致(P>0.05)。结论基层单位末梢血预稀释模式三分群血常规检查简易形态复检能为新生儿、婴幼儿门诊保健和临床医疗提供安全保障。     

疟疾的病原诊断

周围血涂片染色镜检疟原虫仍是当前确诊疟疾最可靠的方法。其中厚血膜用以检出疟原虫,薄血膜用于虫种的鉴定。目前常用的染剂为吉氏和瑞氏染剂。但由于若干因素的影响,可导致原虫的漏检,特别是对于低原虫血症,所以病原诊断一直是疟疾防治工作中实际存在和亟需加以研究的问题。本文谨就疟疾病原诊断的应用方面综述如下。常用血检方法申影响疟原虫检出的若干因素一、周围血液中疟原虫的密度一般认为,每立方毫米血液     

商洛市幼儿寄生虫病调查分析

目的 了解幼儿寄生虫病危害情况，给儿童保健和寄生虫病防治工作提供重要依据。方法 肠道蠕虫采用新鲜粪便改良加藤厚涂片法检查虫卵，蛲虫采用透明胶纸肛门粘贴法清晨检查虫卵，肺吸虫病采用肺吸虫抗原皮内试验，疟疾采取耳垂血涂制厚、薄血膜油镜检查疟原虫。结果 肠道蠕虫感染率为64．％％，蛔虫、鞭虫、蛲虫感染率分别为42．17％、19．12％、40．05％；肺吸虫感染率为32.61％；发热患儿血检疟原虫阳性率为26．42％。结论 商洛市幼儿寄生虫病危害严重，应将寄生虫病防治列入儿童保健的重要内容，寄生虫病防治部门应将幼儿列为寄生虫病防治工作的重点对象。     

血涂片分析在血常规检验中的重要性

目的:研究分析血涂片分析在血常规检查中的重要意义,以供临床参考使用。方法:对经血液分析仪监测的标本血涂片形态学观察和白细胞分类,并对收治并进行过化验的700例正常血标本和2 250例异常血标本做比较,分析血涂片分析在血常规检验中的重要意义。结果:700例正常血标本中,经过涂片检查出现10例异常,其中假阴性为1.4%,2 250例异常标本经血涂片检查后出现1 062例正常,其中假阳性为47.2%,同时在血涂片中发现异常淋巴细胞、异常红细胞、幼稚细胞、中性粒细胞中毒颗粒和空泡。结论:加强血涂片镜检工作能够有效地提高疾病的准确诊断率,为临床治疗提供更加全面的诊断依据,治疗前无论患者经血液分析仪分析的结果如何,都应该进行血涂片观察,确保诊断的准确性。