Survivin及Caspase-3在浅表性膀胱移行细胞癌中表达及预后意义

目的:探讨凋亡相关蛋白Survivin及Caspase-3在浅表性膀胱移行细胞癌表达及其临床意义.方法: 应用S-P免疫组织化学法检测47例行TUR-BT术切除膀胱移行细胞癌标本组织石蜡切片中Survivin和Caspase-3表达的情况,结合临床资料进行分析.所有标本均经病理证实为T1期内.10例正常膀胱黏膜为对照.结果: Survivin在膀胱移行细胞癌标本中的表达阳性率为68.1%(32/47),而正常对照组中无一例呈阳性表达;Caspase-3在膀胱移行细胞癌标本中表达阳性率为38.3%(18/47),与对照组阳性率90%(9/10)相比差异有统计学意义(P<0.05).Survivin表达与膀胱移行细胞癌的组织学分级、初发和复发显著相关(P<0.05),但与肿瘤数目无关;Caspase-3表达与膀胱移行细胞癌的初发复发相关,但与组织学分级、肿瘤数目无关.相关性分析表明,膀胱移行细胞癌中Survivin表达与Caspase-3表达呈负相关. 结论: Survivin在膀胱癌组织中选择性表达与膀胱移行细胞癌的分化程度密切相关,Caspase-3蛋白在膀胱移行细胞癌中表达下降,Survivin及Caspase-3蛋白对于判断膀胱移行细胞癌预后有重要临床指导意义.     

膀胱移行细胞癌RASSF1A和Cyclin D1与Bcl-2蛋白的表达及意义

目的:探讨RASSF1A、CyclinD1和Bcl-2蛋白在膀胱移行细胞癌发生发展中的作用,以及RASSF1A和CyclinD1与Bcl-2蛋白之间的关系。方法:免疫组化法(SP法)检测45例膀胱移行细胞癌组织、45例癌旁黏膜及18例正常黏膜组织中RASSF1A、CyclinD1和Bcl-2蛋白的表达。结果:膀胱移行细胞癌组织中RASSF1A、CyclinD1和Bcl-2蛋白表达阳性率分别为46.7%(21/45)、88.9%(40/45)和57.8%(26/45);癌旁组织分别为84.4%(38/45)、42.2%(19/45)和24.4%(11/45);正常组织分别为94.4%(17/18)、38.9%(7/18)和16.7%(3/18)。膀胱移行细胞癌组织中RASSF1A蛋白的表达显著低于癌旁及正常膀胱黏膜,P<0.05;而CyclinD1和Bcl-2蛋白的表达则显著升高,P<0.05。RASSF1A和CyclinD1及Bcl-2蛋白的表达呈负相关性,P<0.05。结论:RASSF1A蛋白的表达降低和CyclinD1、Bcl-2蛋白的过表达可能参与膀胱移行细胞癌的发生发展过程,RASSF1A可能通过某种机制促使CyclinD1和Bcl-2在膀胱移行细胞癌中过表达,从而促进膀胱移行细胞癌的发生发展。     

凋亡相关蛋白Survivin及Fas在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨凋亡相关蛋白Survivin及Fas在膀胱移形细胞癌表达及其临床意义。方法应用S-P免疫组织化学法检测45例膀胱移行细胞癌及10例正常膀胱黏膜组织石蜡切片中Survivin和Fas表达的情况,结合临床资料进行分析。结果Survivin在膀胱移形细胞癌标本中的表达阳性率为68.9%(31/45),而正常对照组中无一例呈阳性表达;Fas在膀胱移行细胞癌标本中的表达阳性率为46.7%(21/45),与对照组阳性率100.0%(10/10)相比,差异有显著性(P<0.05)。Survivin的表达与膀胱移行细胞癌的组织学分级、初发和复发显著相关(P<0.05),但与临床病理分期、肿瘤数目无关;Fas的表达与膀胱移行细胞癌的组织学分级、肿瘤数目、初发和复发相关,但与临床分期无关。相关性分析表明,膀胱移行细胞癌中survivin的表达与Fas表达呈负相关。结论Survivin在膀胱癌组织中选择性表达与膀胱移行细胞癌的分化程度密切相关,Fas蛋白在膀胱移行细胞癌中表达下降,survivin及Fas蛋白对于判断膀胱移行细胞癌预后有重要临床指导意义。     

热休克蛋白70在膀胱移行细胞癌中的表达

目的　研究HSP70在膀胱移行细胞癌中的表达。方法　采用免疫组织化学S -P染色法 ,检测 6 3例膀胱移行细胞癌组织中HSP70的表达。结果　HSP70在膀胱移行细胞癌中的阳性表达率为 4 7 6 2 % (30 /6 3)。HSP70的表达与膀胱移行细胞癌的分级和分期呈正相关 (P <0 0 5 )。结论　HSP70在膀胱移行细胞癌中的表达与癌组织的分级和分期有关。检测膀胱移行细胞癌中HSP70表达可为临床判断预后提供依据。     

凋亡相关蛋白Fas及caspase-3在膀胱移行细胞癌中表达及临床意义

目的：探讨凋亡相关蛋白Fas及caspase-3在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义。方法：应用SP免疫组织化学法检测45例膀胱移行细胞癌及10例正常膀胱黏膜组织石蜡切片中Fas和caspase-3表达的情况，并结合临床资料进行分析。结果：Fas在膀胱移行细胞癌标本中的表达阳性率为46．7％（21／45），而在正常对照组中阳性表达率为100％；caspase-3在膀胱移行细胞癌标本中的表达阳性率为37．8％（17／45），与对照组阳性率为90％（9／10）相比差异有统计学意义（P〈0．05）。Fas的表达与膀胱移行细胞癌的组织学分级，初发和复发及肿瘤数目之间差异有统计学意义（P〈0．05），但与临床病理分期无关；Caspase-3的表达与膀胱移行细胞癌的初发和复发相关（P〈0．05），但与组织学分级，肿瘤数目，临床分期均无关。相关性分析表明，膀胱移行细胞癌中Fas的表达与caspase-3表达呈正相关。结论：Fas在膀胱癌组织中选择性表达降低且与膀胱移行细胞癌的分化程度密切相关的，caspase-3蛋白在膀胱移行细胞癌中表达下降，因此Fas及caspase-3蛋白对于判断膀胱移行细胞癌预后有重要临床指导意义。     

Ezrin、CD44在膀胱移行细胞癌的表达与意义

目的:探讨ezrin、CD44在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达与意义。方法:采用免疫组织化学检测60例膀胱移行细胞癌与14例正常膀胱组织中ezrin、CD44的蛋白表达。结果:ezrin、CD44在膀胱移行细胞癌组织中的蛋白表达明显高于正常膀胱组织(P<0.05),ezrin、CD44的蛋白表达与膀胱移行细胞癌组织的病理分级、临床分期密切相关,ezrin、CD44蛋白表达的阳性表达随着膀胱肿瘤病理分级、临床分期的增高而增高(P<0.05)。ezrin、CD44的蛋白表达在膀胱移形细胞癌中有相关性。结论:ezrin、CD44在BTCC发生、发展过程中起重要作用。Ezrin、CD44在膀胱移形细胞癌的发生、进展中可能有协同性。ezrin可作为诊断、判断预后、指导治疗、随访检测的指标。     

Survivin基因在膀胱移行细胞癌组织中的表达和意义

目的 探讨Survivin基因在膀胱移行细胞癌组织中的表达和意义.方法 应用免疫组化S-P法检测62例膀胱移行细胞癌组织及10例正常膀胱黏膜组织中Survivin蛋白的表达.结果 10例正常膀胱黏膜组织中,Survivin蛋白表达均为阴性; Survivin蛋白在膀胱移行细胞癌中阳性表达率为56.5%(35/62),肿瘤不同分级中随恶性程度的增高,表达增高,Ⅰ级与Ⅲ级比较,差异有显著性(P＜0.05),不同临床分期中随分期的增高,表达增高,Tis～T1与T2～T4比较,差异有显著性(P＜0.05).结论 Survivin在膀胱移行细胞癌的发生、发展过程中起着重要的作用.     

膀胱癌细胞尿激酶受体的放射配基结合分析

目的 :研究膀胱移行细胞癌细胞膜尿激酶受体 (uPAR)与尿激酶 (uPA)的结合特性及其与膀胱移行细胞癌生物学行为之间的关系。方法 :采用放射配基结合受体分析方法对 18例膀胱移行细胞癌组织及 6例正常膀胱粘膜uPAR的表达及与uPA的亲和力进行检测。结果 :膀胱癌组织uPAR最大结合容量Bmax为 ( 4 2 0 8± 84 6)pmol/ g蛋白 ,平衡解离常数Kd值为 ( 1 2 3± 0 5 )nmol/L ,正常膀胱黏膜Bmax为 ( 84 5± 10 4)pmol/ g蛋白 ,Kd值为 ( 5 5 0± 1 48)nmol/L ,二者比较差异具有统计学意义 ,P <0 0 1。随着膀胱肿瘤分级、分期的增高和转移的出现 ,uPAR结合位点数明显增加 ,与uPA的结合能力显著增强。结论 :uPAR在膀胱移行细胞癌中的表达明显升高 ,与uPA的结合力明显增强 ,uPAR和uPA与膀胱移行细胞癌的恶性生物学行为密切相关     

MMP2和E-cadherin表达在膀胱癌中的侵袭效应

目的　探讨基质金属蛋白酶 2MatrixMetalloproteinase 2 (MMP2 )和钙粘附分子E cadherin(E CD)在膀胱移行细胞癌表达及侵袭效应。方法　应用S -P免疫组化染色法 ,检测 10例正常膀胱粘膜 ,96例膀胱移行细胞癌MMP2和E CD表达情况。结果　正常粘膜MMP2呈阴性表达 ,在膀胱移行细胞癌Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级阳性表达分别为2 3 % (7/3 0 )、5 8.3 % (2 1/3 6)、76.7% (2 3 /3 0 ) ,三组之间差异显著 (P <0 .0 1) ,正常粘膜E CD呈强阳性表达 ,膀胱移行细胞癌Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级正常表达分别为 86.7% (2 6/3 0 )、5 2 .8% (19/3 6)、2 6.7(8/3 0 ) ,三组之间差异显著 (P <0 .0 1)。结论　MMP2阳性表达和E CD的异常表达与膀胱移行细胞癌病理分级、浸润深度及生存率密切相关 ,检测MMP2和E CD的表达有助于判定膀胱移行细胞癌侵袭能力。     

Survivin和PTEN在膀胱癌组织中的表达及临床意义

目的 研究凋亡抑制基因Survivin和抑癌基因PTEN在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达及其与肿瘤分级、分期的关系.方法 应用免疫组织化学方法,检测60例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱黏膜组织中Survivin蛋白和PTEN的表达.结果 60例BTCC中Survivin蛋白的表达率为76.67%,10例正常膀胱组织中未见Survivin蛋白表达,Survivin蛋白表达随BTCC分级、分期的增高而增高.Survivin蛋白在各级肿瘤中表达Ⅰ级42.86%,Ⅱ级79.17%,Ⅲ级95.45%;浅表性癌表达率55.56%,浸润性癌表达率为85.71%,初发63.64%,复发92.59%,单发61.54%,多发88.24%;初发与复发,单发与多发之间表达具有统计学意义(P＜0.05).PTEN蛋白在60例膀胱移行细胞癌组织中阳性表达率为31.67%,PTEN阳性表达率随肿瘤细胞病理分级、临床分期程度的增高呈下降趋势.10例正常膀胱组织中PTEN蛋白均呈阳性反应.结论 Survivin蛋白和PTEN的表达与BTCC临床病理特征和生物学行为有密切关系,联合检测Survivin和PTEN,对诊断BTCC、判断其恶性程度及预后均有一定参考价值.     

PTEN与FHIT在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

目的：探讨PTEN与FHIT在膀胱移行细胞癌（bladder transitional cell carcinoma,BTCC）组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化技术（SP法）检测62例膀胱移行细胞癌和13例正常膀胱黏膜标本中PTEN与FHIT蛋白的表达情况。结果：PTEN、FHIT蛋白在BTCC表达率分别为56.5%和51.6%,明显低于二者在正常膀胱黏膜中的表达,差异有统计学意义（P〈0.05）;在BTCC中PTEN与FHIT蛋白表达均与肿瘤病理分级和分期密切相关（P〈0.05）,在BTCC标本中PTEN蛋白表达与FHIT蛋白表达呈正相关（r=0.448,P〈0.05）。结论：PTEN、FHIT在BTCC的发生、发展中发挥了重要作用。PTEN、FHIT联合检测可作为预测BTCC生物学行为和预后判断的重要指标。     

膀胱移行细胞癌中VEGF表达的临床意义

目的:探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)在膀胱移行细胞癌(tran-sitional cell carcinoma of bladder,BTCC)的表达及意义。方法:采用PV-6000二步法进行免疫组化染色,检测VEGF在63例BTCC、21例膀胱乳头状瘤和13例正常黏膜组织中的表达。结果:VEGF蛋白在BTCC中高表达,随临床分期的增高而表达增强,病理分级无显著相关。结论:VEGF与膀胱癌的发生、发展及预后密切相关。     

E2F3 及C-myc 在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其相关性研究*

目的:探讨E2F3 及C-myc 在膀胱癌组织中表达的相互关系及其与膀胱癌恶性生物学行为之间的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测不同病理分期及组织分级的BTCC标本和正常膀胱黏膜中E2F3 及C-myc 蛋白的表达情况,应用免疫组化自动分析系统进行分析,结果以积分光密度表示。结果:膀胱移行细胞癌组织中E2F3 及C-myc 蛋白的表达阳性率明显高于正常膀胱黏膜,两组间有显著性差异（P<0.05）,同时E2F3 的表达率与膀胱癌的分级和分期密切相关（P<0.05;P<0.01）;C-myc 的表达率与膀胱癌的分级和分期密切相关（P<0.01;P<0.01）。 膀胱移行细胞癌中E2F3 与C-myc 的表达呈正相关。结论:E2F3 及C-myc 与膀胱癌的恶性程度密切相关,同时二者之间的表达密切相关,二者不仅可以作为膀胱癌的诊断与预后指标,而且为以E2F3 为靶点的膀胱癌的基因治疗提供理论依据。      

膀胱移行细胞癌组织中透明质酸合成酶基因家族差异表达的临床意义

目的 研究透明质酸合成酶(HAS)家族基因在膀胱移行细胞癌(BTCC)组织中的差异表达情况,并探讨其潜在的临床意义.方法 运用实时定量聚合酶链反应(PCR)方法,检测78例不同恶性程度的BTCC组织中各HAS亚型mRNA的表达.运用Western blot方法,检测78例BTCC组织和12例正常人膀胱黏膜中各HAS亚型的蛋白表达.分析BTCC组织中各HAS亚型mRNA和蛋白表达与临床病理特征的关系.结果 78例BTCC组织中,HAS2、HAS2和HAS3的mRNA中位表达水平分别为0.0123、0.0353和0.0717,三者差异有统计学意义(P＜0.01).12例正常膀胱黏膜组织未见任何HAS亚型的蛋白表达.78例BTCC组织中,HAS2、HAS2和HAS3的蛋白表达量分别为0.5685±0.2510、1.005±0.5159和0.5040±0.3604,其中HAS1和HAS2、HAS2和HAS3的蛋白表达差异有统计学意义(P=0.004,P=0.001),而HAS1和HAS3的蛋白表达差异无统计学意义(P=0.654).HAS1 mRNA的表达与肿瘤发病、T分期、病理分级有关,HAS2 mRNA的表达与肿瘤大小、肿瘤数量、肿瘤发病、T分期、病理分级有关,HAS3 mRNA的表达水平与各临床病理特征均无关.HAS1蛋白表达与肿瘤发病、T分期和病理分级有关,HAS2蛋白的表达与肿瘤大小有关,HAS3蛋白表达与各临床病理特征无关.结论 膀胱移行细胞癌组织中,3种HAS亚型均明显异常高表达,提示透明质酸作为一种尿源性膀胱癌标记物比较可靠.相对于HAS1和HAS3,HAS2在BTCC的发生、发展过程中可能具有更为重要的作用.

Abstract：

Objective To investigate the differential expression of the hyaluronic acid synthase (HAS) family in human bladder transitional cell carcinoma(BTCC) and its potential clinical significance. Methods The relative quantitative detection of the expression of HAS isoforms(HASs) was performed in 78 human BTCC tissues(mRNA & protein)and 12 normal human bladder mucosa(protein) by real-time RTPCR and Western blot,and the results were statistically analyzed according to the clinical data. Results All the BTCC tissues expressed three HAS isoform mRNA and protein,but to a different extent,as for mRNA,HAS3 ＞ HAS2 ＞ HAS1(P ＜0.001),with a significant difference in HAS1/HAS2,HAS1/HAS3 and HAS2/HAS3(P = 0.003,＜0.001,0.006,respectively).Among the proteins,the HAS2 expression was the highest,with a significant difference in HAS1/HAS2,and HAS2/HAS3(P = 0.004,0.001,respectively),but not in HAS1/HAS3.The elevation of HAS1 mRNA and protein expression was significantly related with the tumor malignancy,tumor initial onset/recurrence,T1/T2 and T1/T3-4 stags,and tumor grading(P=0.02,＜0.001,0.038,＜0.001;0.025,0.031,0.023,0.002;respectively).The HAS2 mRNA expression was significantly related with tumor size(diameter ≤ 3.0 cm/＞ 3.0 cm),tumor number(single or multiple),tumor initial onset/recurrence,T-staging,and histopathological differentiation(low grade/high grade)(P=0.012,0.004,＜0.001,＜0.001,＜0.001,respectively),but its protein expression was not significantly different in all subgroups except with the tumor size(mass diameter ＞3.0 cm/≤3.0 cm).However,HAS3 mRNA and protein expression had no significant difference among all the subgroups.In normal human bladder mucosa,no HAS expressions were detected. Conclusions The abnormally high expression of the HASs further indicate the reliability of hyaluronan as a urinary marker for human BTCC.Compared with HAS1 and HAS3,HAS2 as a marker may have more usefulness in studies on human BTCC carcinogenesis or development.The high expression of HAS1 protein seems to play a more important role in the BTCC tumorigenesis,and may indicate a poor prognosis of the BTCC patients.     

EZH2 和PTEN在膀胱癌的表达及预后分析

目的:研究膀胱癌组织EZH2 和PTEN基因的表达,探讨其与膀胱癌临床病理特征及无瘤生存的关系。方法:制作80例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱黏膜（对照组）组织芯片,应用免疫组织化学方法检测EZH 2 和PTEN蛋白的表达,采用Kaplan-Meier 单因素和Cox 比例风险模型多因素分析其与膀胱癌无瘤生存的关系。结果:膀胱癌组织中EZH 2 和PTEN阳性表达率分别为80.0% 和45.0% 。EZH 2 和PTEN的阳性表达率在膀胱癌不同临床分期及病理分级组间存在显著性差异（P<0.05）,且两者的表达呈负相关（P=0.033）。 全组膀胱癌患者术后平均无瘤生存期为39.4 个月,1、3、5 年无瘤生存率分别为70.0% 、55.2% 、41.4% 。单因素分析表明:病理分级、肿瘤数目和EZH 2 表达为影响膀胱癌预后的相关因素;多因素分析表明:病理分级、肿瘤数目和EZH 2 表达是膀胱癌复发的独立危险因素。结论:EZH 2 和PTEN异常表达与膀胱癌的发生、发展关系密切。病理分级、肿瘤数目和EZH 2 是膀胱癌预后的独立危险因素。      

膀胱移行细胞癌中VEGF表达的临床意义

目的：探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial cell growth factor,VEGF）在膀胱移行细胞癌（tran-sitional cell carcinoma of bladder,BTCC）的表达及意义。方法：采用PV-6000二步法进行免疫组化染色,检测VEGF在63例BTCC、21例膀胱乳头状瘤和13例正常黏膜组织中的表达。结果：VEGF蛋白在BTCC中高表达,随临床分期的增高而表达增强,病理分级无显著相关。结论：VEGF与膀胱癌的发生、发展及预后密切相关。     

TMS1/ASC基因CpG岛甲基化与膀胱移行细胞癌发生的关系

目的检测抑癌基因TMS1/ASC启动子区5′CpG岛甲基化状态及其在膀胱移行细胞癌（BTCC）中mRNA和蛋白表达水平。方法应用MSP技术检测膀胱移行细胞癌中TMS1/ASC基因启动子区甲基化状态,RT-PCR和Western blot法分别检测其mRNA和蛋白表达水平。结果TMS1/ASC基因在正常膀胱组织中未发生甲基化,而在癌组织中甲基化频率为46.9%（15/32）,并且随着肿瘤分级、分期的增加,其甲基化水平逐渐升高（χ^2=23.106,P〈0.05）。在15例启动子异常甲基化的BTCC标本中,14例同时伴有TMS1/ASC基因表达缺失或下调,两者存在明显的相关性（γ=0.5842,P〈0.05）。TMS1/ASC mRNA和蛋白表达在正常膀胱组织和BTCC组织中分别为81.3%（26/32）、18.8%（6/32）（P〈0.01）,不同病理分级、临床分期间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论TMS1/ASC基因启动子区异常甲基化可能导致该基因转录表达失活,使其mRNA和蛋白表达减少,甚至缺失,这可能是膀胱癌发生、发展的原因之一。