左旋精氨酸对模拟缺血再灌注乳兔培养窦房结细胞损伤的保护作用

目的 观察模拟缺血再灌注(IR)培养乳兔窦房结细胞(SANC)损伤及左旋精氨酸(L-Arg)的保护作用.方法 对SANC模拟低糖缺氧培养,添加L-Arg和L-Arg 加 L-NAME(L-Arg抑制剂)与培养细胞共同孵育,吖啶橙(AO)标记细胞凋亡,检测细胞内过氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)、总一氧化氮合酶(NOS)、氧化亚氮(NO)水平.细胞分为正常对照组、I120R120 组、I120R120加L-Arg组、I120R120加L-Arg加L-NAME组4组.结果 凋亡细胞体积明显缩小,核呈黄绿色,断裂为多个碎块状,由膜包裹着凸起于细胞表面呈黄绿色凋亡小体.与I120R120组凋亡率[(5.21±1.59)%]比较,I120R120加L-Arg组凋亡率[(8.70±3.10)%]显著降低(P<0.01);I120R120加L-Arg组细胞SOD活性[(46 820±14 450) U/g]较I120R120组 [(25 030±8 440) U/g]显著上升,而I120R120加L-Arg组MDA[(5.55±3.71)mmol/g]、NO[(3.65±1.02) U/g]和NOS[(3.73±0.24) μmol/L]较I120R120组MDA[(8.42±4.21)mmol/g]、NO[ (4.62±1.20) U/g]和NOS[(4.96±0.52) μmol/L]显著下降(Pa<0.05);而I120R120加L-Arg加L-NAME组各指标较I120R120组无显著性差异(Pa>0.05).结论 补充NO合成底物L-Arg能清除自由基,增加SOD活性,增强细胞抗氧化损伤能力,可能是阻断氧自由基所介导的细胞凋亡机制之一.     

氧化应激在新生大鼠常压高体积分数氧致脑损伤发生中的作用

目的探讨氧化应激在7日龄新生大鼠高体积分数氧（高氧）性脑损伤发生中的作用。方法体质量12～18g的7日龄SD大鼠42只，随机分为空气组和高氧组。高氧组与其乳母一起置于氧箱中，调节氧流量（3L／min），使箱内氧体积分数维持（800&#177;50）mL／L，用数字式测氧仪进行监测。空气组置于同一室内空气中，氧体积分数为210mL／L，饲养条件与高氧组相同。高氧／空气开始暴露30min后，各取3只大鼠，麻醉后采血，行动脉血气分析。高氧／空气暴露12h后2组大鼠各处死8只，化学比色法检测其脑组织还原型谷胱甘肽（GSH）、氧化型谷胱甘肽（GSSG）、GSSG／GSH、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平。高氧／空气暴露12h后2组各处死10只大鼠，取其脑组织常规脱水、包埋、切片（经海马），脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法观察脑组织细胞凋亡指数。结果空气组平均动脉血氧分压[pa（O2）]为（87．0&#177;2．71）mmHg（1mmHg=0．133kPa），高氧组为（219．0&#177;10．7）mmHg，高氧组明显高于空气组[（87．0&#177;2．71）mmHg]（P〈0．05）。高氧组暴露12h脑细胞凋亡指数[（39．20&#177;7．59）％]较空气组[（4．50&#177;1．87）％]显著增加（P〈0．01）。高氧暴露12h组GSH[（0．994&#177;0．230）μmol／g]较空气组[（1．210&#177;0．210）μmoL／g]明显下降（P〈0．05），高氧组暴露12h SOD[（124．60&#177;4．14）&#215;10^3 U／g]也较空气组[（145．0&#177;6．62）&#215;10^3 U／g]明显下降（P〈0．01）；高氧组GSSG[（0．0283&#177;0．0043）μmol／g]、GSSG／GSH（0．0296&#177;0．0045）、MDA[（5．21&#177;0．41）μmol／g]均较空气组[（0．0212&#177;0．0029）μmol／g，0．0181&#177;0．0031，（4．85&#177;0．25）μmol／g]显著升高（Pa〈0．05）。结论常压高氧可引起新生大鼠脑细胞的凋亡及氧化应激，氧化应激与高氧性脑损伤密切相关。     

孕酮对缺氧缺血性脑病新生大鼠皮层和海马神经元凋亡及一氧化氮水平的影响

目的探讨孕酮对HIE新生大鼠皮层和海马组织神经元凋亡率及一氧化氮（NO）水平的影响。方法7日龄新生Wistar大鼠30只随机分为3组：假手术组、缺氧缺血（HI）组和药物预防组。HI组和药物预防组动物先行左侧颈总动脉结扎术,置37℃恒温的密闭容器中,以1.5L/min的速度吸入80mL/L氧气和920mL/L氮气混合气体2.5h,建立HIE动物模型。假手术组仅分离左侧颈总动脉,不结扎,亦不做缺氧处理。药物预防组大鼠于建立模型前30min按8mg/kg腹腔注射0.5g/L孕酮溶液,假手术组和HI组注射同等量的9g/L盐水,24h后处死动物,采用流式细胞仪检测其皮层和海马神经元凋亡情况,硝酸还原酶法检测其NO水平的变化。结果HI组大鼠皮层和海马组织神经元凋亡率分别为（10.09&#177;0.36）%、（12.32&#177;0.28）%,明显高于假手术组[（2.49&#177;0.23）%、（2.58&#177;0.26）%]（Pa〈0.01）,药物预防组大鼠皮层和海马组织神经元凋亡率为（3.47&#177;0.32）%、（4.56&#177;0.30）%,明显低于HI组（Pa〈0.05）。HI组大鼠皮层和海马组织NO水平分别为（51.36&#177;9.71）μmol/L、（52.34&#177;4.26）μmol/L,明显高于假手术组水平[（18.16&#177;6.24）μmol/L、（19.28&#177;3.58）μmol/L）]（Pa〈0.01）,药物预防组大鼠皮层和海马组织NO水平为（33.47&#177;8.02）μmol/L、（32.57&#177;4.27）μmol/L,明显低于HI组（Pa〈0.05）。结论孕酮通过降低新生大鼠HI时皮层和海马组织神经元凋亡率和NO水平,拮抗神经元凋亡发挥对缺氧缺血性脑损伤的保护作用。     

出生后长期缺锌对大鼠生长发育及生长激素的影响

目的 研究出生后长期缺锌对大鼠生长发育的影响及其机制。方法 选取刚出生的SD大鼠3窝,每窝1只母鼠、10只仔鼠,3窝母鼠与仔鼠体重相近,仔鼠雌雄各半。随机分为3组,缺锌组（ZD）、配饲组（PF）、对照组（ZA）。实验期60 d。测定大鼠身长、股骨长度、直径、重量,血清生长激素（GH）含量。结果 ZD组身长[（16.15&#177;0.67）cm]明显低于PF组[（20.94&#177;0.98）cm]及ZA组[（23.08&#177;0.11）cm]（P〈0.01）;ZD组股骨长度[（2.61&#177;0.22）cm]明显低于PF组[（3.38&#177;0.10）cm]及ZA组[（3.54&#177;0.08）cm]（P〈0.01）;ZD组股骨直径[（0.30&#177;0.03）cm]明显低于PF组[（0.37&#177;0.33）cm]及ZA组[（0.42&#177;0.01）cm]（P〈0.01）;ZD组股骨重量[（0.65&#177;0.10）g]明显低于PF组[（1.07&#177;0.07）g]及ZA组[（1.28&#177;0.08）g]（P〈0.01）;ZD组血清生长激素水平[（0.47&#177;0.04）ng/ml]明显低于PF组[（0.66&#177;0.11）ng/ml]及ZA组[（0.75&#177;0.07）ng/ml]（P〈0.01）。结论 出生后长期缺锌可导致动物体内生长激素水平下降,是导致生长迟缓的原因之一。     

肺炎患儿血清一氧化氮和锌水平变化及其相关性

目的探讨肺炎患儿血清一氧化氮（NO）与锌水平的变化及临床意义。方法2005年10月-2006年5月本院儿科住院的符合肺炎诊断标准的患儿48例。其中有充血性心力衰竭的重症肺炎17例,轻症肺炎31例。本院儿科门诊同期健康体检者20例为健康对照组。抽取2组儿童晨起空腹静脉血3mL,其中26例肺炎患儿采集恢复期血液。应用UV-2100分光光度计545nm对肺炎患儿（包括恢复期）及健康对照组血清采用比色法测血清NO水平,采用原子吸收分光光度分析法用P-E503型原子吸收分光光度计直接测出肺炎患儿（包括恢复期）及健康对照组血清锌水平,分析血清NO与锌水平相关性,统计学处理采用SPSS10.0软件进行处理。结果肺炎患儿急性期肺炎血清NO水平[（57.76&#177;19.41）μmol/L]较健康对照组[（25.09&#177;5.51）μmol/L]、肺炎恢复期[（30.08&#177;8.05）μmol/L]明显升高（Pa〈0.01）;重症组[（80.26&#177;11.72）μmol/L]较轻症组[（45.77&#177;12.58）μmol/L]明显升高（P〈0.01）;急性期患儿血清锌水平[（77.61&#177;10.95）μmol/L]较对照组[（115.18&#177;12.66）μmol/L]、肺炎恢复期患儿[（88.08&#177;9.82）μmol/L]显著降低（Pa〈0.01）,重症组[（70.38&#177;6.61）μmol/L]较轻症组[（81.47&#177;10.90）μmol/L]显著降低（P〈0.01）。肺炎患儿急性期NO与锌水平呈显著负相关（r=-0.327P〈0.01）。结论血清NO、锌水平变化与肺炎的发生发展和病情严重程度有关,在肺炎治疗过程中,阻断NO的过多分泌、及时补锌有一定临床意义。     

促肝细胞生长素对大鼠肾缺血再灌注损伤细胞凋亡的干预

目的探讨促肝细胞生长素（pHGF）对肾缺血再灌注损伤（IRI）大鼠肾功能及‘肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法雄性Sprague—Dawley大鼠32只，随机分为假手术组（组I）、缺血再灌注组（组Ⅱ）、缺血再灌注前pHGF干预组（组Ⅲ）和缺血再灌注后pHGF干预组（组Ⅳ）。采用无损伤动脉夹钳夹大鼠双侧肾蒂45min，制作肾IRI模型。组I和组Ⅱ腹腔注射等量9g／L盐水（0．8mL），组Ⅲ和组Ⅳ分别在术前和术后腹腔注射pHGF 50mg／kg。于IRI 12 h股动脉采血，处死动物后迅速摘取其左侧肾脏。采用酶法检测血清肌酐（Scr），采用肾组织原位细胞凋亡标记法（TUNEL）检测肾小管上皮细胞凋亡。结果组Ⅱ血清Scr水平（120．850&#177;22．237）μmol／L明显高于组I（22．775&#177;6．508）μmol／L（P〈0．01），组Ⅲ（60．413&#177;10．197）μmol／L和组Ⅳ（69．40&#177;11．443）μmol／L表达水平均明显较组Ⅱ下降（Pa〈0．01）。组Ⅱ肾脏凋亡阳性细胞的表达（26．850&#177;1．476）较组I（0．90&#177;0．385）明显升高（P〈0．01），组Ⅲ（8．30&#177;1．146）和组Ⅳ（9．0&#177;0．869）均较组Ⅱ显著下调（Pa〈0．01）。组Ⅲ和组Ⅳ间各项值比较差异均无显著性差异（Pa〉0．05）。结论pHGF能显著降低肾缺血再灌注损伤大鼠血清Scr水平，显著抑制其肾小管上皮细胞凋亡，对缺血性急性肾衰竭既有保护又有治疗作用。     

Smac基因过表达增强肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体诱导神经母细胞瘤细胞凋亡

目的研究Smac基因在肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）诱导的神经母细胞瘤（NB）SK-N-SH细胞凋亡中的增强作用。方法1.利用反转录（RT）-PCR从人胚肾293细胞中扩增人Smac基因全长cDNA,通过TA克隆构建重组T载体pGEM-T/Smac。2.将目的片段从重组T载体上酶切下来,构建真核细胞表达载体pcDNA3.1/Smac,并转染人NB SK-N-SH细胞。用新霉素G418筛选稳定细胞株SK-N-SH/Smac,并用Western blot鉴定Smac基因的过表达。3.用1 000μg/L的TRAIL作用于过表达Smac基因的SK-N-SH/Smac和普通的SK-N-SH细胞24 h。采用流式细胞分析检测细胞凋亡百分率。另设无TRAIL干预的SK-N-SH/Smac及正常SK-N-SH对照组。4.比色法测定各组细胞中caspase-8酶活性。结果1.成功建立稳定过表达Smac基因的NB克隆株SK-N-SH/Smac。2.流式细胞分析显示1 000μg/L的TRAIL作用24 h后,过表达Smac基因的SK-N-SH细胞凋亡百分率显著高于正常对照的SK-N-SH细胞[（44.8&#177;4.71）%vs（23.6&#177;3.05）%P〈0.05]。3.比色法测定显示,同样在1000μg/L的TRAIL作用24 h后,过表达Smac基因的SK-N-SH/Smac细胞中,caspase-8的酶活性显著高于未转染的普通SK-N-SH细胞[（0.743&#177;0.029）vs（0.476&#177;0.031）P〈0.05]。结论转染并过表达Smac基因可增强TRAIL对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的促凋亡作用。     

新生儿脐血铅水平与骨代谢指标变化的相关性研究

目的探讨新生儿脐血铅水平与骨代谢指标间的相关性。方法采集80例正常新生儿脐静脉血5ml,分别检测血铅、血清骨钙素（OC）、骨碱性磷酸酶（ALP）及25-（OH）D3。结果脐血铅水平与胎儿OC、25-（OH）D3呈显著负相关,与ALP呈显著正相关。以P50（50.45μg/L）为界,较高脐血铅组血清OC[（10.0±5.84）ng/ml]、25-（OH）D3[（47.52±28.82）μg/L]均显著低于较低脐血铅组血清OC[（19.26±4.32）ng/ml,P〈0.001]、25-（OH）D3[（56.62±26.80）μg/L,P〈0.05];高血铅组骨ALP水平[（182.64±44.67）U/L]显著高于低血铅组[（126.43±62.05）U/L,P〈0.05）]。结论胎儿期低水平铅暴露可能影响骨形成过程,阻碍正常骨矿化过程。     

中药辅助托吡酯治疗Tourette综合征

目的探讨托吡酯联合中药治疗对Tourette综合征患儿的疗效。方法将42例确诊为Tourette综合征的患儿随机分为研究组22例及对照组20例。对照组仅予口服托吡酯治疗,初始剂量0.5 mg/kg,1次/d,逐渐增加剂量,直到症状减轻或控制,最大量不超过5.0 mg/（kg.d）。研究组在此基础上经中医辨证后加服中药止抽汤治疗,治疗第12周末评价疗效。治疗前后使用耶鲁抽动症整体严重度量表（YGTSS）及治疗中需处理的不良反应症状量表（TESS）评估其疗效及不良反应。采用SPSS 11.5软件进行统计学分析。结果治疗前2组YGTSS总分无统计学差异[研究组（48.20&#177;10.42）分vs对照组（52.04&#177;10.21）分P〉0.05]。治疗第12周末,研究组YGTSS总分低于对照组[（27.88&#177;14.24）分vs（36.53&#177;17.45）分P〈0.05],研究组减分率高于对照组[（43.12&#177;18.42）%vs（33.49&#177;14.38）%P〈0.05]。治疗第12周末研究组TESS分值低于对照组[（2.16&#177;2.25）vs（4.78&#177;3.75）P〈0.05]。结论托吡酯联合中药治疗能有效改善儿童Tourette综合征的抽动症状,不良反应相对较小。     

流行性乙型脑炎患儿脑脊液和血清S100β蛋白水平的变化及其意义

目的探讨流行性乙型脑炎（乙脑）患儿脑脊液和血清S100β蛋白水平的变化及其意义。方法乙脑患儿45例,分别在极期和恢复期空腹采静脉血2mL,极期采脑脊液1mL,ELISA法测定其脑脊液和血清S100β蛋白水平。20例拟行非心脏外科手术治疗的行腰麻的患儿采取肘静脉血2mL和脑脊液1mL作为对照。采用ELISA法检测S100β蛋白水平。结果轻型、普通型、重型乙脑患儿极期脑脊液S100β蛋白分别为（0.35&#177;0.12）、（0.76&#177;0.15）、（1.29&#177;0.22）μg/L,血清S100β蛋白分别为（0.08&#177;0.04）、（0.14&#177;0.07）、（0.22&#177;0.12）μg/L;对照组脑脊液S100β蛋白为（0.05&#177;0.03）μg/L,血清S100β蛋白为（0.03&#177;0.02）μg/L。乙脑患儿极期脑脊液和血清S100β蛋白水平均显著高于对照组（Pa〈0.01）,且随临床分型加重而增高。乙脑患儿恢复期血清S100β蛋白为（0.08&#177;0.03）μg/L,较极期[（0.24&#177;0.13）μg/L]显著下降（P〈0.01）。结论乙脑患儿脑脊液和血清S100β蛋白水平与临床分型相关,检测乙脑患儿脑脊液和血清S100β蛋白水平的变化,有助于判定脑组织受损的严重程度及评估患儿的预后。     

IFN-γ增强TRAIL诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡的研究

目的 探讨γ-干扰素（IFN-γ）对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）抑制神经母细胞瘤LAN-1细胞株生长作用的影响,为TRAIL的临床应用提供理论依据。方法 以神经母细胞瘤细胞株LAN-1为对象,采用MTT比色法和流式细胞术研究IFN-γ对TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡的影响。结果 IFN-γ组、TRAIL 组和IFN-γ72h＋TRAIL组的存活分数分别为（97.12&#177;3.03）%、（83.35&#177;2.95）%、（60.05&#177;4.05）%。IFN-γ组、TRAIL 组、IFN-γ24 h ＋TRAIL组、IFN-γ 48 h＋TRAIL组和IFN-γ 72 h＋TRAIL组的凋亡率分别为（2.26&#177;0.35）%、（3.03&#177;0.68）%、（6.87&#177;0.99）%、（9.80&#177;1.85）%、（15.11&#177;2.57）%。IFN-γ 24 h＋TRAIL组的凋亡率高于IFN-γ组与TRAIL组（P 〈0.05）。随着IFN-γ预处理时间的延长,TRAIL引起LAN-1的凋亡率也明显上升（P〈0.05）。结论 IFN-γ能有效加强TRAIL对LAN-1细胞株的凋亡诱导作用。     

新生儿佝偻病骨代谢转换生化标志物检测的意义

目的探讨骨代谢转换生化标志物血清β胶原分解片断（β-CTx）、骨碱性磷酸酶（BALP）和骨钙素（BGP）测定在新生儿佝偻病诊断中的意义。方法选取30例佝偻病新生儿（病例组）和30例健康新生儿（健康对照组）,每例儿童均采集空腹静脉血2mL,电化学发光免疫分析法检测血清β-CTx,ELISA法测定BALP和BGP水平,并对这三项测定指标的灵敏度、特异度、漏诊率、误诊率、诊断符合率、Youden指数、阳性预测值和阴性预测值进行计算和分析,同时测定其血清钙、磷和AKP水平,并进行左手腕关节X线摄片。结果病例组血清β-CTx、BALP和BGP水平分别为（1.58&#177;0.49）μg/L、（291.5&#177;78.4）U/L和（15.2&#177;5.9）μg/L,健康对照组分别为（1.16&#177;0.38）μg/L、（137.1&#177;64.7）U/L和（10.1&#177;4.3）μg/L,病例组明显高于对照组,二组比较均有极显著性差异（Pa〈0.001）。病例组血清β-CTx、BALP和BGP水平异常者分别为28例（93.3%）、26例（86.7%）和24例（80.0%）,明显高于对照组[2例（6.7%）、2例（6.7%）和3例（10.0%）]（Pa〈0.001）。血清β-CTx的灵敏度、特异度、诊断符合率、Youden指数、阳性预测值和阴性预测值均高于血清BALP和BGP,但无统计学意义,其漏诊率和误诊率显著低于血清BALP和BGP（χ^2=9.7124,11.2913,16.9212,18.3671Pa〈0.01）。结论血清BALP和BGP水平测定是准确反映骨代谢转换的生化标志物,也是诊断新生儿佝偻病特异而敏感的指标;血清β-CTx水平测定是诊断新生儿佝偻病、反映骨吸收活动特异性很高的敏感指标。     

不同条件机械通气氧吸入致新生兔肺损伤的实验研究

目的探讨不同吸气峰压（PIP）机械通气（MV）伴450mL/L氧吸入致新生兔肺损伤的病理改变。方法将60只日龄1～5d的新生兔随机分为高PIP组、中PIP组、低PIP组进行MV与未通气对照组,通气后1、3、6h3个时间点取其左肺,病理切片及电镜观察其肺组织结构的改变,行肺泡灌洗液（BALF）蛋白水平测定、细胞计数、沉渣涂片细胞分类,并结合其肺湿干比分析。结果1.光镜下中PIP组肺损伤较低PIP组及高PIP组轻,低PIP组肺叶内局部肺不张较明显,高PIP组肺出血、肺大泡形成较明显。2.随着通气的进行,BALF中细胞计数增高,低PIP组1、3、6h细胞计数分别为：（12.12&#177;7.01）&#215;10^12L^-1、（12.62&#177;2.98）&#215;10^12L^-1、（18.55&#177;5.63）&#215;10^12L^-1,中PIP组为（10.71&#177;2.34）&#215;10^12L^-1、（14.73&#177;3.63）&#215;10^12L^-1、（15.48&#177;1.23）&#215;10^12L^-1,高PIP组为（26.59&#177;7.896）&#215;10^12L^-1、（22.36&#177;6.799）&#215;10^12L^-1、（37.34&#177;11.23）&#215;10^12L^-1;分类中以巨噬细胞和淋巴细胞为主,分叶核升高不明显。BALF中细胞分类计数表明不同的通气模式或同一通气模式不同的时间点细胞反应不同。3.高PIP通气时,Ⅱ型上皮细胞（AT-Ⅱ）增生向AT-Ⅰ细胞转化加速。低压力通气时以AT-Ⅱ细胞肿胀、肺组织水肿为主,低PIP组通气6h就会出现胶原纤维增生。结论新生兔吸入450mL/L的氧时MV会引起肺泡、基底膜结构改变、胶原纤维增生;AT-Ⅱ细胞、淋巴细胞、巨噬细胞变化可能是新生兔机械通气肺损伤的病理基础。MV时肺膨胀有不均一性,低压力通气易致不张伤,高压力通气易致气压伤,适当的压力能减轻肺损伤。     

吉西他滨对白血病细胞系HL-60细胞的抑制作用

目的观察吉西他滨对HL-60细胞增殖、凋亡及C-myc蛋白表达的影响,探讨吉西他滨对白血病细胞的作用及其与c-myc间的关系,为其作为新的抗白血病药物提供实验依据。方法体外培养HL-60细胞,吉西他滨及阿糖胞苷处理细胞0、24、48、72 h后倒置显微镜下观察细胞生长状态及形态学改变;锥虫蓝拒染法计数活细胞,计算细胞存活率,观察吉西他滨对细胞生长的影响;应用流式细胞仪进行细胞周期分析、检测凋亡率;免疫组织化学染色法检测C-myc蛋白表达改变。结果24 h时不同质量浓度吉西他滨组均显著抑制细胞存活,随药物质量浓度增加存活率减小,各组间比较有显著性差异（P〈0.01）;各组随作用时间延长存活率降低,在48、72 h抑制作用显著强于24 h;G0/G1期细胞比例升高而S期细胞比例降低,细胞阻滞在G0/G1期;凋亡率为（17.4 f1&#177;4.88）%,较空白组（4.29&#177;3.07）%和阿糖胞苷对照组（8.16&#177;3.43）%显著升高（Pa〈0.01）;免疫组织化学染色示吉西他滨组C-myc蛋白在细胞中表达阳性平均积分为42.00&#177;8.54,较空白组（248.33&#177;20.74）和阿糖胞苷组（102.67&#177;12.06）显著降低（Pa〈0.01）。结论吉西他滨对HL-60细胞生长及C-myc蛋白表达有明显抑制作用;能使细胞周期发生重新分布,将细胞阻滞在G0/G1期,从而抑制细胞增殖,并可诱导白血病细胞凋亡;在抑制HL-60细胞增殖、诱导其凋亡及抑制C-myc表达方面,吉西他滨的作用显著强于相同剂量的阿糖胞苷,有望成为新药物用于白血病的治疗。     

N-乙酰半胱氨酸对新生小鼠肝细胞内毒素损伤的保护作用

目的探讨N-乙酰半胱氨酸对新生小鼠肝细胞内毒素损伤时的保护作用,为新生小鼠内毒素肝损伤的防治研究提供理论依据。方法采用胶原酶消化组织块法分离新生小鼠的肝细胞,将细胞分内毒素处理组（LPS组）及N-乙酰半胱氨酸预处理组（NAC组）。LPS组培养基中加入LPS 10μg／ml;NAC组先在培养基中加入N-乙酰半胱氨酸5mmol／L,孵育1h后再加入LPS 10μg／ml。分别于加入LPS 0、6和12h收集各组肝细胞上清和肝细胞,每组12例,以生化法检测培养上清的丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）和一氧化氮（nitric oxide,NO）的水平,并以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测各组细胞诱导型一氧化氮合成酶（induced nitric oxide synthase,iNOS）mRNA的表达。结果LPS组在0、6、12h的ALT值分别为（21．1±4．78）U／L、（59．8±8．59）U／L、（89．6±15．30）U／L,NO水平分别为（1．6±0．31）μmol／L、（6．6±0．81）μmol／L、（7．8±1．01）μmol／L,iNOS mRNA水平分别为0．17±0．023、0．71±0．091、0．71±0．097。LPS组的ALT和NO、iNOS mRNA水平在6、12h较0h明显升高,差异有极显著统计学意义（P〈0．01）;NAC组上清中ALT和NO水平在0、6、12h分别为（20．6±5．98）U／L、（40．8±7．30）U／L、（55．4±5．48）U／L和（1．7±0．26）μmol／L、（3．2±0．71）μmol／L、（4．0±0．71）μmol／L,肝细胞iNOS mRNA的表达水平在0、6、12h分别为0．18±0．026、0．41±0．060、0．40±0．067。经NAC预处理后,在6、12h上清中ALT的水平与LPS组比较明显降低,而且NO水平以及肝细胞iNOS mRNA的表达与LPS组比较也明显降低,差异均有极显著统计学意义（P〈0．01）。结论NAC对新生小鼠肝细胞内毒素损伤有保护作用,NAC可能通过抑制LPS激活iNOS而发挥保护作用。     

新生儿重症监护病房早产儿血管紧张素转化酶水平变化及其与基因插入/缺失多态性的关系

目的检测新生儿重症监护病房早产儿血管紧张素转化酶（ACE）基因型、血清ACE水平在出生1周内的变化，探讨ACE基因插入／缺失多态性与血清ACE水平和病情变化的关系。方法早产儿85例，出生第3天取其末梢血提取DNA，确定ACE基因型，出生第1、3、7天分别采用紫外分光光度计法检测早产儿血清ACE水平，并进行危重病例评分。结果早产儿85例中，DD基因型19例，ID基因型34例，Ⅱ基因型32例。出生第1天DD基因型早产儿血清ACE水平[（33．42&#177;7．93）U／L]显著高于Ⅱ基因型早产儿[（25．97&#177;8．32）U／L]（P〈0．01），高于ID基因型早产儿[（31．53&#177;7．56）U／L]，但差异无统计学意义（P〉0．05）；ID基因型早产儿血清ACE水平显著高于Ⅱ基因型（P〈0．01）；在出生第3天和第7天，3种基因型早产儿血清ACE水平均逐渐下降，DD基因型早产儿高于ID基因型，二者显著高于Ⅱ基因型。出生第1天DD基因型的危重病评分[（87．37&#177;8．30）分]低于1D基因型[（95．82&#177;5．85）分]和Ⅱ基因型[（95．88&#177;6．85）分]，差异非常显著（Pa〈0．01），ID和Ⅱ基因型间无差异；出生第3天，DD基因型的危重病评分[（92．95&#177;7．10）分]显著低于ID基因型[（96．94&#177;5．85）分]，而与Ⅱ基因型[（96．44&#177;6．87）分]无差异，ID和Ⅱ基因型间亦无差异；出生第7天，3种基因型间危重病评分均无差异。结论重症疾病时DD基因型携带者的病情相对重，血清ACE水平相对高，虽然疾病可能影响血清ACE水平，但是决定ACE水平的根本因素是个体间基因型的差异。     

黄芪甲甙治疗Balb/c小鼠慢性柯萨奇B3病毒性心肌炎的疗效

目的观察黄芪甲甙对实验性小鼠柯萨奇B3病毒（CVB3）性心肌炎的疗效。方法Balb／c小鼠80只随机分为模型组（30只）、干预组（30只）、对照组（20只）。模型组和干预组小鼠1次／月腹腔接种CVB3，共3个月；对照组腹腔注射等容积不含病毒的培养液。对照组和模型组小鼠每日以饮用水喂养，干预组小鼠以加有羧甲基纤维素钠助溶的黄芪甲甙饮用水（质量浓度为300mg／L）喂养，观察小鼠生存率。3个月后处死所有存活小鼠，HE染色进行心肌病理检查、苦味酸天狼星红胶原染色后以自动图像分析系统计算胶原容积积分（CVF），采用原位末端标记法检测其心肌细胞凋亡指数，半定量反转录聚合酶链反应进行心肌CVB3 RNA和心肌组织凋亡检测。结果模型组生存率为59．7％，干预组生存率为76．7％，二组比较有显著性差异（χ^2=4．26P〈0．05）；模型组与干预组病理积分分别为（3．86&#177;0．47）、（1．72&#177;0．56），二组比较有显著性差异（t=4．21 P〈0．01）；模型组与干预组CVF分别为（17．4&#177;1．2）％、（8．6&#177;0．9）％，二组比较有显著性差异（χ^2=5．38P〈0．05）；模型组与干预组心肌细胞凋亡指数分别为（19．6&#177;5．2）％、（4．3&#177;2．5）％，二组比较有显著性差异（χ^2=35．16 P〈0．01）。干预组心肌组织中CVB3 RNA水平与模型组比较有非常显著的统计学意义[（0．69&#177;0．38）vs（1．24&#177;0．57），t=4．26 P〈0．01]。结论黄芪甲甙可能成为一种有效的治疗Balb／c小鼠慢性CVB3心肌炎的药物。     

产前皮质激素及产后肺泡表面活性物质防治新生儿呼吸窘迫综合征的疗效

目的探讨产前应用皮质激素（ACS）联合产后应用外源性肺表面活性物质（PS）与单一应用防治新生儿呼吸窘迫综合征（RDS）的疗效。方法选取2003年1月-2007年1月本院NICU收治的143例RDS新生儿。随机分为4组：第1组为产前应用ACS联合产后应用PS （n=36）;第2组为单一产前应用ACS （n=33）;第3组为单一产后应用PS （n=39）;第4组为2种治疗措施均未采用（n=35）。对4组患儿的一般资料如性别、胎龄、出生体质量、分娩方式、Apgar评分、产时复苏情况、围生期并发症进行分析,并对不同组间应用鼻导管吸氧、头罩吸氧、持续呼吸道正压（CPAP）、机械通气（MV）等不同氧疗模式的时间,治愈的平均治疗时间及疗效进行比较。结果 4组患儿的一般资料和临床特征相似（Pa〉0.05）。第1、2、3、4组采用鼻导管吸氧时间分别为（75.81&#177;15.63）、（130.09&#177;27.32）、（150.67&#177;28.59）、（174.32&#177;25.92） h （P=0.041）;头罩吸氧时间分别为（37.16&#177;5.51）、（55.29&#177;11.71）、（62.69&#177;12.39）、（100.75&#177;28.10） h （P=0.047）;CPAP时间分别为（24.33&#177;4.41）、（27.44&#177;4.47）、（26.53&#177;3.13）、（56.50&#177;5.50） h （P=0.005）;MV时间分别为（56.12&#177;15.65）、（110.19&#177;21.59）、（127.79&#177;26.36）、（156.61&#177;12.92） h （P=0.009）;第1组采用MV的几率最低。4组患儿住院天数分别为（15.89&#177;1.29）、（21.61&#177;2.30）、（28.31&#177;3.40）、（32.73&#177;4.57） d（P=0）;治愈率分别为63.89%、51.52%、35.90%、20.0%（P=0.005）。结论产前应用ACS联合产后外源性补充PS是治疗RDS的最佳措施,单一产前应用ACS对RDS的疗效优于单一产后应用PS。     

黄芪对哮喘大鼠肺组织信号转导子和转录激活子4表达的调控

目的观察黄芪对大鼠哮喘模型肺组织信号转导子和转录激活子4（STAT4）蛋白及其mRNA表达的影响。方法用卵清白蛋白建立哮喘模型,SD大鼠随机分成4组：正常对照组、哮喘组、低剂量黄芪组和高剂量黄芪组,每组10只鼠。留取支气管肺泡灌洗液（BALF）进行嗜酸性粒细胞（EOS）计数和分类计数;应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法测定BALF中IL-4和IL-12浓度;采用免疫组化法和原位杂交法分别检测STAT4蛋白和STAT4 mRNA的表达。结果（1）哮喘组BALF中EOS绝对值和EOS占细胞总数的百分比[（EOS％）（35．8±7．3）×10^7／L,（8．20±1．75）％]均显著高于正常对照组[（1．5±1．0）×10^7／L,（0．70±0．48）％]（P〈0．01）,黄芪组上述指标[（14．9±2．4）×10^7／L,（4．70±0．82）％;（11．0±1．8）×10^7／L,（3．56±0．53）％]均低于哮喘组（P〈0．01）;（2）BALF中IL-4浓度（ng／L）哮喘组（25．70±7．36）显著高于对照组（8．55±2．97）（P〈0．01）,黄芪组[（13．87±3．61）,（11．67±3．05）]均显著低于哮喘组（P〈0．01）;BALF中IL-12浓度（ng／L）哮喘组（16．10±3．38）显著低于对照组（42．33±9．66）（P〈0．01）,黄芪组[（31．89±5．46）,（35．26±6．03）]均显著高于哮喘组（均为P〈0．01）;（3）免疫组化和原位杂交显示,哮喘组肺组织STAT4蛋白和STAT4 mRNA表达的强度[（0．096±0．012）,（0．098±0．011）]均低于对照组[（0．216±0．034）,（0．228±0．032）],黄芪组[（0．176±0．012）,（0．185±0．023）;（0．183±0．011）,（0．201±0．019）]较哮喘组均明显升高（均为P〈0．01）,其主要表达细胞是气道平滑肌细胞和肺细小动脉的血管平滑肌细胞及内皮细胞;（4）肺组织中STAT4及其mRNA表达分别与BALF中的IL-12浓度呈显著正相关（r=0．897、0．910,P〈0．01）;而与BALF中的IL-4浓度、EOS数量均分别呈显著负相关[（r=-0．693、-0．668,P〈0．01）,（r=-0．891、-0．897,P〈0．01）]。结论黄芪有抑制哮喘气道EOS性炎症的作用,上调气道平滑肌细胞、血管平滑肌细胞及内皮细胞STAT4蛋白及其mRNA表达,使IL-12合成增加可能为其作用机制。     

败血症新生儿外周血中性粒细胞CD64表达的意义

目的检测败血症新生儿外周血中性粒细胞表面CD64（Fcγ-RⅠ）表达水平,探讨CD64对新生儿败血症的诊断价值。方法将60例败血症新生儿和20例无感染症状的新生儿进行外周血中性粒细胞CD64及血清CRP检测。根据血培养结果分为血培养阳性组（24例）、血培养阴性组（36例）。结果血培养阳性组CD64为（6681.95&#177;2074.89）分子数/细胞,血培养阴性组为（3306.89&#177;962.43）分子数/细胞,非感染组为（2065.45&#177;841.68）分子数/细胞,血培养阳性组CD64水平显著高于血培养阴性组和非感染组,3组比较有极显著性差异（P〈0.001）。当CD64取临界值为5141分子数/细胞,其诊断新生儿败血症的敏感度为92%,特异度为97%。血培养阳性组CRP为（34.06&#177;19.60）mg/L,血培养阴性组为（13.24&#177;7.95）mg/L,非感染组为（7.44&#177;2.62）mg/L,血培养阳性组CRP水平显著高于血培养阴性组和非感染组,3组比较有极显著性差异（P〈0.001）。当CRP取临界值为17.1 mg/L时,其诊断新生儿败血症的敏感度为88%,特异度为81%。结论败血症新生儿外周血中性粒细胞表面CD64表达及血清CRP水平均显著增加,可作为早期诊断新生儿败血症的实验室指标,且中性粒细胞表面CD64表达较血清CRP有更高的敏感度和特异度。