骨肉瘤组织中VEGF和BMP-2表达及微血管密度与转移关系的研究

目的：研究骨肉瘤组织中VEGF和BMP-2的表达及微血管密度（microvessel density,MVD）与转移的关系。方法：用免疫组织化学法检测28例骨肉瘤组织中VEGF、BMP-2的表达和MVD。结果：骨肉瘤组织中VEGF的阳性信号主要位于细胞胞质,BMP阳性信号呈胞质型。VEGF、BMP-2表达和MVD与肿瘤转移密切相关（χ^2=15.731,P=0.000;χ^2=9.257,P=0.006;t=6.071,P=0.001）,VEGF表达与MVD密切有关（t=3.677,P=0.006）,VEGF的表达强度与BMP-2表达密切有关（χ^2=.257,P=0.006）。结论：在骨肉瘤的发生发展中VEGF是促进微血管生成的主要细胞因子;VEGF可能影响BMP的骨诱导过程;VEGF和BMP的表达水平与骨肉瘤的转移发生有关,检测VEGF表达BMP-2与MVD值可作为判断骨肿瘤预后的重要指标。     

血管内皮生长因子及其受体与骨肉瘤关系的研究进展

血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）是一种序列高度保守、高度特异性的促血管内皮细胞生长因子,广泛分布于人和动物体内的大脑、肾脏、肝脏、脾脏、胰腺和骨骼等组织中,对内皮细胞具有强烈的促有丝分裂作用,刺激血管内皮细胞增殖和血管通透性增加,促进新生血管形成。ＶＥＧＦ通过与血管内皮细胞表面受体（ＶＥＧＦＲ）特异性结合发挥生物学效应。抑制ＶＥＧＦ及ＶＥＧＦＲ的活性可以减缓或阻滞骨肉瘤侵袭和转移。研究表明,ＶＥＧＦ及ＶＥＧＦＲ对肿瘤血管及淋巴管的生成及肿瘤侵袭和转移起重要作用。本文对ＶＥＧＦ及ＶＥＧＦＲ与骨肉瘤血管与淋巴管生成及其侵袭与转移的关系作一综述。     

沉默Etheràgo-go1基因调控VEGF／PI3K／AKT抑制骨肉瘤增殖和血管生成的研究

目的：检测沉默 Ether àgo-go 1（Eag1）基因对骨肉瘤增殖和血管生成的影响及其可能的调控机制。方法：构建抑制 Eag1表达的短发卡 RNA （short hair RNA,shRNA）重组腺病毒载体 Ad5-Eag1-shRNA 并感染骨肉瘤细胞株。采用实时定量聚合酶链反应（real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR）和蛋白印迹技术（Western blot analysis,WB）检测 Ad5-Eag1-shRNA 的感染效能。采用 CCK-8法和裸鼠成瘤实验检测感染前后骨肉瘤细胞增殖和裸鼠骨肉瘤体积的变化。采用免疫组化技术和 WB 技术分别检测感染前后裸鼠肿瘤组织中微血管密度（microvessel density,MVD）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的变化。采用 WB 技术检测感染前后骨肉瘤细胞中 VEGF、磷脂酰肌醇3-激酶（phosphoinositide 3-kinase,PI3K）和蛋白激酶 B （protein kinase B,AKT）的表达变化。结果：构建的重组腺病毒载体 Ad5-Eag1-shRNA 具有良好的感染效能。感染Ad5-Eag1-shRNA 可沉默骨肉瘤中 Eag1的表达并能有效地抑制骨肉瘤细胞增殖和裸鼠骨肉瘤生长（均 P ＜0.001）,同时下调裸鼠骨肉瘤组织中 MVD 密度和 VEGF 的表达（均 P ＜0．001）。感染 Ad5-Eag1-shRNA 可下调骨肉瘤细胞中 VEGF 的表达（P ＜0.05）并抑制 PI3K 和 AKT 的磷酸化（均 P ＜0．001）。结论：沉默 Eag1可能通过调控 VEGF ／PI3K／AKT 信号通路抑制骨肉瘤增殖和血管生成。     

Ad．VEGF．siRNA抑制荷人骨肉瘤裸鼠血管生成的形态学研究

背景与目的：血管内皮生长因子是骨肉瘤血管形成重要的促进因子,本研究通过抗血管生成方法,观察其抑制荷人骨肉瘤裸鼠血管生成的形态学表现。方法：取4～8周龄的Balb／c裸鼠作为实验动物,人骨肉瘤细胞株MG63皮下接种法构建骨肉瘤的动物模型。建模成功后将荷人骨肉瘤的裸鼠随机分为3组,每组15只。A组使用自行构建的Ad—VEGF-siRNA干扰新生血管形成;B、C组分别使用等剂量的Ad-EGFP或PBS作为对照。实验维持19d,药物使用后隔日测量肿瘤体积和体重．绘制肿瘤生长曲线：采用常规HE染色、VEGF和CD31相关抗原免疫组化染色观察各组肿瘤标本：各组随机抽取一个标本在透射电镜下观察仿血管发生的超微结构。结果：实验结束时,A组裸鼠瘤体体积为（0．31±0．18）cm^3,重量为（0．75±0．21）g,微血管密度（microvessed density,MVD）为5．79±0．34,VEGF表达为235228．09±123244．41,B、C照组裸鼠瘤体积分别为（1．21±1．29）cm^3、（1．43±0．95）cm^3;瘤重分别为（1．19±0．27）g、（1．19±0．35）g;MVD分别为11．00±0．68、10．42±0．10：VEGF表达分别为9641992．40±90479．62、981298．00±213590．50。A组肿瘤体积、重量、MVD和VEGF表达均显著低于B、C组。MVD和VEGF呈正相关关系,相关系数为0．9989。Ad-VEGF—siRNA组仿血管发生数量1．4000±0．5477,明显小于Ad—EGFP和PBS对照组。透射电镜可见肿瘤细胞形成的仿血管。结论：通过宏观和微观的形态学观察,证实Ad—VEGF-siRNA介导的以VEGF为靶向的抗血管生成能够抑制荷人骨肉瘤裸鼠的血管生成。     

VEGF与PTEN在骨肉瘤中的表达及临床意义

[目的]研究骨肉瘤组织中VEGF和PTEN的表达及相关性，为治疗骨肉瘤与评估预后提供理论依据。[方法]应用免疫组织化学方法对40例骨肉瘤和20例骨软骨瘤标本进行检测，并利用SPSS12．0软件进行数据分析其表达意义和相关性。[结果]骨肉瘤中VEGF表达率为57．5％（23／40），在骨软骨瘤中不表达。VEGF在骨肉瘤和骨软骨瘤中阳性表达率有显著性差异（x^2=18．65，P〈0．05）。骨肉瘤中PTEN表达率为55．0％（22／40），在骨软骨瘤中表达率为90．0％（18／20）。在骨肉瘤和骨软骨瘤中阳性表达率有显著性差异（X^2=7．35．P〈0．05）。VEGF和PTEN在骨肉瘤中的阳性表达呈负相关（r=-0．3710，P=0．0189）。[结论]联合检测骨肉瘤组织PTEN、VEGF，作为判定骨肉瘤侵袭转移能力的一项客观指标，可能对骨肉瘤的预后判断具有重要意义，PTEN表达阳性而VEGF表达阴性者，可能预后较好。     

乳腺癌VEGF的表达和微血管形成的关系及意义

目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)与肿瘤内微血管形成的关系 ,以及微血管密度 (MVD)与乳腺癌淋巴结转移和预后的关系。方法 :采用免疫组化 S- P法对 4 0例人乳腺浸润性导管癌组织中的 VEGF和 MVD进行检测。结果 :VEGF阳性者 MVD值显著高于阴性者 ,VEGF表达和MVD与乳腺癌淋巴结转移关系密切。结论 :VEGF与乳腺癌血管生成密切相关 ,VEGF和 MVD表达的增高对乳腺癌淋巴结转移有促进作用 ,MVD和 VEGF均可作为反映乳腺癌生物学行为的指标之一     

骨肉瘤血行转移与CXCR4、VEGF相关性研究

Objective:We determine whether chemokine receptor CXCR4 and vascular endothelial growth factor (VEGF) expression related to the metastasis and survival outcome of patients with osteosarcoma. Methods:Tissue microarray (TMA) was used to detect the expression of CXCR4 and VEGF in 56 osteosarcoma patient samples. Two-year follow-up was per-formed to observe the metastatic behavior and overall survival of osteosarcema patients. Results:There was a significant correlation between the expression levels of CXCR4 and VEGF in 56 osteosarcoma patient samples (P=0.002). Univariate analysis revealed the expression of CXCR4 and VEGF was not associated with age, gender and the level of ALP but as-sociated with clinical stage. Conclusion:These data raises the possibility that VEGF could regulate the levels of CXCR4 to promote the migration of tumor cells to target organs. CXCR4 and VEGF expression are highly correlated with metastatic progression in patients with osteosarcoma and their immunohistochemical expression have predictive value for the metastatic development.     

抗血管内皮生长因子抗体抑制成骨肉瘤生长及血管生成的实验探讨

目的:观察抗血管内皮生长因子(VEGF)抗体对人成骨肉瘤生长的影响。方法:用抗VEGF单克隆抗体100!g隔天于治疗组荷瘤裸鼠肿瘤周围及瘤块内注射,对照组用等量PBS注射,共给药6次。测量两组裸鼠肿瘤体积及肿瘤湿重,肿瘤组织行免疫组织化学染色观察微血管密度(MVD),光镜下病理学检查。结果:治疗组与对照组的肿瘤体积、重量、MVD值两组间差异有显著性,抑瘤率达54.05%。病检发现治疗组肿瘤内有散在点状或线状坏死灶,甚至小片状坏死灶,对照组很少出现坏死灶。结论:抗VEGF单克隆抗体能够有效抑制裸鼠体内人成骨肉瘤移植瘤的血管生成抑制肿瘤生长。     

miR-455-3p在胃癌中的表达及其与MVD和VEGF表达的相关性研究

目的 探讨miR-455-3p在胃癌中的水平及其与微血管密度（MVD）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的关系。方法 采用实时荧光定量PCR检测80例胃癌组织（胃癌组）中miR-455-3p水平,免疫组化法检测80例胃癌组织中MVD和VEGF表达,并分析胃癌组织中miR-455-3p水平与MVD和VEGF表达的相关性。选取同期的37例浅表性胃炎和12例正常胃黏膜组织作对照（对照组）。结果 胃癌组的miR-455-3p水平为1.16±0.59,低于对照组的2.61±0.88,差异有统计学意义（P＜0.05）;胃癌组的VEGF阳性表达率和MVD分别为71.3％（57／80）和54.9±7.3,均高于对照组的28.6％（14／49）和27.5±6.1,差异均有统计学意义（P＜0.05）;胃癌组织中miR-455-3p水平与VEGF表达（r=-0.783,P＜0.05）和MVD（r=-0.824,P＜0.05）均呈负相关。结论 miR-455-3p在胃癌中为低表达,并与VEGF表达和MVD呈负相关,有可能在调控胃癌组织血管生长中发挥重要作用。     

血管内皮生长因子介导的卵巢恶性肿瘤浸润生长的实验研究

 目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在卵巢癌细胞肿瘤血管形成及浸润中的作用。方法脂质体介导VEGFcDNA转染卵巢癌细胞OVCAR3,并经Northernblot和Westernblot法检测转染VEGFcDNA前后卵巢癌细胞中的VEGFmRNA和蛋白表达水平。将VEGF表达阳性的细胞接种于裸鼠皮下观察负荷瘤生长速度、重量并采用免疫组化的方法检测其微血管密度(MVD)。结果(1)VEGFcDNA转染后的卵巢癌细胞系VEGFmRNA和蛋白表达水平明显高于转染前(P<0.05)。(2)体外实验显示转染与非转染细胞系生长曲线基本相同。(3)VEGFcDNA转染后的卵巢癌细胞系接种裸鼠后其负荷瘤生长速度和重量均明显高于未转染的裸鼠负荷瘤(P<0.05)。(4)VEGF表达阳性的裸鼠负荷瘤其MVD也明显高于VEGF表达阴性的裸鼠负荷瘤(P<0.05)。结论VEGF通过促进肿瘤新生血管的增多进而在卵巢癌浸润生长中发挥作用。     

人骨肉瘤中bFGF、Endostatin表达及其临床意义

目的探讨bFGF和Endostatin在人骨肉瘤中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化Elivision两步法检测30例骨肉瘤和30例骨软骨瘤中bFGF、Endostatin和CD34的表达。结果(1)在骨肉瘤中bFGF、Endostatin和CD34的阳性率分别为76.7%、86.7%、96.7%,三者在骨肉瘤和骨软骨瘤中的阳性表达率均有显著性差异(P<0.01)。(2)Endostatin与CD34在骨肉瘤中表达存在正相关关系(P<0.05),相关系数rs为0.528,Endostatin表达在组织高、低分化间有显著性差异(P<0.05),Endostatin表达与骨肉瘤转移有关(P<0.05)。(3)骨肉瘤标本中bFGF与Endostatin表达不存在相关关系(P>0.05)。结论骨肉瘤内血管新生不仅为肿瘤生长提供条件,也是转移的基础。Endostatin可作为术后肿瘤转移的预测因子及判断预后的参考指标。     

VEGF在非小细胞肺癌中表达的意义

采用免疫组化方法检测６３例肺癌和１２例正常肺组织中微血管密度和ＶＥＧＦ的表达。结果显示，肺癌与正常肺组织中微血管密度和ＶＥＧＦ的表达，具有显著性差异（Ｐ＜０．０５），肺癌的微血管密度随着ＶＥＧＦ表达增强而增多；ＶＥＧＦ表达与肺癌分化程度、分期及预后密切相关（Ｐ＜０．０５）。结果表明ＶＥＧＦ参与肺癌的发生、发展过程，可作为肺癌生物学行为的一项评估指标。     

肝癌发生过程中CD31与VEGF的表达

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF),CD31在人肝癌发生过程中结节性病变组织中的表达。方法:对肝癌28例,高度发育不良结节9例,低度发育不良结节13例,肝硬化结节22例进行了VEGF,CD31免疫组织化学法检测,并进行半定量分析。结果:CD31在肝癌组织中的表达高于发育不良结节和肝硬化结节(P<0.05);肝癌组织VEGF表达水平最高(P<0.05);高度发育不良结节组织中VEGF表达水平高于低度发育不良结节和肝硬化结节组织(P<0.05);肝癌发生过程中VEGF在和微血管密度(MVD)水平呈正相关。结论:VEGF和CD31的阳性表达为肝癌与肝癌发生过程中的结节性病变的鉴别诊断提供了较为可靠的形态学标记。     

小剂量希罗达抗小鼠结肠癌生长及微血管的形成

 目的 研究小剂量希罗达对小鼠结肠癌CT 26移植瘤生长和微血管生成的影响。 方法 建立小鼠结肠癌皮下移植瘤模型,随机分组：治疗组持续小剂量希罗达90mg/kg（每只0.1ml）灌胃,对照组给予相应体积生理盐水。给药后观察每组小鼠肿瘤生长情况,肿瘤长出后隔天测量肿瘤体积,接种肿瘤细胞两周后,处死全部小鼠,免疫组织化学法检测肿瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）表达及肿瘤组织微血管密度（MVD）,Western blot法检测肿瘤组织VEGF的表达。 结果 治疗组肿瘤生长受到明显抑制,治疗组VEGF表达强度及MVD低于对照组,VEGF与MVD间呈正相关;Western blot检测治疗组VEGF表达明显减弱。实验结束时未见明显不良反应。 结论 小剂量希罗达能通过抑制肿瘤微血管生成发挥抗肿瘤作用,其机制与抑制VEGF的表达有关。     

VEGF在前列腺癌中的表达及与肿瘤MVD的关系

目的:研究前列腺癌组织中的血管内皮生长因子（VEGF）表达与前列腺癌肿瘤微血管密度（MVD）的关系。方法:选取81例确诊前列腺癌患者及良性前列腺增生患者52例。采用免疫组化法进行染色,观察两种组织中VEGF、MVD的表达情况,并分析VEGF与前列腺癌患者的临床病理特征关系及与MVD之间的关系。结果:前列腺癌组织中VEGF阳性表达率（69.14%）显著的高于前列腺良性增生组（28.85%）,差异具有统计学意义（P<0.05）。前列腺癌组织中MVD计数为（36.7±8.2）显著高于前列腺良性增生组（19.3±5.8）,差异具有统计学意义（P<0.05）。前列腺癌组织中VEGF表达阳性率与患者的TNM分期、淋巴结转移、分化程度具有显著关联（P<0.05）。VEGF表达阳性的癌组织中MVD（40.3±7.5）显著多于VEGF表达阴性的癌组织（28.7±6.1）,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:前列腺癌组织中VEGF高表达,MVD生成增多,VEGF与患者的临床病理特征具有一定的关系,VEGF阳性表达患者的MVD增生水平越高。     

非小细胞肺癌VEGF的表达与临床相关性

目的：研究血管内皮生长因子的表达和肿瘤内微血和 度测定在非小细胞肺癌中的意义及与性别、病理类型、临床分期、化疗疗效、生存期之间的相关性。方法：用免疫组织化学方法对45例非小细胞肺癌患者经纤支镜活检、经皮肺活检取得的标本检测VEGF的表达，并用CD31抗体标记癌组织血管内皮细胞，计算MVD。结果：VEGF阳性表达率77.8%，VEGF的表达与MVD均与性别、病理类型无关，与临床分期、化疗疗效呈正相关（P＜0.05)。VEGF的表达与癌组织MVD呈正相关（P＜0.05)，VEGF阳性组的生存期与阴性组相比无显著性差异。结论：VEGF的表达对肿瘤血管形成、转移起重要作用，VEGF表达阳性的患者单纯化疗能提高局控率但不能延长生存期。     

PTHR1调控VEGF干预骨肉瘤组织血管形成及增殖的机制研究

目的：通过分析临床样本构建细胞转染调控模型,分析甲状旁腺激素1型受体（parathyroid hormone type 1 receptor,PTHR1）调控骨肉瘤血管生成和增殖的分子机制,为骨肉瘤的治疗提供新的临床思路。方法：分析2017年1月至2019年12月就诊于大连理工大学附属肿瘤医院（辽宁省肿瘤医院）与深圳市第二人民医院（深圳大学附属第一医院）,经组织病理学确认的四肢经典型骨肉瘤患者临床样本共50例,构建PTHR1沉默的骨肉瘤细胞模型,分析PTHR1在肿瘤组织样本中的差异表达,探索PTHR1表达水平与肿瘤增殖及患者生存率之间的相关性。通过体外实验下调PTHR1表达,分析其对血管生成的调控作用。结果：在骨肉瘤患者的临床样本中,PTHR1在肿瘤组织中的表达量显著高于瘤旁组织,且随着PTHR1表达量显著增高,患者肿瘤体积的增大,远期生存率下降。术后36个月生存率,PTHR1高表达组患者显著低于低表达组。在体外实验中,通过沉默PTHR1表达可以有效降低血管生成素血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达,抑制肿瘤细胞增殖,在...     

CD105和VEGF在胃癌中的表达及临床意义

目的探讨CD105在胃癌新生血管中的表达及其作为肿瘤新生血管标记物的临床价值.方法采用鼠抗人CD105单克隆抗体(Mab),应用免疫组织化学技术检测80例胃癌手术切除标本及80例对照组织的微血管密度(MVD),并以血管内皮生长因子(VEGF)的表达作为对照研究.结果MVD及VEGF在胃癌组织与对照组织间表达的差异有显著性(P＜0.001,P＜0.01);VEGF在胃癌组织中的表达与CD105的表达呈显著正相关(P＜0.01);胃癌组织MVD和VEGF的表达均与胃癌的淋巴结转移、远处转移及Dukes分期有关(P＜0.01).结论CD105在胃癌组织新生血管有良好的表达,可以作为胃癌新生血管有价值的标记物.以CD105测得的MVD可以被认为是与肿瘤生长、转移及预后有关的一种重要指标.     

VEGF及其受体KDR在非小细胞肺癌中的表达及与肿瘤血管形成关系

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）及其受体（KDR）的表达与非小细胞肺癌（NSCLC）血管形成的关系。方法：分别应用免疫组织化学S-P法和原位分子杂交法检测62例NSCLC组织和16例肺的良性瘤样病变组织中的VEGF和KDR mRNA的表达，并对血管进行染色、计数。结果：62例肺癌组织中46例有VEGF的表达（占74．29％），阳性表达位于肿瘤细胞胞膜及胞质；KDR mRNA在49例中有阳性表达（占79．03％），阳性表达位于肿瘤血管内皮细胞、肿瘤细胞胞膜及胞质。VEGF和KDR mRNA的表达与有无淋巴结转移和临床病理分期密切相关；VEGF和KDR mRNA阳性表达组微血管密度明显高于阴性表达组，P〈0．01。结论：VEGF和KDR的表达与NSCLC的发生、发展和转移可能密切相关，可作为评估NSCLC患者预后的一项指标。     

Noteh1、Dll4蛋白在骨肉瘤的表达及临床意义

目的 探讨Notch1及其配体Dll4在骨肉瘤的表达及其和血管牛成的关系.方法 采用免疫组化SP法检测62例骨肉瘤Notch1和Dll4蛋白的表达,并根据CD34染色结果 计数微血管密度(MVD).43例骨软骨瘤标本作为对照.结果 (1)Notchl和Dll4在骨肉瘤表达的阳性率为85.5%、88.7%,骨软骨瘤表达阳性率为21.2%、23.6%,差异具有显著性(P<0.05);且Notch1和Dll4表达存在正相关(P<0.05,r=0.842).(2)Notch1和Dll4蛋白的阳性表达与骨肉瘤组织分化程度、Ennecking分期和有无转移密切相关(p<0.05).(3)Notch1或Dll4高表达组MVD显著高于低表达组)P<0.05).结论 Notch1、Dll4在骨肉瘤组织中的表达上调与血管生成密切相关,可能在骨肉瘤发生、发展中起重要作用.