白色念珠菌快速鉴别培养基的配制和应用

霉菌性阴道炎多由白色念珠菌感染所致，发病率仅次于滴虫性阴道炎，亦是妇科常见病，若诊断治疗不当易转为慢性或带菌者。近年来临床症状不典，型的病例有所增多。目前基层医院普遍采用的悬滴法显微镜下寻找抱子和假菌丝，但阳性率低，极易漏诊。为提高检出率和准确度，我们研制了快速鉴别培养基，经35C、8～12h增茵后镜检，作出阴阳性判断。本法经一年半的实际应用，效果良好。一、培养基的制备甲液葡萄糖5．0a、蛋白陈1·0a、NaCll·0g、吐温-800．4ml、氯霉素50mg（250mg／2ml针剂，取0．4ml），加蒸馏水至200ml，加热溶解，pH接近6．0…     

电流作用后成骨细胞表面增强的拉曼光谱

目的:多种实验已获知弱强度的电流可促进成骨细胞的增殖、分化和钙盐分泌,进而加速骨伤愈合,加快骨组织代谢。利用表面增强拉曼光谱,可在单细胞水平观察电流刺激下成骨细胞质膜蛋白结构的变化。方法:实验于2006-06/08在南开大学泰达应用物理学院完成。出生4d的昆明品系乳鼠6只,体质量约50g,将1×109L-1密度的成骨细胞用2.5g/L胰酶消化下来,置入到5mmol/L葡萄糖溶液(D-Hanks配置)中。做拉曼光谱的时候取出100μL含有成骨细胞的D-Hanks溶液,使一些成骨细胞固定到CaF2载玻片上。然后应用表面增强拉曼光谱技术,采集0.4mA和1.3mA不同电流强度作用下成骨细胞的拉曼光谱,并与电磁场作用前采集的拉曼光谱做对比。结果:①成骨细胞加电流前后,分别得到30个细胞的拉曼光谱,并利用软件origin7.0算出拉曼光谱的平均相对强度。②根据电流作用前10个细胞的拉曼光谱的相对峰值的平均值和电流作用后10个细胞的拉曼光谱的相对峰值的平均值,得出成骨细胞在受电流作用后,拉曼光谱中11个强峰的相对强度有明显的下降,表明在电流的作用后,成骨细胞膜蛋白构象有很大的变化。③表征蛋白质C-N伸缩振动的谱线1132cm-1的相对强度,在受两种电流作用后,分别增加了128.57%、57.14%,表明细胞质膜蛋白从有序状态转变为无序状态。结论:成骨细胞质膜蛋白在经过电流作用后,细胞膜结构发生较大变化,电流对稳定蛋白质二级结构的氢键和盐键有明显的影响。并且预示拉曼光谱有做为一种潜在的研究骨组织疾病诊断工具的可能性。     

表面增强拉曼光谱技术在恶性肿瘤诊断中的应用

<正>恶性肿瘤是一种发病率和死亡率较高的疾病,其有生存期短、癌痛症状较重、治疗不良反应大等特点,严重影响患者的身体健康和生活质量。因此,恶性肿瘤的早发现、早诊断是临床诊疗工作中的关键。随着医学科学技术的不断提高,已有一些实验室检测方法、物理成像技术和病理组织活检等技术手段用于癌症诊断,但其存在误差大、效率低、成本高、耗时长、创伤大等缺点。近年来,一种高效、准确的物理技术表面增强拉曼光谱(SERS)在恶性肿瘤中的应用日益受到医学界的关注。     

表面增强拉曼光谱在肿瘤实验室诊断中的应用

拉曼光谱技术是一种通过光与物质的相互作用产生的非弹性散射光来进行检测的光学技术,可以提供细胞、组织或生物流体的化学指纹信息;表面增强拉曼光谱(SERS)技术是在拉曼光谱技术基础上发展起来的具有更高灵敏度、高分析效率的新技术,其基本原理是探寻与疾病相关的SERS特征谱线,从分子水平研究新陈代谢的小分子含量及种类的变化。本文简述SERS在肿瘤实验室诊断中的应用。     

疟色素应用于拉曼光谱技术检测疟疾研究进展

正疟疾是一种由疟原虫感染引起的威胁生命的疾病,据世界卫生组织发布的最新情况,2013年仍有共计约1.98亿疟疾患者,其中58.4万人死亡。疟原虫侵入人体后早期寄生在肝细胞中,后期主要寄生在红细胞内。疟原虫在宿主红细胞内以血红蛋白中的珠蛋白部分为营养来源,而血红蛋白的血红素部分则被释放出来成为游离血红素,为避免游离血红素对疟原虫自身的杀伤作用,疟原虫将游离血红素转化成不可溶的高铁血红素结晶,即疟色素[1-2]。目前针对疟色素检测的研究取得许多     

万古霉素修饰玻片用于金黄色葡萄球菌的表面增强拉曼光谱检测

目的建立基于表面增强拉曼光谱(SERS)技术的金黄色葡萄球菌检测方法。方法在碳二亚胺催化下,氨基化玻片与万古霉素形成共价结合,用紫外分光光度计测量玻片偶联万古霉素含量。利用万古霉素修饰玻片捕获并固定金黄色葡萄球菌,在银纳米颗粒增强下,用激光显微拉曼光谱仪检测其SERS光谱。结果傅里叶红外光谱仪检测修饰玻片在1 538 cm~(-1)处具有红外特征峰,紫外分光光度法测定修饰玻片万古霉素含量达0.02 mg/cm~2。在激光显微拉曼光谱仪633 nm激光下,检测出金黄色葡萄球菌在724 cm~(-1)、780 cm~(-1)、1 001 cm~(-1)、1 050 cm~(-1)、1 100 cm~(-1)、1 240 cm~(-1)具有SERS特征峰。结论万古霉素修饰玻片成功捕获金黄色葡萄球菌并检测出其SERS光谱,为直接从人体体液中捕获、鉴定金黄色葡萄球菌提供基础依据。     

表面增强拉曼光谱与卷积神经网络用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 的快速检测

目的 建立一种联合表面增强拉曼散射（SERS）与卷积神经网络（CNN）的方法，用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）的准确鉴定。方法 合成带正电的纳米银颗粒（AgNPs⁺）作为SERS基底，测量MRSA和MSSA的SERS指纹谱并制作数据集，构建浅层一维CNN网络并在该数据上训练生成MRSA/MSSA二分类模型。结果 合成的AgNPs⁺能够通过静电引力紧密地吸附在细菌菌体表面并产生显著的SERS效应，在654、731 cm^-1等7个波段均有明显的拉曼峰被增强出。提出的SERS-CNN方法用于MRSA和MSSA检测的准确率超过94.5%,重现性小于5%,检测灵敏度达到10² cells/mL。结论 建立的联合SERS与CNN的方法可用于MRSA的准确检测。     

科玛嘉念珠菌显色培养基快速鉴定的临床意义

近年来，由念珠菌引起的各种临床感染不断增加，且念珠菌耐药株也有不断上升趋势。故在临床中快速将念珠菌鉴定到种对临床治疗念珠菌，合理选用抗真菌药有更多的帮助。我院以前采用手工糖发酵及同化法将念珠菌鉴定到种，需在分纯后24～48h观察结果。现改用科玛嘉念珠菌显色培养基，可将标本直接接种该培养基24h后即可观察结果。     

表面增强拉曼散射技术在生物医学检测中的研究及应用

拉曼光谱在检验医学领域的应用正在不断进步和发展, 基于拉曼光谱技术的生物传感平台为疾病精准分子诊断提供了一种新的手段, 特别是表面增强拉曼散射(SERS)技术作为一种快速无损的检测方法, 具有样品制备简单、受水的干扰小、实时检测等优点, 在医学检验领域显示出巨大的应用潜力。同时, 随着SERS与其他技术包括电化学、纳米新材料、微流控、生物芯片、DNA纳米机器、人工智能和机器学习等技术的集成结合, 其在医学检验领域将发挥越来越重要的作用。相信随着对SERS研究的不断深入以及多个学科领域之间的交叉融合, 其在生物医学检测领域将得到广泛应用, 并有望成为下一代精准诊断的重要技术平台。     

低频弱脉冲电磁场作用下成骨细胞的实时表面增强拉曼光谱研究

目的:弱强度的低频电磁场可促进成骨细胞的增殖、分化和钙盐分泌,进而加速伤骨愈合、加快骨组织代谢,为揭示低频弱脉冲电磁场影响成骨细胞的初始效应,应用表面增强拉曼光谱技术探索电磁场对成骨细胞的作用机制。方法:用出生5d的Wistar品系小鼠的颅骨接种成骨细胞并传代。应用表面增强拉曼光谱技术实时的方法采集不同磁场作用时间内低频率(50Hz)、低强度(0.30mT)脉冲电磁场作用下的成骨细胞的拉曼光谱。每隔1min采集一次,至作用8min止;并与电磁场作用前采集的拉曼光谱做比对。结果:比较电磁场作用前后和作用8min内不同时刻的拉曼光谱,可知其对成骨细胞膜蛋白和磷脂分子的构象有一定影响:表征膜蛋白中氨基酸侧链和磷脂C-C键骨架的特征峰的位移只发生了小幅变化,说明实验电磁场对细胞膜无损伤作用;在其作用之初的4.0～5.0min内,表征蛋白质构象信息的6个拉曼特征峰的相对强度随时间逐渐增加,揭示了构象发生改变的膜蛋白数量随电磁场作用时间的延长而增多。结论:实验探测到成骨细胞对低频脉冲电磁场的最初响应机制,表现为膜蛋白构象的有序变化。这为进一步探索由电磁刺激而激活的成骨细胞一系列信号转导通路的上游机制提供了有力的依据。     

表面增强激光解析电离飞行时间质谱快速鉴定血液大肠埃希菌感染

目的探讨用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)快速鉴定引起血流感染的大肠埃希菌。方法用SELDI-TOF-MS建立大肠埃希菌的蛋白质指纹模型。临床分离的168株菌经SELDI-TOF-MS检测,数据与大肠埃希菌模型进行相似度比较,对该模型进行评价。SELDI-TOF-MS检测88株微生物血培养分析仪阳性报警的革兰阴性杆菌,与大肠埃希菌蛋白质指纹模型进行相似度比较,对其中的大肠埃希菌进行鉴定。结果 19株建模组菌株经PCR及测序鉴定均为大肠埃希菌,并建立了该菌的蛋白质指纹模型;用168株验证组菌株对该模型进行验证,对大肠埃希菌鉴定的符合率为100%(60/60);用该模型对88株引起血流感染的革兰阴性杆菌进行鉴定,鉴定结果与传统微生物学鉴定结果具有较高的一致性(k=0.905)。结论 SELDI-TOF-MS可快速鉴定引起血流感染的大肠埃希菌,为血流感染细菌的快速诊断提供了新技术。     

念珠菌菌血症患者血标本分离菌特点和预后不良的危险因素分析

目的 分析念珠菌菌血症的分离菌分布特点、药敏特性及其临床结局危险因素。方法 选取2019年4月至2022年3月念珠菌菌血症患者临床标本中分离的73株菌,经质谱仪鉴定、微量肉汤稀释法药敏试验测定,收集并分析相关临床资料。结果 本研究中白念珠菌和热带念珠菌的总体分离率分别为35.61%和23.29%,分别是重症监护室(ICU)和血液内科最主要的检出菌。本次研究未发现对5-氟胞嘧啶和两性霉素B耐药的分离株;而热带念珠菌对三唑类抗真菌药物的敏感率均不足60.00%。氟康唑在念珠菌菌血症抗感染治疗中的使用率最高,为46.88%。经单因素、多因素Logistic回归分析发现,感染性休克是影响患者临床结局的危险因素(P<0.05)。结论 本次研究中,白念珠菌是ICU的主要检出菌;合并感染性休克与患者死亡密切相关;热带念珠菌是血液内科的主要检出菌,其对三唑类抗真菌药物敏感性不高,临床经验性用药应结合区域流行病学特征。     

降钙素原在鉴别诊断细菌和病毒感染中的应用

目的 分析细菌和病毒感染者血清降钙素原(PCT)水平的差别,为鉴别感染性疾病性质、临床合理用药提供实验依据.方法 采用电化学发光法测定36例细菌感染和42例病毒感染者以及30例正常健康人群血清中的PCT,分析PCT水平与细菌、病毒感染者之间的关系.结果 细菌感染组与病毒感染和健康对照组的PCT水平分布差异有统计学意义,细菌感染PCT水平显著高于病毒感染组(P＜0.01),病毒感染组和健康对照组无统计学意义.结论 PCT定量检测是细菌性感染的一个敏感性指标.     

全身磁共振弥散加权成像在鉴别恶性肿瘤骨转移和感染性病变中的应用

目的探讨全身磁共振弥散加权成像(WB-DWI)鉴别恶性肿瘤骨骼系统转移和感染性病变的价值。方法对23例恶性肿瘤椎体转移的患者和14例脊柱感染患者进行WB-DWI检查,比较转移灶和感染灶的ADC值和对比噪声比(CNR)。结果椎体转移灶和感染灶的WB-DWI表现有明显差异,骨转移组的ADC值显著低于感染组(P<0.01),CNR值显著高于感染组(P<0.01)。结论 WB-DWI在鉴别骨骼良、恶性病灶中有着较重要的价值。     

DWI和动态对比增强MRI多参数鉴别腮腺Warthin瘤与多形性腺瘤

目的探讨弥散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)、动态对比增强磁共振成像(dynamic contrast-enhanced magnetic resonance imaging,DCE-MRI)多参数鉴别诊断腮腺Warthin瘤与多形性腺瘤的价值.材料与方法回顾性分析病理学证实的2...     

PCT和CRP在小儿早期病毒性和细菌性呼吸道感染鉴别诊断中的应用研究

【目的】探讨降钙素原（PCT ）、C反应蛋白（CRP）在小儿早期病毒性和细菌性呼吸道感染鉴别诊断中的价值。【方法】选取本院2015年1月至2016年1月收治的经外周血、咽拭子、痰液三种标本进行细菌培养确诊的呼吸道细菌感染患儿180例（细菌组）及经呼吸道常见病毒核酸检测确诊的病毒感染患儿120例（病毒组）作为研究对象,选取同期健康儿童100例作为对照组,比较三组入院时的外周血 PCT、CRP水平。【结果】细菌组的PCT、CRP水平显著的高于病毒组和对照组;病毒组患儿的PCT、CRP水平显著的高于对照组,且差异均具有统计学意义（ P ＜00．5）。细菌组的PCT、CRP诊断阳性率分别为（744．4％）、（677．8％）显著的高于病毒组的（83．3％）、（17．50％）和对照组的（70．0％）、（9．00％）,且差异具有统计学意义（ P ＜0．05）。PCT鉴别诊断细菌感染的灵敏度为842．1％、特异度为850．3％、ROC曲线下面积Auc为08．62;CRP诊断细菌感染的灵敏度为893．6％、特异度为679．8％、ROC曲线下面积Auc为08．14;PCT＋ CRP诊断细菌感染的灵敏度为942．8％、特异度为926．1％、ROC曲线下面积Auc为09．40。【结论】PCT在鉴别诊断细菌感染方面略优于CRP ,二者联合检查鉴别诊断小儿细菌、病毒感染具有更高的临床价值。     

卵巢-附件报告和数据系统超声2022版(O-RADS US v2022)及其联合恶性风险指数4鉴别附件良、恶性肿瘤

目的 观察卵巢-附件报告和数据系统超声2022版(O-RADS US v2022)及其联合恶性风险指数4(RMI4)鉴别附件良、恶性肿瘤的价值。方法 回顾性分析126例手术病理诊断为附件肿瘤患者,根据O-RADS US v2022将1~3类归为良性病变、4~5类归为恶性病变,以450为RMI4分类的临界值,基于二者进行联合分类。以病理结果为金标准,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估单一O-RADS US v2022、RMI4及其联合鉴别附件良、恶性肿瘤的效能。结果 126例附件肿瘤中,良性94例、恶性32例。O-RADS US v2022鉴别附件良、恶性肿瘤的敏感度、特异度、准确率及AUC分别为78.13%、80.85%和80.16%、0.795,RMI4分别为71.88%、84.04%和80.95%、0.780;二者联合的特异度及准确率(93.62%、92.06%)均高于单一O-RADS US v2022(χ²=7.322、5.967,P=0.007、0.015)或RMI4(χ²=4.625、5.331,P=0.032、0.021),而敏感度及AUC(87.50%、0.906)差异均无统计学意义(P均＞0.05)。结论 O-RADS US v2022能有效鉴别附件良、恶性肿瘤,联合RMI4可提高鉴别特异度及准确率。