RAB25沉默抑制结直肠癌细胞铁死亡的作用研究

目的 ：探讨沉默RAS相关结合蛋白25(ras-associated binding protein 25, RAB25)在结直肠癌（colorectal cancer,CRC）细胞铁死亡中的作用。方法：利用GEPIA (Gene Expression Profiling Interactive Analysis)数据库分析RAB25的表达水平及与铁死亡关键基因表达之间的关联。在CRC细胞系HCT116上构建慢病毒介导的RAB25沉默细胞株（shRAB25）,应用定量实时聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR）和蛋白印迹法检测RAB25的表达情况。应用细胞增殖与毒性检测法（CCK8）检测不同浓度的（0～20μmol/L）铁死亡诱导剂erastin对沉默RAB25后细胞活力的影响;利用荧光显微镜和透射电镜分别观察erastin对沉默RAB25后的细胞形态和线粒体结构的影响;使用C11-BODIPY染色和流式细胞仪检测erastin对沉默RAB25后的细胞脂膜过氧化水平的影响。检测erastin与西妥...     

趋化因子受体CCR7在结直肠癌中的表达及临床意义

目的检测趋化因子受体CCR7在结直肠癌中的表达状态,探讨CCR7在结直肠癌发病中的临床意义。方法采用逆转录PCR（RT—PCR）检测CCR7mRNA表达,采用免疫组化检测CCR7蛋白表达。结果31例结直肠癌组织中CCR7mRNA呈阳性表达,显著高于其配对的癌旁正常组织（7例阳性）,38例结直肠癌组织标本检出CCR7蛋白表达,在相应配对的癌旁组织中则有9例检出。在伴发淋巴结转移的结肠癌组织中,CCR7表达比未发生转移者增强。结论CCR7在结直肠癌中过度表达,CCR7表达可能与结直肠癌发生发展及转移存在密切关系。     

基于铁死亡相关基因的生物信息学分析构建结直肠癌预后模型

目的 采用生物信息学方法分析铁死亡相关基因并构建结直肠癌铁死亡相关预后模型.方法 从TCGA数据库中下载结直肠癌患者的mRNA表达谱数据和临床资料.使用R4.0.2软件筛选出与铁死亡相关的差异基因.采用LASSO Cox回归分析构建预后模型.根据得到的风险评分,将纳入的结直肠癌患者划分为高风险组和低风险组.对构建的模型...     

抑制血清素转运蛋白表达联合Erastin诱导肠癌细胞铁死亡的实验研究

目的 观察肠癌SW480细胞经铁死亡诱导剂Erastin处理后血清素转运蛋白（serotonin transporter,SERT）表达的变化,探索调控SERT表达联合Erastin对肠癌细胞铁死亡的影响。方法 Erastin处理肠癌SW480细胞,CCK8检测细胞的存活能力,Western blot评估细胞内血清素转运蛋白SERT及铁死亡相关蛋白SLC7A11、GPX4和ACSL4的影响,流式细胞术分析癌细胞内ROS含量的变化。同时利用siRNA干扰下调细胞内SERT表达,观察调节SERT表达联合Erastin对癌细胞铁死亡的影响。结果 10μmol/L Erastin处理肠癌SW480细胞可诱导癌细胞发生铁死亡,并显著上调细胞中SERT表达。siSERT后Erastin所致的癌细胞中铁死亡抵抗蛋白SLC7A11和GPX4下降更为显著,而铁死亡执行蛋白ACSL4则明显升高。5-HT刺激不仅逆转Erastin对SW480细胞所致的SLC7A11和GPX4减少及铁死亡作用,同时还使得Erastin联合siSERT对铁死亡的协同作用得到一定程度的抑制。结论 Erastin刺激在诱导肠癌SW...     

叶黄素通过激活Nrf2信号传导通路抑制糖尿病性骨质疏松模型大鼠氧化应激及炎性反应的机制研究

目的研究叶黄素缓解糖尿病性骨质疏松(diabetic osteoporosis, DOP)模型大鼠氧化应激及炎性反应的可能机制。方法选取30只健康雌性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、干预组各10只,模型组和干预组大鼠均通过链脲佐菌素诱导糖尿病模型后切除双侧卵巢,假手术组不行糖尿病造模仅分离卵巢但不切除,术后1周干预组大鼠给予200 mg/kg叶黄素灌胃,假手术组及模型组仅予等量0.9%氯化钠注射液灌胃,药物干预8周。末次给药后,对各组大鼠进行骨组织形态学观察及骨密度、血清钙检测,并检测股骨组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平,Western blot法检测各组大鼠股骨组织核因子E2相关因子(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)表达水平。结果与假手术组相比,模型组骨密度、血清钙、成骨细胞数降低,破骨细胞数升高,差异有统计学意义(P<0.05);干预组与假手术组相比,骨密度、血清钙降低,破骨细胞数升高,差异有统计学意义(P...     

GPX2、Nrf2蛋白在直肠癌中的表达及与预后的关系

目的 探究谷胱甘肽过氧化物酶2(GPX2)、核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白在直肠癌中的表达及其与预后的关系.方法 选取2016年1月至2017年6月于上海交通大学医学院附属仁济医院及上海交通大学医学院附属仁济医院宝山分院普外科行手术切除治疗的80份直肠癌患者病理组织标本及术中留存的癌旁(距肿瘤病灶>5 cm)正常...     

HSP60和NRF2在透明细胞性肾细胞癌中的表达及临床价值

目的 研究透明细胞性肾细胞癌(ccRCC)中热休克蛋白60(HSP60)及核因子E2相关因子2(NRF2)的表达及临床意义.方法 选取2017年3月至2019年3月在安康市中心医院诊治的89例ccRCC患者为研究对象,应用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)及免疫组织化学检测癌组织及癌旁组织中HSP60、NRF2的表达.统...     

基于Oncomine和GEPIA数据库分析 NFE2L3基因在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的通过挖掘Oncomine和GEPIA数据库中的相关数据,分析NFE2L3基因在结直肠癌中的表达及临床意义。 方法检索Oncomine和GEPIA数据库中有关结直肠癌的数据并结合文献资料进行二次综合分析。癌与正常组织之间基因表达差异采用t检验,采用单因素方差分析比较不同临床分期之间基因表达的差异,采用Pearson相关分析进行相关性研究,采用Kaplan-Meier方法进行生存分析。 结果Oncomine数据库中共收集了334项关于NFE2L3基因在不同类型癌与正常组织中表达的比较的研究结果,表达差异有统计学意义的研究结果有55个。其中共有21项研究涉及NFE2L3基因在结直肠癌组织和正常结直肠组织中的表达,共包括1000个样本。与对照组相比结直肠癌组织中NFE2L3 mRNA表达显著高于结直肠正常组织（P<0.05）。GEPIA数据库中分析发现NFE2L3基因的表达与错配修复基因MLH1、MSH2、MSH6和PMS2的表达均呈显著相关性（P<0.05）;NFE2L3基因与结直肠癌的临床分期与预后生存（总生存率和无病生存率）均不具有相关性（P>0.05）。 结论NFE2L3 mRNA在结直肠癌组织中呈高表达,并与影响结肠癌发生的错配修复基因的表达关系密切。     

阿帕替尼联合程序性死亡受体1抑制剂治疗晚期结直肠癌患者的应用价值

目的 探讨阿帕替尼联合程序性死亡受体1(PD-1)抑制剂用于晚期结直肠癌(CRC)患者的治疗效果,为临床治疗提供参考。方法 选取2021年1月至2023年1月北京市第二医院收治的40例晚期CRC患者为研究对象,依据随机数字表法分为对照组(采用PD-1抑制剂治疗,20例)和观察组(采用阿帕替尼联合PD-1抑制剂治疗,20例)。观察两组患者临床疗效、CD3⁺T淋巴细胞百分比、CD4⁺T淋巴细胞百分比、CD8⁺T淋巴细胞百分比、CD4⁺/CD8⁺比值、无进展生存时间(PFS)、总生存时间(OS)及不良反应发生情况。结果 观察组患者客观缓解率高于对照组,但组间比较差异无统计学意义(P<0.05);观察组患者疾病控制率高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组患者CD3⁺及CD4⁺T淋巴细胞百分比、CD4⁺/CD8⁺比值均高于对照组,CD8⁺T淋巴细胞百分比低于对照组...     

趋化因子CXCL7通过血管形成途径促进结直肠癌增殖、迁移及侵袭的机制研究

目的 探究趋化因子CXCL7对结直肠癌（CRC）细胞增殖、转移及侵袭的影响与血管生成的关系,阐明CXCL7促进CRC发展的分子机制。方法 采用qPCR及ELISA法筛选出高、低表达CRC细胞株为研究对象,采用CCK-8、EdU染色以及平板克隆形成实验测定CXCL7对结直肠癌细胞增殖能力的影响;流式细胞仪检测周期和细胞凋亡情况;细胞划痕实验测定CXCL7对结直肠癌细胞迁移能力的作用;Transwell实验测定CXCL7对结直肠癌细胞侵袭能力的影响。ELISA试剂盒测量培养血清VEGF水平,Western blot检测血管内皮生长因子受体（VEGF-R）表达水平。结果 细胞增殖实验48 h、72 h时各组吸光度比较：CXCL7干扰组>NC组>空白对照组,差异有统计学意义（F=7.567,17.475,P<0.05）;Transwell实验中迁移与侵袭细胞数比较：CXCL7干扰组>空白对照组>NC组,差异有统计学意义（P<0.05）;处理CRC细胞6 h后,结果显示空白对照组和NC组仅有少量小管形成,而CXCL7干扰组却形成了大量网状结构的小管。管腔形成数...     

Fas相关死亡域样白介素-1β转换酶抑制蛋白在结直肠癌中的表达意义

目的探讨结直肠癌Fas相关死亡域样白介素-1β转换酶抑制蛋白(FLIP)(S)mRNA的表达水平及其临床意义。方法建立检测FLIP(S)mRNA荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR),用该方法检测结直肠癌组织及其癌旁正常组织FLIP(S)mRNA表达水平。结果 FLIP(S)mRNA在结直肠癌组织和癌旁正常组织都有表达,在结直肠癌组织表达水平为0.23±0.19,明显高于癌旁正常组织0.13±0.10(P<0.05)。FLIP(S)mRNA表达水平与结直肠癌组织学分级密切相关(P<0.05),肿瘤分化程度越低,FLIP(S)mRNA的表达水平越高。结论 FLIP(S)在结直肠癌组织中表达升高;在分化越低组织中其表达水平越高;为揭示结直肠肿瘤的发生、发展提供新的理论依据,并为结直肠癌的有效治疗提供新的思路。     

结直肠癌血行转移与两种肿瘤相关因子关系的研究

目的 研究结直肠癌血行转移与转移相关因子的关系。方法 采用逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)技术，对50例结、直肠癌进行血液CK20 mRNA测定，且对癌组织行免疫组化检测CD44v6和p53。结果 CK20 mRNA阳性表达与癌组织中p53和CD44v6之间存在着显相关性。结论 手术前监测血液中的CK20 mRNA并结合癌组织中p53和CD44v6的检测，对于预测结、直肠癌血行转移和指导术后治疗具有重要参考价值。     

脓毒症患者血清NRF2、HO-1水平变化及对并发急性肾损伤的预测价值CSCD

目的 探讨脓毒症患者血清核因子E2相关因子2(nuclea factor erythroid-2-related factor2,NRF2)、血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)水平变化及对并发急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的预测价值。方法 选取2017年4月—2023年4月南京中医药大学附属南京医院脓毒症患者132例为研究组,选取同期年龄、性别匹配的健康体检者132例为对照组。2组均检测血清NRF2、HO-1水平。统计研究组入院1周并发AKI情况,分析脓毒症患者并发AKI的影响因素,构建脓毒症患者并发AKI的列线图预测模型并进行决策曲线分析(decision curve analysis,DCA)。结果 研究组血清NRF2(t=30.537,P<0.001)、HO-1(t=29.302,P<0.001)水平高于对照组;研究组132例脓毒症患者入院1周AKI发生率为45.45%(60/132);随着NRF2、HO-1水平升高,患者并发AKI发生率呈降低趋势(χ2=35.636,28.514,均P<0.001);Logistic多因素回归分析提示NRF2(OR=0.104,95%CI:0.023～0.471,P=0.003)、HO-1(OR=0.341,95%CI:0.168～0.691,P=0.003)是脓毒症患者并发AKI的独立保护因素,脓毒症相关性器官功能衰竭评价评分(OR=1.493,95%CI:1.128～1.976,P=0.005)、降钙素原(OR=1.277,95%CI:1.070～1.523,P=0.007)、白细胞计数(OR=3.030,95%CI:1.550～5.921,P=0.001)是脓毒症患者并发AKI的独立危险因素;列线图预测模型显示NRF2、HO-1对脓毒症患者并发AKI具有较高预测价值,一致性指数分别为0.769、0.751;DCA显示在阈值0.20～0.78,联合评估脓毒症患者并发AKI的净受益率优于NRF2、HO-1单独检测。结论 脓毒症患者血清NRF2、HO-1水平升高,联合检测二者水平有助于判断AKI发生风险。     

非小细胞肺癌化疗患者Nrf2表达与远期疗效临床分析

目的探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)在非小细胞肺癌化疗患者中的表达情况及意义。方法选取2014年2月至2016年4月在河南省省直第一医院接受化疗治疗的非小细胞肺癌(NSCLC)患者87例,采用免疫组织化学法检测Nrf2表达情况,随访患者治疗状况。结果≥60岁患者Nrf2阳性表达率为53.19%,明显高于<60岁患者的12.50%,Ⅳ期患者Nrf2阳性表达率为47.92%,明显高于Ⅲ期患者的17.95%(P<0.05);不同性别、病理类型、分化程度、化疗方案及近期疗效患者Nrf2阳性表达差异无统计学意义(P>0.05);Nrf2表达阳性患者中位总生存期(OS)为13个月(95%CI:11.80~14.20),Nrf2表达阴性患者中位OS为19个月(95%CI:16.67~21.33),差异比较具有统计学意义(P<0.05);COX多因素分析显示,病理类型及Nrf2表达是患者OS的预测因素(P<0.05)。结论Nrf2表达与肺癌患者远期疗效有一定联系,有可能成为预测疗效的指标。     

具核梭杆菌促进结直肠癌发病相关机制的研究进展

具核梭杆菌(fusobacterium nucleatum,Fn)与结直肠癌(colorectal cancer,CRC)发生有关。有研究发现人类CRC中有过量的Fn,并阐明了Fn在体外和小鼠模型中参与CRC发生可能的机制。Fn参与CRC癌变的机制主要包括:通过增加髓系来源的抑制细胞和减少自然杀伤细胞等发挥的免疫调节;由FadA、Fap2和脂多糖介导的毒力作用;促进肿瘤相关microRNA(如miR-21)表达;代谢作用。本文就Fn在CRC中的作用机制作一综述。     

类泛素蛋白FAT10通过Nrf2/HO-1通路对心肌细胞缺血缺氧修复损伤的保护作用

目的 探讨类泛素蛋白人类白细胞抗原F介导转录因子10(FAT10)在心肌细胞缺氧修复损伤中的作用及机制。方法 采用H9C2大鼠心肌细胞构建缺氧复氧模型,将心肌细胞分为对照组、缺氧4 h组、复氧2 h组及复氧4 h组。采用细胞活力检测试剂盒（CCK-8）检测细胞活性,采用Annexin V-FITC/PI法检测心肌细胞凋亡,采用微量酶标法检测乳酸脱氢酶（LDH）。将阴性对照RNA序列（si-CON）和FAT10沉默序列转入心肌细胞,将细胞分为对照组、缺氧4 h+si-CON组、缺氧4 h+siRNA组、复氧4 h+si-CON组、复氧4 h+siRNA组。Western-blot检测细胞FAT10、Nrf2、HO-1蛋白表达水平。结果 随复氧时间延长,心肌细胞存活率下降,心肌细胞损伤加重,细胞凋亡率升高,在复氧4 h后最低。复氧4 h组细胞存活率低于对照组,而LDH水平及细胞凋亡率高于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。FAT10蛋白表达水平：复氧4 h+siRNA组<缺氧4 h+siRNA组<缺氧4 h+si-CON组,差异均有统计学意义（P<0.05）...     

前列腺素E_2在结直肠癌患者术后外周血中的表达及对远处转移的预测价值

目的探讨前列腺素E2(PGE2)在结直肠癌患者术后外周血中的表达及对肿瘤远处转移的影响。方法选取42例结直肠癌患者为观察组,39例健康人群为对照组。测量餐前血清胃泌素、胃动素、皮质醇激素的含量,采用ELISA法测定2组患者血清中PGE2、VEGF及HIF-1α的含量。结果观察组患者血清PGE2水平显著高于对照组(P0.05);观察组患者血清VEGF、HIF-1α水平显著高于对照组(P0.05);血清PGE2与VEGF、HIF-1α均呈正相关(P0.05),血清HIF-1α与VEGF也呈正相关(P0.05);PGE2高水平组患者2年肿瘤远处转移率显著高于PGE2低水平组患者(P=0.042)。结论 PGE2在结直肠癌根治术后患者外周血中升高,与体内VEGF、HIF-1α呈正相关。     

血浆D-二聚体水平与复发转移性结直肠癌患者预后的相关性

目的探讨血浆D-二聚体水平与化疗前复发及转移性不可切除的晚期结直肠癌患者预后相关性。方法测定40例复发转移性结直肠癌患者化疗前血浆D-二聚体水平,分析其与临床病理因素及化疗疗效的相关性。结果血浆D-二聚体高表达患者生存期较中、低表达者短;血浆D-二聚体表达水平是患者死亡的独立预测因子;血浆D-二聚体表达水平与化疗疗效相关（P〈0．05）。结论复发转移性结直肠癌患者血浆D二聚体高表达者生存率较低,血浆D-二聚体水平可作为转移性结直肠癌患者系统化疗效果的预测指标之一。