瑞香素调节Shh/Gli1信号通路对乳腺癌增殖、凋亡和化疗敏感性的影响

目的 探究瑞香素调节音猬因子(Shh)/胶质细胞瘤转录因子1(Gli1)信号通路对乳腺癌增殖、凋亡和化疗敏感性的影响。方法 将人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞分为对照组、瑞香素组(40μmol/L瑞香素)、GANT61组(10μmol/L GANT61)、瑞香素+GANT61组(40μmol/L瑞香素和10μmol/L GANT61);CCK-8实验检测MDA-MB-231细胞增殖;划痕试验检测MDA-MB-231细胞迁移情况;在上述各分组细胞中加入1 mg/L阿霉素(Dox)处理48 h后CCK-8实验检测细胞化疗敏感性;流式细胞术检测MDA-MB-231细胞凋亡情况;Western blot检测MDA-MB-231细胞Shh/Gli1通路及凋亡相关蛋白表达水平。结果 与0μmol/L比较,随着瑞香素的剂量增加MDA-MB-231细胞存活率显著降低(P<0.05),而与40μmol/L比较,50μmol/L瑞香素处理MDA-MB-231细胞存活率无差异(P>0.05),因此选择40μmol/L瑞香素作为后续实验的干预条件;与对照组比较,瑞香素组和GANT61组OD4...     

银杏素调节NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路对高糖诱导肾小球内皮细胞焦亡的影响

目的 探讨银杏素调节核转录因子кB/Nod样受体蛋白3/半胱天冬酶-1(NF-κB/NLRP3/Caspase-1)信号通路对高糖诱导肾小球内皮细胞焦亡的影响。方法 将肾小球内皮细胞(HRGECs)作为研究对象，将HRGECs细胞分为正常组(正常5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)、银杏素低剂量组(30 mmol/L葡萄糖+5μmol/L银杏素)、银杏素中剂量组(30 mmol/L葡萄糖+10μmol/L银杏素)、银杏素高剂量组(30 mmol/L葡萄糖+20μmol/L银杏素)、BAY组[(30 mmol/L葡萄糖+20μmol/L银杏素+2.5μmol/L NF-κB的特异性抑制剂BAY 11-7085(BAY)]、MCC950组(30 mmol/L葡萄糖+20μmol/L银杏素+10μmol/L NLRP3抑制剂MCC950)、VX-765组(30 mmol/L葡萄糖+20μmol/L银杏素+20μmol/L Caspase-1抑制剂VX-765),各组细胞加入相应试剂后共培养24 h; MTT法检测细胞存活率；流式细胞术检测细胞焦亡情况；试剂盒法测定细胞...     

芒柄花素对脂多糖诱导的肺泡上皮细胞凋亡及炎症反应的抑制作用

目的 基于磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路，探讨芒柄花素对脂多糖（LPS）诱导的肺泡上皮细胞凋亡及炎症反应的抑制作用。方法 体外培养肺癌人肺泡基底上皮细胞A549，分为对照组（不干预）、模型组（1μg/mL LPS）、芒柄花素不同浓度组（1μg/mL LPS+6.25、12.5、25、50μmol/L芒柄花素），检测各组细胞培养液中炎症因子（白细胞介素8、肿瘤坏死因子α）水平和细胞活力。另取A549细胞分为对照组、模型组（1μg/mL LPS）、LPS+25组（1μg/mL LPS+25μmol/L芒柄花素）、抑制剂组（1μg/mL LPS+20μmol/L LY294002）、芒柄花素+抑制剂组（1μg/mL LPS+25μmol/L芒柄花素+20μmol/L LY294002）和芒柄花素+激活剂组（1μg/mL LPS+25μmol/L芒柄花素+10μmol/L SC79），检测各组细胞炎症因子分泌水平和mRNA表达水平、细胞凋亡情况和PI3K/Akt信号通路关键蛋白表达情况。结果 与模型组比较，25μmol/L的芒柄花素能显著降低细胞培养液中炎症因子水平，...     

高良姜素调节MCP-1/CCR2信号轴对肺癌细胞恶性生物学行为的影响

目的 研究高良姜素通过调节单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/趋化因子受体-2(CCR2)信号通路对肺癌细胞的恶性生物学行为产生的影响。方法 将人肺癌细胞系A549分为ctrl组、低浓度高良姜素组(5μmol/L)、高浓度高良姜素组(100μmol/L)、吉非替尼组(10μmol/L)、高浓度高良姜素+MCP-1组(100μmol/L高良姜素+75 ng/mL MCP-1)。CCK-8试剂盒检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;细胞划痕实验检测细胞迁移;transwell检测细胞侵袭能力;western blot检测MCP-1、CCR2、凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)、细胞增殖核抗原(Ki67)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白表达。结果 与ctrl组比较,低浓度高良姜素组、高浓度高良姜素组、吉非替尼组肺癌细胞A549的细胞存活率、细胞迁移愈合率、细胞侵袭数、MCP-1、CCR2、Ki67、MMP-2蛋白表达降低,而细胞凋亡率、Caspase-3含量升高(P<0.05);与高浓度高良姜素组比较,高浓度高良姜素+MCP-1组A549细胞存活率、细胞迁移愈合率、细胞侵...     

丹参素对地塞米松诱导MC3T3-E1成骨细胞损伤的保护作用

目的 探讨丹参素对地塞米松诱导MC3T3-E1成骨细胞损伤的保护作用。方法 构建地塞米松1μmol/L诱导MC3T3-E1成骨细胞损伤模型;其中,C、D、E组分别采用丹参素10、20、40μmol/L预处理。另设空白对照组(A组)和地塞米松1μmol/L模型对照组(B组)。MTT法检测细胞存活率,二硝基苯肼法和流式细胞术分别检测乳酸脱氢酶(LDH)和活性氧(ROS)水平,Western blot检测p21、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素氧合酶1(HO-1)蛋白水平。检测丹参素40μmol/L预处理小干扰RNA沉默p21表达(F组)后地塞米松1μmol/L诱导MC3T3-E1成骨细胞(G组)的细胞存活率以及Nrf2和HO-1蛋白水平。结果 与A组比较,B、C、D、E组细胞存活率降低,LDH和ROS水平升高,且p21、Nrf2和HO-1蛋白表达水平升高(P<0.05)。与B组比较,C、D、E组细胞存活率和p21、Nrf2和HO-1蛋白表达水平呈丹参素浓度依赖性升高,而LDH和ROS水平降低(P<0.05)。G组细胞存活率高于B组,但低于E组(P<0.05)。G组...     

黄荆子木脂素3对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用及对蛋白激酶Akt、ERK1/2信号通路的影响

目的:研究黄荆子木脂素3对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用,及其与丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号通路的关系。方法:以人肝癌HepG2细胞为研究对象,采用MTT法检测空白对照组和0.1、0.3、1.0、3.0、10.0、30.0μmol/L黄荆子木脂素3组(n=3)细胞作用48h后的增殖抑制率;采用细胞计数法检测黄荆子木脂素3(10.0μmol/L)组、5-氟尿嘧啶(5-FU,10.0μmol/L)组、溶媒(含0.1%二甲基亚砜的完全培养基)组、空白对照组(n=3)细胞作用24、48、72h后的活细胞数量;采用蛋白印迹法检测溶媒组、黄荆子木脂素3(10.0μmol/L)组、磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂LY294002(10.0μmol/L)组及其混合组(n=3)细胞作用24h后的磷酸化(p-)Akt和p-ERK1/2蛋白表达。结果:与空白对照组比较,1.0～30.0μmol/L黄荆子木脂素3组对细胞的抑制率明显升高(P<0.01);与溶媒组和空白对照组比较,黄荆子木脂素3组作用不同时间的活细胞数量均明显减少(P<0.01);与5-FU组比较,黄荆子木脂素3组作用72h后的活细胞数量明显增加(P<0.01);与溶媒组比较,黄荆子木脂素3组、LY294002组及其混合组细胞内p-Akt和p-ERK1/2蛋白表达均明显降低(P<0.01),但后3组间差异无统计学意义。结论:黄荆子木脂素3呈浓度和时间依赖性抑制HepG2细胞的增殖,其机制可能与抑制Akt、ERK1/2蛋白磷酸化水平有关。     

蔓荆子黄素调控miR-378/PRRX1轴对胃癌生物学行为的影响

目的 探究蔓荆子黄素（Cas）对胃癌（GC）SGC-7901细胞增殖、侵袭、迁移及微小RNA-378(miR-378)/配对相关同源框1(PRRX1)轴的影响。方法 不同浓度Cas(0、5、10、20、40、80μmol/L)处理SGC-7901细胞48 h。将对数生长期的SGC-7901细胞分为：对照组、Cas低浓度组（10μmol/L）、Cas中浓度组（20μmol/L）、Cas高浓度组（40μmol/L）、Cas高浓度+miR-378小干扰RNA(siRNA)组（40μmol/L Cas+miR-378 siRNA）、Cas高浓度+PRRX1组（40μmol/L Cas+PRRX1过表达质粒）、Cas高浓度+miR-378 siRNA+PRRX1组（40μmol/L Cas+miR-378 siRNA+PRRX1过表达质粒）。MTT法、集落形成实验、流式细胞术、Transwell小室、划痕实验分别测定各组SGC-7901细胞活力、集落形成数量、凋亡率、侵袭及迁移能力;q PCR、蛋白印迹实验分别检测SGC-7901细胞miR-378、PRRX1蛋白表达水平;双萤光素酶实验验证mi...     

党参炔苷调节AKT/GSK-3β/snail信号通路对胃癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响

目的 探究党参炔苷(LOB)调节蛋白激酶B(AKT)/糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)/Snail信号通路对胃癌(GC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法 将GC细胞株SGC7901随机分为对照组(Control组)、低浓度LOB组(LOB-L组,10μmol/L LOB)、中浓度LOB组(LOB-M组,20μmol/L LOB)、高浓度LOB组(LOB-H组,40μmol/L LOB)和高浓度LOB+AKT激活剂SC79组(LOB-H+SC79组,40μmol/L LOB+20μmol/L SC79)。CCK-8法检测5组细胞增殖能力。划痕实验检测细胞迁移能力。Transwell实验检测细胞侵袭能力。流式细胞术检测细胞凋亡。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法测定5组细胞AKT、GSK-3β、snail1 mRNA的表达。Western Blot检测5组细胞AKT/GSK-3β/snail信号通路和凋亡、EMT过程相关蛋白表达。结果 与Control组比较,LOB-M组、LOB-H组SGC7901细胞OD450值(48 h、72 h)、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数目...     

紫草素对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo线粒体自噬和功能的影响

目的 研究紫草素对HTR-8/Svneo细胞线粒体自噬和线粒体功能的影响。方法 将人绒毛膜滋养层细胞分为4组：对照组、Mdivi-1组、紫草素组和紫草素+Mdivi-1组。对照组正常培养;Mdivi-1组以5μmol·L^-1 Mdivi-1处理;紫草素组用0.8μmol·L^-1紫草素干预;紫草素+Mdivi-1组以0.8μmol·L^-1紫草素+5μmol·L^-1 Mdivi-1干预处理。用流式细胞术检测细胞凋亡率;用ATP检测试剂盒测定细胞ATP含量;用Dihydroethidium(DHE)荧光检测探针测定细胞内超氧化物水平;用蛋白质印迹法测定线粒体自噬相关蛋白表达水平。结果 细胞分组处理24 h后,对照组、Mdivi-1组、紫草素组、紫草素+Mdivi-1组的凋亡率分别为(6.86±0.37)%,(7.14±0.23)%,(39.97±1.52)%和(14.63±1.19)%;这4组的ATP含量为100%,(89.13±6.23)%,(52.03±9.12)%和(67.84±10.03)%;这4...     

紫草素促进食管癌细胞凋亡及细胞周期阻滞的作用机制研究

目的研究紫草素促进食管癌细胞凋亡及细胞周期阻滞的作用及机制。方法 2019年 1月至 2020年 6月期间开展细胞实验,培养食管癌 Eca109细胞,分为不含药物杜氏改良 Eagle培养基( DMEM)处理的对照组,含不同剂量紫草素 DMEM处理的紫草素组,含 2.0 μmol/L紫草素和 10 μg/L胰岛素样生长因子 -1(IGF-1)DMEM处理的 2.0 μmol/L紫草素 +10μg/L IGF-1组。检测细胞凋亡率、细胞周期及凋亡基因活化的胱天蛋白酶 -3(cleaved caspase-3)、细胞周期蛋白 D1(cyclin D1)、磷酸化磷酸肌醇 3激酶( PI3K)、蛋白激酶 B(AKT)的表达量。结果 0.5 μmol/L紫草素组、 1.0 μmol/L紫草素组、 2.0 μmol/L紫草素组的细胞凋亡率、细胞周期 G1期比例、 cleaved caspase-3的表达量［ 0.5 μmol/L紫草素组( 0.64±0.14)、 1.0 μmol/L紫草素组( 0.81±0.19)、2.0 μmol/L紫草素组( 1.02±0.24)］高于对照组 0.41±0.07,细胞周期 S期、 G2期比例及 cyclin D1［0.5 μmol/L紫草素组( 0.80±0.16)、 1.0 μmol/L紫草素组( 0.68±0.13)、 2.0 μmol/L紫草素组( 0.45±0.09)］、 p-PI3K、p-AKT表达量低于对照组［ cyclin D1表达量(0.91±0.18)］(P<0.05); 2.0 μmol/L紫草素 +10 μg/L IGF-1组的细胞凋亡率、细胞周期 G1期比例、 cleaved caspase-3的表达量低于 2.0 μmol/L紫草素组,细胞周期 G2期比例及 cyclin D1、p-PI3K、p-AKT表达量高于 2.0 μmol/L紫草素组( P<0.05)。结论紫草素具有促进食管癌细胞凋亡及细胞周期阻滞的作用,该作用与抑制 PI3K/AKT通路激活有关。     

黄芩素对胰腺癌细胞的生长抑制和促凋亡作用

目的 研究黄芩素对胰腺癌细胞的生长抑制及诱导凋亡作用.方法 用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察黄芩素及塞来昔布对胰腺癌细胞株SW1990增殖的影响;用流式细胞术法观察药物处理后细胞凋亡和细胞周期的变化;应用免疫组织化学法观察细胞株经药物处理后Bax及Bcl-2蛋白表达情况.结果 50、100、200、400μmol/L塞来昔布作用24 h后对胰腺癌细胞的杀伤率分别为24.6%、37.2%、59.8%、72.6%,48 h后分别为15.8%、34.0%、75.1%、81.9%.5、10、20、40 μmol/L.黄芩素作用24 h后对胰腺癌细胞的杀伤率分别为11.9%、21.2%、33.1%、51.6%,48 h后分别为16.0%、28.0%、38.6%、55.2%.随着干预药物浓度的升高,2种药物对胰腺癌细胞的杀伤率亦逐渐升高,且差异有统计学意义(P<0.05).20 μmol/L黄芩素作用于SW1990细胞24 h时出现凋亡峰,凋亡细胞占3.6%,48 h时凋亡细胞占4.3%;100 μmol/L塞来昔布组是48 h后出现凋亡峰,凋亡细胞占8.5%;空白对照组未见凋亡峰.100 μmol/L塞来昔布组48 h时的凋亡率高于20 μmol/L黄芩素组(P<0.05).20μmol/L黄芩素组24、48 h对SW1990细胞周期的阻滞率均高于100μmol/L塞来昔布组[72.3%比57.0%,74.2%比66.1%,均P<0.05].20μmoL/L黄芩素组和100μmol/L塞来昔布组Bax蛋白表达分别为+++、++,较空白对照组(+)均有所上调,但塞来昔布组弱于黄芩素.20 μmol/L.黄芩素组和100 μmol/L塞来昔布组Bcl-2蛋白表达分别为+、++,较空白对照组(+++)均减少20 μmol/L黄芩素组较100 μmoL/L塞来昔布组亦减少.结论 黄芩素可抑制胰腺癌细胞增殖,促进胰腺癌细胞凋亡并能将胰腺癌细胞周期阻滞于G1期.黄芩素诱导胰腺癌细胞凋亡可能是通过上调促凋亡蛋白和下调抑制凋亡蛋白实现的.     

PI3K/Akt信号转导通路与卵巢癌顺铂耐药相关性的研究

目的:研究卵巢癌顺铂(DDP)耐药与磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号转导通路的关系。方法:根据LY294002作用浓度将SKOV3和SKOV3/DDP细胞分别分为5μmol/L+DDP、10μmol/L+DDP、20μmol/L+DDP、40μmol/L+DDP、DDP组及对照组。MTT法检测40μmol/L LY294002对SKOV3和SKOV3/DDP细胞DDP敏感性的影响;Western blot法检测SKOV3和SKOV3/DDP细胞各实验组PI3K、Akt表达水平。结果:SKOV3和SKOV3/DDP细胞经LY29400240μmol/L作用后,对DDP敏感性分别增加了67.36%、76.56%。LY294002可降低SKOV3和SKOV3/DDP细胞中PI3K和Akt表达。SKOV3细胞对照组PI3K和Akt蛋白相对浓度值均低于SKOV3/DDP细胞对照组(t分别为26.005和23.477,均P<0.05)。结论:PI3K/Akt信号通路异常与卵巢癌DDP耐药有关,抑制PI3K/Akt信号通路能增强卵巢癌DDP敏感性。     

白术内酯Ⅰ调节IL-6/STAT3信号通路对子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨白术内酯Ⅰ调节白细胞介素-6(IL-6)/信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)信号通路对子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 用不同浓度白术内酯Ⅰ(0、25、50、75、100、150μmol/L)处理子宫内膜RL-952细胞,MTT法检测细胞存活率;将RL-952细胞分为对照组(无处理)、白术内酯Ⅰ(50μmol/L)组、IL-6组(10 ng/mL)、白术内酯Ⅰ(50μmol/L)+IL-6组(10 ng/mL),MTT法、Edu染色检测细胞增殖;qRT-PCR法检测细胞中IL-6、STAT3表达水平;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;western blot检测MMP-2、Ki-67、IL-6、p-STAT3、STAT3蛋白表达水平。结果 与0μmol/L比较,25μmol/L、50μmol/L、75μmol/L、100μmol/L、150μmol/L白术内酯Ⅰ干预的RL-952细胞存活率显著下降,呈浓度依赖性(P<0.05);与对照组比较,白术内酯Ⅰ组RL-952细胞活力、增殖率、迁移和侵袭个数、IL-6和STAT3...     

阿托伐他汀对人胃癌AGS细胞增殖、自噬和糖代谢的影响及机制

目的 探究阿托伐他汀对人胃癌AGS细胞增殖、自噬和糖代谢的影响及机制。方法 通过预实验考察低、中、高浓度（12.5、25、50μmol/L）阿托伐他汀对AGS细胞活力的影响,筛选作用浓度。正式实验分为对照组（不做干预）、阿托伐他汀组（25μmol/L）、阳性对照组（50 mg/L 5-氟尿嘧啶）、抑制剂组[25μmol/L阿托伐他汀+10μmol/L磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B(Akt)信号通路抑制剂LY294002]和激活剂组（25μmol/L阿托伐他汀+10μmol/L PI3K/Akt信号通路激活剂SC79）,干预24 h,检测细胞糖代谢情况（葡萄糖和乳酸含量）和细胞增殖率,以及细胞中自噬相关蛋白轻链3(LC3)Ⅰ、LC3Ⅱ及PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达。结果 中、高浓度阿托伐他汀均能显著抑制AGS细胞活力（P<0.05）,正式实验选择25μmol/L阿托伐他汀进行后续实验。与对照组相比,阳性对照组和阿托伐他汀组细胞中葡萄糖和乳酸含量、细胞增殖率以及p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值均显著降低（P<0.05）,LC3Ⅰ、LC3Ⅱ蛋...     

柚皮素对胰腺癌细胞PANC-1增殖和凋亡的影响

目的 探讨柚皮素对胰腺癌细胞PANC-1增殖和凋亡的影响及糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)在其中的作用。方法 PANC-1细胞根据随机数字表分为7组(每组12孔，细胞密度为2 500个/mm²):0μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L、control virus和GSK-3β virus组。0μmol/L组，加入相应体积溶剂；50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L和400μmol/L分别在培养液中加入终浓度为50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L和400μmol/L的柚皮素进行培养；Control virus组，感染了对照病毒的PANC-1细胞培养液中加入200μmol/L的柚皮素进行培养；GSK-3β组，感染了GSK-3β过表达慢病毒的PANC-1细胞培养液中加入200μmol/L柚皮素。CCK-8检测细胞活力，细胞计数仪测定细胞数量，流式细胞测量凋亡细胞百分比，Western blot方法检测Ki-67、cleaved caspase-3、GSK-3β和p-GSK-3...     

3种中药成分对氧化型低密度脂蛋白诱导人主动脉内皮细胞损伤的影响

目的 探讨3种中药成分（姜黄素、连翘苷、白藜芦醇）对氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）诱导的人主动脉内皮细胞（HAEC）损伤的影响。方法 实验设空白对照组（等体积基础培养液）,溶剂对照组[等体积含二甲基亚砜（DMSO）的基础培养液],Ox-LDL组（20μg/mL Ox-LDL）,姜黄素(1)(2)(3)(4)组（20μg/mL Ox-LDL+2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L姜黄素）,连翘苷(1)(2)(3)(4)组（20μg/mL Ox-LDL+10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L连翘苷）,白藜芦醇(1)(2)(3)组（20μg/mL OxLDL+20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L白藜芦醇）,采用四甲基偶氮噻唑盐（MTT）法检测细胞活性,并计算细胞增殖率;采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）法检测细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)和环氧合酶2(COX-2)mRNA的表达水平。结果 与Ox-LDL组比较,姜黄素、白藜芦醇各剂量组,连翘苷(4)组细胞增殖率均显著降低（P <0.01或P ...     

胰岛素、地塞米松和米非司酮对PC12细胞合成和分泌儿茶酚胺的影响及机制探究

目的：考察胰岛素、地塞米松及米非司酮对PC12细胞合成和分泌儿茶酚胺的影响。方法：常规培养及用100 nmol/L的胰岛素（造成胰岛素抵抗模型）培养PC12细胞24小时,单用及合用胰岛素、地塞米松和米非司酮作用于PC12细胞24小时,用荧光检测法检测缓冲液及裂解液中儿茶酚胺的含量。结果：在正常组和模型组中,高浓度的胰岛素（≥100 nmol/L）和地塞米松（≥3μmol/L）单用时,PC12细胞的儿茶酚胺合成和分泌均显著增加（P〈0.01）,而米非司酮单用对PC12细胞的儿茶酚胺合成和分泌无显著影响;胰岛素与地塞米松合用时,随地塞米松浓度的增加,PC12细胞的儿茶酚胺的分泌增加,且当地塞米松浓度高于3μmol/L时,PC12细胞的儿茶酚胺分泌量与不加用地塞米松相比有显著性差异（P〈0.01）;胰岛素、地塞米松和米非司酮合用时,随米非司酮浓度的增加,PC12细胞的儿茶酚胺分泌逐渐减少。在模型组中,胰岛素、地塞米松和米非司酮单用及合用对胞内儿茶酚胺含量均无明显影响。结论：胰岛素和糖皮质激素可显著增加儿茶酚胺的合成和分泌,米非司酮则能抑制这种增强效应。     

山奈酚阻滞JAK2/STAT3通路抑制宫颈癌细胞的增殖及糖酵解的作用研究

探究山奈酚对人宫颈癌细胞增殖、黏附、糖酵解及Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录启动因子3(STAT3)信号通路的调控作用。体外培养人宫颈癌HeLa细胞,分为对照组(不做干预)、10、20、40、80μmol/L山奈酚组,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法筛选出细胞活力接近50%的山奈酚(40μmol/L)用于后续实验。而后取对数生长期的HeLa细胞,分为对照组、实验组(40μmol/L山奈酚)、阳性药物组(20μg/mL 5-氟尿嘧啶)、抑制剂组(40μmol/L山奈酚+50μmol/L JAK2/STAT3信号通路抑制剂AG490)和激活剂组(40μmol/L山奈酚+0.5μmol/L JAK2/STAT3信号通路激活剂Colivelin)。干预24 h,采用5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)法、细胞黏附实验、乳酸检测试剂盒、葡萄糖检测试剂盒、蛋白免疫印迹(WB)法对细胞增殖、黏附能力、乳酸含量、葡萄糖消耗水平及JAK2/STAT3信号通路关键蛋白表达水平进行分析。40μmol/L山奈酚干预后细胞活力接近50%,故选取此浓度进行后续实验。与对照组相比,实验组和阳性...     

咖啡酸苯乙酯通过Nrf-2途径抑制地塞米松诱导的成骨细胞凋亡

目的 探讨Nrf-2途径在咖啡酸苯乙酯(CAPE)抑制地塞米松(DEX)诱导成骨细胞凋亡中的作用.方法 用细胞贴壁法培养小鼠颅顶前骨细胞(MC3T3-E1),采用10μmol/L DEX建立细胞损伤模型,以不同浓度CAPE(0.05、0.25、1μmol/L)预处理细胞2h后加入地塞米松共孵育24h;细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活性;依据CCK-8检测结果确定药物浓度后将实验分为对照组、咖啡酸苯乙酯组(CAPE组)、地塞米松组(DEX组),咖啡酸苯乙酯+地塞米松组(CAPE+DEX组);DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3酶活性,Western blot法检测Nrf-2 途径相关蛋白Nrf-2和血红素氧合酶1(heme oxygenase,HO-1)蛋白表达水平;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 10μmol/L DEX作用下细胞形态发生明显变化,损伤作用明显.与对照组相比,DEX组内细胞存活率显著下降(P＜0.01),而细胞内 ROS水平、细胞凋亡率及Caspase-3酶活性显著增加(P＜0.01);同时,Nrf-2途径相关蛋白 Nrf-2及HO-1表达量减少,差异有统计学意义(P＜0.01).与DEX组相比,CAPE+DEX组细胞存活率显著上升(P＜0.01),Nrf-2途径相关蛋白 Nrf-2及HO-1表达明显增加(P＜0.01);此外,CAPE+DEX组细胞内 ROS 水平、细胞凋亡率及Caspase-3酶活显著降低,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 咖啡酸苯乙酯可以通过Nrf-2途径降低细胞内ROS水平进而减轻地塞米松诱导的氧化应激所致细胞损伤及凋亡.     

苍术素调节Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路对脑胶质瘤细胞铁死亡的影响

目的 探讨苍术素调节Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路对脑胶质瘤细胞铁死亡的影响及其机制。方法 体外培养脑胶质瘤U251细胞,将U251细胞分为对照组、苍术素低剂量组(5 mol/L)、中剂量组(10 mol/L)、高剂量组(20 mol/L)、ML385组(Nrf2抑制剂1 mol/L)。MTT和Edu实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡率;试剂盒检测亚铁离子(Fe²⁺)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、活性氧(ROS)水平;Western blot检测Ki-67、cleaved-caspase3、Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达;建立脑胶质瘤裸鼠模型,观察肿瘤生长情况,检测肿瘤组织中Ki-67、cleaved-caspase3、Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白水平。结果 细胞实验结果显示,与对照组比较,苍术素低、中、高剂量组U251细胞Fe²⁺、MDA、LDH、ROS水平、细胞凋亡率、cleaved-caspase3水平显著性升高,GSH水平、OD490(24 h、48 h)值和细胞...