内皮细胞蛋白C受体在狼疮性肾炎患者血浆中的表达及意义

目的探讨内皮细胞蛋白C受体（EPCR）表达在狼疮性肾炎（LN）患者发生、发展中的作用。方法采用ELISA和RT-PCR技术分别对38例LN患者（LN组）和20例健康献血者（对照组）血浆可溶性EPCR（sEPCR）水平及外周循环sEPCRmRNA表达进行检测。结果LN组外周血sEPCR蛋白及sEPCRmRNA表达水平均显著高于对照组,且并感染者显著高于无感染者。结论sEPCR不仅在LN发病中起重要作用,且与其并发严重感染密切相关;循环系统sEPCR水平升高不仅是早期发现LN的标志物之一,而且持续增高也预示并发严重感染的可能。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞c-kit受体表达的研究

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）中c-kit受体的表达及其临床意义。方法：采用免疫荧光标记，流式细胞仪检测SLE患者PBMC的c-kit受体蛋白（CD117）表达，反转录－聚合酶链式反应（RT－PCR）检测其c-kit mRNA的表达水平，并分别与正常人比较。结果：SLE患者PBMC中c-kit受体及其mRNA表达水平与正常组相比显著增高（P＜0．05）；活动期与非活动期相比显著增高（P＜0．05），非活动期SLE患者PBMC的c-kit受体蛋白表达与正常人差异无显著性（P＞0．05），PBMC的c-kit受体蛋白表达与其SLEDAI显著相关（P＜0．01），结论：SLE患者PBMC c-kit受体蛋白水平及其mRNA表达水平均显著高于正常人，且与疾病活动呈正相关，c-kit受体可能在SLE的病程变化中起着重要作用。     

吸烟减少大鼠骨骼肌胰岛素受体底物1 mRNA和蛋白表达

应用RT-PCR及免疫组化技术分别检测实验大鼠后肢骨骼肌胰岛素受体底物1 mRNA及蛋白的表达。结果提示正常吸烟组、高脂饲养吸烟组及糖尿病吸烟组大鼠骨骼肌胰岛素受体底物1基因mRNA的表达及蛋白含量显著低于各自对照组（P〈0．05或P〈0．01），这可能是吸烟导致胰岛素抵抗的分子机制之一。     

狼疮肾炎患者血浆内皮素水平的变化及泼尼松与环磷酰胺冲击治疗对其影响

目的：探讨狼疮肾炎（LN）患者血浆内皮素（ET）的变化及泼尼松与环磷酰胺冲击治疗（IV－CTX）对其影响。方法；采用特异性的放射免疫法检测35名健康人（正常对照组）、30例稳定期LN患者和45例活动期LN患者IV－CTX治疗前后血浆ET水平。结果：稳定期LN患者血浆ET与政党对照组比较差别无显著性（P＞0．05），而活动期LN患者血浆ET水平显著高于稳定期组与正常对照组（P＜0．01），且血浆ET与抗双链DNA抗体、血沉、24h尿蛋白定量、尿素氮、血肌酐呈正相关（P＜0．01，P＜0．01，P＜0．05，P＜0．05，P＜0．01）。与补体C3、C4、内生肌酐清除率呈显著负相关（P＜0．01，P＜0．05，P＜0．01），轻度肾功能不全组LN患者血浆ET水平显著高于肾功能正常对照组（P＜0．01），泼尼松加IV－CTX能显著降低LN患者血浆ET水平（P＜0．01）。结论：ET参与了LN的发病过程，动态观测血浆ET水平有助于判断LN的活动性、肾脏损害程度和治疗效果。     

活化蛋白C治疗重症急性胰腺炎机制的实验研究

目的观察重症急性胰腺炎（SAP）大鼠给子活化蛋白C（APC）后胰腺组织中血栓调节素（TM）和内皮细胞蛋白C受体（EPCR）的表达，并同时评估胰腺损伤的严重程度。方法SD大鼠随机分为SAP组（胆胰管逆行注射5％牛黄胆酸钠诱导sAP）、高剂量治疗组（诱导SAP时静脉注射50〉g／kgAPC）和低剂量治疗组（10〉g／kgAPC）以及正常对照组。于动物造模后16h取材，行胰腺组织损伤评分，胰腺湿／干重系数、血淀粉酶测定评估胰腺损伤严重度，并测定胰腺组织基质金属蛋白酶9（MMP-9），TM和EPCR蛋白及mRNA表达水平。结果胰腺损伤严重度指标在APC两种剂量治疗组均较SAP组明显减轻（P〈0．01或P〈0．05）。高剂量治疗组的MMP-9表达较SAP组明显下调（P〈0，01），EPCR和TM表达较SAP组和正常对照组上调（P〈0，01）。同时发现两种剂量APC治疗组的TM蛋白及mRNA表达呈量效关系（P〈0．01）。结论APC可能通过降低MMP-9表达，减少EPCR脱落及弱化炎症介质对TM和EPCR表达的抑制作用，而提高组织TM和EPCR的表达，能有效强化蛋白C途径在SAP中的作用，降低胰腺组织的损伤程度，因此有可能成为临床治疗疾病的新手段。     

BLyS/April在川崎病患者中的表达及意义

目的 探讨BLyS／April在川崎病（KD）免疫发病机制中的作用。方法 急性期KD患儿48例，正常同年龄对照组32名，KD患儿分别于静脉注射丙种球蛋白（IVIG）治疗前后直接取血备检。采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及荧光定量PCR检测单核-巨噬细胞（MC）BLyS和April，BLyS／April受体BR3、BCMA、TACI及细胞因子mRNA表达；双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆中细胞因子蛋白浓度。结果 ①急性期KD患儿MCBLyS和Aprilm RNA表达明显高于正常同年龄对照组（P〈0．01），经IVIG治疗后表达不同程度下降；②BLyS／April受体BR3、BCMA和TACI基因转录水平显著高于正常同年龄对照组（P〈0．01）；③急性期KD患儿抗体类型转换相关细胞因子白细胞介素（IL）-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-15 mRNA表达水平及蛋白浓度明显高于正常同年龄对照组（P〈0．01）；④KD患儿BLyS／April调控因子干扰素（IFN）-α/γ、IL-10 mRNA表达水平及血浆浓度明显高于正常同年龄对照组（P〈0．01）。结论 急性期KD患儿BLyS／April过表达可能是导致KD免疫功能紊乱的因素之一。     

膀胱癌组织中趋化因子受体CXCR7的表达变化及意义

目的观察膀胱癌组织中趋化因子受体CXCR7的表达变化及意义。方法收集37例膀胱癌患者的癌组织（观察组）和29例癌旁正常组织（对照组）,采用逆转录聚合酶链反应法（RT—PCR）和免疫组化法分别检测其中的CXCR7 mRNA和蛋白。结果观察组CXCR7 mRNA相对表达量为0．692±0．071,明显高于对照组的0．432±0．148,P〈0．05。观察组中浅表性膀胱癌CXCR7 mRNA相对表达量为0．676±0．065,明显低于浸润性膀胱癌组织中的0．731±0．074,但二者均高于对照组,P均〈0．05。观察组11例CXCR7蛋白低表达、26例高表达,对照组分别为23、6例,两组CXCR7蛋白表达情况相比P〈0．05。观察组26例浅表性膀胱癌中15例CXCR7高表达,11例浸润性膀胱癌CXCR7均为高表达。CXCR7表达情况与膀胱癌临床分期有关（P〈0．05）。CXCR7表达情况与膀胱癌患者年龄、性别无关（P均〉0．05）。结论膀胱癌组织中CXCR7 mRNA和蛋白表达升高。检测膀胱癌组织中的CXCR7 mRNA或蛋白可能有助于判断膀胱癌的临床分期。     

系统性红斑狼疮患者外周血中IFN-α、IL一10、TGF—β的表达变化及意义

目的观察系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血中α干扰素（IFN-α）、白介素10（IL—10）、转化生长因子B（TGF-B）的表达变化,并探讨其意义。方法采用双抗体夹心ELISA法检测98例SLE患者（SLE组）及55例健康人（对照组）血清中的IFN—α、IL-10、TGF—β,采用RT—PCR法检测外周血单个核细胞（PBMCs）中的IFN—α、IL-10、TGF-β mRNA。结果SLE组血清中的IFN-α、IL-10及PBMCs中的IFN—α、IL-10 mRNA均高于对照组（P〈0．05）,且活动期高于稳定期（P〈0．05）;SLE组血清中的TCF—β及PBMCs中的TGF-β mRNA低于对照组（P〈0．05）,且活动期低于稳定期（P〈0．05）;SLE组血清及PBMCs中的IFN-α、IL-10及其mRNA呈正相关（r=0．80、0．75,P均〈0．05）,IL-10、TGF-β及其mRNA呈负相关（r=-0．45、-0．25,P均〈0．05）,IFN-α、TCF-β及其mRNA无相关性。SLE组血清及PBMCs中IFN—α、IL-10、TGF-β与其相应的mRNA呈正相关（r=0．90、0．82、0．91,P均〈0．05）。结论SLE患者外周血中IFN-α、IL-10高表达,TGF—β低表达;三者相互作用参与SLE的发病。     

SLE患者PBMCs细胞凋亡及其相关基因Bax、p53、C-myc蛋白表达的临床意义

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）外周血单个核细胞（PBMCs）细胞凋亡及其相关基因Bax、p53、C-myc蛋白表达在SLE发病中的作用及机制。方法应用流式细胞仪（FCM）检测20例活动期SLE患者（SLE组）及20例健康者（对照组）PBMCs细胞凋亡率及凋亡相关基因Bax、p53、C-myc蛋白表达阳性率;免疫比浊法检测血清补体C,水平,并分析SLE组PBMCs细胞凋亡率与C3水平的相关性。结果SLE组PBMCs细胞凋亡率及Bax、p53、C-myc蛋白表达阳性率均显著高于对照组（P均〈0．01）;SLE组血清补体C,水平显著低于对照组,且SLE组PBMCs细胞凋亡率与血清补体C3水平呈高度负相关（P均〈0．01）。结论Bax、p53、C-myc蛋白表达在SLE发病中具有重要作用,可能机制为诱发PBMCs细胞凋亡失衡及反馈性降低血清补体水平。     

SLE患者外周血单个核细胞中HSP90基因表达水平及与SLEDAI的相关性

目的 进一步探讨外周血单个核细胞（PBMC）中热休克蛋白90（HsPg0）基因表达在系统性红斑狼疮（SLE）发生、发展中的作用。方法 分离58例SLE患者（SLE组）和28例健康人（对照组）新鲜PBMC,利用半定量RT-PCR方法测定HSP90 mRNA表达水平;对SLE组HSP90 mRNA表达水平与SLE疾病活动指数（SLEDAI）的关系进行直线相关分析。结果 SLE组和对照组HSP90 mRNA表达水平分别为0．76±0．14、0．58±0．10,P〈0．05（t=5．930）;SLE组HSP90基mRNA表达与SLEDAI呈正相关,P〈0．05（r=0．451）。结论HSP90基因过度表达在SLE发生、发展中具有重要作用,此为进一步研究SLE发病机制及进行病情监测提供了依据。     

PI-3K在大鼠非酒精性脂肪性肝病发病中的作用

目的探讨磷脂酰肌醇-3激酶（PI-3K）在非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）发病中的作用。方法30只SD大鼠随机分为3组：正常对照组、非酒精性脂肪肝模型：A组（高脂喂养8周）、B组（高脂喂养16周）。评价各组大鼠肝脂变程度和炎症活动度积分水平；免疫组化观察各组PI-3K（p85α）蛋白表达量；RT—PCR检测PI-3K（p85α）mRNA的表达水平。结果模型组脂肪变性明显，炎症活动度记分均显著高于正常对照组（P〈0．01），模型B组炎症活动度记分水平显著高于模型A组（P〈0．01）。模型A、B组PI-3K（p85α）蛋白表达量均明显低于正常对照组（P〈0．01），且模型B组PI-3K（p85α）蛋白表达量明显低于模型A组（P〈0．01）；模型A组PI-3K（p85α）mRNA表达水平与正常对照组比较无显著差异（P〉0．05）；模型B组PI-3K（p85d）mRNA表达水平显著低于模型A组及正常对照组（P〈0．01）。结论PI-3K可能是影响NAFLD发病的重要因素。     

维持性血液透析患者血浆内脏脂肪素表达及临床意义

目的探讨维持性血液透析（MHD）患者血浆内脏脂肪素表达及临床意义。方法用ELISA法检测30例MHD患者（MHD组）和20例健康者（对照组）的血浆内脏脂肪素,并检测其血浆白蛋白、钙、磷、尿素氮、肌酐、血脂等生化指标,以及C反应蛋白（CRP）;分析内脏脂肪素与其他检测指标的相关性。结果MHD组血浆内脏脂肪素明显高于对照组（P〈0．01）;内脏脂肪素水平与CRP、TG、动脉粥样硬化指数呈正相关（P〈0．01或〈0．05）,与白蛋白呈负相关（P〈0．05）。结论MHD患者血浆内脏脂肪素明显升高,可能参与其营养不良、微炎症过程。     

甲状腺乳头状癌组织中ANG-Ⅱ、AT1R、VEGF表达及意义

目的探讨甲状腺乳头状癌（PTC）的发生机制。方法采用免疫组化SP法检测20例PTC（PTC组）、20例甲状腺良性病变（良性组）和15例正常甲状腺（对照组）组织标本中血管紧张素Ⅱ（ANG-Ⅱ）及其受体1（AT1R）和血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达。结果ANG-Ⅱ、ATIR、VEGF阳性率PTC组明显高于良性组和对照组（P〈0．05）,良性组高于对照组（P〈0．05）;PTC组织中ANG-Ⅱ、AT1R与VEGF蛋白表达呈显著正相关（r=0．594,P〈0．01;r=0．446,P〈0．05）。结论ANG-Ⅱ、AT1R高表达促进了PTC的发生,其机制可能为诱导VEGF产生,促进肿瘤新生血管形成。     

游离脂肪酸对人脐静脉内皮细胞eNOSmRNA及ET-1mRNA表达水平的影响

目的研究游离脂肪酸（FFA）对离体培养人血管内皮细胞（HUVEC）eNOS mRNA和ET-1mRNA表达水平的影响。方法用不同的FFA培养HUVEC，分为C16：0、C18：0、C18：1、C18：2、C24：0及对照组，每组选用4个浓度，孵育24h，用RT—PCR方法，半定量测定eNOS mRNA和ET-1mRNA的表达。结果①C18：1、C18：2组（t≥200μmol／L）eNOS mRNA表达值低于对照组（P〈0．05）且呈浓度依赖性，而C18：2组eNOS mRNA表达值比C18：1组低（P〈0．05）。②C18：1组以及C18：2组ET-1mRNA表达值低于对照组（P〈0．05），呈浓度依赖性。③C16：0、C18：0、C24：0组（≥200μmol／L），ET-1mRNA表达值增高（P〈0．05），呈浓度依赖性。④C18：0、C18：1、C18：2各组相同FFA水平相比较，ET-1mRNA表达水平依次降低（P〈0．05）。⑤C18：1、C18：2组eNOS mRNA与ET-1mRNA表达值之比高于对照组（P〈0．05）。C16：0、C18：0、C24：0各组此比值低于对照组（P〈0．05）。C18：0、C18：1、C18：2各组同浓度FFA条件下此比值依次升高（P〈0．05）。C16：0、C18：0、C24：0各组同浓度FFA条件下此比值无显著差异（P〉0．05）。结论①FFA对内皮细胞eNOS mRNA表达水平的影响与链长无关，而与FFA饱和程度有一定关系。②不饱和脂肪酸（UFA）降低eNOS mRNA以及ET-1mRNA表达；提示UFA倾向于维护血管舒张功能。③饱和脂肪酸（SFA）呈浓度依赖性促进ET-1mRNA表达可能是导致内皮功能障碍的部分原因。     

狼疮肾炎患者外周血单核细胞载脂蛋白EmRNA表达及意义

目的研究外周血单核细胞载脂蛋白E（apoE）mRNA表达，初步探讨apoE在狼疮肾炎（LN）中的作用和意义。方法系统性红斑狼疮（SLE）患者19例，其中LN患者13例：LN-Ⅳ型（弥漫性LN）8例、LN-Ⅱ型（系膜增生性LN）5例，非LN的SLE患者组6例，健康对照组8名。通过密度梯度离心法分离外周血单核细胞，反转录-聚合酶链反应检测单核细胞apoEmRNA表达量。结果LN-Ⅳ型组apoEmRNA表达量明显高于LN-Ⅱ型组（脚．006）和其他两组（均为P=O．000）。与正常对照组和非LN的SLE组比较，LN-Ⅱ型组表达也上调，P值分别为0．018和0．031，正常对照组和非LN的SLE组之间差异无统计学意义，P=O．276。19例患者apoEmRNA表达量与外周血总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）水平之间无直线相关关系，P值分别为0．697，0．647。LN-Ⅳ型组、LN-Ⅱ型组、非LN的SLE组血清总胆固醇水平无差异，P=0．764，3组TG差异也无统计学意义，P=0．525。LN-Ⅳ型组肾脏病变活动指数高于LN-Ⅱ型组，P=0．006。结论LN患者单核细胞apoE表达水平可能与体内免疫反应和活动性炎症病变有关。     

糖皮质激素受体αβ和剪接因子SRp30c在系统性红斑狼疮的表达及意义

目的研究系统性红斑狼疮（SLE）糖皮质激素（GC）抵抗患者外周血单个核细胞（PBMC中糖皮质激素受体（GR）α、GRβ及剪接因子SRp30c的表达及其与临床指标的相关性，以探讨GC抵抗发生的可能机制。方法根据患者对GC反应的敏感程度分为GC抵抗组和GC敏感组，分别用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测两组患者与健康人外周血PBMC中GRα、GRβ及剪接因子SRp30c的mRNA表达量；免疫细胞化学（ICC）方法测定外周血PBMC的GRα、GRβ蛋白水平的表达，并分析GR及SRp30c变化的意义及与各临床指标之间的关系。结果①SLE患者与正常对照者PBMC均有GRα、GRβ的mRNA及蛋白的表达，以GRα占大部分；②GC抵抗组GRβ和SRp30c的mRNA表达量均明显高于GC敏感组及正常对照组（P〈0．05），GC抵抗组GRβ阳性细胞数也明显高于GC敏感组及正常对照组（P〈0．05），但三组GRctmRNA表达量及阳性细胞数比较差异无统计学意义；③两组的临床指标中肾脏受累时间、尿蛋白定量（24h）、血浆白蛋白水平及SLE疾病活动指数（SLEDAI）评分差异有统计学意义（P〈0．05），但采用多因素Logistic回归分析后，显示只有GRα和SRp30c的mRNA表达量是GC抵抗发生的独立危险因素。结论GRβ及剪接因子SRp30c在GC抵抗的发生中可能发挥重要作用，检测患者外周血PBMC中GRβ及SRp30c的表达有可能预测患者对激素治疗的反应，给临床治疗提供进一步的依据。     

胰岛素样生长因子结合蛋白-4在食管鳞癌中的表达及临床意义

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-4（IGFBP-4）在食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法应用RT—PCR及免疫组化方法检测23例食管鳞癌及正常组织IGFBP-4、基质金属蛋白酶-7（MMP-7）的表达情况。结果食管鳞癌IGFBP-4 mRNA表达高于正常组织（P〈0．01），但在肿瘤侵及外膜以上及有淋巴结转移者表达降低（P〈0．01），在不同年龄、性别及肿瘤大小间表达差异无统计学意义（P〉0．05）。癌组织IGFBP-4蛋白表达阳性率为60．9％，低于正常组织（91．3％）（P〈0．05）。MMP-7 mRNA在食管鳞癌组织的表达为100．0％，正常组织未见表达（P〈0．01），肿瘤侵及外膜以上及有淋巴结转移组表达上调更明显（P〈0．05）。IGFBP-4与MMP-7 mRNA表达呈负相关（P〈0．01）。结论IGFBP-4表达下调与食管鳞癌的浸润及转移有密切关系，并与MMP-7高表达负相关，IGFBP-4 mRNA检测对判断食管癌进展及预后有重要意义。     

缬沙坦对兔主动脉PPAR-γmRMA及其蛋白表达的影响

目的研究缬沙坦对兔主动脉过氧化物酶体增殖物激活受体-γ（PPAR-γ）表达的影响，探讨其抗动脉硬化（AS）的可能机制。方法将24只新西兰兔随机分成正常对照组、高脂组、药物组，分别给予正常饮食、高脂饮食、高脂饮食加缬沙坦灌胃，共14周。采用逆转录聚合酶链反应及免疫组化法分别检测兔主动脉PPAR-γ mRNA及其蛋白表达，并测量主动脉内膜厚度及内膜／中膜厚度比。结果药物组内膜厚度低于高脂组（P〈0．05）。主动脉PPAR-γ表达药物组〉高脂组〉对照组．P均〈0．05。药物组主动脉PPAR-γ蛋白表达高于高脂组（P〈0．05）．对照组未见明显表达。结论缬沙坦可能通过增加PPAR-γ表达而发挥抗AS作用。     

2型糖尿病肾病患者外周血单个核细胞Toll样受体4的表达及TNF-α水平的研究

目的研究2型糖尿病肾病患者Toll样受体4的表达及血清TNF-α浓度水平,探讨其在糖尿病肾病发病中的作用及其可能的机制。方法将70例2型糖尿病患者（T2DM）根据尿白蛋白排泄率（UAER）分为正常白蛋白尿组（NA组,35例）、微量白蛋白尿组（MA组,23例）和大量白蛋白尿组（CP组,12例）,取20例健康体检者做为对照组,分别运用RT—PCR法、ELISA法测定其外周血单个核细胞Toll样受体4的表达及血清TNF-α浓度。结果NA组、MA组和CP组TLR4MRNA表达水平逐渐增高,MA组、CP组显著高于对照组（P〈0．01）,各组血清TNF-α浓度也逐渐升高,均显著高于对照组（P〈0．01）。TLR-4mRNA表达水平与血清TNF-α水平及UAER呈正相关（P〈0．05,P〈0．01）。结论糖尿病肾病患者外周血单个核细胞TLR4MRNA表达水平上调,血清TNF-α水平也同步升高,TLR4可能通过调节炎症反应介导糖尿病肾病炎症损伤。     

糖尿病视网膜病变血小板5-HT及血浆NO、ET的变化

选择40例DR患者，35例2型糖尿病患者和42例正常人做对照组，测定的血小板5-HT、血浆NO、血浆ET水平。结果：血小板5-HTDR组低于糖尿病组（P〈0．05）及对照组（P〈0．01），糖尿病组低于正常对照组（P〈005），血浆NO水平DR组低于糖尿病组（P〈0．05）和对照组（P〈0．01），糖尿病组低于健康对照（P〈0．05）而ET水平DR组高于糖尿病组（P〈0．05）和对照组（P〈0．01），糖尿病组高于对照组（P〈0．05）。结论：DR血小板释放5-HT异常增多，血浆NO水平的降低，ET水平的升高，参与了糖尿病视网膜病变的发生发展。