碱性成纤维细胞生长因子联合血管内皮细胞生长因子促进自体脂肪移植成活的动物实验研究

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(1bFGF)联合血管内皮细胞生长因子(VEGF)对大鼠自体脂肪移植血管新生及成活的影响。方法建立大鼠自体脂肪移植模型,将腹股沟处脂肪组织与生长因子蛋白溶液或生理盐水混合移植于大鼠背部。大鼠背部随机注射脂肪组织与生理盐水或0.5μg bFGF、1.0μg bFGF、2.0μgbFGF、0.5μg bFGF+0.5μg VEGF、1.0μg bFGF+1.0μg VEGF。12周后,对移植物进行成活率分析、组织学观察以及CD31免疫组织化学染色。结果向0.3 ml脂肪组织中添加2.0 Pg bFGF可显著提高移植物成活率及微血管密度。0.5μg bFGF组及1.0μg bFGF组与生理盐水组相比,差异无统计学意义(P0.05);但分别联合应用0.5μgVEGF和1.0μgVEGF以后,可显著升高移植物成活率,差异具有统计学意义(P0.05)。1.0μg bFGF+1.0μg VEGF联合应用组的移植物成活率和血管密度亦高于2.0μg bFGF单添加组。结论相比单独应用bFGF,VEGF与bFGF联合应用可刺激更多的血管生成,从而提高移植脂肪的成活率。     

异丙酚预先给药对内毒素诱导大鼠肾小球血管内皮细胞通透性升高的影响

目的 探讨异丙酚预先给药对脂多糖(LPS)诱导大鼠肾小球血管内皮细胞通透性升高的影响.方法 分离、培养SD大鼠肾小球血管内皮细胞,以1×106/ml的密度接种于24孔培养板(200 μl/孔)和transwell小室(100 μl/室),采用随机数字表法,将其随机分为6组(n=10),正常对照组(C组)不作任何处理;脂肪乳对照组(I 组)加入10%脂肪乳4 μg/ml;异丙酚组(P组)加入异丙酚4μg/ml;LPS组(L组):加入LPS 10μg/ml;LPS+脂肪乳组(L+I组)加入10%脂肪乳4 μg/ml及LPS 10μg/ml;LPS+异丙酚组(L+P组)加入异丙酚4μg/ml 及LPS 10 μg/ml.于加入LPS前30 min加入脂肪乳或异丙酚,药物的浓度均为终浓度.加入LPS后6 h,收集细胞,采用逆转录-聚合酶链反应测定血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA表达水平;收集上清液,采用酶联免疫吸附法测定VEGF浓度;测定血管内皮细胞通透性.结果 与C组比较,L组、L+I组和L+P组VEGF mRNA表达上调,上清液中VEGF浓度和血管内皮细胞通透性增加(P＜0.05),而I组和P组上述指标差异无统计学意义(P＞O.05).与L组比较,L+P组VEGF mRNA表达下凋,上清液中VEGF浓度和血管内皮细胞通透性降低(P＜0.05),L+I组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).上清液中VEGF浓度与血管内皮细胞通透性呈正相关(r=0.833,P＜0.05).结论 异丙酚预先给药可抑制LPS诱导大鼠肾小球血管内皮细胞通透性升高,其机制与下调VEGF表达有关.

Abstract：

Objective To investigate the influence of propofol pretreatment on the increased glomerular endothelial cell permeability induced by lipopolysaccharide (LPS) in rats.Methods Glomerular endothelial cells isolated from SD rats were cultured in 24-well plates(200 μl/well) and transwell filters (100 μl/filter) at 1×106/ml and assigned into 6 groups (n=10 each):control group (group C) , introlipid group (group I), propofol group (group P) , LPS group (group L), LPS+introlipid group (group L+I) and LPS+propofol group (group L +P). In group I, 10% introlipid 4 μg/ml was added. In group P, 4 μg/ml propofol was added. In group L, 10 μg/ml LPS was added. In group L+I, 10% introlipid 4 fig/ml combined with 10 μg/ml LPS was added. In group L+ P, 4 μg/ml propofol combined with LPS 10 μg/ml was added. Introlipid or propofol was added 30 min before the administration of LPS and the corresponding concentrations mentioned above were all final concentrations.After 6 h incubation with LPS, the cells were collected for measurement of vascular endothelial growth factor (VEGF) mRNA expression using RT-PCR. The supernatant was collected for determination of the VEGF concentration by ELJSA. The endothelial cell permeability was determined. Results Compared with group C, the expression of VEGF mRNA was up-regulated and the VEGF concentration and endothelial cell permeability were significantly increased in L, L+I and L + P groups (P＜0.05 ) ,but no significant change was found in the parameters mentioned above in I and P groups (P＞0.05). Compared with group L, the expression of VEGF mRNA was downregulated and the VEGF concentration and endothelial cell permeability were significantly decreased in L+P group (P＜0.05), but no significant change was found in the parameters mentioned above in group L+I(P＞0.05). A positive correlation existed between the concentration of VEGF and the permeability of endothelial cells(r= 0.833,P＜0.05).Conclusion Propofol pretreatment can decrease the increased glomerular endothelial cell permeability induced by LPS probably through down-regulation of VEGF expression.     

骨髓间充质干细胞联合血管内皮生长因子基因治疗肢体缺血的实验研究

目的 观察骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC)联合血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因治疗对家兔肢体缺血模型的疗效.方法 切除新西兰兔右后肢全长股浅动脉并结扎股深动脉以建立兔后肢缺血模型,随机分为空质粒对照组(EP组)、骨髓间充质干细胞组(BMSC组)、VEGF基因治疗组(VEGF组)及联合治疗组(BV组),每组各8只.分别于治疗后28 d及30 d进行动脉造影及VEGF免疫组化染色.结果 EP组、BMSC组及VEGF组的新生血管计数组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).BV组的新生血管计数较其余3组明显增加,差异有统计学意义(F=35.47,P＜O.01).BMSC组及VEGF组的VEGF免疫组化染色呈阳性表达,与EP组比较差异有统计学意义(F=764.32,P＜0.01).BV组的VEGF免疫组化染色呈强阳性表达,与其余3组比较差异有统计学意义(F =764.32,P＜0.01).结论 BMSC联合VEGF基因治疗兔肢体缺血可使VEGF获得稳定而有效的表达,从而改善肢体缺血.     

关节炎患者血管内皮生长因子的检测及其临床意义

目的通过对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)和骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者血清及关节液的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的检测,探讨VEGF在两种疾病中的鉴别意义。方法采用酶联免疫吸附试验方法检测RA组(40例)、OA组(40例)血清及关节液中VEGF的含量。结果 RA组血清VEGF含量(94.41±43.32)ng/L,明显高于OA组(35.60±17.08)ng/L,差异有统计学意义(t=7.987,P0.001);RA组关节液VEGF含量(188.26±90.76)ng/L,明显高于OA组(69.72±30.42)ng/L,差异有统计学意义(t=7.832,P0.001);关节液中VEGF和血清中VEGF含量之间存在相关性(r=0.714,P0.001)。结论 VEGF在RA患者体内高表达,可作为RA与OA鉴别的参考指标。     

血管内皮细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子加速预构扩张皮瓣成熟的研究

目的　观察以生物蛋白胶局部缓释血管内皮细胞生长因子 (VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)应用于兔预构扩张皮瓣对细胞增殖及凋亡、血管化进程 ,以及皮瓣成熟的作用。　方法　将新西兰大耳白兔 5 3只随机分为正常、空白、生物蛋白胶、VEGF直接应用、VEGF胶及 b FGF胶共 6组 ,兔耳中央动静脉束植入预构扩张皮瓣 ,14天后形成 3cm× 5 cm岛状瓣。分别进行皮瓣成活面积、激光多普勒血流量、铅丹灌注、墨汁灌注、PCNA免疫组化和 TUNEL 凋亡检测。　结果　两种生长因子应用组皮瓣成活面积较其它组增加 ,血流灌注量增多 ,新生毛细血管密度加大 ,细胞增殖提高、凋亡减少。　结论　 VEGF和 b FGF均能通过刺激细胞增殖和减少凋亡发生来促进血管新生和预构扩张皮瓣成熟 ,用生物蛋白胶缓释生长因子有独特效果。     

pcDNA3.1(+)载体携带血管内皮生长因子治疗大鼠缺血皮瓣

目的 观察注射真核表达载体pcDNA3.1(+)携带血管内皮生长因子(VEGF)基因后对大鼠缺血皮瓣存活的影响.方法 构建重组质粒pcDNA3.1(+)-VEGF,将SD大鼠随机分成3组,每组10只.pcDNA3.1(+)-VEGF组:于背部皮肤皮下多点注射pcDNA3.1(+)-VEGF 30 μg/100μl;VEGF组:多点注射VEGF蛋白100 ng/100μl;生理盐水(NS)组:注射生理盐水100μl,注射2d后在其背部形成7 cm×3 cm的全厚随意型皮瓣,48 h后按原设计掀起皮瓣并原位缝合.术后10 d测量皮瓣的成活面积,计算成活面积百分比,并行免疫组织化学检测.结果 皮瓣成活面积百分比:pcDNA3.1(+)-VEGF组为(79.1±3.5)％,VEGF组为(62.2±2.7)％,NS组为(59.9±3.1)％,pcDNA3.1(+)-VEGF组皮瓣成活面积明显高于其他两组(P＜0.05).结论 皮下注射pcDNA3.1(+ )-VEGF可促进新生血管的形成,比单纯注射VEGF蛋白更能提高皮瓣的成活率.     

肝癌衍生生长因子和血管内皮生长因子在肝外胆管癌患者血清中的诊断价值

目的:探讨肝癌衍生生长因子(HDGF)和血管内皮生长因子(VEGF)在肝外胆管癌(EHCC)患者血清中的诊断价值。方法:通过ELISA方法检测83例EHCC患者和51例健康对照血清中HDGF和VEGF表达水平,并通过Logistic回归和ROC曲线分析二者在EHCC中的诊断价值。结果:EHCC组血清中HDGF浓度(167.48±107.48)pg/m L,健康对照组的为(69.97±53.52)pg/m L,EHCC组明显高于健康对照组(P=0.002)。VEGF在EHCC组和健康对照组中血清浓度分别为(1.42±1.04)ng/m L和(0.802±0.602)ng/m L,EHCC组明显高于健康对照组(P0.001)。ROC曲线分析结果显示血清HDGF和VEGF的曲线下面积(AUC)分别为0.807和0.681,两者差异有统计学意义(P=0.03),表明血清HDGF作为EHCC潜在标志物明显优于VEGF。进一步分析显示联合检测血清HDGF和VEGF并没有提高EHCC患者的诊断能力。结论:检测血清HDGF和VEGF表达水平对EHCC诊断有一定价值,可作为EHCC患者非侵袭的潜在诊断标志物。     

原发性醛固酮增多症患者钙磷代谢情况及其与成纤维生长因子23相关性分析

目的比较原发性醛固酮增多症(PA)和原发性高血压(EH)患者钙磷代谢和成纤维生长因子23(FGF23)水平的差异,探讨二者的相关性。方法选择因"高血压查因"住院确诊的资料完整的病例,按性别、年龄、高血压水平及其病程等匹配原则纳入123例PA患者和123例EH患者,比较两组患者的钙磷代谢指标的差异并分析其与FGF23的关系。结果 (1)PA组的FGF23、PTH水平高于EH组,分别是271.31 pg/m L(173.91,504.34)vs 160.41 pg/m L(118.08,235.60)和74.5 pg/m L(46.5,91.0)vs.43.60 pg/m L(33.75,60.25),其差异具有统计学意义(P0.001),但血钙、血磷水平低于EH组(2.18±0.17 mmol/L vs.2.33±0.17 mmol/L和1.013±0.204 mmol/L vs.1.127±0.190 mmol/L,P0.001)。(2)PA组中FGF23与与血磷水平呈负相关(r=-0.502,P=0.001),与PTH水平呈正相关(r=0.349,P=0.030)。(3)PA组中随着醛固酮水平的递增,FGF23呈上升趋势(P0.05)。结论 PA患者FGF23水平显著上升,FGF23水平与血磷和PTH水平相关,且FGF23与高醛固酮水平相关。     

血管内皮生长因子反义寡核苷酸抑制胆囊癌血管生成的研究

目的探讨Oligofectamine介导的血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growthfactor,VEGF)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)转染对人胆囊癌细胞GBC-SD裸鼠移植瘤的VEGF表达和血管形成的影响。方法裸鼠接种GBC-SD细胞建立移植瘤模型,随机分为A、B、C三组,各组裸鼠在接种1周后,分别给于200μl磷酸缓冲液(PBS)、VEGFSODN100μg Oligofectamine0.5μl及VEGF ASODN100μg Oligofectamine0.5μl,每3天1次,连续治疗5周,观察各组裸鼠的成瘤性、体积及瘤重的变化,各组移植瘤中VEGF表达及微血管密度(MVD)变化。结果三组裸鼠3周时的成瘤率,C组显著低于A、B两组(P<0.05),6周时各组的成瘤率无差异。各组移植瘤6周时的体积和瘤重相比C组显著低于A、B两组(P<0.05),C组的抑瘤率为(50.79±9.19)%。A、B两组移植瘤VEGF表达及MVD均无显著性差异(P>0.05),而C组移植瘤VEGF的表达较A、B两组明显减弱(P<0.05),MVD明显小于A、B两组(P<0.05)。结论VEGF ASODN在体内能显著抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤的增殖,降低其在裸鼠体内的成瘤性,抑制VEGF在蛋白水平的表达,减少裸鼠移植瘤中血管的形成,降低微血管密度。     

血管内皮生长因子转染内皮祖细胞治疗大鼠缺血后肢的研究

目的 使用血管内皮生长因子(VEGF)转染内皮祖细胞(EPC)治疗大鼠缺血后肢,观察EPC、VEGF转染EPC对大鼠缺血后肢的新生血管和肢体成活的影响.方法 制作SD大鼠后肢缺血模型,将动物随机分为3组,每组6只.将构建的VEGF基因真核表达载体转染入骨髓来源的EPCs后通过尾静脉注射人大鼠体内,并与使用磷酸盐缓冲液(PBS)或EPC的动物进行比较,观察转染VEGF的EPCs在缺血部位的聚集和形成新生血管的情况.结果 (1)动物总残肢率比较,CELL组、VEGF组较PBS组明显增加的肢体恢复率(P<0.05),CELL组肢体恢复率较VEGF组差(P<0.05).(2)毛细血管密度与PBS组比较,各时间点中CELL、VEGF组MVD均明显增多(P<0.05).(3)缺血肢体VEGFa的表达:VEGF组的VEGF蛋白表达较PBS组、CELL组、明显增多(P<0.05);(4)手术后7、14、28 d,与PBS对照组比较,CELL、VEGF组细胞的血流灌注有较大程度的恢复(P<0.01).结论 VEGFa基因转染EPCs对缺血部位的血管新生有重要影响,联合应用VEGFa基因和EPCs治疗缺血后肢有较好的协同作用.     

纤维蛋白凝胶立体培养诱导血管样结构的形成

目的探讨微血管内皮细胞(MVEC)在体外培养中形成血管样结构的细胞外基质条件，为体外组织工程血管化提供实验基础。方法在纤维蛋白原浓度为2g／L的纤维蛋白凝胶中加入不同浓度的血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)，进行MVEC的立体培养，观察有无血管样结构形成。结果在VEGF165为10μg／L组和20μg／L组中，MVEC在立体培养中形成血管样结构。VEGF165为20μg／L组比VEGF165为10μg／L组形成血管样结构的时间更早、结构更长。VEGF165为5μg／L组和对照组均无血管样结构形成，但可见细胞团聚。结论VEGF165浓度为20μg/L或10μg／L时，MVEC在纤维蛋白凝胶立体培养中可形成血管样结构。VEGF165诱导形成血管样结构的长度与剂量有依赖关系。     

垂体瘤中血管内皮生长因子和血管形成的关系

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)在垂体瘤中的表达,探讨VEGF与垂体瘤血管形成的关系.方法采用免疫组织化学技术检测42例垂体瘤组织VEGF蛋白表达和微血管计数.结果 VEGF蛋白表达阳性者37例,阴性者5例;微血管密度(MVD)在阳性组为47.93±15.82,阴性组为18.12±4.39,两组差异有非常显著性(P＜0.001);VEGF表达与MVD之间存在相关性(r=0.79,P＜0.001).结论 VEGF存在于垂体瘤组织中,VEGF表达与垂体瘤血管形成密切相关,提示VEGF在垂体瘤中可能作为一种旁分泌因子,刺激肿瘤血管内皮细胞增殖,促进肿瘤血管形成.     

血管内皮生长因子对关节软骨细胞基质金属蛋白酶-13表达的影响

目的 观察血管内皮生长因子(VEGF)对体外培养的关节软骨细胞基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达的影响.方法 体外培养SD乳鼠关节软骨细胞,分为4组,每组加入不同处理因素进行干预,A组:(对照组)不加任何处理因素;B组:10 μg/L VEGF;C组:10 μg/L白细胞介素(IL)-1β;D组:10 μg/L VEGF+ 10 μg/L IL-1β.采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测MMP-13 mRNA的表达,蛋白免疫印迹法检测MMP-13蛋白的表达.结果 B组(0.88±0.47)、C组(3.69 ±0.45)及D组(3.85 ±0.48)的MMP-13 mRNA表达水平均显著高于A组(0.73±0.56),D组软骨细胞MMP-13的mRNA表达水平明显高于B组(P＜0.01)及C组(P＜0.05).与A组(0.36 ±0.17)比较,B组(0.63±0.21)、C组(0.76±0.24)及D组(0.99±0.26)的MMP-13蛋白表达水平显著升高,D组MMP-13的蛋白表达水平明显高于B组(P＜0.05)及C组(P＜0.05).结论 在骨关节炎的发病过程中VEGF可能通过上调软骨细胞MMP-13的表达发挥重要作用.     

血管内皮生长因子在妊娠期高血压疾病患者中的变化及意义

目的:检测健康妇女、孕妇及妊娠期高血压疾病患者外周血中血管内皮生长因子(VEGF)的水平,并探讨其与妊娠期高血压疾病发病的关系.方法:应用双抗体酶联免疫吸附法(ELISA)检测未妊娠妇女(正常组)90例、正常妊娠妇女(妊娠组)92例以及妊娠期高血压疾病患者95例外周血中VEGF的水平.结果:①妊娠组(143.53±25.77)ng/L与正常组(13.21±4.12)ng/L相比VEGF水平明显增高(P＜0.001)；妊娠组孕中期VEGF水平达高峰(186.71±52.37)ng/L,孕晚期下降(120.20±34.07)ng/L.②妊娠期高血压疾病组VEGF水平(58.28±20.43)ng/L,明显低于妊娠组孕晚期水平(P＜0.01),并随病情的加重,VEGF水平呈逐渐下降趋势(P＜0.05).结论:妊娠后VEGF水平显著下降可能是妊娠期高血压疾病发病机理中的一个重要因素.     

糖尿病条件下钛-骨界面氧化应激对血管内皮细胞功能的影响及机制研究

目的研究在糖尿病条件下过度产生的活性氧簇(ROS)对钛-骨界面的血管内皮细胞功能的影响,并初步探讨改善血管内皮细胞功能以保持内植物稳定的方法。方法通过将人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)种植于钛片培养,建立体外模型,比较正常血清组(NS组),糖尿病血清组(DS组),DS+NAC(ROS抑制剂,20 mmol/L)组,NS+H_2O_2(300μmol/L)组血管内皮细胞的生物学功能、氧化应激水平及炎症介质水平。结果培养后第1、4、7天,DS组的细胞增殖活力明显低于NS组,DS+NAC组中细胞增殖活力较DS组显著提高但仍低于NS组,NS+H_2O_2组细胞增殖活力明显低于其他3组,差异均有统计学意义(P0.05)。DS组MDA含量明显高于NS组,Mn SOD酶活性更低,早期细胞凋亡率更高,TNF-α含量更高。DS加入NAC之后,DS+NAC组MDA含量下降明显,Mn SOD酶活性升高,早期细胞凋亡率较显著下降,TNF-α含量明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。在NS组中加入H_2O_2后,血管内皮细胞功能受损,氧化应激和炎症反应水平明显升高。结论糖尿病环境造成钛-骨界面血管内皮细胞氧化应激,过度产生ROS,对血管内皮细胞功能造成明显损伤,而抗氧化治疗可有效改善血管功能状态。     

血管内皮生长因子反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞的抑制作用

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸(ASODN)对骨肉瘤细胞的抑制作用。方法设计合成VEGF ASODN,按不同浓度转染骨肉瘤OS-732细胞,设正义(SODN)和空白对照组进行比较。观察细胞生长状态,Western blot检测VEGF蛋白表达,MTT法测定细胞生长抑制率(IR),流式细胞仪检测细胞凋亡。结果与SODN、对照组比较,ASODN组细胞中VEGF表达显著降低(P<0.05),IR(分别为10μmol/L组34.21%,20μmol/L组39.50%)显著增高(P< 0.05),上述效应呈浓度依赖性;镜下观察ASODN转染细胞代谢衰退,当转染浓度至20μmol/L时,其凋亡率AI值(18.25±0.40)%显著高于对照组(5.20±0.28)%和SODN组[(6.41±0.10)%, P<0.01]。结论ASODN能够特异性封闭骨肉瘤细胞VEGF基因表达;并可抑制细胞增殖,诱导其凋亡。     

糖尿病足动脉缺血患者骨骼肌血管内皮生长因子基因表达

目的　研究糖尿病患者缺血下肢肌肉组织内源性血管内皮生长因子 (VEGF)基因表达及其与糖尿病足发病机理的关系。　方法　将 2 4例患者 ,33条肢体分为 3组 :无下肢动脉缺血的糖尿病 (DM) 5例 ,10条肢体 ;无糖尿病的下肢动脉粥样硬化闭塞症 (ASO) 10例 ,13条肢体 ;糖尿病下肢动脉硬化闭塞症 (DLASO) 9例 ,10条肢体。对照组为正常志愿者 (NOR) 5例 ,10条肢体。通过肌肉穿刺获取小腿骨骼肌组织 ,采用RT PCR法测定肌肉组织中hVEGF16 5mRNA表达。　结果　DM组和NOR组小腿骨骼肌组织中hVEGF16 5mRNA无表达。DLASO组小腿骨骼肌组织有hVEGF16 5mRNA表达 (0 0 2 1± 0 0 13) μg ,但明显低于ASO组 (0 133± 0 0 2 4 ) μg ,(t=13 32P <0 0 1)。　 结论　DLASO组缺血下肢肌组织内源性VEGF基因表达水平明显低于ASO组 ,是糖尿病足部溃疡发生发展的重要内在原因。     

血管内皮生长因子对关节软骨细胞诱导型一氧化氮合酶的影响

目的 观察血管内皮生长因子(VEGF)对体外培养的关节软骨细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法 体外培养SD乳鼠关节软骨细胞,用白细胞介素(IL)-1β诱导的方法建立骨关节炎(OA)体外模型,实验分为4组,每组加入不同处理因素进行干预,A组:(正常对照组)不加任何处理因素;B组:10 μg/L VEGF;C组:10 μg/L IL-1β;D组:10 μg/L VEGF+ 10 μg/LIL-1β。采用实时荧光定量PCR( Real Time PCR)检测iNOS mRNA的表达,采用蛋白免疫印迹法( Western blot)检测iNOS蛋白的表达。结果 iNOS mRNA的表达:A组iNOS mRNA无表达,B组(9.64±1.64)、C组(17.27±2.01)及D组(28.93±6.63),3组的iNOS mRNA表达量显著升高,进一步组间比较,D组软骨细胞iNOS的mRNA表达水平明显高于B组(P＜0.01)及C组(P＜0.05),C组软骨细胞iNOS的mRNA表达水平高于B组(P＜0.05)。iNOS蛋白的表达:A组iNOS蛋白无表达,B组(0.44±0.12)、C组(0.74±0.07)及D组(1.38±0.38),3组的iNOS蛋白表达量显著升高,进一步组间比较,D组软骨细胞iNOS的蛋白表达水平明显高于B组(P＜0.01)及C组(P＜0.05),C组软骨细胞iNOS的mRNA表达水平高于B组(P＜0.01)。结论 在OA的发病过程中,VEGF可能通过上调软骨细胞iNOS的表达发挥重要作用。     

纳米血管内皮生长因子在治疗下肢缺血促进血管再生成中的作用

目的　利用家兔后肢缺血模型 ,观察纳米材料聚乳酸聚乙醇酸共聚物 (poly dl lactic co glycolicacid ,PLGA) ,包载血管内皮生长因子 (VEGF16 5 )基因 ,经局部肌肉注射后 ,外源基因在局部缺血组织中的转染及强度 ,以及缺血部位的血管新生状况。　方法　制备VEGF16 5 真核表达质粒 ,制备包载VEGF16 5 基因的纳米粒子 ,并检测其理化性质和体外释放曲线。建立家兔后肢缺血模型 2 4只 ,其中4只为对照组 ,只行股动脉及其分支结扎切断术 ;2只为空白纳米粒子组 ,局部缺血肌肉注射空白纳米粒子 ;10只应用裸质粒VEGF16 5 转染 ,8只采用纳米技术包载VEGF16 5 转染。直接缺血部位肌肉内多点注射 ,进行局部定位基因转染。术后 14d行血管造影 ,了解缺血部位侧枝形成情况。处死兔子 ,取股二头肌 ,内收大肌 ,做病理切片 ,免疫组化染色 ,观察VEGF16 5 的表达 ,测定毛细血管密度。应用逆转录 聚合酶链反应了解VEGF16 5 在骨骼肌中的表达 ,并对不同的转染技术进行半定量分析。　结果　转基因治疗 14d后 ,转染VEGF基因组血管造影可见明显新生血管和侧枝循环形成 ,免疫组化染色可见VEGF16 5 蛋白表达水平增高 ,缺血肌肉血管数增多 ,纳米VEGF16 5 治疗组与裸质粒VEGF16 5 治疗组的毛细血管密度明显高于对照组 ,有显著性差异 (P     

尿激酶及肝素钠对提高断指再植成活率及促进血管新生的效果比较

目的比较应用尿激酶及肝素钠对提高断指再植成活率及促进血管新生的效果。方法将行断指再植术的189例患者(312指)按照随机数字表法分为尿激酶组(99例,168指)和肝素钠组(90例,144指)。比较两组血管危象发生率、断指再植成活率、血液流变指标、凝血功能情况以及碱性成纤维生长因子(b FGF)、血管内皮生长因子(VEGF)水平的差异。结果血管危象发生率尿激酶组低于肝素钠组(26. 8%vs 38. 2%),断指再植成活率尿激酶组高于肝素钠组(89. 3%vs 80. 6%),差异均有统计学意义(P 0. 05)。给药5 d后,全血高切黏度、中切黏度及低切黏度尿激酶组均低于肝素钠组,凝血酶原时间、活化部分凝血酶时间及凝血时间尿激酶组均长于肝素钠组,差异均有统计学意义(P 0. 05)。给药3 d时,尿激酶组b FGF及VEGF水平达到最高值,且高于肝素钠组,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论相对肝素钠,断指再植术后给予尿激酶更能减少血管危象发生,改善血液流变学指标,延长血液凝固时间,增加b FGF及VEGF水平,从而提高断指再植成活率。