抑癌基因PDCD4在子宫内膜异位症中的作用及其机制

子宫内膜异位症(EMs)属于子宫内膜异位性疾病,是子宫内膜组织出现在子宫以外的其他组织或器官,发生与多种因素有关,如经血倒流、遗传、手术等,EMs临床表现为痛经、月经不调,甚至不孕,虽然EMs属于良性疾病,但具有恶性肿瘤特性,可发生恶变。程序性细胞死亡因子4(PDCD4)基因是一种新型的抑癌基因,其功能丧失与子宫内膜病变的发生、发展密切相关。自噬可能参与了EMs的病理过程,其能促进内膜细胞死亡,而PDCD4参与了自噬的调控,因而PDCD4可通过调控自噬影响EMs。深入研究PDCD4与EMs的关系,可为EMs的治疗提供新的途径。     

ING4基因及其抑癌作用的研究进展

ING4基因是Shiseki M.等[1]于2003年发现的抑癌基因ING家族的新成员,ING4基因位于染色体12p13.31,由8个外显子和7个内含子组成,跨越了13 000个碱基对,编码248个氨基酸[2-3]。ING4基因编码的蛋白定位于细胞核内,ING4蛋白有植物同源结构域(plant homeodomain,PHD)和核定位信号(nu     

p53抑癌基因与细胞凋亡

细胞凋亡和ｐ５３基因都是２０年来特别是近１０年来细胞生物学和分子生物学研究的热点。它们之间的相互关系以及它们与肿瘤发生和发展之间的关系亦是肿瘤研究工作者关心的主要问题之一。目前，对ｐ５３抑癌基因的研究仍在不断的深入，而对细胞凋亡的研究则已成为肿瘤细胞生物学的一个重要组成部分［１］。由于各种实验资料的积累，使人们对细胞凋亡与ｐ５３抑癌基因的相互关系有了一定的了解，现结合国外有关资料作一综述。１　细胞凋亡的主要形态学特点　　在细胞的正常发展过程中，细胞的分裂、生长、分化和最终死亡都是受到高度调节的。…     

ING4基因72其抑癌作用的研究进展

ING4基因是Shiseki M.等[1]于2003年发现的抑癌基因ING家族的新成员,ING4基因位于染色体12p13.31,由8个外显子和7个内含子组成,跨越了13 000个碱基对,编码248个氨基酸[2-3].     

抑癌基因PTEN与肿瘤

PTEN基因是迄今为止发现的第一个具有双特异性磷酸酶（DPs）活性的抑癌基因,该基因在细胞的生长、增殖、迁移和细胞凋亡中具有重要的生物学功能。PTEN基因的突变、缺失或转录水平降低常见于多种原发性恶性肿瘤,如脑胶质瘤、乳腺癌、肾癌、子宫内膜癌和恶性黑色素瘤,表明PTEN基因与肿瘤的形成与发展密切相关。     

抑癌基因与小儿肿瘤研究现状

抑癌基因与小儿肿瘤研究现状李福年综述袁继炎＊周蓉儿＊审校（附属医院小儿外科滨州市２５６６０３＊同济医科大学同济医院小儿外科）１抑癌基因的概念肿瘤的发生不仅与癌基因（Ｏｎｃｏｇｅｎｅ）有关，而且与抑癌基因（ＴｕｍｏｒＳｕｐｐｒｅｓｓｏｒＧｅｎｅ，ＴＳＧ...     

抑癌基因ING4转染对乳腺癌细胞MDA-MB-435S生物学行为的影响

目的 研究转染抑癌基因ING4对乳腺癌细胞系MDA-MB-435S生物学行为的影响.方法 携带ING4基因的真核表达质粒pcDNA3.0(+)-ING4利用脂质体瞬时转染乳腺癌MDA-MB-435S细胞,以转染pcDNA3.0(+)空载体和未转染的MDA-MB-435S作为阴性对照和空白对照.转染72 h后,RT-PCR检测转染前后ING4基因mRNA表达水平,MTT法检测转染各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞周期的变化,TUNEL实验检测各组细胞凋亡水平的变化.结果 转染ING4基因的MDA-MB-435S细胞ING4 mRNA表达水平明显上调;细胞增殖活力较空白组和阴性对照组下降(P＜0.05);细胞发生G2/M期阻滞(P＜0.05);细胞凋亡比例明显增加(P＜0.01).结论 ING4基因通过G2/M期阻滞和诱导细胞凋亡的方式抑制乳腺癌细胞生长.     

抑癌基因P53在肺癌中表达的意义

应用免疫组织化学技术－ＳＰ法，检测１０６例原发性肺癌组织和３７例癌旁组织中Ｐ５３蛋白的表达，肺癌组织Ｐ５３蛋白阳性表达率为５２．８％，其中鳞癌，腺癌和小细胞癌Ｐ５３阳性率分别为５２．８％，４７．１％和６３．２％，而癌旁组织未见Ｐ５３蛋白表达，Ｐ５３表达与组织学分型，病理分及临床ＰＴＮＭ分期无关。     

抑癌基因p27的分子调控机制研究进展

ｐ2 7不仅是一个有效的Ｇ1期阻断的诱导剂 ,还具有促进细胞凋亡、参与细胞分化调控 ,作为胞外信号与细胞周期联系的媒介 ,调节肿瘤耐药性 ,防御炎性损伤等功能。ｐ2 7基因的发现为研究肿瘤发生、发展、诊断及治疗提供了新的热点。ｐ2 7的调控机制是极其复杂的 ,本文就其分子调控机制的研究进展作一综述。1　ｐ2 7的自身代谢调节ｐ2 7在静止期及指数生长期细胞中的ｍＲＮＡ水平无变化 ,但 ｐ2 7蛋白水平随细胞周期改变而发生变化。静止期细胞ｐ2 7蛋白水平最高 ,在促有丝分裂原刺激后开始下降 ,ＤＮＡ合成达到最高点时其降低到最低水平 ,随着…     

一种合成人血小板因子4基因的简便有效方法(英文)

目的:用一种简便有效的方法合成hPF4基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行高效表达。方法:根据hPF4基因的序列,用touch-down PCR的方法合成hPF4基因,将合成的基因片断克隆到表达载体pGEX-4T-1中,构建了重组质粒pGEX-4T-1-hPF4,并将之转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达由谷胱甘肽转移酶和hPF4组成的融合蛋白。结果:用touch-down PCR的方法成功合成了hPF4基因。融合蛋白形成包含体,表达量约为全菌体蛋白的30%。结论:Touch-down PCR方法可作为合成其它目的基因的简便有效方法。BL21(DE3)/pGEX-4T-1表达系统能高效表达合成的hPF4基因,为下一步hPF4的纯化与生物学活性研究打下了基础。     

肿瘤基因靶向治疗载体的构建和鉴定

目的构建并鉴定人端粒酶反转录酶(human telomerase reverse transeriptase,hTERT)基因核心启动子调控的EGFP基因表达载体。方法从体外培养的HepG2细胞中提取全基因组DNA,以此为模板,克隆得到hTERT基因启动子核心区基因片段(hTERTp)。设计引物以质粒pEGFP-N1为模板利用PCR扩增得到EGFP基因片段,将两者通过搭桥PCR扩增得到hTERTp-EGFP片段,经SacⅠ、XbaⅠ双酶切定向插入到pGL3-Enhancer载体中,得到重组表达载体pGL3-hTERTp-EGFP。将该表达载体瞬时转染HELF细胞和HeLa细胞后观察EGFP蛋白表达情况。结果重组质粒经测序后确认插入序列正确无误,瞬时转染48h后在HeLa细胞中可以看到EGFP蛋白的大量表达,而在HELF细胞中未见表达。结论成功构建了可以通过hTERT核心启动子调控治疗基因在肿瘤细胞中特异表达的重组表达载体pGL3-hTERTp-EGFP。     

ING4基因在肿瘤细胞凋亡过程中的研究进展

ING4(inhibitor of growth family member4)基因是近年来新发现的一种肿瘤抑制基因。作为抑癌基因家族的重要成员,其广泛参与基因调节转录、细胞周期、凋亡、细胞衰老、接触抑制、DNA修复、抑制血管生成、促进细胞自噬等多个过程,对肿瘤的进程和预后产生重要影响。肿瘤细胞的凋亡在肿瘤研究中处于热点话题。ING4基因在肿瘤细胞凋亡过程中具有重要作用,它可以通过调节线粒体依赖性途径和死亡受体途径诱导细胞凋亡,还可以通过调节凋亡基因参与肿瘤细胞的凋亡。     

程序性细胞死亡因子10在胃癌组织中的表达及其临床病理学意义

目的  探讨在胃癌发生过程中凋亡相关基因程序性细胞死亡因子10 (programmed cell death factor 10, PDCD10)的表达及其临床病理学意义。  方法 采用SP免疫组织化学方法检测26例正常胃粘膜,22例慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生及66例胃癌组织标本中PDCD10基因的表达,分析其与临床病理学参数之间的关系 结果  正常胃粘膜、萎缩性胃炎伴肠上皮化生及胃癌组织中 PDCD10表达阳性率分别为11.5%、31.8%和63.6%,呈现上调趋势。相关分析表明,PDCD10的表达上调与肿瘤分化程度及转移密切相关(P＜0.05),而与性别、年龄及肿瘤生长部位无关(P＞0.05)。  结论 胃癌组织中PDCD10表达较正常胃粘膜、萎缩性胃炎伴肠上皮化生明显上调,其表达程度与胃癌的分化程度及侵袭转移相关。     

自噬——程序性细胞死亡的执行者与管理者

自噬是一种细胞内降解机制,除了参与胞内蛋白和细胞器的质与量控制外,也被认为是一种与凋亡、坏死并列的程序性细胞死亡机制。然而,已揭示的自噬与凋亡、坏死的关系暗示它可能是死亡程序的管理者,在应激时细胞死亡是否发生及死亡机制的选择等过程中扮演着重要角色。自噬分子机制的揭示有助于理解这两个看似矛盾的观点。自噬在程序性细胞死亡中作用的阐明对包括肿瘤在内疾病的治疗具有重要的现实意义。     

PDCD4对甲状腺癌SW579细胞调亡及成瘤能力的影响

目的 研究程序性细胞死亡因子4(PDCD4)诱导的对甲状腺癌SW579细胞凋亡效应及抑制成瘤能力的可能作用机制.方法 将对数生长期的细胞分为两组,观察组先予以PDCD4凋亡相关基因Bax的刺激14 h进行细胞的收集,然后加入tPA刺激细胞进行收集.对照组未加PDCD4凋亡相关基因Bax的刺激和tPA刺激.应用AnnexinV/PI和API等标记,Cyclins/DNA双标流式细胞仪检测甲状腺癌SW579细胞的凋亡及周期特异性,运用RT-PCR的方法检查Caspase-3、Caspase-9活化情况.结果 处于静止期的外周血对PDCD4凋亡诱导不敏感,而G1期PDCD4诱导甲状腺癌SW579细胞出现了明显的细胞凋亡.PDCD4诱导的细胞凋亡主要是在细胞周期的G1期发生.观察组的Caspase-3、Caspase-9 mRNA的表达值分别为(1.12±0.56)、(1.10±0.29),显著高于对照组的(0.82±0.31)、(0.72±0.26),差异有统计学意义(P<0.05).结论 PDCD4诱导的细胞凋亡与甲状腺癌SW579细胞的细胞周期相关,存在G1期细胞周期阻滞的周期特异性,且此过程中发生了Caspase活化,参与细胞凋亡及可能抑制细胞成瘤能力.     

p53靶位基因Wig-1——肿瘤与干细胞新的调控因子

Wig-1是抑瘤基因p53的转录调节靶位之一,编码与基因转录后水平调节相关的锌指结构蛋白。Wig-1几乎在所有类型细胞中均有表达,在脑组织中表达水平最高,在干细胞中表达水平较分化细胞高。Wig-1可结合长双链RNA(dsRNA),也可结合短的dsRNA,如microRNA。Wig-1通过结合p53基因3'非翻译区的富于AU元件稳定p53基因mRNA,正反馈调节p53基因。在此讨论Wig-1与p53功能的关系,在肿瘤、非肿瘤性疾病以及干细胞调控中的作用。     

肿瘤转移相关基因S100A4的研究进展

肿瘤的发生发展受多种基因的调控。S100A4基因是近几年发现的一种具有促肿瘤作用的基因,该基因编码一种钙离子结合调节蛋白,通过与钙离子结合在肿瘤发生发展中发挥重要作用。本文就S100A4基因的结构、促肿瘤的作用及机制作一综述。     

PDCD4和Ki67蛋白在不同期蕈样肉芽肿中的表达

目的探讨程序性细胞凋亡因子4（PDCD4）和Ki67蛋白在不同期蕈样肉芽肿（MF）皮损中的表达。方法选择27例MF病变皮肤及5例正常皮肤组织蜡块,分为:红斑/斑块期MF(n＝21)、肿瘤期MF（n＝6）和正常对照组（n＝5）,应用免疫组织化学Envison两步法分别检测3组标本表皮及真皮中PDCD4及Ki67的表达。结果①红斑/斑块期MF皮损表皮PDCD4＋细胞与正常对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）,真皮PDCD4＋细胞明显少于正常对照组（P<0.05）;肿瘤期MF皮损表皮及真皮PDCD4＋细胞均少于正常对照组和红斑/斑块期MF（P<0.05）;②两组MF表皮Ki67＋细胞的数量与正常对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）,红斑/斑块期MF及肿瘤期MF皮损真皮Ki67＋细胞均多于正常对照组（P<0.05）;肿瘤期MF皮损真皮Ki67＋细胞高于红斑/斑块期MF皮损（P<0.05）;③各期MF的表皮及真皮中PDCD4和Ki67的表达无相关性（P>0.05）。结论PDCD4的表达从MF的红斑/斑块期到肿瘤期逐渐减低,真皮中Ki67的表达逐渐增强,MF的发生与发展可能与PDCD4表达降低或缺失有关。     

人 PDCD4启动子真核报告质粒的构建和鉴定

目的  克隆人程序性死亡因子4(PDCD4)基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中,并在细胞内检测其活性,为进一步研究PDCD4表达调控奠定基础。方法  采用PCR技术,从人基因组DNA中扩增出PDCD4启动子,插入荧光素酶报告基因载体pGL4-Basic中,测序所扩增的DNA序列,并将构建的pGL4-PDCD4-P1荧光素酶报告质粒,与内参照pRL-TK用脂质体法瞬时共转染OVCAR3,SKOV3细胞系,通过双荧光素酶活性检测确定其启动子活性。结果  测序结果表明,扩增的PDCD4启动子序列正确,pGL4-PDCD4-P1转染OVCAR3细胞(高表达内源性PDCD4) 24h后,双荧光素酶活性检测显示其启动子相对活性约为pGL4-Basic空载体的67倍;而pGL4-PDCD4-P1转染低表达内源性PDCD4的SKOV3细胞后相对活性约为15倍。结论  成功构建了PDCD4启动子的克隆及人PDCD4启动子报告基因,为后续研究奠定了基础。