非小细胞肺癌p53凋亡刺激蛋白家族表达临床研究

目的:探讨非小细胞肺癌p53凋亡刺激蛋白家族(apoptosis-stimulating protein of p53,ASPP)1,ASPP2mRNA表达与P53蛋白表达状态的关系及ASPP1,ASPP2 mRNA的表达与非小细胞肺癌发生的相关性.方法:应用实时荧光定量RT-PCR方法检测37例非小细胞肺癌患者癌组织、癌旁组织、正常肺组织ASPP1,ASPP2 mRNA表达,免疫组织化学法检测肺癌组织P53蛋白表达状态.结果:肺癌组织、癌旁组织、正常肺组织中ASPP1、ASPP2 mRNA表达均逐渐升高,肺癌组织ASPP1,ASPP2 mRNA表达低于癌旁组织和正常肺组织(P<0.05),癌旁组织和正常肺组织ASPP1、ASPP2 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05).肺癌组织中ASPP1,ASPP2 mRNA表达在P53阴性组中明显低于P53阳性组(P<0.05).结论:肺癌组织ASPP1、ASPP2 mRNA表达降低与非小细胞肺癌的发生密切相关,ASPP mRNA的表达可在基因水平检测肿瘤的发生.     

p53凋亡刺激蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的 研究分析p53遗传背景不同的非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株中p53凋亡刺激蛋白(ASPP)家族的表达和调节,以及在NSCLC诊断和化疗监测中的临床意义.方法 用实时荧光定量逆转录(FQ-RT)-PCR检测NSCLC细胞株A549(野生型)和NCI-H157(突变型)及37例肺癌患者组织与外周血单个核细胞中ASPP1、ASPP2 mRNA表达,免疫印迹技术检测NSCLC细胞株ASPP1、ASPP2蛋白含量.同时,检测2株细胞对顺铂(CDDP)的敏感性以及化疗药物处理后ASPP1、ASPP2mRNA表达变化.此外,还比较NSCLC患者与37名健康对照者ASPP1、ASPP2 mRNA表达情况,并监测NSCLC患者化疗前后ASPP1、ASPP2 mRNA表达变化.结果 FQ-RT-PCR检测ASPP标准品曲线斜率均值分别为-3.249、-3.358,r＞0.98,标准曲线的扩增效率分别为1.156、1.028;CDDP处理后NCI-H157细胞株的IC_(50)值是3.70μg/ml,A549的IC_(50)是10.48μg/ml.NCI-H157细胞株中ASPP1,ASPP2 mRNA平均表达量比A549分别高2.66倍和6.98倍.肺癌患者组织和外周血单个核细胞中ASPP1 mRNA表达分别为(4.27 ±0.57)×10~3和(2.49±0.32)×10~3,ASPP2 mRNA表达分别为(2.34±0.75)×10~3和(7.00±1.17)×10~3,而健康对照组组织和外周血单个核细胞中ASPP1 mRNA 表达分别为(1.32±0.21)×10~4和(1.46±0.31)×10~4,ASPP2 mRNA表达分别为(1.38±0.19)×10~4和(1.28±0.18)×10~4.肺癌组中ASPP1和ASPP2 mRNA明显低于健康对照组(t值分别为2.58、3.94、3.62、3.76,P均＜0.05).NSCLC组中18例患者术后化疗前ASPP1和ASPP2 mRNA分别为(2.34±0.56)×10~3和(6.64±0.72)×10~3,进行2个周期化疗后分别为(3.66±0.64)×10~3和(9.42±0.44)×10~3,基因表达量均明显升高(t值分别为3.02、4.50,P均＜0.05).结论 NSCLC突变型细胞株ASPP1和ASPP2 mRNA的表达均高于野生型细胞株,ASPP1和ASPP2表达升高有可能增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.NSCLC患者化疗过程中,ASPP1和ASPP2 mRNA表达的变化可能与化疗药物作用有关,提高ASPP1、ASPP2的表达将有助于肿瘤的治疗.     

非小细胞肺癌组织中Survivin蛋白的表达及意义

目的探讨凋亡抑制基因Survivin在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表迭情况及其与预后的关系。方法100例NSCLC石蜡标本，应用免疫组织化学SP法及原位杂交方法检测Survivin在NSCLC组织中的表达情况。结果Survivin蛋白阳性表达率为72，0％，Survivin mRNA阳性表达率为76，0％。随TNM分期增高，Survivin蛋白及mRNA阳性表达率增高。淋巴结转移者较无转移者阳性表达率高。Survivin阳性表达与NSCLC组织学类型、分化程度无相关性。Survivin mRNA水平与其蛋白水平表达一致。结论NSCLC组织中Survivin mRNA与蛋白均高表达；Survivin蛋白水平和mRNA水平表达一致；Survivin阳性表达与TNM分期及淋巴结转移密切相关。     

异粘蛋白在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究

目的:探讨异粘蛋白(metadherin,MTDH)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达与患者病理分级、临床分期及预后之间的关系。方法:采用RT-PCR和免疫组化EnVinsion法检测有完整随访资料的113例NSCLC切除标本中MTDH表达情况,并结合随访资料进行分析。结果:有81例出现不同程度的MTDH蛋白的阳性表达,相应的正常组织中均未见表达。MTDH在不同病理分级的鳞癌或腺癌中表达差异明显(P<0.01),而在不同临床分期中的差异不显著(P>0.05)。随访资料分析显示,无论鳞癌抑或腺癌,高表达MTDH患者预后均较阴性表达者差。结论:MTDH在NSCLC中高表达,与病理分级存在相关性,MTDH的激活可能与患者预后较差密切相关。     

WWOX蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的通过WWOX蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）癌灶与癌旁正常组织中表达的比较,探讨WWOX蛋白在NSCLC发生、发展中的作用。方法用免疫组化elivision法检N51例NSCLC组织标本中WWOX蛋白的表达,与20例癌旁正常组织标本作对照,并分析WWOX蛋白与NSCLC患者年龄、性别、组织分化程度、病理类型、吸烟及淋巴结转移等关系。结果WWOX蛋白在NSCLC组织中表达的阳性率25．49％（13／51）,癌旁正常组织中表达的阳性率85．0％（17／20）,二者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。WWOX蛋白阳性率与NSCLC组织分化程度、病理类型、吸烟、有无淋巴结转移有相关关系,而与患者的年龄、性别及肿瘤TNM分期无相关性。结论WWOX蛋自在NSCLC组织中表达明显低于癌旁正常组织,WWOX蛋白的表达与NSCLC的多种重要临床病理预后因素相关,有望成为判断NSCLC临床发展的分子标记。     

Skp2蛋白在非小细胞肺癌中的表达与预后

目的：研究Skp2蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其指标的关系，以探讨其在预后中的意义。方法：纳入武汉大学人民医院1995—01／2001—1242例非小细胞肺癌(NSCLC)组织，10例肺良性病变及8例癌旁不典型增生石蜡组织切片。采用免疫组化技术检测Skp2蛋白在42例NSCLC、10例肺良性病变、8例癌旁不典型增生组织中的表达，并借助HPIAS-1000图像分析系统对结果进行分析。结果：肺癌组织中Skp2蛋白的阳性率为(24．83&;#177;13．64)％，明显高于肺良性病变组织(3．07&;#177;1．32)％(P&;lt;0．01)，也高于癌旁不典型增生组织(13．89&;#177;3．95)％(P&;lt;0．01)。Skp2蛋白表达水平与分化程度、TNM分期及淋巴结转移有密切关系．但与年龄、性别、肿瘤组织学分型无明显关系。结论：Skp2蛋白的过量表达在NSCLC的发生发展中起重要作用，Skp2蛋白可能为肺癌的一个独立预后因子，与肺癌患者的生活质量可能有一定的关系。     

p53促凋亡刺激蛋白2在非小细胞肺癌中表达的临床意义

目的 探讨p53促凋亡刺激蛋白2(ASPP2)在非小细胞肺癌(NSCLC)诊断和治疗中的临床意义.方法 建立检洲ASPP2 mRNA表达的实时荧光定量(RT-PCR)方法,并应用该方法检测非小细胞肺癌患者肿瘤组织和外周血单个核细胞ASPP2 mRNA表达,并监测化疗前后ASPP2 mRNA表达的变化.结果 建立的RT-PCR方法获得较好的扩增曲线和标准曲线,并且熔解曲线峰型单一,具有良好的稳定性与重复性;NSCLC患者肺癌组织和外周血中ASPP2 mRNA表达分别为(2.34±0.75)×103,(7.00±1.17)×103.肺癌组外周血中ASPP2 mRNA明显低于对照组(1.20±0.18)×104(P<0.05),术后化疗一个月后ASPP2 mRNA的表达明显高于化疗前(P<0.05).结论 ASPP2 mRNA的表达水平变化可以反映NSCLC疾病的状况,可在基因水平检测肿瘤的发生.ASPP2 mRNA的表达与化疗药物的敏感性相关,有望成为抗肿瘤治疗的新的分子靶点.     

叉头框蛋白J2在非小细胞肺癌组织 和癌旁组织中的表达及临床意义

目的 探讨叉头框蛋白J2(forkhead box J2,Foxj2)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者癌组织中的表达及其临床意义。方法 收集50例NSCLC患者手术切除肺癌组织标本,用免疫印迹法(western blot)和免疫组化法检测Foxj2在癌组织和癌旁组织中的表达。结果 western blot显示Foxj2在癌旁组织中的表达高于癌组织,两组间差异具有统计学意义(P<0.05); 免疫组化结果表明Foxj2在癌旁组织中的阳性细胞数明显高于癌组织,且无淋巴结转移组Foxj2的表达强度高于有淋巴结转移组,两组间差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 Foxj2参与NSCLC的发生发展过程,并且可能与NSCLC淋巴结转移有关。     

COX-2在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨COX-2在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义。方法应用免疫组化方法检测88例非小细胞肺癌、23例癌旁正常肺组织中COX-2蛋白表达水平。结果与癌旁及正常肺组织相比,非小细胞肺癌癌组织中COX-2蛋白表达明显上调(P<0.01),COX-2蛋白表达与患者年龄、性别、有无淋巴结转移等因素无明显相关性,但与临床分期、病理组织学类型相关,肺腺癌组织中表达明显多于其他类型非小细胞肺癌。结论 COX-2蛋白在NSCLC中、特别是肺腺癌中表达上调,可探索用于预测NSCLC患者预后的指标。     

RhoE、p53和caspase-3在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨RhoE、p53和caspase-3蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达与不同临床病理特征的关系及三者在肺癌发生过程中可能存在的相关性.方法 采用SP法检测60例NSCLC组织和23例正常肺组织中RhoE、p53和caspase-3蛋白的表达情况.结果 非小细胞肺癌组织中RhoE、p53和caspase-3蛋白阳性表达率分别为8.33%、86.67%、68.33%.RhoE在NSCLC中的表达与TNM分期(P<0.01)和淋巴结转移有关(P<0.05).RhoE与p53和caspase-3蛋白的表达呈负相关(P<0.01,P<0.05).结论 RhoE在癌组织中表达下调,说明RhoE在肺癌的发生、发展中发挥重要作用;RhoE蛋白表达与肺癌的TNM分期密切相关,有可能作为判断病情和评价预后的新指标;RhoE与p53、caspase-3的表达均呈负相关,有望为肺癌基因治疗提供新的靶点.     

端粒酶活性检测与非小细胞肺癌的相关性研究

目的探讨端粒酶活性在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,以了解其临床意义。方法采用端粒重复序列扩增法一酶联免疫(PCR-TRAP)检测70例肺癌手术患者癌组织中的端粒酶活性,并与70例肺部良性疾病患者对照组的检测结果进行比较。结果端粒酶活性在肺癌组中的阳性率明显高于对照组的阳性率,差异有显著性(P<0.01);Ⅲ期的阳性率明显高于Ⅰ期和Ⅱ期的阳性率,差异有显著性(P<0.05)。结论端粒酶活性检测对NSCLC的诊断具有鉴别意义,有一定的临床辅助价值。     

非小细胞肺癌患者血清中p53蛋白检测的临床意义

目的研究非小细胞肺癌（NsCLC）患者血清中p53蛋白检测的临床意义。方法收集非小细胞肺癌（NScLC）患者及体检健康者的血清,采用双抗体夹心生物素一亲和素酶联免疫吸附方法（ABC—ELISA）测定血清中p53蛋白水平。结果手术组手术前血清中p53蛋白水平与手术后相比,差异有统计学意义（P〈0．01）;化疗有效组患者血清中p53蛋白水平均低于化疗前和化疗无效组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论检测血清中p53蛋白水平,对NSCLC的诊断、治疗效果评价和预后估计有一定的临床意义。     

多种膜转运蛋白在早期非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:探讨P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药相关蛋白(LRP)和乳腺耐药蛋白(BCRP)在肺癌中的表达及其临床意义.方法:利用组织芯片技术和免疫组织化学二步法,对86例行术后辅助化疗的早期非小细胞肺癌标本进行上述4种膜转运蛋白检测.结果:在肺癌组织中P-gp、MRP、LRP、BCRP表达的阳性率分别为70.9%、73.3%、79.1%和39.5%,其表达与临床病理类型无关(P＞0.05);术后化疗效果不佳患者MRP、BCRP的表达水平高于术后化疗效果佳患者,但差异无显著性(P＞O.05);P-gp、LRP的表达水平与肺癌耐药及预后有关(P＜0.05).结论:P-gp、MRP、LRP、BCRP在未化疗过的肺癌组织中均有不同程度的表达,且与肺癌的某些生物学行为有关,联合检测P-gp、LRP有助于早期肺癌术后辅助化疗的选择及预后的判断.     

非小细胞肺癌远处转移与血小板参数变化的相关性分析

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)不同临床分期血小板参数变化对肺癌远处转移的预测价值。方法回顾性分析2013年4月至2014年1月就诊于该院诊治住院的肺癌患者,分别检测患者血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、大血小板比例(P-LCR)及血小板压积(PCT)等参数。结果检测结果显示肺癌组PLT、MPV、P-LCR和PCT均高于肺部良性肿瘤组及健康对照组,差异有统计学意义(P0.01),而PDW比较差异无统计学意义(P0.05)。随TNM分期的增加,Ⅲ期(血小板增高比例32.35%)和Ⅳ期(42.85%)明显高于Ⅰ期(19.35%)和Ⅱ期(22.85%)(P0.01)。Ⅳ期血小板五项参数与Ⅰ期、Ⅱ期比较,差异均有统计学意义(P0.05);但Ⅲ期与Ⅰ期、Ⅱ期PDW和P-LCR比较,差异无统计学意义(P0.05)。Ⅳ期与Ⅲ期PLT、MPV和PCT比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论肺癌患者常以某种特殊机制刺激骨髓巨核细胞产生血小板,分期愈晚血小板增高比例越明显,连续动态观察血小板参数有助于临床判断病情的发展及预后。     

凋亡抑制蛋白Livin在非小细胞肺癌中的表达及与p53、bcl-2的相关性

目的探讨凋亡抑制蛋白(IAP)家族的新成员Livin在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及p53、bcl-2之间的关系。方法采用免疫组织化学法(SP法)检测45例NSCLC患者的肺癌组织,35例癌旁组织和15例肺良性瘤样病变的肺组织中Livin及p53、bcl-2的表达,使用χ2检验比较各组间差别;使用Spearman相关性分析分析Livin与p53,bcl-2之间的相关性。结果 Livin在45例NSCLC组织中62.22%表达阳性,而35例癌旁正常肺组织和15例肺良性瘤样病变组织低表达(分别为2.86%、6.67%,P<0.01)。Livin蛋白的表达与肺癌患者的病理类型、肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期均无明显相关关系(分别为P=0.844,P=0.156,P=0.565,P=0.537)。p53、bcl-2蛋白表达均与Livin蛋白表达呈正相关(p53:r=0.375,P=0.011;bcl-2:r=0.565,P<0.001)。结论 Livin在NSCLC组织中特异性的高表达提示其可能参与了NSCLC的发生,使其将来可能成为NSCLC诊断及治疗的新靶点。Livin与p53及bcl-2在NSCLC的发生中有可能发挥了协同作用。     

乙酰肝素酶mRNA在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨乙酰肝素酶(HPA)mRNA在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与NSCLC临床病理特征的关系.方法 采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)方法检测HPA mRNA在48例NSCLC癌组织、10例癌旁正常肺组织以及10例肺良性疾病肺组织中的表达水平.结果 HPA mRNA在NSCLC组织平均表达水平(8.244±5.314)明显高于癌旁(1.043±0.478)及良性疾病肺组织(1.025±0.465)(P<0.01);在NSCLC组织中HPA的高表达与肿瘤病理类型(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.05)和临床分期(P<0.01)有关,而与患者的年龄、性别、吸烟情况以及分化程度无关.结论 HPA在人肺癌组织中的表达量较正常肺组织明显上调并与非小细胞肺癌的侵袭、浸润以及转移有关.     

非小细胞肺癌患者p53基因突变检测的临床意义

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者呼出气冷凝液（EBC）中p53基因突变检测的临床意义。方法采用巢式PCR结合DNA测序法,检测53例NSCLC患者EBC中p53基因第5～8外显子的突变情况,并以32例健康体检者EBC标本作为对照。结果肺癌组53例EBC标本中扩增到1）53基因26例,其中10例检测到p53基因突变,突变率为38．5％（10／26）;正常对照组32例EBC标本中扩增到p53基因15例,但未检测到p53基因突变。结论p53基因突变可能参与NSCLC的发生发展,检测EBC中p53基因的突变对肺癌的早期诊断有一定的价值。     

肺耐药蛋白在人食管癌组织中的表达及临床意义

目的探讨肺耐药蛋白（LRP）在食管癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学S—P法对58例术前未行化疗的食管癌组织切片中的LRP表达进行分析。结果58例食管癌患者中43例LRP蛋白表达阳性，阳性率为74．13％，LRP蛋白表达与癌组织浸润深度、淋巴结转移有关；与癌组织分化程度无关。结论食管癌LRP表达水平与癌组织浸润深度、淋巴结转移有密切关系，可能是食管癌原发性多药耐药的一种重要机制。     

CC10 在非小细胞肺癌中的表达及其与癌细胞凋亡的关系

目的：研究CC10蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达，并观察其与癌细胞凋亡的关系。方法：采用免疫组化技术检测CC10蛋白在43例NSCLC及20例癌旁正常肺组织石蜡标本中的表达，并借助HPIAS-1000图像系统对结果进行分析。应用TUNEL技术检测43例NSCLC中癌细胞的凋亡情况。结果：CC10蛋白在NSCLC中的表达率为46．5％（20／43），明显低于癌旁正常肺组织的85．0％（P〈0．01）；CC10蛋白在肺癌中的表达水平与分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关，但与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤组织学分型无关（P〉0．05）；CC10蛋白阳性的肺癌组织细胞凋亡指数（AI）为（5．585±1．7822）％，CC10蛋白阴性的肺癌组织为（2．856±1．3990）％，差异有显著性，癌细胞AI与NSCLC中CC10蛋白的表达有显著相关性（rs=-0．0211，P〈0．05）。结论：CC10蛋白的表达下调可能在NSCLC的发生发展中起重要作用，NSCLC细胞的凋亡与CC10蛋白的表达下调密切相关