褪黑激素对受损伤脑神经元的保护作用与bcl—2蛋白过度表达有关

研究：研究褪黑色激素对受损伤脑神经元的保护作用和对脑缺血后ｂｃｌ－２，ｂａｘ表达的影响。方法 用大鼠大脑中动脉梗死再灌注脑缺血模型，以脑梗死面积和存活细胞百分率作为脑损伤指标，用免疫组化的方法分析ｂｃｌ－２，ｂａｘ的表达。结果：缺血再灌注后２４ｈ褪黑激素呈剂量依赖性的减少脑梗死面积，减少缺血周边区细胞死亡，并显著增加该区ｂｃｌ－２的表达，而对ｂａｘ的表达则无明显影响。结论 褪黑激素具有明显减少缺血     

bcl—2基因在乳腺癌中的表达及其与雌激素的关系

应用免疫组织化学方法，研究１０５例乳腺癌手术标本中ｂｃｌ－２基因的表达情况。探讨其临床病理学意义。同时进行雌二醇测定，研究其与ｂｃｌ－２基因的关系。结果显示：乳腺癌中ｂｃｌ－２基因的表达率为４８．６％，ｂｃｌ－２表达与乳腺癌临床病理分期及肿瘤大小呈负相关，而与肿瘤细胞分化程度呈正相关。     

胃癌组织中细胞凋亡与bcl-2、bax基因蛋白表达的关系

为了探讨胃癌发生发展与细胞凋亡、ｂｃｌ ２ 和ｂａｘ 基因蛋白表达之间的关系,采用原位末端标记ＤＮＡ 断裂片段技术和免疫组化方法对６０ 例胃癌和２５ 例正常胃粘膜中的细胞凋亡指数、ｂｃｌ ２ 和ｂａｘ 进行检测。正常胃粘膜凋亡指数为１１－２ ±４－５１ ,高于胃癌的６－３５ ±３－８４（ Ｐ ＜ ０－０１） 。胃癌中ｂｃｌ ２强表达组凋亡指数为５－１９ ±２－０５ ,低于弱表达组的７－１２ ±３－８９（ Ｐ ＜ ０－０５） ;ｂａｘ 强表达组凋亡指数为７－１９ ±３－７２ ,高于弱表达组的５－２８ ±２－１３（ Ｐ ＜ ０－０５） ,胃癌分化好组凋亡指数为７－８９ ±３－１２ ,高于分化差组的５－２３ ±２－２１（ Ｐ ＜ ０－０５） 。ｂｃｌ ２ 表达越强,ｂａｘ 表达越弱,癌组织分化越差,凋亡指数就越少。提示ｂｃｌ ２ 和ｂａｘ 参与了胃癌组织中细胞凋亡的凋节,并在胃癌的发生发展中发挥着重要作用     

原发性中枢神经系统恶性淋巴瘤bcl—2基因产物的表达

运用免疫组化标记方法，观察１６例中枢神经系统Ｂ细胞淋巴瘤ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果表明：１２例滤泡中心性淋巴瘤ｂｃｌ－２蛋白阳性，１例淋巴瘤细胞淋巴瘤ｂｃｌ－２蛋白阳性，总阳性率８１．２５％。其中以裂细胞表达为主。阳性细胞呈弥漫性分布或围绕血管呈袖套状分布，阳性者中１０例ｂｃｌ－２蛋白表达为Ⅱ－Ⅲ级。     

Neuroprotective action of dextromethorphan in rat photochemically-induced focal cerebral ischemia

目的：研究右美沙芬在脑缺血中的作用和机制．方法：采用光化学脑缺血模型，在缺血前１５分钟，腹腔注射１２５，２５，５０ｍｇ·ｋｇ－１的右美沙芬，观察对损伤区体积、局部脑血流量和ｂｃｌ２／ｂａｘ表达的影响．结果：右美沙芬呈剂量依赖性地减轻损伤区体积，梗死体积分别下降了１７％，２６％和５０％；在缺血后２０分钟及３０分钟，右美沙芬（５０ｍｇ·ｋｇ－１）可明显改善缺血后的低灌流状态；该剂量的右美沙芬还可以上调缺血后ｂｃｌ２的表达．结论：右美沙芬在光化学脑缺血性损伤中有神经保护作用，其机制与改善脑血流、增加ｂｃｌ２的表达有关     

急性白血病细胞Bcl—2蛋白表达及其临床意义

用免疫组化方法检测了４０例急性白血病细胞中Ｂｃｌ－２蛋白表达，结果发现３３例（８２．５％）为阳性，７例（１７．５％）为弱阳性或阴性，联合化疗后阳性组ＣＲ率４２．４％（１４／３３），弱阳性组为１００％（７／７），提示Ｂｃｌ－２蛋白表达与白血病预后有关。     

Bcl—2基因蛋白在乳腺导管上皮非典型增生病变中的表达及意义

应用免疫组化技术乳腺管上皮轻中度非典型增生（轻中度组，Ⅱ组）２３例，重度非典型 生（重度组，ＩＩＩ组）３３例，浸润性导管癌（癌组，ＩＶ组）４０例和正常乳腺（正常组，Ｉ组）２０例进行ｂｃｌ－２基因蛋白产物的检测，结果：１，以上４组ｂｃ－２蛋白的阳性表达率分别为１００％，８１．８２％和７７．５０％，１００％，四组间比较差异有显著性（Ｐ〈０．０５），２Ｉ组阳性表达率显著地高于ＩＶ组（Ｐ〈０．０５），３？     

急性白血病细胞Bcl-2蛋白表达及其临床意义

用免疫组化方法检测了４０例急性白血病细胞中Ｂｃｌ－２蛋白表达，结果发现３３例（８２．５％）为阳性，７例（１７．５％）为弱阳性或阴性，联合化疗后阳性组ＣＲ率４２．４％（１４／３３），弱阳性组为１００％（７／７），提示Ｂｃｌ－２蛋白表达与白血病预后有关。     

Quercetin down-regulated bcl-2 gene expression in human leukemia HL-60 cells

目的：研究槲皮素对人白血病ＨＬ６０细胞ｂｃｌ２基因表达的影响．方法：采用免疫组织化学技术和ＲＮＡ点杂交观察基因表达．结果：Ｑｕｅ１５－６０μｍｏｌ·Ｌ－１处理ＨＬ６０细胞４８ｈ使ｂｃｌ２蛋白由对照组的９４％表达下调到４５％－８４％，并能明显下调ＨＬ６０细胞ｂｃｌ２ｍＲＮＡ表达．结论：Ｑｕｅ诱导ＨＬ６０细胞凋亡，其诱导凋亡的分子机制与下调ｂｃｌ２基因表达有关．     

bcl—2,P^53在乳腺癌中的表达及其意义

目的：探讨ｂｃｌ－２、Ｐ＾５３在乳腺癌中的表达及其意义。方法：应用免疫组化Ｓ－Ｐ法检测７０例乳腺癌及２０例乳腺良性病变中ｂｃｌ－２和Ｐ＾５３的表达,结果：ｂｃｌ－２与Ｐ＾５３表达之间差异有显著性,呈负相关（Ｐ〈０．０５）,ｂｃｌ－２和Ｐ＾５３表达与组织学分级有关（Ｐ〈０．０５）,ｂｃｌ－２表达随分级增加阳性率降低,Ｐ＾５３表达与腑窝淋巴转移有关（Ｐ〈０．０５）,ｂｃｌ－２表达与腑窝淋巴结转移无关（Ｐ〉０．０５）,结论：ｂｃｌ－２表达与淋巴结转移无关,其阳性表达可反映肿瘤属分化好或属早期阶段。Ｐ＾５３表达与淋巴结转移呈正相关。     

补气活血方对慢性支气管炎肺气虚证大鼠肺组织bcl-2、bax表达的影响

目的：观察补气活血方对慢性支气管炎肺气虚证大鼠肺组织 bcl-2及 bax表达的影响。方法 SD大鼠50只,随机选取10只作为空白对照组,其余40只采用改良烟熏法复制慢性支气管炎肺气虚证大鼠模型,造模成功后随机分为模型组、补气活血方高剂量组、补气活血方低剂量组、补肺汤组,每组10只。采用免疫组化法检测细胞凋亡相关基因蛋白 bcl-2、bax的表达情况。结果与空白对照组比较,模型组大鼠 bcl-2表达明显增加,bax表达降低（ P 〈0.01）;与模型组比较,补气活血方高剂量组、补气活血方低剂量组、补肺汤组 bcl-2蛋白表达降低,bax 蛋白表达增加（ P〈0.01）;补气活血方高剂量组 bcl-2的表达较低剂量组和补肺汤组明显减少,bax的表达较低剂量组和补肺汤组明显增多（P〈0.01）;补气活血方低剂量组 bcl-2表达低于补肺汤组,bax表达高于补肺汤组（P 〈0.05）。结论补气活血方能够通过抑制细胞凋亡相关基因蛋白 bcl-2的表达,上调蛋白 bax的表达,促进炎性细胞凋亡,可作为预防和治疗慢性支气管炎的有效方法。     

胚胎停止生长绒毛细胞凋亡研究

目的研究胚胎停止生长患者绒毛组织中的细胞凋亡及细胞凋亡调控基因bcl-2和bax在凋亡的作用。方法收集妊娠12周以内经B超证实为胚胎停止生长患者的绒毛组织30例;对照组30例为正常早孕要求人工流产者。所有研究对象均无生殖器畸形和感染性疾病,无内、外科合并症及妊娠并发症。应用TUNEL技术检测绒毛组织中的凋亡细胞,用免疫组织化学SP法观察细胞凋亡调控基因bcl-2和bax在绒毛组织中的表达。结果正常早孕和胚胎停止生长患者绒毛组织中均可见到凋亡细胞,但胚胎停止生长患者的绒毛组织中凋亡细胞显著增多。与正常早孕对照组比较有显著性差异(P<0.05);胚胎停止生长患者绒毛组织中可见bax过表达,与正常早孕对照组比较差异有显著性(P<0.05);而bcl-2在胚胎停止生长患者绒毛组织中表达低于正常对照组,两者比较差异有显著性(P<0.05)。结论胚胎停止生长患者绒毛组织中细胞凋亡指数显著增加且与bax表达呈正相关,而与bcl-2的表达呈负相关。     

解毒祛瘀滋阴药对MRL／lpr小鼠外周血淋巴细胞凋亡及线粒体跨膜电位的影响

目的探讨解毒祛瘀滋阴中药对MRL／lpr小鼠外周血淋巴细胞凋亡及其线粒体跨膜电位的影响。方法80只MRL／lpr小鼠随机分为：模型组：20只,灌胃0．9％氯化钠注射液;中药组：20只,灌胃解毒祛瘀滋肾中药煎剂;西药组：20只,灌胃强的松混悬液;中西药组：20只,中西药分别灌胃;正常组：昆明小鼠选用20只,0．9％氯化钠注射液灌胃,均每日1次,每次0．5ml。连续饲养用药12周后取血,以梯度离心法分离提纯外周血淋巴细胞（PBLC）,培养48h,流式细胞仪检测凋亡率及其线粒体跨膜电位水平。结果正常组、中药组、西药组和中西药组PBLC0和48h凋亡率高于模型组,差异有显著性（P〈0．05,P〈0．01）。0小时西药组、正常组与中西药组的凋亡率无明显差异（P〉0．05）,但中药组和模型组与中西药组比较,差异有显著性（P〈0．05）;48h西药组与中西药组的凋亡率有明显差异（P〈0．05）,中药组和模型组与中西药组比较,差异有显著性（P〈0．01）;正常组、中药组、西药组和中西药组PBLC线粒体跨膜电位水平水平均明显低于模型组,差异有显著性（P〈0．05和P〈0．01）;西药组与中西药组低于正常组,模型组高于正常组,且比较均差异有显著性（P〈0．05和P〈0．01）;中药组与正常组之间差异无显著性（P〉0．05）;西药组与中西药组之间差异无显著性（P〉0．05）。结论解毒祛瘀滋阴药能增加MRL／Ipr小鼠的PBLC凋亡率并下调其线粒体跨膜电位水平。     

细胞凋亡控基因p53、bcl-2、c-myc在大肠腺癌-癌序列中的表达

目的 研究细胞凋亡的调控基因p53、bcl-2、c-myc在大肠粘膜癌变中的作用。方法 利用免疫组织化学SP法对30例大肠腺瘤(伴轻、中、重度异型增生各10例)和30例大肠癌的活检组织标本分别进行p53、bcl-2、c-myc蛋白表达的检测,同时采用15例正常大肠粘膜作为对照。结果 (1)正常黏膜、腺瘤和腺癌的p53蛋白表达率为6.7％、40%和73.3%。三组间有显著的差异(P均<0.05)。(2)正常粘膜、腺瘤和腺癌的bcl-2蛋白表达率分别为20％、73.3％和63.3%。腺瘤和腺癌组均高于正常对照组(P均<0.01),腺癌与腺癌组间差异不显著(P>0.05)。(3)正常粘膜、腺癌和腺癌的c-myc蛋白表达率分别为26.7%、60%和76.7%。腺瘤和腺癌组均高于正常对照组(P<均0.05),腺瘤与腺癌组间差异不显著(P>0.05)。结论 (1)bcl-2基因可能通过对细胞凋亡的抑制而在大肠的早期发生作用。(2)p53基因突变在腺瘤化为腺癌的过程中起作用。(3)c-myc基因的表达与细胞增生和肿瘤发生可能关。     

p16蛋白在甲状腺肿瘤细胞中的表达及与p63的关系

目的研究甲状腺肿瘤组织中抑癌基因产物p16蛋白的表达,探讨p16、p63蛋白在甲状腺良恶性肿瘤中的相关性。方法 采用免疫组织化学Envision法检测60例甲状腺肿瘤标本细胞中p16蛋白的表达。结果 60例甲状腺肿瘤中p16蛋白阳性表达率为46.7％(28/60)。其中30例腺瘤中p16蛋白阳性表达率为60.0％(18/30),其中30例腺癌中为33.3％(10/30),腺瘤和腺癌组间比较差异有显著性(P<0.05);此外,甲状腺肿瘤中p63蛋白的表达与p16蛋白的表达在腺瘤和腺癌组均呈正相关(P<0.001)。结论 p16蛋白表达的缺失参与了甲状腺肿瘤的发生,抑癌基因p16、p63共同参与了甲状腺肿瘤的发生、发展,其发生过程可能存在p16、p63蛋白的协同作用,其异常表达对诊断甲状腺恶性肿瘤有一定的参考意义。     

氯沙坦对大鼠心肌缺血再灌注诱导心肌细胞凋亡及对bcl-2,bax 和p53基因表达的影响

目的:研究氯沙坦对大鼠在体心肌缺血再灌注后细胞凋亡影响以及与bcl-2,bax和p53基因表达变化之间的关系.方法:用原位末端标记、原位杂交、免疫组化分别检测细胞凋亡、基因表达产物的mRNA和蛋白质,经图象分析系统测量阳性染色区域的平均光密度值,从而对原位杂交和免疫组化检测物质进行量化分析.大鼠分成对照组、治疗组和假手术组.结果:细胞凋亡数各组间差异非常显著(P<0.001);原位杂交和免疫组化bcl-2对照组、治疗组的升高值与假手术组之间差异显著(P<0.05),治疗组和对照组之间无显著差异(P>0.1);免疫组化bax治疗组、假手术组的降低值与对照组间差异非常显著(P<0.001),治疗组和假手术组之间无差异(P>0.9);bcl-2/bax比值由高到低分别为治疗组、对照组和假手术组.原位杂交p53各组间差异非常显著(P<0.001),假手术组>治疗组>对照组;免疫组化p53假手术组显著高于对照组和治疗组(P＜0.001 ),治疗组和对照组间差异无显著性(P>0.1).结论:氯沙坦可抑制缺血再灌注后心肌细胞凋亡,机制可能是通过抑制bax基因表达使bcl-2/bax比值升高,并抑制p53基因表达的降低.     

HIF-1α反义寡核苷酸对肝癌细胞增殖凋亡的影响及机制

目的：本研究通过应用 HIF-1α反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotide,ASODN）处理 SMMC-7721肝癌细胞,观察其对 SMMC-7721肝癌细胞增殖的作用和对细胞周期及凋亡率的影响及其机制。方法肝癌细胞系SMMC-7721分对照组和试验组。对照组细胞常规培养,试验组细胞施加 HIF-1α的 ASODN 干预,设浓度梯度和时间梯度。检测不同药物浓度、不同时间对 SMMC-7721细胞的增殖的作用及对细胞周期和凋亡率的影响。对 bcl-2、bax、surviving mRNA 表达产物相对定量,并对 SMMC-7721细胞胞浆 bcl-2、bax、survivin 蛋白进行相对定量分析。结果与对照组相比,各处理组 OD 值均有显著下降,细胞数量降低,且各实验组相比呈明显的时间-剂量依赖效应,差异有统计学意义（ P <0.05）。不同浓度 HIF-1α的 ASODN 处理细胞后,均可使各处理组 G0/ G1期细胞增多,S 期细胞减少,且呈时间-剂量依赖效应,差异有统计学意义（ P <0.05）。不同浓度 HIF-1α的 ASODN 处理细胞不同时间后,与对照组相比,各实验组 bcl-2 mRNA 和 survivin mRNA 表达均有显著下降,差异有统计学意义（ P <0.05）。而 bax 的 mRNA无明显变化趋势（ P >0.05）。不同浓度 HIF-1α的 ASODN 处理细胞不同时间后,与对照组相比,各实验组 bcl-2和survivin 的蛋白表达显著下降,bax 的蛋白表达显著增加,差异有统计学意义（ P <0.05）。结论 HIF-1α的 ASODN可以将 SMMC-7721肝癌细胞株阻滞于 G0/ G1期,影响细胞周期进程,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。HIF-1α促进增殖抑制凋亡的可能机制是上调肝癌细胞 Survivin 和 bcl-2的表达,下调 bax 的表达。针对 HIF-1α抑制剂的应用为肝癌的治疗提供了新思路。     

丹参对体外培养大鼠成纤维样滑膜细胞bcl-2和bax表达的影响

目的：探讨丹参对体外培养大鼠成纤维样滑膜细胞增殖及 bax、bcl-2表达的影响。方法取浓度为1.5＆#215;10-5个/ml的 RSC-364成纤维样滑膜细胞悬液100μl加入细胞培养板,培养24 h,加入含不同浓度丹参的培养液,采用 MTT法分析丹参对成纤维样滑膜细胞增殖抑制作用及其时效关系;免疫组化法检测 bcl-2、bax表达情况。结果丹参可明显抑制大鼠成纤维样滑膜细胞增殖,并显示出一定的量效和时效关系。丹参可显著上调大鼠成纤维样滑膜细胞 bax表达,下调 bcl-2表达,与空白对照组比较差异有统计学意义（ P 〈0.05）。结论丹参对体外培养大鼠成纤维样滑膜细胞的增殖具有抑制效应,其作用机制可能与调控 bax、bcl-2表达有关。