凝血因子Ⅷ抑制物的诊治进展

凝血因子Ⅷ抑制物系体内产生的具有灭活或中和FVⅢ促凝活性的抗体,引起FⅧ水平和活性降低,造成临床严重出血。包括同种免疫抗体（allo-antibodies）;血友病A（HA）患者输注FⅧ制品后产生的抗FⅧ抗体;自身免疫抗体（Auto-antibodies）;非血友病患者自发产生的抗FⅧ抗体。     

抗人凝血因子Ⅷ-C1C2区单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备抗人凝血因子Ⅷ（FⅧ）C1C2区单克隆抗体（mAb）,并对其进行生化和生物学鉴定。方法采用基因重组技术表达FⅧ-C1C2区蛋白（rFⅧ-C1C2）,以rFⅧ-C1C2免疫8周龄Balb/C小鼠,小鼠脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后,ELISA法筛选阳性克隆,制备稳定分泌抗rFⅧ-C1C2mAb的细胞株,并对mAb进行生化和免疫学鉴定。结果获得一株抗rFⅧ-C1C2区单克隆抗体阳性克隆2B11,命名为SZ-133。琼脂糖双扩散鉴定为IgG1类,Westernblot法证实SZ-133可与rFⅧ-C1C2区蛋白及重组的全长FⅧ特异性结合,但不影响FⅧ的凝血活性。结论表达了rFⅧ-C1C2,并制备出了抗人凝血因子Ⅷ的单克隆抗体SZ-133,它能特异识别血浆及重组的FⅧ,有可能用于基础和临床应用研究。     

人凝血因子Ⅷ浓缩制剂治疗血友病甲的临床观察

应用上海生物制品研究所1980年研制成的人凝血因子Ⅷ浓制剂,对10例重,中型血友病甲患者进行治疗。初步临床观察说明(1)该制剂的安全性佳,无过敏、热源反应及其它付作用;(2)7例关节、肌肉型出血在一次输入适当剂量后即可使Ⅷ:C上升至止血水平,临床均呈显效,一例颅内出血,一例严重消化道出血患者经过输因子Ⅷ浓制剂抢救,病情转危为安,一例左颌骨囊肿摘除术者在因子Ⅷ浓制剂保护的情况下安全渡过手术。(3)该制剂的半寿期介于4～12小时,临床一般可间隔8～12小时给药,所需使用的剂量可按每单位/公斤体重提高Ⅷ:C2.63%计算。该制剂尤其适用于需在短期内迅速提高Ⅷ:C水平,如颅内出血、大手术的抢救。推广应用人凝血因子Ⅷ浓制剂对提高血友病甲的疗效将具有重要意义。     

人凝血因子Ⅷ基因cDNA的部分分离的初步研究

我们用血友病FⅧ基因探针P114.12从人肝细胞cDNA文库中分离到3个有杂交信号的克隆。进一步鉴定,其中1个(FⅧhc_1)的克隆片段比所用的探针P114.12(0.65kb)增大0.45kb。通过FⅧhc_1部分顺序分析及微机搜索,FⅧhc_1有210bp与FⅧcDNA(5559-5769)完全同源,提示FⅧhc_1从FⅧ基因cDNA17号外显子向下游延伸了800～900bp。     

血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性与下肢深静脉血栓形成的关系

目的观察血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性与下肢深静脉血栓形成(DⅤT)的关系。方法取2012年4月至2016年8月医院收治下肢DⅤT患者300例,设为观察组,取同期入院健康体检者300例,设为对照组。采用发射底物法检测2组血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性水平,对危险因素进行Logistic回归分析,分析血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性与下肢DⅤT的关系。结果观察组血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ水平,高于对照组(P0.05);观察组蛋白C活性水平,低于对照组(P0.05);下肢DYT发生率与血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ高表达及蛋白C活性水平低表达关系密切(P0.05)。结论下肢DⅤT中血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ存在高表达,蛋白C活性低表达,是下肢深静脉血栓的独立危险因素。     

肾病综合征患儿血浆纤维蛋白原凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅻ的改变

为探讨肾病综合征高凝状态的发生机理,检测了40例肾病综合征患儿血浆纤维蛋白原,凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅻ。发现纤维蛋白原的含量和凝血因子Ⅷ的活性均显著增高。Ⅻ因子活性明显降低,而Ⅺ因子活性无明显改变,提示肾病综合征患儿凝血因子的代谢是复杂的,凝血因子代谢紊乱是肾病综合征患儿血浆高凝状态发生的一个重要原因。     

凝血因子Ⅷ和凝血因子Ⅸ活性检测影响因素的分析

目的 验证离心力对凝血因子FⅧ（FⅧ）活性和凝血因子FⅨ（FⅨ）活性检测的影响。方法 用全自动血凝分析仪测定室温700 g、1500 g、396 g和4℃1000 g、1500 g离心15 min以及4℃2700 g离心10 min,不同离心力条件下即刻和冷冻后48 h FⅧ和FⅨ的活性并进行数据统计分析。结果 6种不同离心方法得到的血浆,不管是立即检测还是冻存后检测,FⅧ和FⅨ的活性水平在不同离心力条件下没有显著性差异（P>0.05）,同一离心力条件下冷冻后FⅧ活性水平跟即刻检测结果有统计学差异（P<0.05）,同一离心条件下FⅨ活性在即刻和冷冻后检测结果无统计学差异（P>0.05）。结论 从离心机类型、离心力转速到离心时间和离心温度多方面分析,在一定离心力范围内不同离心力对FⅧ活性和FⅨ活性检测的影响不大,冻融会影响凝血因子Ⅷ活性水平检测,凝血因子Ⅸ活性检测不受冻融影响。     

脑血栓凝血因子FⅧ增高与巨细胞病毒感染的关系

目的:研究病毒感染对凝血因子Ⅷ(FⅧ)增高的脑血栓形成的影响.方法:用凝固法对83例脑血栓患者的血浆FⅧ活性(FⅧ:C)进行测定,同时检测其C-反应蛋白(CRP)浓度.ELISA法测定巨细胞病毒等的抗体IgM.结果:83例脑血栓患者标本中63例FⅧ:C水平升高,其中CRP水平正常者44例,FⅧ:C水平与CRP水平无明显相关;44例FⅧ:C增高而CRP水平正常的患者组中,巨细胞病毒抗体阳性率明显高于正常对照组.结论:FⅧ水平增高与巨细胞病毒感染关系密切;巨细胞病毒感染可能通过促进FⅧ合成和分泌增加,进而影响脑血栓形成.     

肾病综合征患儿血浆纤维蛋白原凝血因子Ⅷ、Ⅺ、Ⅻ的改变

为探讨肾病综合征高凝状态的发生机理,检测了40例肾病综合征患儿血浆纤维蛋白原,凝血因子Ⅷ、Ⅺ、Ⅻ.发现纤维蛋白原的含量和凝血因子Ⅷ的活性均显著增高,Ⅻ因子活性明显降低,而Ⅺ因子活性无明显改变.提示肾病综合征患儿凝血因子的代谢是复杂的,凝血因子代谢紊乱是肾病综合征患儿血浆高凝状态发生的一个重要原因.     

基因重组人凝血因子Ⅷ在中国人血友病A患者中使用的研究

目的 探讨第二代rFⅧ（Kogenate FS）在中国人血友病A患者中使用的安全性和有效性。方法 采用第二代rFⅧ（Kogenate FS）治疗14例血友病A志愿者患者，用药前进行FⅧ抗体、FⅧ：C活性、血清病毒学（HBV、HCV和HIV）、血常规、尿常规、大便常规以及肝肾功能检查，于第一次用药后10min和60min进行FⅧ：C测定，治疗结束后进行FⅧ抗体和肝肾功能检测。结果 ①采用KogenateFS治疗的14例血友病A志愿者患者中，KogenateFS用量12．99～25．00u／kg（平均18．74u／kg），总用量3000～11000u（平均6570u），自治疗至出血停止或出血症状改善所需的时间为1．5～5．5d（平均3．29d），除1例FⅧ抗体滴度较高者外，其余13例患者第一次用药后10min和60minFⅧ：C活性均明显升高，用药前后FⅧ：C活性比较差异具有显著性（P〈0．01）。显效13例（占92．86％），好转1例（占7．14％），总有效率为100％。②14例血友病A志愿者患者中，用药前FⅧ抗体阳性2例，其中1例FⅧ抗体〉5Bu，第一次用药后10min和60minFⅧ：C活性无明显升高，治疗结束后FⅧ抗体仍然〉5Bu，但出血症状改善；另1例FⅧ抗体为4Bu，第一次用药后10min和60minFⅧ：C活性显著升高，治疗结束后FⅧ抗体转为阴性。③14例血友病A志愿者患者在应用KogenateFS治疗期间和治疗结束后均表现出良好的耐受性，无不良事件或药物不良反应发生。结论 第二代rFⅧ（KogenateFS）治疗中国人血友病A患者耐受性好，安全有效。     

白血病患者治疗前凝血因子Ⅷ、抗凝血酶Ⅲ的测定与分析

本文测定了急、慢性白血病患者98例治疗前的凝血情况,结果表明血浆凝血因子VIII相关抗原(VIIIR:Ag)均升高;血浆抗凝血酶III(AT—III)浓度升高,活性均减低;β-血小板球蛋白(β-TG)均高于正常。文中讨论了这些变化的可能机理和临床意义。     

新鲜血浆溶血程度对凝血因子Ⅷ活性的影响

目的探讨溶血程度对Ⅷ因子活性的影响,确定新浆制备过程能否混入少量红细胞。方法用2U新鲜血浆稀释1％浓度血红蛋白标准品,制备血红蛋白终浓度为0．1％、0．2％、0．3％、0．4％的新浆各50ml,静置20分钟,用血凝仪检测稀释前后新浆内Ⅷ因子活性。结果0—0．4％Hb区间Ⅷ因子活性无显著性差异。结论轻微溶血不会影响Ⅷ因子活性,不需去除新浆内少量红细胞。但由于红细胞混入量难以确定,为保证新浆质量,建议新浆都要二次离心去除红细胞。     

新鲜冰冻血浆的制备时间对凝血因子Ⅴ和Ⅷ含量的影响

目的 探讨在标准时间范围内(即6 h)新鲜冰冻血浆(FFP)制备时间因素对凝血因子Ⅴ和Ⅷ含量的影响.方法 采用凝固法对按要求收集的300份FFP进行凝血因子Ⅴ和Ⅷ定量.结果 凝血因子Ⅴ在不同制备时间无差别,凝血因子Ⅷ在不同制备条件下有差别,但均符合产品的国标要求.结论 6 h制备FFP与2 h及4h制备有差别.     

2型糖尿病患者血浆凝血因子Ⅴ、凝血因子Ⅷ和纤维蛋白原、抗凝血酶Ⅲ联合检测的临床应用价值

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血浆凝血因子Ⅴ、凝血因子Ⅷ、纤维蛋白原和抗凝血酶Ⅲ在临床上的应用价值。方法随机选取在本院住院治疗的T2DM患者60例,其中有并发症患者30例(并发症组),单纯糖尿病患者30例(单纯糖尿病组),并以同期健康体检者30例作为对照组。测定各组患者血浆凝血因子Ⅴ、凝血因子Ⅷ、抗凝血酶Ⅲ活性和纤维蛋白原。结果T2DM患者血浆凝血因子Ⅴ、凝血因子Ⅷ活性和纤维蛋白原与健康对照组相比均明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。其中并发症组血浆凝血因子Ⅴ、凝血因子Ⅷ活性和纤维蛋白原明显高于单纯糖尿病组,血浆抗凝血酶Ⅲ活性明显低于对照组(P<0.05);而单纯糖尿病组抗凝血酶Ⅲ活性与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论监测血浆凝血因子Ⅴ、凝血因子Ⅷ、纤维蛋白原水平和抗凝血酶Ⅲ的活性,有利于对T2DM患者凝血状态进行评估,从而为早期干预T2DM患者血管并发症提供参考依据。     

Determination of Ⅷ:C and Ⅷ:Ag in Hemophilia A Carrier

ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆⅧ：ＣａｎｄⅧ：ＡｇｉｎＨｅｍｏｐｈｉｌｉａＡＣａｒｒｉｅｒＣｈｅｎＨｕａｉｈｕａ（陈怀华）ＣｈｅｎＪｉｑｉｎｇ（陈吉庆）（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ．ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａ...     

凝血因子Ⅷ的多态性可影响HRT相关的心梗危险性

美英研究人员在近期出版的《血液》杂志上刊登一篇报道指出,凝血因子Ⅷ的某种基因变异型有可能改变绝经后服用雌激素进行激素替代治疗(HRT)的妇女发生非致死性心肌梗死(MI)的危险性。来自于美国西雅图市华盛顿大学的Alexander P.Reiner博士及其同事推测,凝血因子Ⅷ的     

柱前衍生法测定人凝血因子Ⅷ中甘氨酸含量

目的建立人凝血因子Ⅷ中甘氨酸含量测定的一种新方法。方法采用反相高效液相色谱法,在色谱柱内层析,以紫外检测器在254 nm波长处检测,用内标法计算含量。结果在本实验条件下,甘氨酸与内标物质峰的分离度符合要求;甘氨酸在0.135 2-0.811 2 mg/ml范围内线性关系良好;精密度实验中甘氨酸RSD值为0.23%;平均回收率99.73%,RSD值为1.03%;溶液稳定性检测中,供试品溶液放置0,2,4,8 h后分别进样,RSD值为1.2%。结论此方法检测结果准确,可用于人凝血因子Ⅷ甘氨酸含量的测定。     

重组人凝血因子Ⅷ在中国血友病A患者的有效性及抑制物产生的观察

目的探讨重组人凝血因子Ⅷ（Kogenate FS，拜科奇）在中国血友病A患者的有效性、安全性及抑制物产生率。方法采用拜科奇治疗30例血友病A患者的出血事件，观察其临床止血效果及用药后4周FⅧ抑制物的产生情况。其中11例患者在用药前后进行血、尿便常规、肝肾功、血清病毒学（HBV、HCV、HIV）、FⅧ抑制物、FⅧ活性检测，并于第1次用药后10min、60min检测FⅧ活性；同时随访2年检测FⅧ抑制物。结果11例患者在用药后10min、60min较用药前FⅧ活性明显提高，达到或接近预期升高值；所有30例患者用药后出血症状停止，显效率达100％。每次出血事件约86．7％的患者在≤3次输注即可较好的控制症状，提示具有较好的有效性。30例患者共输注重组FⅧ70次，总计51294u，在用药期间无任何不良反应出现。本研究发现1例患者在用药后4周产生FⅧ抑制物，提示短期抑制物产生率为3．3％（1／30），11例2年随访未见抑制物产生增加趋势。结论重组人凝血因子Ⅷ（Kogenate FS，拜科奇）在中国血友病A患者使用中具有较好的有效性、安全性及较低的抑制物产生率。     

小儿原发性肾病综合征患儿血浆蛋白Z、凝血因子Ⅷ活性的检验研究

目的分析原发性肾病综合征患儿的检验指标,探讨血浆蛋白Z、凝血因子Ⅷ活性水平的检验意义。方法将本院在2020年10月至2021年10月之间收治的原发性肾病综合征患儿中选取40例作为研究组。保持均衡性抽取同一时间段内的40名健康儿童(对照组),均为健康体检者。对所有儿童检测,纳入血浆蛋白Z水平、凝血因子Ⅷ活性等指标,对不同组别和不同发病阶段患儿体内该水平的差异。结果研究组的血浆蛋白Z与对照组对比可见差异,SPSS分析可见低于对照组,血浆蛋白Z在急性期的含量明显低于恢复期(P<0.05)。研究组凝血因子Ⅷ含量统计学分析差异明显,SPSS分析可见其水平高于对照组,急性期的含量远高于恢复期(P<0.05),均具有统计学意义。结论原发性肾病综合征儿童检验指标可能发生变化,其中以血浆蛋白Z含量变化明显,同时凝血因子Ⅷ活性发生改变。检测上述指标能够分析疾病状态,可作为疾病诊疗和预后分析的依据,具有重要临床研究价值。     

冷沉淀质量抽检：凝血因子Ⅷ活性测定的影响因素

质量抽检是确保冷沉淀质量合格,临床使用有效的重要保障,只有保证检测过程合理、检测结果可靠,才是有效的质量抽检。我们根据日常工作经验和复习文献,对冷沉淀凝血因子Ⅷ(FⅧ)活性测定全过程中需要注意的问题进行总结,希望对开展冷沉淀质量抽检工作的血站工作人员有所帮助。