紫草素对人肝癌细胞化疗增敏作用及机制研究

目的研究紫草素对人肝癌HepG_2细胞顺铂增敏作用并初探其可能的作用机制。方法取对数生长期人肝癌HepG_2细胞并分别给予紫草素组(紫草素0.5μg/ml)、顺铂组(顺铂40μg/ml)和联合干预组(紫草素0.5μg/ml+顺铂40μg/ml)干预治疗48 h,同步设空白对照组,每组设10个复孔(n=10)。检测细胞增值抑制率、细胞周期和细胞凋亡状况并计算细胞凋亡率及Bax mRNA、bcl-2 mRNA、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达情况。结果与顺铂组比较,联合干预组人肝癌HepG_2细胞增殖抑制率显著升高(P0.05),细胞周期G_0/G_1期显著延长(P0.05)、G_2/M期显著缩短(P0.01),凋亡细胞数量明显增多、细胞凋亡率显著升高(P0.01),Bax mRNA表达上调、bcl-2 mRNA表达下调(P0.05),且Bax/bcl-2比值显著升高(P0.01),Caspase-3蛋白表达上调(P0.05)。与空白对照组比较,紫草素组人肝癌HepG_2细胞周期G_0/G_1期延长、G_2/M期缩短,bcl-2 mRNA表达下调(P0.05)、Bax/bcl-2比值升高(P0.05),Caspase-3蛋白表达上调(P0.01)。结论紫草素具有提高人肝癌HepG_2细胞顺铂敏感性的作用,其机制可能与紫草素阻滞细胞周期及调节凋亡相关基因和蛋白表达有关。     

紫草素对人大肠癌HT29细胞化疗增敏作用研究

目的:研究紫草素对人大肠癌HT29细胞奥沙利铂化疗增敏作用及其机制。方法:体外培养并取对数生长期人大肠癌HT29细胞,设紫草素(0.5 mg·L^-1)、奥沙利铂(25 mg·L^-1)、联合[紫草素(0.5 mg·L^-1)+奥沙利铂(25 mg·L^-1)]组,并设空白对照组。给药干预48 h后,CCK-8法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、激活型Caspase-3的表达。结果:较空白对照组,紫草素组人大肠癌HT29细胞处于G0/G1期比例升高且G2/M期比例降低(P<0.05;P<0.01),Bax蛋白表达量升高且Bcl-2表达量降低(P<0.05;P<0.01)、Bax/Bcl-2值升高(P<0.01),激活型Caspase-3蛋白表达量升高(P<0.01)。较奥沙利铂组,联合组人大肠癌HT29细胞增殖率明显降低(P<0.05);细胞凋亡率显著升高(P<0.01);处于G0/G1期细胞比例升高而G2/M期比例降低(P<0.05;P<0.01);Bax、激活型Caspase-3蛋白表达量升高且Bcl-2表达量降低(P<0.05;P<0.01),Bax/Bcl-2值显著升高(P<0.01)。结论:紫草素具有提高人大肠癌HT29细胞奥沙利铂化疗敏感性的作用,机制可能与紫草素阻滞细胞周期进程、调节凋亡相关蛋白表达而促进HT29细胞凋亡有关。     

大蒜素抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞生长的实验研究

目的 研究大蒜素抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞生长的作用,并探讨其可能的作用机制。方法 以不同浓度大蒜素（12.5、25、50μg/ml）和顺铂（40μg/ml）分别干预对数生长期Ishikawa细胞,采用MTT法检测Ishikawa细胞增殖抑制;通过流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡状况,采用Western blot法检测Ishikawa细胞中caspase-3蛋白表达,RT-PCR法检测Ishikawa细胞中Bax mRNA、bcl-2 mRNA表达并计算Bax/bcl-2表达比值。结果 大蒜素能够显著提高子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖抑制率、阻滞Ishikawa细胞周期于G₂/M期,提高细胞凋亡率、上调caspase-3蛋白和Bax mRNA表达、下调bcl-2 mRNA表达、提高Bax/bcl-2表达比值,且上述作用均具有一定的剂量依赖性。结论 大蒜素对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖具有抑制作用以及促其凋亡的作用,从而表现出其抑制Ishikawa细胞生长的作用;作用机制可能与大蒜素能够改变Ishikawa细胞周期以及调节凋亡相关基因、蛋白表达有关。     

大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡及细胞周期的影响

[目的]研究大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡以及细胞周期的影响并初探其机制。[方法]取对数生长期Tca8113细胞设空白对照组、大蒜素（50、25、12.5 μg/mL）组和顺铂（40 μg/mL）组,给药48 h后流式细胞术分析细胞周期的改变并检测细胞凋亡状况,逆转录聚合酶链式反应法（RT-PCR）检测B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）mRNA、Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测细胞周期相关调控蛋白周期蛋白（cyclin B1、cyclin D1）和周期蛋白依赖性激酶（CDK1、CDK2）表达。[结果]与空白对照组比较,大蒜素（50、25 μg/mL）组细胞周期G₂/M期比例显著提高（P<0.05）,细胞凋亡率显著升高（P<0.01）,Bcl-2 mRNA表达显著下调且Bax mRNA表达显著上调（P<0.05或P<0.01）,Bax/Bcl-2值显著提高（P<0.01）,cyclin B1蛋白和CDK1蛋白显著上调、cyclin D1蛋白和CDK2蛋白显著下调（P<0.05或P<0.01）。[结论]大蒜素具有促进人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡、阻滞细胞有丝分裂的作用,其机制可能与大蒜素影响凋亡相关调控基因及细胞周期相关调控蛋白表达有关。     

黄芩苷联合顺铂体外诱导人肝癌细胞HepG2.0凋亡的实验研究

目的观察黄芩苷联合顺铂是否能诱导HepG2.0细胞凋亡及探讨其对凋亡相关蛋白表达的影响。方法采用体外细胞培养方法,分别用黄芩苷、顺铂及黄芩苷联合顺铂干预HepG2.0细胞。用CCK-8法检测细胞活性;光学显微镜观察HepG2.0细胞凋亡的形态学改变;流式细胞仪检测HepG2.0细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、c-myc表达的影响。结果光学显微镜下可观察到药物组细胞凋亡的形态改变;各药物组细胞早期凋亡率显著升高;各药物组细胞Bcl-2蛋白表达水平下降,Bax、c-myc和Caspase-3表达升高。结论黄芩苷、顺铂及黄芩苷联合顺铂均能诱导HepG2.0细胞凋亡,其机制可能通过调控Bcl-2、Bax、Caspase-3、c-myc蛋白的表达有关。     

黄连素联合顺铂诱导人肺癌耐药A549/DDP细胞凋亡的实验研究

目的观察黄连素联合顺铂对A549/DDP细胞凋亡的影响并探讨其相关机制。方法以A549/DDP细胞为研究对象,分别加入12μg/m L的顺铂、浓度为20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L的黄连素+12μg/m L的顺铂,设置空白对照孔(PBS孔),分别用药物干预24 h、48 h、72 h,采用MTT法检测细胞增殖活性;各组用药干预48 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot法检测Caspase-3、Caspase-9、Bax、Bcl-2的蛋白表达情况,Real-time PCR法检测Caspase-3、Caspase-9、Bax、Bcl-2的m RNA表达水平。结果黄连素联合顺铂能够抑制A549/DDP细胞增殖(P0.01),并具有一定的时间-浓度依赖性。黄连素联合顺铂能够诱导耐药细胞A549/DDP凋亡(P0.01),且呈一定的浓度依赖性。不同浓度的黄连素联合顺铂使促凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-9、Bax在蛋白和m RNA水平表达上调(P0.05),而抗凋亡基因Bcl-2在蛋白和m RNA水平表达下调(P0.05)。结论黄连素联合顺铂抑制A549/DDP细胞增殖和促凋亡的分子机制可能是上调促凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-9、Bax的表达,下调抗凋亡基因Bcl-2的表达。     

加味香砂六君子汤诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡机制研究

目的研究加味香砂六君子汤对胃癌细胞株SGC-7901凋亡作用及可能机制。方法以加味香砂六君子汤按1.55、3.1、6.3 g/kg剂量分为实验组,以50 mmol/L的5-Fu设为5-Fu组,分别作用于胃癌细胞SGC-7901。流式细胞仪检测细胞周期,免疫细胞化学法检测Bax、Bcl-2、Caspase-3表达水平。结果药物处理细胞后,相对于对照组,不同浓度的加味香砂六君子汤能够表现出不同的促进细胞凋亡作用,能够将细胞周期阻滞于G2期(P0.05),免疫细胞化学法显示SGC-7901细胞中Bax和Caspase-3蛋白表达量显著上升,Bcl-2蛋白表达量显著下调。结论加味香砂六君子汤可以促进SGC-7901细胞凋亡,阻滞细胞周期于G2期,其凋亡机制可能与Bax、Caspase-3表达上升,Bcl-2表达的下调有关。     

β-榄香烯联合卡铂对结肠癌SW480细胞放疗增敏作用的实验研究

目的探讨β-榄香烯联合卡铂对结肠癌SW480细胞放疗增敏作用。方法 2019年3—5月于海南省第三人民医院肿瘤中心分子生物实验室进行实验。收集SW480细胞分为SW480细胞组(培养环境为37℃、5%CO_2、20%O_2)、放疗组(放射剂量为8 Gy,时间为24 h)、β-榄香烯组(80.0μg/ml)、卡铂组(100μg/ml)、β-榄香烯联合卡铂+放疗组(β-榄香烯、卡铂浓度分别为80.0μg/ml、100μg/ml,放射能量为8 Gy,时间为24 h);培养结束后,MTT法测定细胞SW480细胞增殖情况、培养计数细胞克隆形成数目,流式细胞仪测定细胞凋亡水平、细胞周期、Matrigel跨膜细胞侵袭,RT-PCR法测定SW480细胞Caspase-3、Caspase-6基因表达,Western-blot法测定SW480细胞Caspase-3、Caspase-6蛋白表达。结果与SW480细胞组比较,放疗组、β-榄香烯组、卡铂组、β-榄香烯联合卡铂+放疗组SW480细胞OD值、存活率水平、克隆形成数目降低,凋亡率、G1期比例及Caspase-3、Caspase-6 mRNA/蛋白表达水平升高(F=16.365、21.654、25.654、15.654、18.598、19.987、25.654、32.365、26.987,P均=0.000);与放疗组、β-榄香烯组、卡铂组比较,β-榄香烯联合卡铂+放疗组SW480细胞OD值、存活率水平、克隆形成数目降低,G1期比例、凋亡率及Caspase-3、Caspase-6 mRNA/蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论β-榄香烯联合卡铂能增加结肠癌SW480细胞放疗敏感性,抑制结肠癌SW480细胞增殖、侵袭水平,提高凋亡水平,其机制与β-榄香烯联合卡铂能增促进SW480细胞Caspase-3、Caspase-6 mRNA和蛋白高表达有关。     

山楂叶总黄酮对H2O2诱导PC12细胞凋亡的保护作用及机制的研究

目的探讨山楂叶总黄酮(flavone mixture of crataegus leaves,FMCL)对H2O2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及其分子机制.方法用H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,用流式细胞仪检测PC12细胞凋亡率,用Western blot 法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3P20蛋白及用RT-PCR法检测Bcl-2、Bax mRNA表达量的变化.结果与模型组比较FMCL 100μg/ml剂量组PC12细胞凋亡率下降,Bcl-2蛋白及mRNA表达量明显升高,而Bax、Caspase-3P20蛋白及Bax mRNA表达量明显降低(P<0.05或P<0.01),且在一定范围内存在剂量依赖关系.结论山楂叶总黄酮可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与调节凋亡相关基因及蛋白的表达从而抑制Caspase-3活化有关.     

洛铂联合放疗对肺癌细胞杀伤作用的研究

目的:研究洛铂联合放疗对非小细胞肺癌细胞的杀伤作用以及对细胞周期和凋亡的影响?方法: MTT法观察肺癌A549细胞增殖抑制,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分布,蛋白免疫印迹检测Bcl-2和Bax蛋白表达?结果: 洛铂对肺癌A549细胞有增殖抑制作用,且细胞毒性呈剂量依赖性;洛铂联合放疗组观察到有更高的细胞凋亡率和G2/M期阻滞;蛋白免疫印迹结果显示洛铂联合放疗组Bcl-2表达水平下降,促进凋亡诱导蛋白Bax表达水平升高?结论:洛铂有放疗增敏作用,作用机制可能与抑制Bcl-2表达?促进Bax表达?激活 Bcl-2(Bax)-Caspase信号通路有关?     

罗哌卡因通过线粒体通路诱导人结直肠癌SW620细胞株凋亡的实验研究

目的探究罗哌卡因通过线粒体通路诱导人结直肠癌SW620细胞株凋亡的机制。方法体外培养人结直肠SW620细胞,使用罗哌卡因处理人结直肠SW620细胞,采用CCK-8实验检测癌细胞活力。将结直肠癌SW620细胞分为:结直肠癌细胞组、低剂量罗哌卡因组、中剂量罗哌卡因组和高剂量罗哌卡因组;参考CCK-8实验结果,分别使用20,50和100μg/mL浓度的罗哌卡因处理低、中、高罗哌卡因组的结直肠癌细胞;采用流式细胞仪检测各组细胞线粒体膜电位;使用蛋白质印迹检测凋亡蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3和Caspase-9表达情况;采用流式细胞仪检测结直肠SW620细胞周期及凋亡情况。结果 CCK-8结果显示随着使用罗哌卡因剂量的增加,人结直肠SW620细胞的抑制率显著升高,半数致死浓度约为:69.36μg/mL。结直肠癌细胞组细胞凋亡率为(1.52±0.11)%显著低于低、中、高剂量罗哌卡因组[(35.91±5.69)%、(46.27±6.57)%、(69.36±8.01)%; F=559.203,P0.001];相比结直肠癌细胞组,使用罗哌卡因处理各组线粒体膜电位、G2/M期细胞比例、S期细胞比例、Bax蛋白相对表达水平均显著降低,且呈剂量依赖性(P0.001);相比结直肠癌细胞组,使用罗哌卡因处理各组G0/G1期细胞比例、Bcl-2蛋白、Caspase-3蛋白和Caspase-9蛋白相对表达水平显著升高,且呈剂量依赖性(P0.001)。结论罗哌卡因可以通过线粒体途径促进人结直肠SW620细胞的凋亡,其作用机制可能与Caspase-3及Bcl-2信号传导相关。     

番茄红素对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究番茄红素（lycopene,LP）对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 取对数生长期SKOV3细胞随机分为5组：正常对照组、LP（20、10、5μg/ml）组和顺铂（40μg/ml）组（阳性对照组）,每组10个复孔。给药干预48h后,观察比较各组细胞生长状况并采用MTT比色法测定细胞增殖抑制率;通过流式细胞术（flow cytometry）分析细胞周期的改变、检测细胞凋亡并计算细胞凋亡率,免疫印迹法（Western blot）检测caspase-3蛋白表达并进行半定量分析,反转录PCR（RT-PCR）技术检测Bax mRNA和bcl-2 mRNA表达并计算Bax/bcl-2表达比值。结果 与正常对照组比较,LP各组SKOV3细胞呈现不同程度的细胞脱壁、细胞间松散等病理性状态,以LP 20μg/ml组最为显著;LP（20、10μg/ml）组细胞增殖抑制率显著升高,细胞周期被阻滞于G₂/M期,细胞凋亡率显著升高,caspase-3蛋白表达量显著增高,bcl-2 mRNA表达显著下调、Bax mRNA表达显著上调,Bax/bcl-2表达比值显著升高,上述差异均具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论 LP具有抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖并促进其凋亡的作用,作用机制可能与LP能够有效提高caspase-3蛋白表达并下调bcl-2 mRNA表达、上调Bax mRNA表达、提高Bax/bcl-2表达比值有关。     

番茄红素对人骨肉瘤细胞顺铂增敏作用及机制研究

目的 研究番茄红素（lycopene,LP）对人骨肉瘤MG-63细胞顺铂化疗敏感度的影响并初步探讨其可能的作用机制。方法 体外培养并取对数生长期人骨肉瘤MG-63细胞,设空白对照组、LP组（10μg/ml）、顺铂组（40μg/ml）和联合组[LP（10μg/ml）+顺铂（20μg/ml）];药物干预48h后,采用噻唑蓝（MTT）比色法测定细胞增殖抑制率,流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测细胞周期和细胞凋亡状况,反转录PCR（RT-PCR）法检测Bax mRNA、bcl-2 mRNA表达并计算Bax/bcl-2比值,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测caspase-3蛋白表达。结果 联合干预组与顺铂组比较发现,联合干预组人骨肉瘤MG-63细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05）,细胞周期G₀/G₁期显著延长（P<0.05）、S期和G₂/M期显著缩短（P<0.05,P<0.01）,细胞凋亡率（apoptosis index,AI）显著升高（P<0.01）,Bax mRNA表达明显上调、bcl-2 mRNA表达显著下调（P<0.05）且Bax/bcl-2比值显著升高（P<0.01）,caspase-3蛋白表达上调（P<0.01）。LP组与空白对照组比较发现,LP组MG-63细胞周期明显改变（G₀/G₁期延长、G₂/M期缩短）,bcl-2 mRNA显表达著下调（P<0.05）、Bax/bcl-2比值显著升高（P<0.05）,caspase-3蛋白表达显著上调（P<0.01）。结论 LP具有提高人骨肉瘤MG-63细胞顺铂敏感度的药理学作用,其机制可能与LP能够阻滞细胞周期以及调节凋亡相关调控基因和蛋白表达有关。     

天麻素调节cAMP/PKA/GRK2信号通路对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响

摘要:目的 探讨天麻素(Gastrodin)对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法 不同浓度的天麻素(2.5 ~80.0μmol/L)分别处理 U87细胞24、48、72h,检测细胞增殖确定最佳给药浓度;U87细胞分为对照组(Control组)、天 麻素低、中、高浓度组(Gastrodin-L、Gastrodin-M、Gastrodin-H 组,天麻素工作浓度分别为5、10、20μmol/L)、天麻素+ cAMP/PKA 信号通路抑制剂组(Gastrodin+H-89组,20μmol/L 的天麻素与10μmol/L 的 H-89共同处理细胞),分别 检测 U87细胞增殖、凋亡及cAMP及 CyclinD1、p21、Bax、Bcl-2、Caspase-3、p-PKA、PKA、p-GRK2、GRK2的蛋白表达水 平。结果 2.5~80.0μmol/L的天麻素均可抑制 U87细胞增殖,选择浓度为5、10、20μmol/L的天麻素进行后续实验。 与 Control组比较,Gastrodin-L、Gastrodin-M、Gastrodin-H 组 G0/G1期细胞比例、细胞凋亡率、cAMP、p21、Bax、Caspase3、p-PKA、p-GRK2蛋白表达水平均显著升高(均P<0.05),S期与 G2/M 期细胞比例、集落形成数、CyclinD1、Bcl-2蛋 白表达水平显著降低(均P<0.05),且呈药物浓度依赖性;与 Gastrodin-H 组比较,Gastrodin+H-89组 G0/G1期细胞比 例、细胞凋亡率、cAMP、p21、Bax、Caspase-3、p-PKA、p-GRK2蛋白表达水平显著降低(均 P<0.05),S期与 G2/M 期细 胞比例、集落形成数、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达水平显著升高(均P<0.05)。结论 天麻素可能通过激活cAMP/PKA/ GRK2通路抑制脑胶质瘤细胞增殖,并诱导其凋亡。     

祁连圆柏提取物诱导人肝癌细胞Bel-7402凋亡的作用及筛选研究

目的探讨祁连圆柏提取物体外对人肝癌细胞Bel-7402体外增殖抑制、凋亡作用机制并进行有效组分筛选研究。方法采用硅胶柱层析法提取祁连圆柏有效抗瘤组分,分光光度法测定含量。用克隆形成实验、台盼蓝拒染法及MTT显色法检测祁连圆柏提取物对Bel-7402细胞增殖的影响,流式细胞术检测其诱导细胞凋亡的细胞周期阻滞状况及凋亡率,免疫组化观察对Bcl-2与Bax蛋白的表达水平,光镜、电镜观察凋亡细胞的组织形态和超微结构变化。结果祁连圆柏提取物对Bel-7402细胞增殖有明显的抑制作用,其中C液-组分-3细胞的半数抑制浓度为2.47μg/ml。流式细胞检测结果 G0/G1期细胞增多,G2/M期细胞减少,其中10～50μg/ml的祁连圆柏C液-组分-3在G1期细胞前出现典型"凋亡峰";免疫组化SP法检测实验组细胞BCL-2基因蛋白表达降低,Bax基因蛋白表达增加。光镜与电镜下均见凋亡细胞明显增多。结论祁连圆柏C液-组分-3具有显著的抑制Bel-7402细胞增殖以及诱导该细胞系凋亡的作用,其诱导Bel-7402细胞凋亡的作用与其上调Bax、下调Bcl-2蛋白的表达,激活Bax凋亡基因蛋白及G0/G1期阻滞有关,是其重要的抗肿瘤作用机制。     

PPARγ激动剂对肝癌细胞HepG2增殖的影响及其机制探讨

目的 观察过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮体外抑制人肝癌细胞HepG2生长并探讨其作用机制.方法 MTT检测不同浓度罗格列酮(10、30、50、100 μmol/L)对HepG2细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率,免疫细胞化学半定量检测PPARγ、PTEN、Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达,TUNEL和透射电镜观察HepG2细胞凋亡的形态学改变.结果 PPARγ经其配体罗格列酮激活后,可明显抑制HepG2细胞的生长并呈剂量和时间依赖关系;HepG2细胞周期出现G0/G1期停滞;PTEN、Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达水平下降,Caspase-3被激活.TUNEL和透射电镜均可在罗格列酮组观察到凋亡细胞.结论 PPARγ激动剂罗格列酮可抑制肝癌细胞HepG2的生长,其主要作用机制之一是促进细胞凋亡,这可能与调节Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达有关.     

白藜芦醇通过PI3K/Akt信号通路诱导子宫内膜癌 Ishikawa细胞凋亡机制研究*

目的通过研究白藜芦醇诱导Ishikawa细胞凋亡的过程中对PI3K/AKT信号通路的影响,探讨白藜芦醇通过PI3K/Akt信号通路诱导子宫内膜癌细胞凋亡的机制。方法Ishikawa细胞体外培养,经25、50、100 μM白藜芦醇处理细胞48h后,倒置显微镜观察Ishikawa细胞生长变化;RT-PCR及Western-blot检测相关mRNA和蛋白的表达。结果随着白藜芦醇作用浓度的增加,Ishikawa细胞数量逐渐减少,细胞凋亡率显著上升,与空白组比较,差异具有统计学意义（P<0.05）;白藜芦醇作用于子宫内膜癌Ishikawa细胞48 h后,PI3K、Akt、Bcl-2的mRNA和蛋白表达降低,Bax mRNA和蛋白表达升高,与空白对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论白藜芦醇能够促进Ishikawa细胞的凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路的激活,降低Bcl-2的表达,促进Bax的表达有关。     

薤白总皂苷对人宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡作用的影响

目的观察薤白总皂苷对宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡作用的影响,并探讨其可能的作用机制。方法用不同浓度的薤白总皂苷(25、50、100、250、500、1000μg/ml)于不同作用时间(24、48、72 h)处理宫颈癌HeLa细胞后,采用MTT法检测不同浓度的薤白总皂苷在不同作用时间下对HeLa细胞增殖率的影响;用100和200μg/ml的薤白总皂苷处理宫颈癌HeLa细胞48 h后,Annexin V-FITC/PI染色测定细胞凋亡率,JC-1染色法测定细胞线粒体跨膜电位水平,Caspase试剂盒检测HeLa细胞中Caspase-9和Caspase-3的活性,荧光定量PCR测定Bcl-2和Bax mRNA表达,并计算Bcl-2与Bax的比值。结果薤白总皂苷对HeLa细胞的生长抑制作用呈明显的时间一剂量依赖性;薤白总皂苷(100和200μ/ml)处理能显著降低HeLa细胞线粒体膜电位,抑制HeILa细胞增殖,促进其凋亡(P<0.05,P<0.01);上调Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达和Bcl-2与Bax的比值以及增强Caspase-9和Caspase-3的活性(P<0.05,P<0.01)。结论薤白总皂苷有显著的抑制HeLa细胞增殖和诱导凋亡作用,其作用机制可能与其降低HeLa细胞线粒体膜电位,上调Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达和Bcl-2与Bax的比值以及增强Caspase-9和Caspase-3的活性有关。     

白藜芦醇对人上皮性卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究白藜芦醇抑制人上皮性卵巢癌细胞增殖并促进其凋亡的作用及机制。方法:将人上皮性卵巢癌细胞株SKOV3细胞随机分为5组,即正常对照组、白藜芦醇高剂量组(40 mg·L~(-1))、白藜芦醇中剂量组(20 mg·L~(-1))、白藜芦醇低剂量组(10 mg·L~(-1))和顺铂组(40 mg·L~(-1))。干预48 h后,通过光学显微镜观察各组细胞形态,MTT比色法检测各组细胞增值抑制率。通过流式细胞仪分析细胞周期的改变、流式细胞术检测细胞凋亡并计算细胞凋亡率,采用RT-PCR法检测细胞Bcl-2 mRNA和Bax mRNA表达并计算Bax/Bcl-2比值,Western blot法检测细胞caspase-3蛋白表达。结果:与正常对照组比较,白藜芦醇高、中剂量组细胞出现变圆、脱壁、细胞间接触松散等状态,细胞抑制作用明显、增殖抑制率显著升高(P0.01);白藜芦醇各剂量组细胞周期被阻滞于G2/M期,白藜芦醇高、中剂量组细胞凋亡率显著升高(P0.01),同时可明显下调Bcl-2 mRNA而上调Bax mRNA表达,显著提高Bax/Bcl-2值(P0.05,P0.01),上调caspase-3蛋白表达(P0.01)。结论:白藜芦醇能够通过抑制增殖并促进凋亡对人上皮性卵巢癌SKOV3细胞生长起到一定的抑制作用,其机制可能与白藜芦醇调节凋亡相关基因蛋白表达有关。     

Livin基因增强骨肉瘤转化和顺铂耐药性的体外实验研究

目的 探讨凋亡抑制蛋白(IAP)家族新成员Livin基因在骨肉瘤形成以及多药耐药过程中的作用.方法 应用亚克隆技术构建Livin基因短发夹RNA(shRNA)表达载体,稳定转染并筛选沉默Livin表达的克隆.细胞克隆形成法测定阳性克隆的非贴附性生长状态.流式细胞计数法测量Livin表达短期沉默后细胞周期和顺铂化疗敏感性的变化,以及长期沉默后的Hoechst33258核染色情况.Western blot检测Cyclin D1、Bcl-2、Bax、活化型Caspase-3和多聚ADP核糖多聚酶的表达变化.结果 在骨肉瘤U2-OS细胞中,shRNA介导了Livin mRNA和蛋白水平的下调,细胞克隆形成能力明显下降.在Livin表达沉默早期,处于G0/G1期细胞增加,Cyclin D1的表达减弱,对顺铂药物敏感性增强;长期沉默后凋亡小体形成,Bcl-2蛋白的表达下调,Bax、活化型Caspase-3和PARP的表达上调.结论 凋亡抑制蛋白Livin不但促进骨肉瘤的发生而且促进顺铂化疗耐药性的形成.