百草枯对大鼠正常肝细胞系增殖和凋亡的影响

目的观察不同浓度百草枯对大鼠正常肝细胞系(BRL-3A)增殖和凋亡的影响。方法将传代培养的BRL-3A细胞分为药品空白组及低、中、高浓度组。向高、中、低浓度组和药品空白组中加入百草枯,使其终浓度依次为4.80、1.20、0.15、0.00μmol.L-1。24 h后噻唑蓝法检测细胞增殖活性;Western blot检测B细胞白血病家族蛋白Bcl-2、Bax和胱天蛋白酶caspase-9、caspase-3的表达变化。结果细胞增殖活性高浓度组低于药品空白组,差异有统计学意义(P<0.05);中、低浓度组与药品空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)。细胞计数高浓度组低于药品空白组,差异有统计学意义(P<0.05);中、低浓度组与药品空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)。随着染毒剂量的增加,促凋亡蛋白Bax、caspase-9、caspase-3表达增加,而凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达量则减少。结论百草枯能抑制BRL-3A细胞增殖,这种作用可能是通过调节凋亡相关蛋白表达实现的,但浓度较低时对细胞增殖反而有促进效应。     

胰岛素对高糖条件下人脐静脉内皮细胞凋亡及小窝蛋白-1表达的影响

目的:探讨不同浓度的胰岛素对高糖条件下人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)凋亡及小窝蛋白(caveolin,Cav)-1表达的影响?方法:体外培养HUVEC,分为A组(对照组,葡萄糖浓度5.5 mmol/L)?B组(高糖组,葡萄糖浓度33.3 mmol/L)?C组(高糖+低浓度胰岛素组,葡萄糖浓度33.3 mmol/+胰岛素浓度20 mU/L)?D组(高糖+高浓度胰岛素组,葡萄糖浓度33.3 mmol/L+胰岛素浓度1 000 mU/L)?采用流式细胞仪检测细胞凋亡比例及细胞周期,免疫组化检测HUVEC的Cav-1表达?结果:在高糖条件下,HUVEC凋亡比例显著升高,停滞于G0/G1期细胞增加,Cav-1表达减少;低浓度胰岛素使细胞凋亡比例减少,Cav-1表达增加;加入高浓度胰岛素不能改变细胞凋亡比例及细胞周期,Cav-1表达亦无明显改变?结论:低浓度胰岛素可抑制高糖导致的内皮细胞凋亡,而高浓度胰岛素无此作用,其机制可能与Cav-1表达有关?     

烟草烟雾刺激通过骨桥蛋白对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨烟草烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖的影响及骨桥蛋白(osteopontin,Opn)在其中的作用。方法体外培养VSMC,用不同浓度CSE刺激,并且设置对照组,采用MTT法检测CSE对大鼠VSMC增殖活性的影响,用免疫细胞化学检测CSE作用后VSMC中骨桥蛋白和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果①MTT结果示2.5%、5%CSE组吸光度(A值)增高,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.01)。10%、20%CSE组A值与对照组比较,差异无显著性意义(P0.05)。对照组VSMC中有少量Opn和PCNA蛋白表达。2.5%CSE组Opn和PCNA蛋白表达增加。5%CSE组Opn和PCNA蛋白表达达到高峰,此后逐渐下降。10%、20%CSE组仍高于高于对照组。②Opn抗体可显著抑制5%CSE诱导的MTTA值和Opn、PCNA蛋白表达增加。结论①低浓度CSE(2.5%、5.0%)对大鼠VSMC的增殖逐渐增加,高浓度(10%、20%)时增殖趋势逐渐下降。②CSE可通过增加Opn的表达促进大鼠VSMC的增殖。     

血小板衍生性生长因子对低氧培养内皮细胞增殖的影响

目的　观察低氧条件下血小板衍生性生长因子 (PDGF)对于培养人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)增殖的影响。方法　流式细胞仪分析细胞周期各时相分布 ,氚 -亮氨酸 (3 H -Leu)掺入实验评价蛋白质合成 ,免疫组织化学方法检测增殖细胞核抗原 (PCNA)水平。结果　低氧可显著减少S期及G2 /M期细胞数 ,使停留于G0 /G1 期HUVEC细胞数增加 ,降低HUVEC3 H -Leu的掺入量及PCHA水平。低浓度的PDGF(5ng/ml)对低氧条件培养的HUVEC细胞周期时相分布、3 H -Leu的掺入量及PCNA水平影响不明显 ;高浓度PDGF(1 0ng、2 0ng)加速HUVEC由G1 期S期的转换 ,显著增加低氧培养HUVEC3 H -Leu掺入量 ,PCNA水平 ,此作用呈剂量依赖性。结论　PDGF能够拮抗低氧所致的培养HUVEC增生能力的下降 ,但低浓度PDGF(5ng/ml)作用不显著 ,剂量越大 ,拮抗作用愈显著。     

氧化低密度脂蛋白抑制人外周血CD4~+T细胞Notch1、Notch2的表达

目的:探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人CD4+T细胞Notch分子表达的影响。方法:采用密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞,分离淋巴细胞,经流式细胞术分选CD4+T细胞,然后分为4组:空白对照组,低、中、高浓度组,加入浓度分别为0、50、100、200 mg/L的ox-LDL培养72 h,流式细胞术检测CD4+T细胞Notch1、Notch2分子的表达变化。结果:流式细胞术检测显示,空白对照组,低、中、高浓度组的Notch1表达分别为(3.81±0.34)%、(1.68±0.25)%、(0.73±0.21)%、(0.31±0.17)%。与空白对照组比较,低、中、高浓度组Notch1表达率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组,低、中、高浓度组的Notch2表达分别为(15.75±1.48)%、(26.33±2.68)%、(12.42±3.19)%、(9.87±1.65)%。与空白对照组比较,低浓度组Notch2表达率明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),中、高浓度组Notch2表达率反而明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:一定浓度的ox-LDL能明显抑制人外周血CD4+T细胞Notch1、Notch2分子表达,可能与ox-LDL抑制Th2分化而促进Th1异常分化有关,参与动脉粥样硬化的发生、发展。     

局部缓释秋水仙素抑制移植血管内膜增殖的研究

目的 :观察局部缓释秋水仙素 (colchicine ,COL)对移植血管内膜增生的抑制程度。方法 :采用大鼠自体静脉移植模型 ,外涂含不同浓度COL的Pluronic胶 ,于术后 14d处死取材 ,行HE ,Verhoeff弹力纤维染色、增殖细胞核抗原 (proliferatingcellularnuclearantigen ,PCNA)免疫组化染色 ,测量内膜厚度、内膜与中膜面积比、PCNA阳性细胞百分比 ,用流式细胞仪计数各期细胞百分比 ,观察不同浓度COL对内膜及平滑肌细胞增殖的抑制程度。结果 :血管移植术后 14d ,对照组的内膜厚度、内膜面积与中膜面积比 ,与高浓度组、中浓度组、低浓度组相比 ,差异显著(P <0 .0 5 )。PCNA阳性细胞数在各组之间相互比较 ,差异显著 (P <0 .0 5 )。流式细胞仪分析 ,从高浓度组、中浓度组、低浓度组到对照组 ,G0 G1、S期细胞所占比例逐渐减少 ,G2 M期细胞所占比例逐渐增多 (P <0 .0 5 )。结论 :局部缓释COL具有抑制移植血管内膜及平滑肌细胞增殖的作用。COL抑制血管内膜增殖作用与其剂量呈剂量—效应关系。COL可使平滑肌细胞停止在分裂中期 ,抑制其进入下一个增殖周期 ,从而抑制移植血管内膜及平滑肌细胞增殖的作用。     

川楝树提取物对人乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移及细胞周期分布的影响

目的研究川楝树提取物对人乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移以及细胞周期分布的影响。方法将人乳腺癌MCF-7细胞分为空白组和川楝低、中、高浓度组,采用MTT法和流式细胞术检测细胞不同时间段乳腺癌细胞的增殖和凋亡情况,Transwell实验检测细胞迁移情况,流式细胞仪检测细胞周期分布,Western blot检测ICAM-1、MMP-2、MMP-9的表达。结果川楝低、中、高浓度组乳腺癌细胞在不同时间段的增殖率、凋亡率均显著低于和高于空白组,且随着浓度的升高作用效果更加明显(P0.05,P0.01);川楝低、中、高浓度组乳腺癌细胞的细胞迁移数量相比空白组均显著减少,且细胞迁移个数随着浓度的升高而明显减少;川楝树提取物浓度越高,乳腺癌细胞处于G0/G1和S周期的细胞比例显著降低,处于G2/M周期的细胞比例明显上升(P0.01);川楝低、中、高浓度组ICAM-1、MMP-2、MMP-9的表达显著低于空白组,高、中浓度组ICAM-1、MMP-2、MMP-9的表达明显低于低浓度组(P0.01)。结论川楝树提取物能够有效抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移,促进癌细胞的凋亡,通过改变癌细胞的周期分布降低癌细胞的增长,能力呈浓度依赖性。     

灵芝酸A对人胶质瘤细胞U251细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的探讨灵芝酸A对人胶质瘤细胞U251细胞凋亡、侵袭及KDR表达的影响。方法制备灵芝酸A,以人胶质瘤细胞细胞U251细胞为研究对象,根据细胞培养液所含灵芝酸A的不同浓度,将实验分为空白对照组(等量细PBS)、灵芝酸A低浓度组(0.1 mmol/L)和高浓度组(0.5 mmol/L)。用RT-PCR和Western blot法分别从mRNA水平和蛋白水平检测KDR基因的表达,CCK-8法测定细胞体外增殖能力,流式细胞技术(flowcytometry,FCM)检测各组细胞周期和凋亡情况,TUNEL染色检测各组细胞的的凋亡,细胞侵袭小室法检测各组细胞的体外侵袭力。结果 RT-PCR和Western blot显示,灵芝酸A高浓度组和低浓度组较空白对照组的KDR mRNA和蛋白表达都明显下降;灵芝酸A高浓度组和低浓度组细胞的生长速度明显减慢,降低G1期细胞比例,S期和G2/M期比例增高;与空白对照组相比,高浓度组和低浓度组细胞的凋亡率明显升高(P0.01),增殖、侵袭能力显著下降(P0.05);高浓度组和低浓度组细胞相比促进凋亡和抑制KDR表达的作用更明显(P0.05)。结论灵芝酸A可诱导人胶质瘤细胞U251细胞凋亡,抑制其增殖和侵袭能力,并能抑制Kdr DR mRNA和蛋白的表达,提示这可能是其抗肿瘤的作用机制之一。     

槲皮素对结肠癌SW480细胞增殖及蛋白表达的影响

目的研究槲皮素对SW480结肠癌细胞生长增殖及蛋白表达的影响。方法体外培养人结肠癌SW480细胞后,采用人工重组基膜技术监测槲皮素对肿瘤细胞体外侵袭能力和运动活性的作用。将培养成功的细胞分为空白组和其余5个不同浓度(10、20、40、80、160 mg/L)的槲皮素作用组,观察干预结果,检测人结肠癌SW480细胞的增殖抑制率,选择最佳作用浓度;并通过免疫印迹法检测人结肠癌SW480内增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki67的表达情况。结果结肠癌SW480细胞经槲皮素处理后,体外侵袭、运动能力呈剂量依赖性下降(P<0.05);槲皮素能显著抑制结肠癌SW480细胞的增殖,浓度为10、20、40、80、160μmol/L的槲皮素作用于结肠癌SW480细胞的增殖抑制率分别为(4.1±1.2)%、(13.9±1.5)%、(38.8±2.2)%、(41.5±2.6)%、(45.3±2.6)%,与空白组对照相比差异有统计学意义(P<0.05);干预的结肠癌SW480细胞内Ki67和PCNA的表达均呈下调表现(P<0.05)。结论槲皮素可呈浓度和时间依赖性地抑制结肠癌SW480细胞的增殖,对人结肠癌SW480细胞的生长有抑制作用,并能诱导其凋亡。     

前癃通胶囊抑制良性前列腺增生基质细胞TGF-β1表达的体外实验研究

目的研究前癃通胶囊干预下,TGF-β1mRNA在良性前列腺增生基质细胞中的表达的变化。方法:采用MTT比色法检测前癃通胶囊对体外培养良性前列腺增生前列腺基质细胞增殖的抑制作用;应用逆转录-多酶链反应(RT-PCR)技术,观察前癃通胶囊干预下TGF-β1mRNA在良性前列腺增生基质细胞中的表达的变化。结果 3种浓度的前癃通胶囊能抑制前列腺基质细胞的增殖,且随着时间的延长抑制作用增强,高浓度组在不同时段对前列腺基质细胞增殖有明显的抑制作用,与中浓度组比,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);中浓度组在不同时段对前列腺基质细胞增殖有抑制作用,与低浓度组比,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。前列腺基质细胞中的TGF-β1mRNA表达随着前癃通胶囊(药液)浓度的增高呈现下降趋势。TGF-β1mRNA在高浓度组的表达最低,空白组的表达最高。高、中、低浓度组分别与空白组比较差异有统计学意义(P<0.01);高、中浓度组与低浓度组比较TGF-β1mRNA的表达明显减弱,差异有统计学意义(P<0.01)。结论前癃通胶囊对前列腺基质细胞的增殖有较强的抑制作用,能降低TGF-β1mR-NA在基质细胞中的表达。     

皂角刺提取液对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨皂角刺提取液对鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养人鼻咽癌CNE-2细胞,予不同的浓度皂角刺提取液作用于细胞,分别作用12、24、48 h后,通过MTT比色法检测细胞的增殖抑制情况。予不同浓度的皂角刺提取液作用于鼻咽癌CNE-2细胞48 h后,通过流式细胞仪检测细胞的凋亡情况。结果较高浓度皂角刺提取液组（3.2、6.4、12.8、25.6 mg/mL）作用于细胞48 h的增殖抑制率分别为（89.61±1.88）%、（96.99±0.66）%、（93.88±1.24）%、（84.15±0.86）%,均高于阴性对照组（P < 0.05）。2、2.5、3 mg/mL皂角刺提取液作用于细胞48 h后,细胞凋亡率分别为（15.61±1.21）%、（22.08±1.70）%、（37.62±2.07）%,均高于阴性对照组（P < 0.01）。结论皂角刺提取液可抑制鼻咽癌CNE-2细胞增殖并诱导其凋亡。     

汉防己甲素抑制MMP-2蛋白表达的实验研究

目的观察汉防己甲素（Tet）对体外培养的人脐带血管内皮细胞（HUVEC）中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）蛋白表达的影响,探讨其抗新生血管形成的药物效应。方法应用MTT法测定不同浓度Tet（10-3、10-4、10-5、10-6M）对HUVEC的抑制作用,用免疫组织化学检测MMP-2蛋白在血管内皮细胞中的表达。结果Tet能抑制HUVEC增殖且具有量效依赖关系;MMP-2蛋白在1640对照组、Tet实验组中的表达率分别为0.628±0.054、0.350±0.061,提示Tet明显降低MMP-2蛋白在内皮细胞中的表达（P〈0.05）。结论Tet下调HU-VEC中MMP-2蛋白的表达,从而抑制HUVEC的增殖。     

黄芪微乳载入修饰后胶原对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的:研究黄芪微乳载入修饰后胶原对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响,进一步探讨黄芪微乳对HUVEC增生的作用及其机制?方法:体外培养HUVEC细胞,用含1%FCS的RPMI-1640培养液同步24 h后,分为2组进行观察:空白微乳胶原组和黄芪微乳胶原组,并设定空白微乳和黄芪微乳的浓度分别为16.90?8.50?4.20?2.10?1.05 μg/ml等5个浓度,每组每个浓度设3个复孔?干预48 h后,采用MTT法和流式细胞术检测各组细胞的增殖情况;实时荧光定量RT-PCR检测细胞内血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA表达?结果:干预48 h后,在浓度分别为16.9?8.5?4.2 μg/ml的黄芪微乳胶原组HUVEC的吸光度值?细胞分裂增殖指数和VEGF mRNA表达均明显高于相应浓度的空白微乳胶原组(P < 0.05,P < 0.01)?结论:黄芪微乳能促进HUVEC的增殖,并上调HUVEC的VEGF mRNA表达,推测黄芪微乳可能具有促进血管生成的作用?     

三叶青黄酮调节PI3K/Akt-eNOS信号通路对膀胱癌细胞生物学行为的影响及其机制

目的 分析三叶青黄酮调节PI3K/Akt-eNOS信号通路对膀胱癌细胞生物学行为的影响及其机制。方法将对数生长期T24细胞分为空白对照组、高浓度组、低浓度组,空白组在处理时采用空白培养基培养,高浓度组和低浓度组细胞在处理时采用100μg/mL和50μg/mL浓度三叶青黄酮干预;检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭活性,检测细胞中PI3K、Akt、p-Akt、eNOS、β-actin蛋白表达水平。结果 空白组、低浓度组和高浓度组T24细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭活性存明显差异,其中高浓度组细胞增殖、迁移和侵袭活性最低,高浓度组细胞凋亡活性最高,且组间两两比较差异有统计学意义(P0.05);Hoechest染色结果显示,空白组细胞细胞核相对较为完整,且颜色均一,低浓度组和高浓度组细胞细胞核出现坍缩,出现裂解碎块并可见凋亡小体,且随给药浓度增高,细胞凋亡越高;空白组、低浓度组和高浓度组T24细胞PI3K、p-Akt、eNOS水平存明显差异,其中高浓度组细胞PI3K、pAkt、eNOS水平最低,且组间两两比较均存统计学意义(P0.05)。结论 三叶青黄酮可通过调节PI3K/Akt-eNOS信号通路实现抑制膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。     

基于DA受体cAMP-PKA信号通路探讨加味当归芍药散治疗HPRL大鼠的机制

目的研究加味当归芍药散治疗高泌乳素血症(HPRL)大鼠的机制。方法 96只雌性SD大鼠采用随机数字表分为空白组,模型组,阳性组,高、中、低浓度组,每组16只,经背部皮下注射甲氧氯普胺液,制造HPRL模型,5天后造模成功,定时定量给药30天后立即处死取材,采用免疫组化法检测下丘脑多巴胺D1受体(DRD1)、D2受体(DRD2)、蛋白激酶A(PKA)的表达,酶联反应法(Elisa)检测各组大鼠血泌乳素(PRL)、多巴胺(DA)、环磷酸腺苷(cAMP),实时荧光定量PCR检测各组HPRL模型大鼠下丘脑多巴胺D1受体mRNA (DRD1 mRNA)、多巴胺D2受体mRNA(DRD2 mRNA)。结果与模型组相比,中高浓度组PRL水平降低[(260.12±4.814)、(241.98±8.351)比(332.18±9.472)](P0.05),cAMP水平显著性降低[(1.05±0.427)、(0.89±0.745)比(1.37±0.002)](P0.01),DA表达数量升高[(41.53±6.19)、(50.69±3.28)比(14.87±5.12)](P0.05),三组不同浓度中药组与模型组比较,PKA活性明显降低,且低浓度组略高于高浓度组[(0.30±0.024)、(0.23±0.061)、(0.20±0.034)比(0.51±0.037),(0.30±0.024)比(0.20±0.034)](P0.05);DRD1 mRNA表达各浓度组无差异、DRD2 mRNA表达增高且高浓度组表达量明显高于低浓度组[(0.20±0.322)比(0.11±0.700),P0.05];与模型组比,DRD1有增高趋势,DRD2除了低浓度组数量略增高[(0.34±0.040)比(0.41±0.019),P0.05],其余均明显增高(P0.01)。结论加味当归芍药散可能作用于DRD2通过cAMPP-PKA信号通路发挥治疗高泌乳素血症模型大鼠的作用。     

珍香胶囊抗人宫颈癌作用及其机制研究

目的探讨珍香胶囊对人宫颈癌的抗癌作用及其机制。方法建立人宫颈癌裸鼠移植瘤模型,分别应用TUNEL法和免疫组化SABC法观察不同浓度的珍香胶囊对裸鼠移植瘤凋亡指数(AI)增殖细胞核抗原阳性细胞指数(PI)的影响。结果经珍香胶囊治疗后,高浓度组和中浓度组AI分别为(2．83±1．52)％和(2．50±1．43)％均明显高于阴性对照组的(0．78±0．31)％(P＜0．01,P＜0．05),而低浓度组AI为(0．87±0．27)％与对照组比较,差异无显著性(P＞0．05)；高浓度组和中浓度组PI分别为(63．58±9．31)％和(68．83±9．04)％均低于阴性对照组(84．42±9．25)％(P＜0．01),而低浓度组PI为(79．25±8．53)％与对照组比较,差异无显著性(P＞0．05)。结论珍香胶囊通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡而达到其抗人宫颈癌作用。     

基质溶解素及其反义寡核苷酸对肺腺癌A549细胞增殖的作用

目的 探讨重组基质溶解素 (recombinant matrilysin, rMMP-7)和脂质体-MMP-7反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide of matrilysin by liposome transfection, LIPO- MAON)对肺腺癌A549细胞和人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell, HUVEC)增殖的影响.方法 ①构建MMP-7的反义寡核苷酸.②MTT法检测rMMP-7和LIPO-MOAN作用下A549和HUVEC的增殖状况.③RT-PCR法检测rMMP-7 和LIPO-MAON作用下腺癌A549细胞和HUVEC MMP-7 mRNA的表达.结果 0.75、1.0 μg/ml rMMP-7对HUVEC增殖有促进作用,各种浓度的LIPO-MAON无作用;对A549细胞的增殖,0.5、0.75、1.0 μg/ml的rMMP-7均有促进作用;而高浓度(7.5、10 nmol/ml)的 LIPO-MAON对A549细胞增殖有明显抑制作用.RT-PCR检测结果表明,HUVEC不表达MMP-7 mRNA;rMMP-7能增加A549细胞MMP-7 mRNA的表达,LIPO-MAON 可降低其MMP-7 mRNA的表达(P＜0.05).结论 在本试验浓度范围内高浓度的MMP-7能促进正常血管内皮细胞和肺腺癌细胞的增殖,其反义寡核苷酸不能抑制正常血管内皮细胞增殖,但高浓度的反义寡核苷酸能抑制肺腺癌细胞的增殖.     

磷酸酶PHLPP1转基因对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的 探讨磷酸酶PHLPP1在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的基础表达及转基因对其增殖的影响.方法 体外培养的HUVEC分3组处理,分别为未转染组、转染pcDNA3-GFP组和转染pcDNA3HA-PHU)P组.通过构建pcDNA3HA-PHLPP1质粒并瞬时转染HUVEC.以细胞计数及噻唑盐比色法测定细胞增殖能力2.Western blot ting定量磷酸酶PHLPP1蛋白表达水平.结果 基础状态下HUVEC不表达PHLPP1.转染pcDNA3HA-PHLPP1组明显增加PHLPP1表达,与正常对照组、pcDNA3-GFP组比较差异显著(均P<0.01).3组的细胞增殖指标无明显差异(P>0.05),其中MTT吸收度A值分别是0.134±0.015,0.133±0.014,0.137±0.016,细胞计数为(8.293±0.962)×105,(7.937±0.101)×105,8.127±0.112×105.结论 PHLPP可能不是调节HUVEC增殖的最重要信号蛋白.     

高浓度雄激素环境对猪卵巢颗粒细胞分泌功能和增殖及分化的影响

目的 研究高浓度雄激素环境对卵巢颗粒细胞(GC)分泌功能和增殖、分化的影响.方法 体外培养猪卵巢窦状卵泡GC,先以梯度浓度(500、250、125、62.5、31.25、15.625 μmol/L)加入丙酸睾酮,通过CCK-8法检测各纽GC相对活力,确定适合继续研究的丙酸睾酮浓度；放射免疫法检测并对比实验组(加入丙酸睾酮)和空白对照组(未加入任何物质)细胞上清液中雌二醇(E2)与孕酮(P)的含量；采用半定量RT-PCR和Western blot 分别检测两组的PCNA、FSHR、StAR mRNA与PCNA、FSHR、StAR、IGF-Ⅰ、p-ERK1/2、p-p38、Cyclin D2和CDK4蛋白表达水平.结果 实验组E2较对照组显著升高(P＜0.001),P则显著降低(P＜0.001)；GC中PCNA、StAR和FSHR mRNA表达量较对照组均明显下降(P＜0.05)；同时PCNA、FSHR、StAR、IGF-Ⅰ、p-ERK1/2与p-p38蛋白表达较对照组也明显下降(P＜0.05).结论 雄激素对卵泡发育的影响具有双重性,高浓度雄激素抑制GC分泌P的作用可能早于抑制E2的分泌；并影响ERK1/2和p38MAPK信号通路,一方面通过抑制Cyclin D2,使正常的细胞周期调控受阻而抑制细胞增殖,另一方使细胞形态和存活率失调,而负向调控细胞正常分化.     

灯盏花素对人脐静脉内皮细胞增殖及基质金属蛋白酶-2的影响

目的研究灯盏花素对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）生长的影响及不同浓度的灯盏花素对凝血酶诱导的HUVEC基质金属蛋白酶-2（MMP-2）表达的影响。方法用MTT比色法观察灯盏花素作用48h后对HUVEC增殖的影响，用培养细胞片免疫细胞化学染色的方法来评价不同浓度的灯盏花素（17．50、35．00、70．00mg／L）对凝血酶诱导HUVEC分泌MMP-2表达的情况。结果灯盏花素在浓度≤78．13mg／L时，对HUVEC的增殖无影响（P〉0．05），而在浓度为156．25、312．50、625．00、1250．00mg／L时明显抑制细胞增殖（P〈0．01），其作用的IC50为226．90mg／L；与凝血酶组相比，灯盏花素各浓度组均能抑制凝血酶诱导的HUVEC分泌MMP-2（P〈0．01），并呈浓度依赖性。结论高浓度灯盏花素对体外培养HUVEC的增殖有抑制作用；灯盏花素能以浓度依赖性的形式抑制凝血酶诱导的体外培养的HUVEC分泌MMP-2的表达；可能对抗动脉粥样硬化、稳定硬化斑块、防治斑块破裂和预防急性冠状动脉综合征的发生产生有益的作用。