TNF-α对内皮细胞白介素-8基因表达的影响

IL-8作为一种趋化细胞因子在炎症反应中具有重要作用,其在内皮细胞内的表达受多种细胞因子的调节。本文用TNF-α孵育培养的人脐静脉内皮细胞不同时间后,用RT-PCR法检测内皮细胞内IL-8mRNA的表达,并用免疫细胞化学染色法检测内皮细胞内NF-κB的激活。结果发现(1)未用TNF-α孵育的内皮细胞IL-8表达量很少,TNF-α孵育1小时后IL-8表达明显增加,3h进一步增加;6hIL-8表达降低,9h进一步降低至基础水平;(2)未用TND-α孵育的内皮细胞核NF-κBp65免疫细胞化学染色呈阴性,NF-α孵育1,3h后NF-κBp65免疫细胞化学染色呈阳性,6h时后呈弱阳性,9h后呈阴性。提示TNF-α可诱导内皮细胞表达IL-8并可激活内皮细胞内NF-κB,二者的时相过程基本一致。作者认为TNF-α诱导IL-8在内皮细胞内表达可能与转录因子NF-κB的激活有关。     

α-黑色素细胞刺激素对ECV304细胞产生促炎因子的调节作用

研究α-黑色素细胞刺激素（α—MSH）对人脐静脉内皮细胞系ECV304细胞产生促炎因子的调节作用，探讨α—MSH的抗炎与免疫调节机制。用不同浓度α—MSH处理ECV304细胞，或在LPs／TNF-α处理的同时加不同浓度的α—MSH培养ECV304细胞。用ELISA检测上清中TNF-α和IL-8，以Greiss法测定NO，RT-PCR检测组织因子（TF）mRNA，Western blot检测TF蛋白表达。结果显示，α-MSH抑制ECV304细胞产生NO、TNF-α，但促进IL-8的释放。LPS或TNF-α能上调ECV304细胞表达TFmRNA，而α—MSH抑制这种上调作用，并抑制ECV304细胞表达TF蛋白。上述结果提示α—MsH可通过调节血管内皮细胞表达促炎因子而发挥抗炎和免疫调节作用。     

IL-18BP重组蛋白对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞的作用研究

目的探讨人重组白细胞介素-18结合蛋白(rhIL-18BP)对肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导的内皮细胞炎症、凋亡的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),用20 ng/ml的TNF-α和不同质量浓度的rhIL-18BP孵育相应时间,提取mRNA并用PCR及实时定量PCR检测细胞因子(IL-6、IL-8)、黏附分子(ICAM-1、VCAM-1)的mRNA表达;ELISA法检测细胞上清液中细胞因子(IL-6、IL-8)、可溶性黏附分子(sICAM-1、sVCAM-1)的蛋白含量;流式细胞术检测细胞凋亡的变化。结果 1)IL-18BP可以抑制TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞中炎症因子的表达;2)IL-18BP能抑制TNF-α诱导的HUVECs的凋亡。结论 rhIL-18BP对TNF-α诱导的内皮炎症反应有抑制作用,并可以抑制TNF-α诱导的内皮细胞凋亡。     

咪喹莫特对朗格汉斯细胞及角质形成细胞细胞因子mRNA表达及分泌水平的影响

目的 观察咪喹莫特（Imiquimod）溶液对人表皮朗格汉斯细胞（LC）及永生化角质形成细胞（KC）株-HaCaT细胞细胞因子mRNA及分泌水平的影响，探讨其免疫调节机制。方法 联用密度梯度离心及免疫磁珠法分离纯化人表皮LC，将LC及HaCaT细胞均各分为实验组和对照组，实验组加5μg/ml咪喹莫特，对照组不加药，处理4h后，提取总RNA，采用RT-PER法分别检测各组细胞中细胞因子TNF-α、IL-1β及11,-6 mRNA的表达量，取培养上清，用ELISA方法检测3种细胞因子的含量。结果 LC实验组TNF-α、IL-1β及IL-6 3种细胞因子mRNA表达量及分泌量均较对照组显著增高（P〈0．05），而HaCaT细胞组加药后3种细胞因子mRNA表达量及分泌量较对照组未见明显增加（P〉0．05）。结论 5μg/ml咪喹莫特溶液能增加LC细胞因子TNF-α、IL-1β及IL-6的mRNA表达量，但其对HaCaT细胞上述3种细胞因子mRNA表达量均未见有明显上调作用。     

粘附分子在过敏性紫癜患者血管内皮细胞中的作用探讨

目的：探讨粘附分子在过敏性紫癜血管炎性损伤中的作用及可能的调节机制。方法：建立人脐静脉内皮细胞（human umbilical veins endothelial cell，HUVEC）体外培养模型，ELISA双抗体夹心法检测过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞（PBMC）培养上清液炎性细胞因子IL-6、TNF-α的含量。采用流式细胞仪间接荧光免疫法检测PBMC及其所诱导的HUVEC粘附分子的表达；MTT生物活性检测法测定PBMC与HUVEC间的粘附率。结果：过敏性紫癜患儿PBMC及其培养上清可诱导内皮细胞表面粘附分子表达明显增强，PBMC与内皮细胞间的粘附率明显提高，上述粘附作用可被抗粘附分子抗体明显阻断。同时IL-6、IL-1β、TNF-α等炎性细胞因在过敏性紫癜患儿外周血中异常升高，用抗细胞因子的单克隆抗体可明显阻滞过敏性紫癜患儿外周血免疫活性细胞及其所诱导的局部血管内皮细胞上粘附分子的表达和内皮细胞与PBMC间相互粘附作用。结果：（1）粘附分子通过介导全身循环中的免疫效应细胞粘附于血管内皮细胞，在过敏性紫癜血管损伤的病理生理机制中起重要作用。（2）IL-6、IL-1β、TNF-α等炎性细胞因子可能作为过敏性紫癜血管损伤的重要环节，在诱生免疫活性细胞及血管内皮细胞多种粘附分子的表达、介导免疫活性细胞向血管局部聚集及进一步向血管深层浸润最终导致内皮细胞损伤中起重要作用。     

α-黑色素细胞刺激素对ECV304细胞产生促炎因子的调节作用

研究α-黑色素细胞刺激素(α-MSH)对人脐静脉内皮细胞系ECV304细胞产生促炎因子的调节作用,探讨α-MSH的抗炎与免疫调节机制。用不同浓度α-MSH处理ECV304细胞,或在LPS/TNF-α处理的同时加不同浓度的α-MSH培养ECV304细胞。用ELISA检测上清中TNF-α和IL-8,以Greiss法测定NO,RT-PCR检测组织因子(TF)mRNA,Westernblot检测TF蛋白表达。结果显示,α-MSH抑制ECV304细胞产生NO、TNF-α,但促进IL-8的释放。LPS或TNF-α能上调ECV304细胞表达TF mRNA,而α-MSH抑制这种上调作用,并抑制ECV304细胞表达TF蛋白。上述结果提示α-MSH可通过调节血管内皮细胞表达促炎因子而发挥抗炎和免疫调节作用。     

乳杆菌对TNF-α诱导Caco-2细胞分泌IL-6和IL-8的影响

目的 研究嗜酸乳杆菌对TNF-α诱导Caco-2细胞表达细胞因子IL-6和IL-8的影响.方法 将嗜酸乳杆菌L050103-12与Caeo-2细胞共孵育,加入TNF-α-起温育2 h,收集细胞培养上清,ELISA检测IL-6和IL-8的水平;提取细胞总RNA,采用RT-PCR的方法检测IL-6和IL-8 mRNA的表达.结果 加入TNF-α(10 ng/ml)温育2 h后,与对照组相比,Caco-2细胞IL-6和IL-8的mRNA表达显著增强.IL-6和IL-8的分泌水平也显著增高(P＜0.01).提前给予嗜酸乳杆菌1950103-12与Caco-2细胞共孵育,与TNF-α处理组相比,TNF-α诱导Caco-2细胞IL-6和IL-8 mRNA表达相对减弱(P＜0.05),IL-6和IL-8的分泌水平也显著降低(P＜0.01).单独给予嗜酸乳杆菌1950103-12处理Caco-2细胞,其IL-6和IL-8 mRNA表达以及分泌与对照组相比,均无变化.结论 嗜酸乳杆菌1950103-12可以抑制TNF-α诱导Caco-2细胞表达促炎性细胞因子IL-6和IL-8.     

DENV-2感染的HUVECs与调节性T细胞相互作用对主要炎性细胞因子产生的影响北大核心CSCD

目的研究人原代脐静脉内皮细胞（primary human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）被登革病毒2型（DENV-2）感染后,与调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）共培养,HUVEC与Treg细胞相互作用对各自主要炎性细胞因子的影响。方法用密度梯度离心法从人浓缩白细胞分离外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）,磁珠阴性分选Treg细胞,流式细胞术检测CD4＋CD25＋CD127＋细胞纯度。HUVECs经DENV-2感染后,用Transwell与Treg细胞共培养,对照组用鞘氨醇-1-磷酸（sphingosine-1-phosphate, S1P）1型特异性受体激动剂CYM-5442预处理24 h去除药物后感染病毒,并与Treg细胞共培养,real-time RT-PCR分别检测HUVECs的IL-6、IL-8、TNF-α和Treg细胞的IL-10、TGF-β的mRNA转录水平;双抗体夹心ELISA法检测培养上清中上述细胞因子表达。结果感染后HUVECs中DENV-2 NS1基因转录水平逐渐上升,在24 h达到峰值（3.03±0.26,P〈0.01）后下降。流式细胞术检测经免疫磁珠阴性分选的Treg细胞纯度为（84.3±0.5）%。DENV-2感染后HUVECs的IL-6、IL-8、TNF-α mRNA转录均有上调,感染后24 h IL-6、IL-8、TNF-α的mRNA转录量分别为16.64±2.64、26.80±5.81和5.25±0.42,而未感染组的转录水平分别为1.70±0.68、1.68±0.74、1.45±0.15,与Treg共培养后上述细胞因子在各时间点的转录有所降低,但仍高于未感染DENV-2的对照组。CYM-5442预处理后被感染的HUVECs IL-6、IL-8、TNF-α的mRNA转录水平显著下降;共培养的Treg细胞所产生的IL-10、TGF-β也下调。结论被DENV-2感染的原代HUVECs能增强Treg细胞IL-10与TGF-β的分泌,同时Treg细胞产生的抑制性细胞因子能降低被感染的HUVECs炎性细胞因子的产生。     

碘化钠对人甲状腺细胞IL—6，IFN—γ和TNF—α基因表达的影响

本研究以10^-4M碘化钠（NaI)刺激单层培养的人Graves病（GD）甲状腺滤泡上皮细胞（TEC），采用定性及半定量PCR技术检测刺激前后白介素-6（IL-6）、γ-干扰素（IFN-γ）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在细胞中的表达水平。结果表明：（1）3例GD组织均含有IL-6及IFN-γmRNA,2例检测到TNF-α基因表达；（2）基础状态下，3例TEC均表达IL-6基础，2例表达TNF-α，而所有样本均无IFN-γmRNA;（3）NaI不能诱导TEC产生IFN-γmRNA，对IL-6mRNA的表达亦无明显影响；（4）1例TNF-α阴性的TEC样本，经NaI刺激后，可表达mRNA，2例原含有TNF-α的TEC经刺激后，其mRNA的表达水平显著增加。提示碘可通过诱导或增强TEC表达TNF-α，导致自身免疫性甲状腺疾病的发生与发展。     

通痹灵总碱对LPS(脂多糖)刺激后的巨噬细胞产生炎性细胞因子的影响

目的：观察中药通痹灵（TBL）的有效部位-总生物碱对LPS（脂多糖）刺激后的巨噬细胞产生炎性细胞因子IL-1β、TNF-α的影响。方法：培养人类单核白血病细胞系——THP-1细胞，在PMA（Phorbol 12-mmstate 13-acetate）作用下分化为巨噬细胞。体外用LPS（Lipopolysaccharide）刺激分化的巨噬细胞，以MTX（甲氨喋呤）作为对照，培养有药物作用的细胞24小时后检测细胞上清液中炎性细胞因子IL-1β、TNF-α含量并用PR-PCR（逆转录-聚合酶链式反应）半定量测定IL—1β mRNA、TNF-α mRNA的表达。结果：LPS刺激PMA分化后的THP—1细胞，其IL-1β、TNF—α含量明显升高（与正常组比较P〈0．01），不同浓度的通痹灵总碱（200、100、50、25mg／L）及MTX明显抑制IL—1β、TNF-α的产生（P〈0．01），并下调IL-1β mRNA、TNF-α mRNA的表达。结论：通痹灵总碱抑制巨噬细胞分泌炎性细胞因子IL-1β、TNF-α，进而抑制了一系列免疫炎症反应造成的病理损伤。     

TNF—a对内皮细胞白介素—8基因表达的影响

IL-8作为一种趋化细胞因子在炎症反应中具有重要作用，其在内皮细胞内的表达受多种细胞因子的调节。本文用TNF-a孵育培养的人脐静脉内皮细胞不同时间后，用RT-PCR法检测内皮细胞内IL-8mRNA的表达，并用免疫细胞化学染色法检测内皮细胞内NF-kB的激活。结果发现：（1）未用TNF-a孵育的内皮细胞IL-8表达量很少，TNF-a孵育1小时后IL-8表达明显增加，3h进一步增加；6h IL-8表达降低，9h进一步降低至基础水平；（2）未用TND-a孵育的内皮细胞核NF-kB p65免疫细胞化学染色呈阴性，NF-a孵育1，3h后NF-kB p55免疫细胞化学染色呈阳性，6h时后呈弱阳性，9h后呈阴性。提示：TNF-a可诱导内皮细胞表达IL-8并可激活内皮细胞内NF-kB，二者的时相过程基本一致。作者认为TNF-a诱导IL-8在内皮细胞内表达可能与转录因子NF-kB的激活有关。     

IL-2等6种细胞因子与儿童支气管哮喘关系的研究

观察急性发作期、激素治疗后缓解期支气管哮喘患儿血浆细胞因子的变化,探讨儿童支气管哮喘与细胞因子的关系。采用免疫分析技术对64例急性发作期支气管哮喘患儿、45例缓解期患儿及20例正常儿童血浆IL-2、sIL-2R、IL-4、IL-5、IL-8、TNF-α、IgE等细胞因子水平进行测定;用逆转录聚合酶键反应技术（RT-PCR）对外周淋巴细胞IL-4、IL-5mRNA表达进行定量分析。结果:（1）发作期哮喘患儿血浆IL-2、sIL-2R、IL-4、IL-5、IL-8、TNF-α和IgE水平均明显高于正常对照组（P值均<0.001）,以IL-4、IL-5和IgE变化最为明显,缓解期均明显下降,但IL-4、IL-5及IgE水平仍高于正常水平（P<0.01）。（2）发作期患儿外周淋巴细胞IL-4、IL-5mRNA表达增强,治疗缓解后减弱,同时血浆IL-4、IL-5分别与IL-4、IL-5mRNA呈明显正相关关系。结论:（1）本研究结果提示细胞因子的释放与哮喘的发作密切相关。（2）外周淋巴细胞IL-4、IL-5强表达以及血浆IL-4、IL-5高水平提示哮喘发作期Th2亚群的激活;同时IL-8和TNF-α的升高表明中性粒细胞和单核巨噬细胞可能参与哮喘的发作。（3）糖皮质激素抑制多种细胞因子的释放,可能是其治疗哮喘的主要机制。     

孕酮和骨化三醇通过miR-590-5p靶向RelA调控子宫内膜癌细胞Ishikawa的 细胞因子分泌

目的：探讨孕酮和骨化三醇抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa细胞因子分泌的分子机制。方法：孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞，检测细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1及CXCL2的mRNA水平，NF-κB亚基RelA、RelB、c-Rel、p50、p52蛋白水平。荧光素酶报告检测RelA启动子活性。高通量测序检测孕酮和骨化三醇处理Ishikawa细胞后miRNA表达差异。过表达孕酮和骨化三醇共同调控的差异miRNA，检测RelA表达。结果：孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞后，细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2分泌水平和表达均显著降低（P<0.05）,NF-κB亚基RelA表达下调，NF-κB亚基RelB、c-Rel、p50、p52表达无改变。孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞，RelA启动子活性变化差异无统计学意义（P>0.05），但RelA mRNA水平降低（P<0.05）。孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞后，有110种miRNAs表达上调，骨化三醇处理后有57种miRNAs表达上调，其中14种miRNAs...     

血管紧张素Ⅱ1型受体在脂多糖诱导RAW264.7巨噬细胞促炎性细胞因子产生中的作用

目的 探讨血管紧张素Ⅱ1型受体在脂多糖（LPS）诱导巨噬细胞促炎性细胞因子产生中的作用和机制.方法 按照随机数字表法将小鼠单核巨噬细胞株（RAW264.7）细胞分为空白对照组、ZD7155组、LPS组和LPS ＋ZD7155组.酶联免疫吸附试验法（ELISA）测定各组细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的含量,逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测RAW264.7细胞内TNF-α和IL-1β mRNA表达,凝胶电泳迁移检测法（EMSA）检测RAW264.7细胞内核因子-κB（NF-κB）和活化蛋白-1（AP-1）活性的变化.结果 和空白对照组相比,ZD7155组培养上清液中的TNF-α和IL-1β含量差异没有统计学意义（P＞0.05）,但是LPS组细胞培养上清液中的TNF-α和IL-1β含量均显著高于空白对照组（均P〈0.01）和ZD7155组（均P〈0.05）.LPS组细胞内的TNF-α和IL-1β mRNA表达是空白对照组的2.19倍（P〈0.01）和1.77倍（P〈0.01）,细胞内NF-κB和AP-1活性是空白对照组的1.43倍（P〈0.01）和1.90倍（P〈0.01）.而LPS＋ZD7155组上清液中的TNF-α和IL-1β含量较LPS组下降（均P〈0.05）,细胞内TNF-α和IL-1β mRNA表达较LPS组下降了34.7%（P〈0.01）和49.72%（P〈0.01）,同时细胞内NF-κB活性和AP-1活性较LPS组下降了46.15%（P〈0.05）和48.42%（P〈0.05）.结论 血管紧张素Ⅱ1型受体通过活化转录因子NF-κB和AP-1,参与了LPS诱导巨噬细胞促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β的产生和释放.     

休克淋巴液对肠系膜微淋巴管内皮细胞炎症介质表达的影响

目的：观察休克淋巴液对大鼠肠系膜微淋巴管内皮细胞（MMLEC）诱生型一氧化氮合酶（iNOS）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）表达的影响，探讨休克淋巴液损伤MMLEC的机制。方法：正常大鼠MMLEC原代培养，应用第三代MMLEC进行研究。无菌条件下复制大鼠重症失血性休克模型（血压40 mmHg，维持90 min），引流休克时肠淋巴液及门静脉血，并以正常肠淋巴液、门静脉血作为对照。以4%终浓度的休克淋巴液作用MMLEC 6 h，以休克血浆、正常淋巴液、正常血浆、胎牛血清（FBS）、DMEM培养液作为对照。提取MMLEC的cDNA，RT-PCR检测iNOS、TNF-α及IL-6 mRNA的表达；同时检测培养上清液MDA、NO、TNF-α及IL-6含量的变化。结果：4%终浓度的休克淋巴液作用6 h后，MMLEC的iNOS、TNF-α、IL-6 mRNA表达以及培养上清液MDA、NO、TNF-α和IL-6水平显著高于正常淋巴液组、休克血浆组、正常血浆组、FBS组以及DMEM组；且休克血浆作用MMLEC 6 h后的iNOS、TNF-α、IL-6 mRNA表达以及培养上清液的MDA、NO、TNF-α及IL-6水平显著高于正常淋巴液组、正常血浆组、FBS组以及DMEM组。结论：休克淋巴液可使大鼠MMLEC的 iNOS、TNF-α及IL-6 mRNA表达增强，促进自由基释放，从而诱导细胞损伤。     

孕酮调节小鼠脾脏CD11c阳性树突状细胞白细胞介素和TNF-α的表达

目的 在mRNA水平上探讨性激素孕酮(Prog)对小鼠脾脏CD11c阳性树突状细胞(SDCs)合成的细胞因子IL-6、IL-10、IL-12和TNF-α的影响. 方法 采用免疫磁珠法分选小鼠CD11c阳性SDCs,用不同浓度的Prog处理SDCs 24h,采用RT-PCR在mRNA水平上检测SDCs合成细胞因子的变化. 结果 中浓度的Prog上调IL-6和IL-10的表达而高浓度则降低表达;各浓度组的Prog可上调细胞因子IL-12的水平而降低TNF-α的表达. 结论 Prog可能通过影响SDCs合成的细胞因子进而调控机体的免疫反应,低、中浓度的Prog使机体的免疫应答向Th2倾斜,而高浓度的Prog推动机体内的免疫反应向Th1型转变.     

miR-181b在动脉粥样硬化血管中的表达及对H2O2诱导的血管内皮细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨miR-181b在动脉粥样硬化血管中的表达及miR-181b对H2O2诱导的血管内皮细胞增殖与凋亡的影响.方法 qPCR法检测动脉粥样硬化模型组小鼠主动脉和H2O2诱导的血管内皮细胞中miR-181b的表达情况;酶联免疫法检测miR-181b对鼠血清中TNF-α、IL-6和IL-10含量的影响;克隆形成实验检测miR-181b对H2O2诱导的血管内皮细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测miR-181b对H2O2诱导的血管内皮细胞凋亡能力的影响;qPCR和Western blot法检测miR-181b对主动脉和H2o2诱导的血管内皮细胞中Caspase-3、Bax和Bcl-2 mRNA和蛋白表达的影响.结果 miR-181b在动脉粥样硬化模型组小鼠主动脉和H2O2诱导的血管内皮细胞表达水平显著下调,血清中TNF-α、IL-6含量均增加,IL-10含量减少;过表达miR-181b使小鼠血清中TNF-α、IL-6含量均减少(P＜0.05),IL-10含量增加(P＜0.05).与对照组比较,H2O2诱导的血管内皮细胞的增殖能力显著下降,凋亡能力显著提高,miR-181b过表达使血管内皮细胞增殖能力提高,凋亡能力下降;与对照组比较,动脉粥样硬化模型组小鼠主动脉和H2O2诱导的血管内皮细胞中Caspase-3、Bax的mRNA和蛋白表达水平均上调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平下调,miR-181b过表达使动脉粥样硬化模型组小鼠主动脉和H2O2诱导的血管内皮细胞中Caspase-3、Bax的mRNA和蛋白表达水平均下调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05).结论 miR-181b在动脉粥样硬化血管和H2O2诱导的血管内皮细胞中低表达,过表达miR-181b抑制细胞凋亡及促进细胞的增殖,可能在动脉粥样硬化的治疗中起到积极作用.     

慢性牙周炎龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌胶原酶水平与牙周病变程度的关系

目的 检测慢性牙周炎（chronic periodontitis，CP）患者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg）胶原酶基因prtC及其产物PrtC，了解PrtC水平与牙周病变程度的关系，确定PrtC诱导细胞分泌炎性细胞因子的作用。方法 采用SDS-PAGE检测原核表达系统重组PnC（rPrtC）表达和Ni-NTA亲和层析法提取的rPrtC纯度。rPrtC免疫家兔获得抗血清。建立多重PCR检测56例CP患者209牙位的龈下菌斑标本中Pg 16S rDNA和prtC基因。建立ELISA检测上述标本中的PrtC，并分析PrtC水平与牙周病变程度的关系。采用ELISA检测rPrtC诱导人脐静脉内皮细胞EVC-304分泌IL-1α、IL-8和TNF-α的作用。结果 rPrtC表达产量约占细菌总蛋白的50％。提纯的rPrtC SDS-PAGE后仅见单一的蛋白条带。96．1％（201／209）和92．3％（1931209）的龈下菌斑标本分别Pg 16S rDNA和prtC基因PCR阳性，91．4％的龈下菌斑标本（191／209）PrtC ELISA阳性。重度CP龈下菌斑标本中PrtC含量明显高于轻度和中度CP标本（P〈0．05），但轻度和中度、中度和重度四标本之间PrtC含量差异无统计学意义（P〉0．05）。1μg的rPrtC作用EVC-304细胞24h后，5和10μg的rPrtC作用EVC-304细胞12h后均可使EVC-304细胞分泌的IL-1α、IL-8和TNF-α水平明显增高（P〈0．05）。结论 Pg有很高的prtC基因携带率和表达率。CP牙周病变程度与龈下PrtC水平密切相关。rPrtC有直接诱导细胞合成并分泌IL-1α、IL-8和TNF-α的活性。     

ERK在LPS诱导大鼠雪旺氏细胞TNF-α表达中的作用

目的 研究细胞外信号调节激酶（ERK）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠雪旺氏细胞肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的作用。方法 采用Westernblot检测细胞中ERK激酶的活性；用ERK的特异性抑制剂（PD98059）预处理细胞后，ELISA检测细胞中TNF-α水平；RT-PCR检测细胞中TNF-α mRNA的表达；用免疫荧光双标法检测ERK的表达定位。结果 LPS可显著激活雪旺氏细胞中的ERK信号通路，其激活高峰在LPS刺激后30～45min，60min后ERK磷酸化水平开始逐渐下降；用PD98059预处理细胞后，可显著抑制细胞TNF-α以及TNF-α mRNA的产生；LPS刺激细胞后引起ERK磷酸化，PD98059可抑制该过程。结论 ERK信号通路的激活可能是LPS诱导TNF-α表达的前提。通过阻断细胞内信号转导通路来减少TNF-α及其他细胞因子的产生，为抑制周围神经损伤后的炎症以及免疫反应发生提供了一条新的思路。     

IL-18对肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的：研究IL-18对体外培养肾小管上皮细胞表型转化的影响，以明确IL-18在慢性肾脏疾病中的可能作用机制。方法：应用体外细胞培养技术培养人肾小管上皮细胞侏（HK-2）。应用RT-PCR技术检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA水平，用免疫细胞化学方法（ICC）及Western blot技术分别检测IL-18对HK-2细胞表达仪-SMA蛋白的影响。结果：（1）IL-18可促进HK-2细胞表达α-SMA、TGF-β1 mRNA，且两者之间呈正相关（P〈0．05）。（2）IL-18增加α-SMA阳性HK-2细胞百分数（P〈0．05）。（3）IL-18使HK-2细胞α-SMA蛋白表达水平增加。结论：IL-18可剂量和时间依赖性地促进肾小管上皮细胞转分化为肌成纤维细胞，促进肾间质纤维化。