高效液相色谱法及荧光偏振免疫法测定环孢素A血药浓度的比较

本文建立了特异性测定全血中环孢素Ａ（ＣｓＡ）的高效液相法（ＨＰＬＣ），并与荧光偏振免疫法（ＦＰＩＡ）比较，结果提示两法相关性好，回归方程ＦＰＩＡ值＝７５．６８＋２．６８ＸＨＰＬＣ值（Ｎ＝９４），ｒ＝０．９０５（Ｐ＜０．００１），ＨＰＬＣ法测定的是ＣｓＡ主药和代谢物，ＦＰＩＡ／ＨＰＬＣ值＞３．提示患者体内ＣｓＡ代谢物积蓄，肝功能异常。     

骨髓移植患者环孢环血药浓度的HPLC和PAFPIA法的比较

建立了一种专一性测定骨髓移植（ＢＭＴ）患者全血环孢素（Ｃｓ）主药浓度的高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法，并与非专一性测定Ｃｓ主药及代谢物二者总浓度的多抗荧光偏振免疫（ＰＡＦＰＩＡ）法比较，两者测定值，经ｔ检验具统计学极显著性差异；经相关与回归分析，呈线性关系，方程为：ＹＦＡＦＰＩＡ＝２．５９ＸＨＰＬＣ＋３７．３５，ｒ＝０．９２４７，ｎ＝５３。建议：监测ＢＭＴ患者Ｃｓ时，既要采用ＰＡＦＰＩＡ法，又要采用Ｈ     

高效液相色谱法及荧光偏振免疫法测定不孢素A血药浓度的比较

本文建立了特性测定全轿中环孢素Ａ（ＣｓＡ）的高效液相法（ＨＰＬＣ），并与荧光偏振免疫法（ＦＰＩＡ）比较，结果提示两法相关性好，回归方程ＦＰＩＡ值＝７５．６８＋２．６８ＸＨＰＬＣ值（Ｎ＝９４），ｒ＝０．９０５（Ｐ＜０．００１），ＨＰＬＣ法测定的是ＣｓＡ主药和代谢物，ＦＰＩＡ／ＨＰＬＣ值＞３，提示患者体内ＣｓＡ代谢物积蓄，肝功能异常。     

高效液相色谱法与紫外法测定慢性阻塞性肺病患者茶碱血药浓…

本文用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）和双波长紫外分光光度法（ＵＶ）平行测定了２１例慢性阻塞性肺病（ＣＯＰＤ）患者的血清茶碱浓度，共１２３例次，两种方法之间有良好的线性关系（ｒ＝０．９７６１，Ｐ〈０．０１），但ＵＶ法较ＨＰＬＣ法测得的血清茶碱浓度低（△Ｃ＝－０．６±１．６ｍｇ／Ｌ，ｎ＝１２３，Ｐ〈０．０５），药物动力学研究表明：两种方法所得药－时曲线均符合一房室模型，血药浓度的差异并不影响茶碱的主要药动     

肝功能对环孢素血药浓度影响的监测

６０位肾移植术后病人的１０８份ＣｓＡ血样用特异性单克隆（ＭＡＦＰＩＡ）和非特异性多克隆荧光免疫偏振分析法（ＰＡＦＰＩＡ）进行测定。结合肝脏功能与术后时间，观察药物浓度的变化。ＭＡＦＰＩＡ和ＰＡＦ－ＰＩＡ两种检测方法之间有线性关系（ｒ＝０．８９２６），二者的测得值具统计学非常显著性差异。肝功能异常的患者ＰＡＦＰＩＡ／ＭＡＦＰＩＡ比值以及回归曲线参数与肝功能正常的患者相比有明显差异，表明肝功能异常的患者ＣｓＡ的代谢产物在体内蓄积而使得检测结果偏高。术后时间对药物浓度变化有一定的作用。术后近期（１０ｄ内）与术后３～７ｗｋ服用等同剂量的ＣｓＡ，血药浓度有明显差异，说明对于肾移植术后服用ＣｓＡ的患者，应持续、定期地进行药物浓度的监测。     

用兔血小板膜受体筛选血小板激活因子（TAF）拮抗剂

在兔血小板膜中，血小板激活因子（ＰＡＦ）结合部位显示高度亲合性（Ｋｄ＝０．１±０．００７ｎｍｏｌ／Ｌ）、饱和性、显著的药理学特异性，其最大结合容量为２．８９±０．３２ｐｍｏｌ／ｍｇ蛋白。３Ｈ－ＰＡＦ饱和结合浓度为０．２ｎｍｏｌ／Ｌ。等温线表明为单一结合位点。红曲霉（Ｍｏｎａｓｃｕｓｓｐ．Ｆ４００）代谢产物中的小成份Ｄ（２Ａ）和Ｃ（４Ａ）与ＰＡＦ竞争受体结合部位，它们是ＰＡＦ的拮抗剂。Ｄ２Ａ的ＩＣ５０为３．１６×１０－５ｍｏｌ／Ｌ，Ｃ４Ａ的ＩＣ５０为３．０３×１０－５ｍｏｌ／Ｌ。     

Serum α_1-acid glycoprotein,sialic acid,and protein binding of disopyramide in normal subjects and cardiac patients

目的：研究日本人充血性心力衰竭（ＣＨＦ）和急性心肌梗塞（ＡＭＩ）病人对血清α１酸性糖蛋白（ＡＧＰ）、唾液酸（ＳＡ）浓度及ＡＧＰ与丙吡胺（Ｄｉｓ）结合的影响．方法：对正常人、ＣＨＦ及ＡＭＩ患者血清样本９７例，采用免疫化学法测定ＡＧＰ浓度，高效液相层析法测定ＳＡ浓度及超滤膜技术和高效液相层析法测定Ｄｉｓ的体外游离浓度．结果：ＣＨＦ及ＡＭＩ患者血清ＡＧＰ浓度较正常人升高．Ｄｉｓ药物游离浓度降低．血清ＳＡ浓度的变化与血清ＡＧＰ浓度的变化趋势一致．结论：ＣＨＦ和ＡＭＩ病人血清药物游离浓度受血清ＡＧＰ结合的影响而变化，应进行临床监测．     

高血压和高血压合并冠状动脉疾病患者的左心功能

对３２例高血压和高血压合并冠状动脉疾病（ＣＡＤ）的患者应用γ心功能仪做了左心功能测定。结果表明，高血压患者和左心室射血分数（ＬＶＥＦ）明显高于正常人和高血压合并ＣＡＤ的患者（６２．４±９．２ｖｓ５１．７±６．８，Ｐ〈０．０５，６２．４±９．９ｖｓ４２±１５，Ｐ〈０．０１）。高血压与正常人组其高峰充盈率（ＰＦＲ）差别不显著（２．４５±０．５２ｖｓ２．２７±０．４５，Ｐ〉０．０５），而高血压合并ＣＡＤ     

六项放免检测在NIDDM患者诊断早期肝损伤的临床应用

对３９ 例ＮＩＤＤＭ 患者采用放射免疫法（ＲＩＡ）进行甘胆酸（ＣＧ）、透明质酸（ＨＡ）、分泌型免疫球蛋白Ａ（ｓＩｇＡ）、甲胎蛋白（ＡＦＰ）、铁蛋白（ＳＦ）、及癌胚抗原（ＣＥＡ）联合测定。以５１例健康人血清作对照。结果显示：ＮＩＤＤＭ患者血清ＳＦ、ＣＧ、ｓｌｇＡ与对照组比较有显著差异（Ｐ＜ ０．０１）;血清ＨＡ与对照组比较差异明显（Ｐ＜ ０．０５）;血清ＡＦＰ、ＣＥＡ则无差异（Ｐ＞ ０．０５）。检测结果说明对ＮＩＤＤＭ 患者血清ＳＦ、ＣＧ、ｓＩｇＡ、ＨＡ测定对诊断早期肝损伤具有可靠的临床价值。     

口服茶碱缓释胶囊的药物动力学

采用荧光偏振免疫法（ＦＰＩＡ），对１２名老年慢性阻塞性肺病（ＣＯＰＤ）患者口服单剂量和多剂量茶碱缓释胶囊（ＰＴ）测定经时血药浓度并计算药物动力学参数。结果表明，单剂量组口服ＰＴ后Ｔｍａｘ＝７．０±６．０ｈ，Ｃｍａｘ＝６．８±２．６ｍｇ·Ｌ－１；多剂量组连续口服ＰＴ后Ｔｓｓｍａｘ＝４．０±１．８ｈ，Ｃｓｓｍａｘ＝１６．５±２．６ｍｇ·Ｌ－１。     

骨髓移植患者环孢素血药浓度的HPLC和PAFPIA法的比较

建立了一种专一性测定骨髓移植(BMT)患者全血环孢素(Cs)主药浓度的高效液相色谱(HPLC)法,并与非专一性测定Cs主药及代谢物二者总浓度的多抗荧光偏振免疫(PAFPIA)法比较。两者测定值,经t检验具统计学极显著性差异(P<0.01);经相关与回归分析,呈线性关系,方程为:Y_(PAFPIA)=2.59X_(HPLC) 37.35,r=0.9247,n=53(P<0.01)。建议:监测BMT患者Cs时,既要采用PAFPIA法,又要采用HPLC法。PAFPIA/HPLC比值的实际意义:通过该比值的变化,可了解肝功能异常或Cs与药酶诱导剂或抑制剂合用时对BMT患者Cs代谢及排泄的影响程度,籍以调整治疗方案,以防治移植物抗宿主病(GVHD)。     

单克隆荧光偏振免疫法和高效液相色谱法测定环孢素A全血浓度的相关性

目的比较单克隆荧光偏振免疫法（FPIA—m法）和高效液相色谱（HPLC）法测定环孢素A（CsA）全血浓度的相关性。方法分别采用HPLC法和FPIA—m法测定42份肾移植患者的CsA血样，测定值用t检验和线性回归方法进行分析。结果FPIA—m法与HPLC法测定值之间相关性好；回归方程为CF=78．12＋1．21CH，r=0．9893（P〈0．001）。结论FPIA—m法和HPLC法同属于特异性分析法，FPIA—m法测定值均高手HPLC法。     

A radioreceptor assay for the measurement of cyclosporine activity: a preliminary report

Cyclosporine A (CsA) is extensively metabolized in the liver. Some of the known metabolites share immunosuppressive properties with the parent drug. Furthermore, CsA therapy is used in an increasing number of clinical conditions, some of which affect the pharmacokinetics of the drug. At this time, it is not yet known if CsA or its metabolites are responsible for the nephrotoxicity or hepatotoxicity observed in some individuals. Some high-performance liquid chromatography (HPLC) and monoclonal immunoassay procedures measure parent drug and not the pharmacologically active metabolites, while polyclonal immunoassays and nonspecific monoclonal antibody immunoassays measure both parent drug and metabolites. However, it is unlikely that the degree of cross-reactivity with metabolites correlates with their immunosuppressive effect. To overcome these drawbacks, we have developed a method of measuring CsA activity in whole blood using specific receptors from the cytosol of human mononuclear leukocytes that have been semipurified through ultracentrifugation. The basis of the procedure is the competitive binding at specific receptor(s) between a constant concentration of [3H]dihydrocyclosporine and the variable concentrations of cyclosporine and its pharmacologically active metabolites in whole blood. Comparisons between six different assays (three specific, two nonspecific, and the receptor assay) were made. Overall, the two specific radioimmunoassay procedures correlated well to HPLC, while correlation of the two nonspecific immunoassay procedures to HPLC was poor. Poor correlation was also found to exist between the radioreceptor assay and the nonspecific assays, indicating that the cytosolic binding of CsA and its metabolites cannot be correlated to currently available assays.     

EMIT法与HPLC法测定人血浆中环孢素A浓度的比较研究

目的:比较酶放大免疫(EMIT)法和高效液相色谱(HPLC)法测定人血浆中环孢素A(CsA)浓度的区别与相关性。方法:收集肾移植患者服药后的稳态谷浓度血样20份,分别用EMIT法和HPLC法进行测定,考察2种测定方法的区别和相关程度。结果:HPLC法和EMIT法检测的CsA血药浓度差异有统计学意义(P<0.05),EMIT法测定血浆中CsA浓度较HPLC法高26.4ng·mL-1,通过Passing-Bablok回归分析2种方法具有良好的相关性(r=0.9940)。结论:EMIT法和HPLC法测定CsA血浆药物浓度结果差异具有统计学意义,在临床进行CsA药物浓度监测中应予以关注并作相应调整。     

RP-HPLC法测定肾移植患者全血中环孢素A的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法测定肾移植患者全血中环孢素A(CsA)浓度的方法。方法:采用单步萃取法提取,以反相高效液相色谱法测定,其中色谱柱为C8,流动相为乙腈-甲醇-水(45∶30∶25),流速为1.2mL·min-1,检测波长为210nm,柱温为60℃。结果:全血中CsA的检测浓度在50～600ng.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9997);方法平均回收率为99.44%,日内、日间RSD均<4%;当S/N≥3时,方法的最低检测限为10ng.mL-1。结论:本方法准确、专一、回收率高、受代谢物干扰少、相对成本较低,可用于临床血药浓度检测及药动学研究。     

A preliminary study to evaluate an in vitro assay for determining patient whole blood immunosuppressive cyclosporine A and metabolite activity: comparison with cytosolic binding assays using cyclophilin or a 50-kilodalton binding protein, and the Abbott TDx cyclosporine A parent, and parent and metabolites assays.

Thirty-five allograft recipients undergoing cyclosporine A (CsA) therapy were randomly selected to evaluate a "novel" in vitro assay that determines CsA and metabolite immunosuppressive activity in whole blood. The assay uses a third party mixed lymphocyte culture (MLC) system to which patient whole blood extracts containing CsA and metabolites are added. The ability of the extracted CsA and metabolites to inhibit proliferation in this system is proportional to the immune suppressive activity in whole blood. Comparison of the MLC suppression assay against Abbott TDx parent, TDx parent and metabolites, and radioreceptor assays utilizing cyclophilin or a 50-kDa binding protein isolated from JURKAT cytosol gave the following correlation coefficients: r = 0.612, r = 0.672, r = 0.362, and r = 0.775, respectively.     

地奥心血康在兔体内对环孢素药动学的影响

目的: 研究地奥心血康(DAX)对环孢素(CsA)血药浓度及其药动学参数的影响.方法: 采用高效液相色谱法(HPLC)对单用CsA(组Ⅰ)及DAX与CsA合用(组Ⅱ)后家兔体内CsA全血浓度进行测定,并对两组药动学参数进行统计学分析.结果: DAX可使CsA的 Cmax、AUC显著增大(P＜0.05),其余药动学参数无显著变化.结论: CsA与DAX合用时,需对CsA进行血药浓度监测.     

HPLC法与荧光偏振免疫法检测血样中环孢素A浓度的比较研究

目的:比较高效液相色谱(HPLC)法与荧光偏振免疫法检测血样中环孢素A(CsA)浓度的结果,评价HPLC法测定CsA血药浓度的临床实用性。方法:在HPLC系统和荧光偏振免疫分析仪上检测20对血样,对比检测结果。结果:HPLC系统和荧光偏振免疫分析仪检测CsA血药浓度有显著性差异,HPLC系统测定的结果偏低,但相关性良好(r=0.9952)。结论:HPLC系统和荧光偏振免疫分析仪检测CsA结果间的换算公式有助于临床了解方法改变后检测结果的差异,但HPLC法的检测值要对比相应的参考值才有较强的临床指导作用。     

环孢素A血药浓度测定方法的比较

本文建立了特异性测定全血中环孢素A(CsA)的高效液相法(HPLC),并与荧光偏振免疫法(FPIA)比较,结果提示两法相关性好,回归方程FPIA值=75.68+2.68×HPLC值(N=94),r=0.905(p<0.001),HPLC法测定的是GsA主药,具有更强的专一性,FPIA法同时测定GsA主药和代谢物,FPIA/HPLC值>3,提示患者体内CSA代谢物积蓄,肝功能异常。     

酶放大免疫法与荧光偏振免疫法检测环孢素A血药浓度对比研究

目的比较酶放大免疫法（EMIT）和荧光偏振免疫法（FPIA）检测人全血中环孢素A（CsA）质量浓度的相关性。方法收集肝移植患者服药后的稳态谷浓度血样78份,分别用TDx—FLx血药浓度测定仪和Viva—E血药浓度分析仪进行检测,测定值用线性回归分析和配对样本t检验进行对比研究。结果两种方法测定的CsA血药浓度无显著性差异,相关性良好（r=0．9809）,线性回归方程为Y=1．0313X-11．268。结论应用Viva—E血药浓度分析仪检测患者全血中CsA的质量浓度准确、可靠。在无TDx—FLx血药浓度测定仪时,Viva—E血药浓度分析仪可作为测定CsA血药浓度的常规仪器。