子宫肌层中大电导钙激活钾通道的表达与分娩发动的关系

人类的分娩发动机制复杂,其动因尚不清楚.研究发现足月妊娠子宫平滑肌中的钾离子通道的开放和失活可调控子宫的舒张状态,这一机制在分娩中有重要作用[1].而在未妊娠和妊娠子宫平滑肌细胞中,大电导钙激活钾通道(large conductance Ca2+-activated K+-channel,BKCa)是最主要的钾通道[2],因为其电导大,表达密度高,所以在调节子宫肌细胞膜静息电位和细胞兴奋性中发挥重要作用.     

K+通道亚型Kv1.1在卵巢癌细胞增殖中的作用

K+通道是细胞膜上种类最多、分布最广的一类离子通道.近年来的研究发现,细胞膜K+通道结构和功能的异常在细胞癌变、侵袭和转移相关的信号传导、基因表达等方面起重要作用[1].目前,对K+通道与人体肿瘤细胞增殖关系的研究主要集中于结肠癌、肺癌、乳腺癌、黑色素瘤、前列腺癌等恶性肿瘤[2].     

K+通道亚型Kv1.1在卵巢癌细胞增殖中的作用

K+通道是细胞膜上种类最多、分布最广的一类离子通道.近年来的研究发现,细胞膜K+通道结构和功能的异常在细胞癌变、侵袭和转移相关的信号传导、基因表达等方面起重要作用[1].目前,对K+通道与人体肿瘤细胞增殖关系的研究主要集中于结肠癌、肺癌、乳腺癌、黑色素瘤、前列腺癌等恶性肿瘤[2].     

K+通道亚型Kv1.1在卵巢癌细胞增殖中的作用

K+通道是细胞膜上种类最多、分布最广的一类离子通道.近年来的研究发现,细胞膜K+通道结构和功能的异常在细胞癌变、侵袭和转移相关的信号传导、基因表达等方面起重要作用[1].目前,对K+通道与人体肿瘤细胞增殖关系的研究主要集中于结肠癌、肺癌、乳腺癌、黑色素瘤、前列腺癌等恶性肿瘤[2].     

子宫平滑肌中双孔钾离子通道TREK-1研究进展

TREK-1(TWIK-related K~+ channel)是双孔钾离子通道(K2p)家族的重要成员,可以被机械刺激、脂质分子、细胞膜内外pH值变化等有效激活。近年研究表明,TREK-1表达于子宫平滑肌细胞,调节妊娠期子宫平滑肌舒缩功能。本文就此研究进展及TREK-1的功能结构做一综述。     

妊娠期糖尿病与磺脲类药物受体基因多态性的相关性

磺脲类药物受体(SUR1)本身或其中一部分就是K+内流通道(kir),SUR1基因定位于距胰岛素基因很近的位置,提示SUR1基因变异可导致胰岛素分泌异常.近来发现SUR1基因多态性与2型糖尿病(T2DM)及妊娠期糖尿病(GDM)的遗传易感性相关,即具有SUR1某等位基因型的人群比其它基因型更易发展为T2DM及GDM.     

子宫内膜癌HEC-1A细胞中电导钙激活性K+通道的电生理特性及其在细胞增殖中的作用

子宫内膜癌是妇科常见的恶性肿瘤,严重威胁着妇女的身心健康,随着全球妇女人均寿命的延长、雌激素治疗的日益增多等因素的存在,其发生率呈上升趋势.但子宫内膜癌的发病机制不详,近年的研究发现,包括K+通道在内的离子通道在恶性肿瘤的发生、发展中具有重要的意义.本研究应用膜片钳技术、蛋白印迹(western blot)法、RNA干扰(RNAi)技术等来探讨子宫内膜癌细胞株HEC-1A细胞中电导钙激活性K+通道(KCa3.1)的电生理特性及其在细胞增殖中的作用.     

BKCa、SK3、TREK-1钾离子通道在晚孕大鼠子宫中的表达及功能研究

目的:探讨大电导钙激活钾通道(BKCa)、小电导钙激活钾通道(SK3)以及双孔钾离子通道(TREK-1)在非孕和晚孕大鼠子宫中的表达,以及对子宫舒缩功能的影响。方法:将SD大鼠分为非孕组(NP)和晚孕组(孕19天,LP),采用Western blot法和q PCR法检测非孕和晚孕大鼠子宫组织中3种收缩相关钾离子通道(BKCa、SK3、TREK-1)蛋白和基因表达水平。利用等长收缩实验,观察比较两组子宫肌条在缩宫素诱导下的收缩能力变化以及TREK-1通道抑制剂对晚孕组子宫肌条收缩能力的影响。结果:与非孕组比较,晚孕组子宫组织中3种收缩相关钾离子通道(BKCa、SK3、TREK-1)蛋白表达水平和基因表达水平显著提高(P0.05),晚孕组肌条在缩宫素诱导下的收缩力显著降低(P0.05)。TREK-1通道抑制剂L-甲硫氨酸可显著提高晚孕组子宫肌条收缩能力(P0.05)。结论:晚孕子宫静息状态的维持与BKCa、SK3以及TREK-1通道表达密切相关,TREK-1通道可能通过调节子宫收缩能力参与分娩发动。     

胎盘滋养细胞离子通道及其与子痫前期关系的研究进展

胎盘构成了母胎间物质交换的主要屏障。研究发现,在人类胎盘有氯离子通道、钙离子通道、钠离子通道和钾离子通道等的存在,这些通道与胎盘生理功能的调控密切相关,但其机制尚不清楚。目前离子通道功能改变与子痫前期关系的研究正在逐步开展。作者简要总结了胎盘离子通道研究的新进展,并讨论了离子通道与子痫前期可能的关系。     

哺乳动物及人精子的Ca~(2+)通道与顶体反应

在精子生理活动中 ,Ca2 +通道起重要作用。近年来 ,随着荧光探针 ,分子生物学以及电生理技术的飞速发展 ,人们更明确地认识到 Ca2 +通道的重要性 ,特别是在顶体反应中的作用 ,并对其功能性亚单位有了一定的了解。在参与精子顶体反应的众多 Ca2 +通道中 ,电压依赖性 Ca2 +通道倍受重视。同时 ,这些研究资料也可能为男性不育的治疗和避孕提供新的思路     

Ca2+及其通道与子宫内膜癌非基因转录效应关系的研究进展

子宫内膜癌是女性常见的三大恶性肿瘤之一,其发生、发展与高雌激素状态相关,多见于老年妇女,近年来发病有升高趋势.过去认为,子宫内膜癌发病机制是雌激素与其核受体(nER)结合,激活下游元件调控相应的基因转录使细胞增殖;而近年来发现,细胞膜上存在雌激素膜受体(mER),雌激素能通过mER引起快速的非基因转录效应,而Ca2+作为第二信使在非基因转录效应中与肿瘤发生密切相关.本文对Ca2+及其通道与子宫内膜癌非基因转录效应关系的研究进展综述如下.     

先天性巨结肠患儿结肠组织钾离子通道蛋白表达的变化

目的观察先天性巨结肠患儿结肠组织钾离子通道蛋白表达的变化。方法选择2012年10月至2016年10月湖南省儿童医院收治先天性巨结肠患儿40例作为观察组,同期选择本院肠套叠患儿40例作为对照组。采用免疫组织化学法对患儿结肠组织钾离子通道蛋白的表达进行测定。结果观察组HERG1钾离子通道蛋白表达阳性率、Kv3.4钾离子通道蛋白阳性率分别为85.0%(34/40)、90.0%(36/40),显著高于对照组0%、10.0%(4/40),差异有统计学意义(P0.05)。结论先天性巨结肠患儿结肠组织钾离子通道蛋白呈高表达特征,可能为先天性巨结肠重要的发病机制之一。     

雌激素通过FTO基因调控子宫内膜癌细胞的增殖活性

目的:探讨雌激素对子宫内膜癌细胞系ishikawa细胞中肥胖相关基因FTO表达的调控机制以及对增殖的影响。方法:RT-PCR及细胞免疫荧光法检测不同浓度雌激素处理后ishikawa细胞中FTO表达水平的变化,PCR方法检测雌激素是否通过PI3K/AKT和MAPK信号通路对FTO进行调控,应用siRNA干扰法和MTT分析法检测FTO基因对细胞增殖的影响。结果:(1)不同浓度雌激素均可上调ishkawa细胞中FTO mRNA的表达,以10-9mol/L作用最明显,与对照组的差异有统计学意义(P<0.05);(2)E2+LY294002、E2+U0126组FTO mRNA表达水平比单独加雌激素组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),E2+LY294002+U0126联合加通路抑制剂组比E2+LY294002、E2+U0126单独加通路抑制剂组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);(3)siFTO干扰组FTO mRNA表达水平比阴性对照组明显降低,干扰效率达40%(P<0.05),FTO被干扰后,细胞的增殖活性受到明显的抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:雌激素通过受PI3K/AKT和MAPK信号通路调控的FTO基因调控细胞的增殖活性。     

PTEN基因逆转卵巢上皮性癌细胞耐药的机制研究

目的通过检测PTEN基因在卵巢上皮性癌（卵巢癌）顺铂敏感细胞株0V2008及0V2008配对的顺铂耐药细胞株C13K中的表达,探讨转染PTEN基因能否逆转C13K细胞对顺铂的耐药及其相关机制。方法半定量RT-PCR技术和蛋白印迹法检测0V2008和C13K细胞中PTENmRNA和蛋白的表达。将野生型PTEN基因真核表达质粒在脂质体介导下转染C13K细胞,同时以转染空载体和未转染的C13K细胞作为对照,分别应用RT-PCR技术检测各组细胞PTENmRNA表达的变化,应用蛋白印迹法检测各组细胞PTEN、蛋白激酶B（AKT）及磷酸化AKT（p-AKT）蛋白表达的变化;四甲基偶氮唑蓝（M1Tr）比色法观察转染PTEN基因后C13K细胞对顺铂敏感性的变化,流式细胞仪分析顺铂作用后的细胞凋亡情况。结果（1）PTENmRNA在0V2008和C13K细胞中的表达水平分别为1．02±0.05和0．45±0.03,而0V2008、C13K细胞中PTEN蛋白的表达水平分别为1.02±0.07、0．55±0．03,两种细胞PTENmRNA和蛋白的表达水平分别比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。（2）PTEN基因转染48h后,C13K细胞中PTENmRNA、蛋白的表达水平分别为2.04±0．10和0．94±0．04,分别与转染空载体和未转染的C13K细胞比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）;p-AKT蛋白的表达水平（0.94±0．07）较转染空载体（1．66±0．10）和未转染（1．68±0．14）的C13K细胞显著降低（P〈0．05）。（3）转染PTEN基因的C13K细胞对顺铂的半数抑制浓度（IC50）为（7.2±0．3）μmol／L,明显高于转染空载体和未转染的C13K细胞[分别为（12．7±0．4）、（13．0±0．3）μmol／L,P〈0,05]。（4）顺铂作用24h后,转染PTEN基因、转染空载体和未转染的C13K细胞的凋亡率分别为（41.7±0.9）％、（18．6±0．7）％和（15,3±0．8）％,前者明显高于后两者（P〈0．01）。结论PTEN基因在0V2008细胞中的表达明显高于C13K细胞。转染野生型PTEN基因能有效提高C13K细胞内PTEN基因的表达,并通过降低C13K细胞中AKT磷酸化的水平恢复C13K细胞对顺铂的敏感性。     

细胞信号转导信使磷脂酰肌醇3-激酶和卵巢癌的关系

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)是一种与细胞信号转导有关的脂类第二信使.在人类肿瘤中,已发现PI3K级联信号途径的各成员具有基因结构,蛋白质表达和激酶活性等的异常改变.PI3K在卵巢癌中有异常表达,为肿瘤早期诊断、开发新的抗肿瘤药物和寻找新的基因治疗靶点提供了新的思路.     

EGFR基因多态性与宫颈癌放化疗近期疗效的关系

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因R497K及-216G/T单核苷酸多态性(SNP)与宫颈癌患者放化疗近期疗效的关系。方法:应用聚合酶链反应-连接酶检测反应方法,检测了196例接受单纯放疗或放疗合并化疗的宫颈癌的EGFR基因R497K、-216G/T两个SNP。结果:与携带R497K G/G基因型组相比,携带A/A基因型组放疗敏感性差异有统计学意义(P0.05),校正OR值为0.244(95%CI 0.087~0.680);与携带-216G/G基因型组相比,携带G/T+T/T基因型组放疗敏感性差异无统计学意义,校正OR值为2.412(95%CI 0.856~6.797)。与携带R497KG/G基因型相比,携带A/A基因型组复发转移风险差异有统计学意义(P0.05),校正OR值为0.248(95%CI 0.078~0.786);与携带-216G/G基因型的患者相比,携带G/T+T/T基因型组复发转移风险差异无统计学意义(P0.05),校正OR值为1.027(95%CI 0.324~3.253)。结论:EGFR基因R497K多态性位点与宫颈癌患者放化疗近期疗效及复发或转移风险相关,可能是预测宫颈癌放疗近期疗效及复发或转移的预测指标。     

细胞信号转导信使磷脂酰肌醇3—激酶和卵巢癌的关系

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)是一种与细胞信号转导有关的脂类第二信使。在人类肿瘤中，已发现PI3K级联信号途径的各成员具有基因结构，蛋白质表达和激酶活性等的异常改变。PI3K在卵巢癌中有异常表达，为肿瘤早期诊断、开发新的抗肿瘤药物和寻找新的基因治疗靶点提供了新的思路。     

GOLPH3通过PI3K/Akt信号通路调控上皮性卵巢癌细胞增殖与凋亡的研究

目的:探讨GOLPH3基因对上皮性卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响及作用机制。方法:siRNA干扰技术沉默SKOV3细胞株中GOLPH3基因表达,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测PI3K/Akt信号通路相关基因Akt、p-Akt 473、p-Akt 308及Bcl-2表达。PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002处理卵巢癌SKOV3细胞后,检测SKOV3细胞的增殖能力及凋亡情况。结果:siRNA干扰SKOV3细胞株中GOLPH3基因,GOLPH3表达下调,细胞增殖减少,凋亡增多;PI3K/Akt信号通路相关基因p-Akt 473、p-Akt 308、抗凋亡基因Bcl-2蛋白表达水平均下降,Akt蛋白水平表达无显著变化。LY294002处理SKOV3细胞后,细胞增殖率降低,凋亡率升高。结论:GOLPH3基因可能通过激活PI3K/Akt信号通路促进卵巢癌细胞增殖,并抑制其凋亡的作用。     

内皮素-1对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的可能作用方式

目的 :了解内皮素 - 1影响离体大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的可能作用方式。方法 :采用大鼠睾丸间质细胞体外孵育技术以及12 5I-睾酮放射免疫法 ,观察了缩血管肽内皮素 - 1 (ET- 1 )对间质细胞睾酮的分泌。结果 :ET- A、ET- B受体拮抗剂均可逆转 ET- 1对离体大鼠间质细胞睾酮分泌的抑制作用 ,但 T-型 Ca+ +通道阻滞剂异搏定 (VER)未表现此作用。结论 :ET- 1通过与 ET- A受体及 ET-B受体结合而发挥作用。其 Ca+ +的动员可能不是通过 T-型 Ca+ +通道的开放。     

大电导钙激活钾通道与妊娠的关系

大电导钙激活钾通道(large conductance Ca2+-activated K+-channel,BKCa)由4个相同的α亚基构成的孔样通道及附属的β调节亚基(β1～β4)组成[1],因其电导大、对Ca2+敏感、电压依赖性得名.BKCa广泛分布于哺乳动物除心肌外的各种组织细胞中,包括平滑肌、骨骼肌、神经元、肾脏和内分泌细胞等,并可通过多种调节因子直接作用于细胞核内DNA或作用于细胞膜上的相应受体而发挥多种生物学作用,在许多生理和病理过程中也发挥着重要作用.因其在维持平滑肌细胞静息电位、调节平滑肌舒缩方面起重要作用,近年来,在调节胎盘营养物质转运及子宫平滑肌收缩中的作用及其机制引起不少学者的高度重视.研究发现,BKCa与宫内胎儿发育、妊娠维持及分娩发动密切相关.现就BKCa在妊娠过程中的作用进行综述.