As2O3对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤作用

目的探讨不同剂量三氧化二砷（As2O3）对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤作用及机制。方法将4×10^6个Hela细胞接种于裸鼠皮下,建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为As2O3低剂量（1.0 mg/kg）、中剂量（2.5 mg/kg）、高剂量（5.0 mg/kg）组及生理盐水空白对照组、顺铂阳性对照组,腹腔连续给药10 d,停药后24 h处死裸鼠留取标本计算抑瘤率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR方法检测移植瘤组织caspase-3基因的相对表达量,免疫组化SP法检测磷酸化细胞外信号调节激酶（pERK）的表达。结果各剂量As2O3组及顺铂组瘤质量与生理盐水组相比均有统计学意义（F=39.14,P〈0.05）;As2O3高、中、低剂量组流式细胞仪检测时均出现典型凋亡峰,凋亡率分别为17.89%、17.19%、18.52%;As2O3作用后caspase-3基因的表达较生理盐水组明显升高,差异均有统计学意义（F=8.76,q=3.06～5.81,P〈0.05）;As2O3各剂量组pERK的表达较生理盐水组降低。结论 As2O3对人宫颈癌移植瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制与上调caspase-3基因的表达诱导细胞凋亡,下调pERK的表达与抑制MAPK信号传导通路有关。     

三氧化二砷对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用及其机制

目的：观察三氧化二砷（As2O3）对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用并探讨其机制。方法：20只体质量相似的BALB/c裸鼠,皮下接种胆囊癌移植瘤随机分为0.9%氯化钠液（NS）组（n=10）和As2O3组（n=10）。尾静脉注射NS0.2mL（NS组）或As2O310mg.kg-1（As2O3组）,每日1次,连续7d。21d时处死所有裸鼠,测量肿瘤的质量和体积,同时分别用免疫组织化学法和Western blot法检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）的表达。结果：NS组瘤质量0.992±0.401g、体积1.50±0.57mm3,As2O3组瘤质量0.526±0.269g、体积0.83±0.39mm3,两组间均有显著差异（P〈0.01）;免疫组织化学和West-ern blot检测结果显示As2O3组肿瘤组织Cyclin D1的表达明显下降。结论：As2O3能明显抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤的生长,可能通过下调Cyclin D1的表达来实现抑瘤生长。     

拉帕替尼对人卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤的影响

【目的】探讨新型靶向治疗药物拉帕替尼对人卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤生长的影响。【方法】将人SKVO3细胞株接种于裸小鼠胸壁皮下建立卵巢癌裸小鼠移植瘤模型。随机将其分为空白对照组（A组）和实验组（B组）,实验组根据拉帕替尼药物浓度的不同分为两个亚组：100 mg/kg （B1）和200 mg/kg （B2）,检测各组拉帕替尼用药前后荷瘤体积及裸鼠体质量的变化。【结果】拉帕替尼可显著抑制SKOV3裸小鼠移植瘤的生长,呈剂量依赖性,B2组抑瘤率显著高于B1组,其差异有统计学意义（P＜0．05）,但小鼠体质量用药前后比较无显著性差异（P＞0．05）。【结论】拉帕替尼可显著缩小人卵巢癌细胞株SKVO3裸鼠移植瘤的体积,为卵巢癌新型靶向治疗提供了理论基础。     

蜂毒肽对卵巢癌生长抑制作用的实验研究

目的 研究蜂毒肽对卵巢癌细胞株及卵巢癌皮下移植瘤动物模型的生长抑制作用。方法 选取卵巢癌细胞株SKOV3,以四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法观察蜂毒肽对SKOV3的生长抑制作用。通过建立卵巢癌皮下移植瘤动物模型来观察蜂毒肽对移植瘤的生长抑制作用。结果 体外实验观察到蜂毒肽对卵巢癌细胞株生长有抑制作用,并且随着其浓度的增加抑制作用增强。在卵巢癌皮下移植瘤动物模型中,注射蜂毒肽各组瘤重明显低于对照组（P〈0.05）。结论 蜂毒肽可明显抑制卵巢癌细胞株及卵巢癌皮下移植瘤的生长并且随着蜂毒肽的浓度增加抑制作用增强。     

As2O3对人子宫内膜癌细胞HEC-1-B皮下移植瘤抗肿瘤作用

目的检测不同浓度As2O3对人子宫内膜癌HEC-1-B细胞裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤作用及对瘤细胞内磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶（p-ERK）表达的影响,进一步探讨As2O3的抗肿瘤机制。方法建立人子宫内膜癌HEC-1-B细胞皮下移植瘤模型,随机分为实验组,即As2O3低剂量（1.0 mg/kg）、中剂量（2.5 mg/kg）、高剂量（5.0 mg/kg）剂量组,生理盐水（NS）组及顺铂组（5 mg/kg）,腹腔内注射给药,连续8 d。观察用药前后裸鼠体质量改变。剥取瘤组织,计算药物的抑瘤率。检测用药后裸鼠的肝肾功能及血常规。透射电镜观察细胞变化,流式细胞仪检测细胞凋亡周期和细胞凋亡率,免疫组化法检测p-ERK的表达。结果不同浓度As2O3和顺铂均有不同程度抑制肿瘤细胞生长、促进肿瘤细胞凋亡的作用,其中As2O3低剂量组的抑瘤率为34.3%,p-ERK的表达率为37.5%,该组在亚G1期出现典型的凋亡峰,且As2O3低剂量组与NS组比较,凋亡率、瘤质量差异均有显著意义（F=27.20、33.92,q=9.19、13.34,P〈0.05）。As2O3低剂量组与顺铂组相比,无明显血液及肝肾毒性。结论低剂量As2O3组能明显抑制肿瘤细胞HEC-1-B生长,且毒副作用轻,可能与阻滞细胞周期,抑制p-ERK表达有关。     

沉默ATF5对卵巢癌裸鼠成瘤的影响

目的研究沉默人转录激活因子5（ATF5）后对卵巢癌SKOV-3细胞体外增殖、凋亡及体内成瘤的影响,探讨人类卵巢癌基因治疗的新途径。方法将慢病毒携带的小干扰RNA感染卵巢癌SKOV-3细胞（实验组）,空载体转染的卵巢癌SKOV-3细胞（空载体对照组）和卵巢癌SKOV-3细胞（空白对照组）进行对照,对比观察细胞的生长状态;MTT法检测细胞的增殖生长情况;罗氏凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况;分别于裸鼠皮下接种3组卵巢癌SKOV-3细胞,观察各组裸鼠的存活状态、种植瘤生长情况;RT-PCR检测瘤组织中ATF5mRNA的表达;Western-Blot方法检测瘤组织中ATF5蛋白的表达;苏木素-伊红染色（HE染色）观察瘤组织生物学形态变化。结果经转染ATF5基因的小干扰RNA后,在相同培养时间内3组细胞的增殖和生物学形态没有明显差异,但实验组细胞凋亡数量较其他两组明显增多。皮下接种成瘤后,3组裸鼠的成瘤率没有明显区别,实验组与空载体对照组和空白对照组相比,肿瘤成瘤时间晚,生长缓慢;移植瘤ATF5mRNA表达及蛋白表达降低;细胞分裂象明显减少,凋亡现象明显。结论沉默ATF5对人上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤生长有抑制作用,这可能成为卵巢癌基因治疗的新靶点。     

三氧化二砷对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:观察三氧化二砷(As2O3)对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:20只皮下接种移植瘤大小相似的BALB/c裸鼠,随机分为0.9%氯化钠液(NS)组(n=10)和As2O3组(n=10)。尾静脉注射NS0.2ml.只-1(NS组)或As2O310mg·kg-1(As2O3组),每日1次,连续7d。21d时处死所有裸鼠,测量肿瘤的重量和体积。结果:NS组瘤重0.992±0.401g、体积(1.50±0.57)mm3,As2O3组瘤重(0.526±0.269)g、体积(0.83±0.39)mm3,瘤重和体积明显下降(P<0.01)。结论:As2O3能明显抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤的生长。     

超声联合载药微泡对卵巢癌移植瘤的抑瘤作用及对P53,VEGF表达的影响

目的 探讨超声辐照载紫杉醇脂质微泡(paclitaxel-carrying liposome microbubbles,PLM)对裸鼠SKOV3卵巢癌移植瘤的抑瘤作用及其相关机制.方法 建立裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型,随机分成4组,比较各组的抑瘤率;用免疫组化法检测肿瘤组织中P53、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,并进行半定量分析;用CD34染色标记血管内皮细胞,以微血管密度(microvessel density,MVD)作为定量检测指标.结果与其它实验组比较,PLM辐照组移植瘤质量增长抑制明显(P<0.01);P53,VEGF及MVD表达减低(P<0.01),VEGF表达与P53呈正相关(r=0.960,P<0.001).结论 超声辐照PLM可显著抑制SKOV3卵巢癌移植瘤的生长和发展,其机制可能是通过抑制P53抑癌基因的突变,下调了VEGF的合成与分泌,破坏并减少肿瘤血管再生,从而抑制肿瘤的生长.该方法的应用为卵巢癌提供了新的临床治疗途径.     

丙氨瑞林对人子宫内膜癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响及机制研究

目的 探讨不同剂量的醋酸丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长及其可能的作用机制.方法 建立子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型,选32只雌性荷瘤裸鼠随机分为4组,即空白对照组、醋酸丙氨瑞林干预组（20 μg/kg、40μg/kg、80 μg/kg）,不同剂量醋酸丙氨瑞林组均采取肌肉注射方式连续给药,4周后处死裸鼠,将移植瘤完整取出,测量肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线、计算抑瘤率,并应用免疫组织化学法检测瘤组织中TGF-β1、Smad2/3、Smad7蛋白的表达.结果 实验对照组、低、中、高剂量醋酸丙氨瑞林组中移植瘤生长曲线斜率依次减小,生长速度依次减慢.低、中、高剂量醋酸丙氨瑞林抑瘤率分别为（13.03±5.4）％、（26.42±7.3）％、（43.27±6.9）％,组间两两比较差异有统计学意义（P＜0.05）.随着醋酸丙氨瑞林浓度的升高,各干预组TGF-β1、Smad2/3蛋白表达水平明显升高,Smad7蛋白表达水平明显下降,且与对照组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 醋酸丙氨瑞林对子宫内膜癌细胞株Hec-1-B裸鼠皮下移植瘤生长有抑制作用,且呈一定的剂量依赖效应,其作用机制可能与调节TGF-β1/Smads信号转导通路有关.     

survivin基因RNA干涉对宫颈癌裸鼠移植瘤生长及凋亡和顺铂化疗敏感性的影响

目的观察survivin基因RNAi对宫颈癌裸鼠移植瘤生长、凋亡和化疗敏感性的影响。方法随机选择雌性BALB/C-nu/nu裸小鼠24只,细胞接种法建立4组人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,每天观察裸鼠一般状况及肿瘤生长情况,通过绘制肿瘤生长曲线并计算肿瘤生长抑制率,观察survivin基因RNAi对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响;通过免疫组化SP法检测各组移植瘤组织中survivin蛋白表达情况,TUNEL染色观察survivin基因RNAi对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤凋亡的影响;当肿瘤体积达0.2cm3时给予顺铂化疗以观察survivin基因RNAi对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤化疗敏感性的影响。结果成功建立4组人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤体积在每个检测点均明显小于接种HeLa组;观察结束时,接种HeLa-s2组裸鼠瘤重明显小于接种HeLa组,分别为：（0.369±0.043）g和（1.150±0.136）g（P〈0.05）;接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤生长抑制率为67.9%。免疫组化结果显示：接种HeLa-s2组裸鼠survivin蛋白表达显著下降;TUNEL染色结果显示：接种HeLa-s2组裸鼠细胞凋亡明显增多,凋亡指数（AI）值达（22.73±1.37）%。顺铂化疗后不同检测点接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤体积明显小于接种HeLa组,肿瘤生长明显受抑;观察结束后,接种HeLa-s2组裸鼠瘤重明显小于接种HeLa组,分别为：（0.323±0.058）g和（1.347±0.173）g（P〈0.05）;接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤细胞凋亡明显增多,与接种HeLa组AI比较,接种HeLa-S2组AI明显升高,分别为：（37.38±1.01）%和（5.19±0.61）%（P〈0.05）。结论 survivin基因RNAi可通过下调移植瘤组织survivin蛋白表达抑制移植瘤生长并促进其凋亡,并通过增加顺铂化疗诱导的细胞凋亡,增强顺铂化疗对移植瘤的生长抑制,进而提高移植瘤对顺铂化疗的敏感性。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对卵巢癌裸鼠移植瘤SKOV3细胞的促凋亡研究

目的 研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)蛋白对SKOV3移植瘤细胞半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响及其与肿瘤细胞凋亡的关系.方法 建立雌性裸小鼠SKOV3移植瘤24只,随机分为4组,每组6只.TRAIL组单用重组人TRAIL蛋白(10μg/kg),顺铂(DDP)组单用DDP(3 mg/...     

塞来昔布对小鼠膀胱肿瘤的抑制作用

目的探讨选择性环氧化酶-2抑制剂塞来昔布对膀胱肿瘤的抑制作用及其机制。方法建立小鼠膀胱肿瘤模型并随机分为对照组、实验1组和实验2组,分别给予生理盐水和不同剂量的塞来昔布灌胃,观察肿瘤的生长情况,测量肿瘤体积、质量并计算抑瘤率;免疫组织化学方法检测肿瘤原癌基因bcl-2和半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）的表达情况,并计算其免疫组化评分（HIS）。结果实验1、2组肿瘤的平均质量明显低于对照组,差异有显著性（F=64．99,q=4．52、15．66,P〈0．05）。实验1、2组的抑瘤率分别为43％和58％。3组间bcl-2的HIS比较差异有显著性（F=25．08,q=3．75～9．91,P〈0．05）;3组间caspase-3的HIS比较差异有显著性（F=16．82,q=3．26～8．15,P〈0．05）。结论塞来昔布能抑制小鼠膀胱肿瘤的生长,其机制可能与抑制bcl-2、增强caspase-3的表达有关。     

siRNA沉默血管VEGFR-1基因对乳癌生长抑制作用

目的探讨应用化学修饰的小干扰RNA（siRNA）沉默人裸鼠乳癌移植瘤新生血管中的血管内皮生长因子受体-1（VEGFR-1）基因对移植瘤生长的影响。方法将组织瘤块接种于裸鼠右侧第二对乳腺的脂肪垫内,肿瘤长至一定大小时,随机分为对照（A）组、转染试剂对照（B）组、siRNA治疗（C）组。于肿瘤局部分别注射PBS溶液、Lipofectamine 2000^TM转染试剂和Lipofectamine 2000^TM转染试剂包裹的VEGFR-1 siRNA。22d后处死全部动物,取肿瘤,测其大小;用RT—PCR及蛋白印迹法检测乳癌组织VEGFR-1基因的表达。结果与A、B组比较,C组移植瘤增长趋势受到明显抑制（F=158．18、55．72,q=11．39、14．05,P〈0．01）;RTPCR结果表明,与A、B组比较,C组明显下调了VEGFR1 mRNA的表达（F=385．06,q=33．43,34．52,P〈0．01）;蛋白印迹法结果亦显示,C组明显下调了VEGFR-1 mRNA的表达（F=114．11,q=9．31,20．75,P〈0．01）。A组和B组各指标差异无显著性（P〉0．05）。结论化学修饰的siRNA介导的RNAi可以降低人乳癌裸鼠移植瘤血管中VEGFR-1的表达,抑制血管生成进而抑制肿瘤的生长,是潜在的肿瘤治疗的新方法。     

三氧化二砷对类风湿关节炎滑膜细胞凋亡的影响——附18例报告

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）对类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）滑膜细胞凋亡的影响。方法：对18份RA滑膜组织进行原代培养,采用四甲基偶氮唑盐法检测加入0μmoL／L、0．10μmol／L、0．40μmoL／L、0．80μmol／LAs2O3对RA滑膜细胞活力影响,用流式细胞仪分析加入不同浓度As2O3后早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞、活细胞、坏死细胞所占的比例,观察加入不同浓度As2O3后RA滑膜细胞的半胱氨酸蛋白酶-3的活性变化。结果：与同一时段无加入As2O3的RA滑膜细胞比较,加入0．10μmol／L、0．40μmol／L、0．80μmol／L As2O3的RA滑膜细胞活力明显下降（均为P〈0．05）。RA滑膜细胞中的早期凋亡细胞及坏死细胞所占比例随As2O3浓度升高而增高,活细胞所占比例随As2O3浓度升高而降低（均为P〈0．05）,其中,As2O3浓度为0．80la,mol／L组的早期凋亡细胞及坏死细胞所占比例最高、活细胞所占比例最低（均为P〈0．01）。半胱氨酸蛋白酶-3活性随As：O,浓度增加而增加（均为P〈0．05）。结论：As：O,可抑制RA滑膜细胞的活力,在达到一定的药物浓度后可对滑膜细胞产生致死效应。As：O,所诱导滑膜细胞凋亡可能与半胱氨酸蛋白酶一3的活性增高有关。     

17 DMAG对人结直肠癌裸鼠移植瘤微血管形成的抑制作用

目的探讨17-二甲基胺乙基-17-去甲氧基格尔德霉素（17-DMAG）对结直肠癌微血管生成的抑制作用。方法24只BALB／C-nu／nu裸鼠用于建立裸鼠结直肠癌移植瘤模型,并将其随机分为17-DMAG、5-氟尿嘧啶（5-Fu）及对照组各8只,分别腹腔注射17-DMAG、5-Fu、生理盐水,4周后测量裸鼠移植瘤体质量、体积,采用免疫组织化学染色法检测肿瘤组织中微血管密度（MVD）和血管内皮生长因子（VEGF）,采用蛋白免疫印迹法检测VEGF。比较3组结果。结果17-DMAG组、5-FU组移植瘤体质量、体积与对照组比较差异均有统计学意义（P均〈0．05）;17-DMAG组MVD、VEGF水平均低于5-Fu组与对照组（P均〈0．05）,而5-FU组与对照组的MVD、VEGF水平比较差异无统计学意义（P均〉0．05）。结论17-DMAG可通过下调VEGF的表达减少结直肠癌组织中新生血管的生成进而抑制肿瘤的生长。     

MUC1表达与食管癌细胞对紫杉醇及顺铂反应的关系

目的:探讨MUC1过表达与食管癌细胞对紫杉醇及顺铂反应的关系。方法:构建MUC1过表达的食管癌细胞株,建立食管癌细胞裸鼠移植瘤模型;然后,对成瘤裸鼠腹腔注射顺铂(8μg/kg,d1、d7)及紫杉醇(20μg/kg,d1、d7)。每3 d测量肿瘤体积及裸鼠体质量,绘制肿瘤生长曲线及裸鼠体质量曲线;测量肿瘤的终末体积,计算肿瘤抑瘤率;采用免疫组化方法检测化疗药物对肿瘤中Bcl-2及Ki-67表达的影响。结果:顺铂与紫杉醇都能抑制MUC1过表达的食管癌移植瘤的肿瘤体积及裸鼠体质量增加,与空载组相比差异有统计学意义(P0.05),但顺铂与紫杉醇之间差异无统计学意义(P0.05);顺铂和紫杉醇对MUC1沉默的食管癌移植瘤的抑制效应不明显;顺铂与紫杉醇能够明显下调MUC1过表达的移植瘤中Ki67的表达(P0.01),上调Bcl-2的表达(P0.01)。结论:顺铂与紫杉醇都能明显抑制MUC1过表达的食管癌移植瘤的生长及细胞增殖,促进细胞凋亡,顺铂的抑制效应与紫杉醇无明显差异,但顺铂对裸鼠体质量的影响较明显。     

FADD在L-OHP抑制裸鼠人结肠癌皮下移植瘤生长中的表达

[目的]探讨Fas相关死亡结构域蛋白（Fas associated protein with death domain,FADD）在奥沙利铂（L—OHP）抑制裸鼠人结肠癌皮下移植瘤生长中的表达及其可能机制。【方法】建立BALB／C-nu／nu裸鼠SW480人结肠癌皮下移植瘤模型,L-OHP行瘤体内注射,与氟尿嘧啶治疗进行对比。观察各组肿瘤瘤重和体积变化,计算抑瘤率。采用HE染色和TUNEL法检测瘤体组织肿瘤细胞凋亡情况,Western-blotting检测FADD蛋白表达情况。【结果】L-OHP和氟尿嘧啶均能显著抑制裸鼠皮下移植瘤的生长,且L-OHP对移植瘤的抑制作用和L-OHP组肿瘤细胞凋亡率明显强于（高于）氟尿嘧啶和5-Fu组,差异有统计学意义（P〈0．05）。TUNEL法观察到棕褐色的阳性肿瘤凋亡细胞,Western-blotting结果显示FADD蛋白表达增加。[结论]L-OHP通过诱导SW480细胞凋亡从而抑制裸鼠人结肠癌皮下移植瘤,其作用机制可能与激活凋亡死亡受体途径、FADD表达上调有关。